异丙酚对福尔马林致痛大鼠脊髓Fos表达的影响

目的：研究脊髓结构对福尔马林痛刺激的反应及异丙酚对其的影响。方法：采用福尔马林致痛模型及c-fos基因免疫组织化学方法（ABC法）。SD大鼠30只,随机分为6组：2．5％福尔马林注射于大鼠一侧前爪掌心皮下组、福尔马林痛刺激后腹腔注射异丙酚组、福尔马林痛刺激后腹腔注射同等容量生理盐水