厚朴的任意引物PCR指纹图谱分析

目的：鉴别中药材厚朴，凹叶厚朴及其常见的伪品和混淆品，方法：采用任意引物PCR（arbitrarily primed PCR,AP-PCR)技术扩增植物基因组DNA样品。结果：AP－PCR技术获得清晰可靠的DNA指纹图谱，根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可迅捷地区分厚朴，凹叶厚朴及其伪品，混淆品。结论：为应用AP－PCR技术在分子水平上鉴别中药材厚朴，保证引种的准确性奠定了基础。     

中药材厚朴的随机扩增多态性DNA指纹图谱研究

目的:鉴别中药材厚朴及其伪品、混淆品.方法:采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品.结果:此种分子生物学鉴别方法可以获得清晰可靠的DNA指纹图谱,根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可准确区分出厚朴、凹叶厚朴和其伪品、混淆品.结论:RAPD方法可以准确、快速、简便地鉴定中药材厚朴及其伪、混品,尤其在正确引种方面具有很高的价值.     

中药材厚朴的X射线衍射Fourier指纹图谱分析

目的:建立中药材厚朴的鉴定分析新方法.方法:采用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法.结果:通过对3个中药材厚朴、3个凹叶厚朴、14个厚朴的代用品和习用品、1个伪品厚朴进行实验、分析,获得了中药材厚朴和凹叶厚朴的对照X射线衍射Fourier指纹图谱.结论:粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材厚朴和凹叶厚朴的鉴定和识别.     

厚朴和厚朴习用品、混淆品及伪品的鉴别

目的鉴别厚朴和厚朴习用品、混淆品及伪品，方法 性状鉴别与按厚朴鉴别项2的试验法。结果厚朴及厚朴习用品均含厚朴酚及和厚朴酚成分，但厚朴混淆品及伪品不含厚朴酚及和厚朴酚成分。结论 厚朴和厚朴习用品，混淆品及伪品需仔细鉴别。     

3种易混淆中药材鉴别技术进展分析

笔者通过查阅近十年的研究文献,对含有马兜铃酸类成分的三种易混淆中药材的鉴别技术的研究进展进行总结与分析,木通为关木通的替代品,混淆品有多种,目前已经有性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、光谱鉴别、DNA分子鉴别等方法对木通、关木通以及川木通进行鉴别;在广防己、防己以及其混淆品的鉴别上,已经有性状鉴别、紫外光谱鉴别以及DNA条形码鉴别等方法;在青木香及其混淆品的鉴别上,已经有性状鉴别、显微鉴别、HPLC指纹图谱以及UPLC指纹图谱等方法。     

上海中药市场北柴胡的真伪鉴别

柴胡为常用解表药之一,为中国传统中药,应用广泛,具有和解表里、疏肝、升阳之功效.近年来因市场需求量增大,市场上出现柴胡混淆品及掺伪品,不利于用药安全.笔者收集了上海地区中药材市场常见正品柴胡(野生及栽培),混淆品南柴胡及其伪品大叶柴胡、竹叶柴胡、藏柴胡、锥叶柴胡、小叶黑柴胡,并对其药材及饮片进行性状鉴别比较,为柴胡传统...     

中药材地肤子与其伪品灰菜子超微指纹特征的对比研究

目的研究中药材地肤子及其伪品灰菜子的鉴别,建立中药材地肤子超微指纹特征鉴定标准。方法应用扫描电镜技术分别在70倍、 800倍、 3000倍电镜下对地肤子及其伪品灰菜子表面超微指纹特征进行比较研究。结果地肤子与其伪品灰菜子表面超微指纹特征存在明显区别。结论该方法可通过表面的超微指纹特征的研究快速准确鉴别地肤子与其伪品灰菜子,可为地肤子真伪鉴别提供一种有效、简单的快速鉴定方法。     

中药材性状鉴别经验术语100例

中药材经验鉴别术语形象地概括了中药材性状鉴别特点.具有这些特征的药材,一般为正品、真品;而伪品或混淆品则不具备这些特征.现将100例术语解释如下.     

川贝母及常见伪品的鉴别

用简易的性状鉴别特征区别川贝母及其混淆品、类似品、伪品.收集沈阳地区各主要零售店、中药材市场的样本,用性状定方法及参考《中华人民共和国药典》、相关工具书等加以描述.现将川贝母及其类似品、混淆品、伪品的外观特征进行简要区别,以保障人民群众用药安全,亦可供消费者购买川贝母药材时参考.     

柴胡及其常见伪品的DNA指纹鉴定

目的:建立柴胡及其伪品DNA指纹鉴别方法.方法:采用改良的CTAB法提取柴胡及常见伪品的干根基因组DNA,设计鉴别正品柴胡及其伪品的特异性引物,利用PCR扩增技术对正品柴胡及其伪品进行DNA指纹鉴定.结果:改良的CTAB法提取出大小为23 kb的基因组DNA条带,纯度在(1.71±0.11),且经特异引物PCR扩增,只有正品柴胡能扩增出173bp大小的片段,而伪品未能扩增出目的片段.结论:柴胡DNA具有特异性指纹特征,可作为市售柴胡的真伪鉴定依据.     

白及与其混伪品ITS2序列二级结构比较与鉴别

目的:利用DNA条形码技术通过ITS2序列对白及及其混伪品进行快速、准确鉴别。方法:采用植物基因组DNA提取试剂盒提取白及及其混伪品基因组DNA,对全部收集样品的ITS2序列进行PCR扩增和测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,利用MEGA7.0软件进行数据分析计算物种种间种内Kimura2-parameter(K2P)遗传距离。采用最近距离法及基于ITS2序列构建Neighbor-joining(NJ)系统聚类树,结合ITS2序列二级结构相比对的方法鉴别分析。结果:K2P遗传距离及NJ聚类树均显示只能鉴别出白及属与其他科属物种,区分不开白及属内3个物种,结合ITS2二级结构进一步鉴定,可将白及属的各个种及其他科属混伪品准确地鉴别出来。结论:利用ITS2序列作为DNA条形码,结合ITS2序列的二级结构可以有效地鉴定白及及其混伪品。     

应用RAPD技术探讨穿龙薯蓣遗传多样性及亲缘关系

目的分析不同居群的穿龙薯蓣及其近缘品种山药、盾叶薯蓣的亲缘关系,鉴别中药材穿龙薯蓣及其近缘品种。方法采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品,利用NTSYS软件,建立了UPGMA聚类图结果从50条随机引物中筛选出清晰且多态性高的引物7条。共扩增出62条DNA片段。其中54条具有遗传多样性,多态率为92.71%。遗传相似系数在0.659 5~0.875;应用引物S75,S313可有效鉴别穿龙薯蓣、盾叶薯蓣、山药。结论不同居群的穿龙薯蓣具有丰富的遗传多样性,DNA带型差异可准确区分穿龙薯蓣、盾叶薯蓣及山药,RAPD方法可以准确、快速简便地鉴定中药。尤其在正确引种方面具有很高的价值。     

西红花及其伪品的微性状鉴别

目的研究西红花及其伪品的微性状鉴别特征。方法采用中药微性状鉴定法对西红花及其伪品进行观察鉴别。结果西红花及其伪品的微性状特征明显,最主要的鉴别点为西红花柱头褶皱状及边缘具黄色分泌物,表皮细胞呈梭样凸起,并有花粉粒存在,而伪品无上述微性状特征。结论利用微性状鉴别法可以清楚地分辨出西红花药材表面微性状特征以及与伪品的鉴别要点,可为西红花的真伪鉴别及质量评价提供依据。     

应用RAPD快速鉴别中药材海风藤及其替代品

目的:建立一种鉴别海风藤及其替代品的新方法.方法:采用RAPD技术进行PCR扩增,筛选出适合鉴别的随机引物.结果:从62条随机引物中筛选出4条能够准确鉴别海风藤及其替代品,且具有良好的重复性.结论:RAPD技术能在DNA水平上鉴别海风藤及其替代品,是一种行之有效的方法.     

18种商品蛤蚧原动物及性状的鉴别

目的 :对中药商品蛤蚧进行调查与真伪鉴定。方法 :在市场上收集各类商品蛤蚧 1 8种 ,选择样品长度、头部、吻鳞、眼睑、鳞片、背腹部、指趾、尾及其他特征、地理分布进行原动物鉴定 ,并检索鉴别。结果 :1 8个样品中 2个样品为蛤蚧Gekkogecko(广西蛤蚧　泰国蛤蚧 ) ,其余 1 6个样品均为蛤蚧混伪品 ,其原动物来源分别是壁虎、多疣壁虎、无蹼壁虎、荔波壁虎、睑虎、喜山鬣蜥、变色树蜥、蜡皮蜥、青海沙蜥、西藏沙蜥、石龙子、山溪鲵、红瘰疣螈、贵州疣螈、中国瘰螈、东方蝾螈。结论 :市场销售中药商品蛤蚧伪品较多。利用本文提供的蛤蚧原动物及性状特征检索方法可鉴别之。     

基于聚类分析与多元统计分析的东北林蛙油及其类似品、伪品的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱鉴别

目的:建立一种基于聚类分析与多元统计分析对东北林蛙油及其类似品黑龙江林蛙油、伪品中华蟾蜍油、牛蛙油的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱有效分类与鉴别的方法。方法:利用SDS-PAGE法,得到18批药材的电泳图谱,将SDS-PAGE电泳图谱转化为数据矩阵,利用NTSYSpc 2. 10e统计分析软件进行聚类分析,结合SMICA-P14. 1分析软件进行多元统计分析中的无监督的主成分分析(PCA),有监督的偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法进行多元分析评价。结果:SDS-PAGE电泳图谱技术结合聚类分析与多元统计分析方法能够对东北林蛙油及其类似品、伪品进行准确分类、鉴别。除1号药材外,聚类分析可将四类药材聚为4支。PCA分析结果优于聚类分析,多元统计分析中有监督的PLS-DA和OPLS-DA的分析结果优于无监督的PCA分析,OPLS-DA的分类与鉴别效果最优,OPLS-DA将东北林蛙油、黑龙江林蛙油、牛蛙油、中华蟾蜍聚成4类,并通过VIP(variable importance in projection)值与OPLS-DA载荷图综合分析得到6个差异性蛋白质成分,相对分子质量分别为51. 363,35. 838,14. 565,17. 563,15. 358及21. 696 k Da。结论:SDS-PAGE电泳图谱技术结合聚类分析及多元统计分析方法可以作为一种有效分类、鉴别东北林蛙油及其类似品、伪品的方法。该研究为东北林蛙油的品质评价及筛选提供了一定的参考依据。     

半夏厚朴汤及君臣配伍对小鼠肝脏CYP450和肾脏离子转运子的影响

目的:研究半夏厚朴汤中君药半夏、臣药厚朴、君臣药对以及伞方对小鼠体内肝脏微粒体CYP450亚型和肾脏离子转运子的影响,以期从肝脏代谢和肾脏排泄能力的角度,评价半夏厚朴汤的配伍意义及合理性.方法:将小鼠随机分为半夏组、厚朴组、半夏厚朴配伍药对组、复方的原方剂量组和高剂量组,分别给予水提取物.采用常规生化、RT-PCR和Western blotting等检测方法,分别测定各组动物肝脏微粒体Cyp2e1和Cyp3a11亚型的活性及其mRNA和蛋白表达,以及肾脏有机阴离子转运子OAT1和OAT3、有机阳离子转运子OCT1和OCT2的mRNA和蛋白表达.结果:君药半夏增加了小鼠肝脏Cyp2e1和Cyp3a11活性和表达.半夏和厚朴均可提高肾脏OAT1/3,OCT1/2 mRNA和蛋白表达.半夏厚朴药对及复方则使之恢复至正常,复方的协同作用优于君臣配伍药对,且原方剂量组的作用强于高剂量组.结论:半夏厚朴配伍及复方协同改善了半夏对肝脏Cyp2e1活性和表达的激活作用,避免了肝脏过氧化和中毒等损伤以达到减毒目的;同时它们逆转了单味半夏对肝脏Cyp3a11活性与表达的增加,弥补药物在肝脏代谢太快的不足.并平衡君药半夏、臣药厚朴单独使用所引起肾脏OAT1/3,OCT1/2 mRNA或蛋白的表达增加以达到增效目的.为半夏厚朴汤增效减毒的组方合理性及临床半夏厚朴君臣配伍发挥相须相使的疗效提供了重要的药理学依据.     

基于网络药理学分析厚朴抗抑郁的物质基础及其作用机制

目的:采用网络药理学方法探讨厚朴抗抑郁的物质基础及作用机制。方法:通过中国知网,Sci Finder,中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)等数据库收集厚朴药材的主要化学成分;通过BATMAN-TCM数据库筛选出药物成分潜在作用靶标;基于HPO数据库筛选出抑郁疾病相关靶标;采用String数据库对药物成分潜在靶标与抑郁症靶标进行蛋白质相互作用分析,筛选抗抑郁化学成分及其相关靶点,并通过David数据库对其结果进行功能富集分析。基于以上结果,采用Cytoscape v3. 5. 1软件网络化展现厚朴抗抑郁的"药物靶标-疾病靶标""化学成分-靶标-信号通路"的网络关系图,并通过网络拓扑分析从中筛选出关键靶标并对其进行"成分-靶标蛋白"的分子对接验证,进一步明确关键抗抑郁成分及其靶点。结果:从厚朴收集得到的138种化学成分中筛选得到16个与抑郁症相关的活性成分,涉及74个关键作用靶标;分子对接分析结果表明,与其他成分相比,16种活性成分中的α-衣兰油烯等10种挥发性成分与"药物靶标-疾病靶标"相互作用网络图中的5种关键靶标(degree排名前5)胰岛素受体(INSR),丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1),鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α抑制3(GNAI3),磷脂酰肌醇3-激酶受体1(PIK3R1),选择性受体B1(GNB1)均具有较好的结合活性;并且该类成分与目前治疗抑郁症化药的直接靶标毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2(CHRM2),5-羟色胺受体(HTR) 2B和HTR2C也均具有较好的亲和活力;通路富集分析结果表明厚朴抗抑郁作用可能通过调节神经营养因子信号通路,MAPK信号通路,钙离子信号通路,神经活性配体-受体相互作用等发挥作用。结论:该研究从网络药理学的角度初步揭示了厚朴抗抑郁的药效物质基础及作用机制,筛选得到16个与抑郁症相关的活性成分,可为抗抑郁药物的开发以及厚朴抗抑郁质量标志物的发现提供参考。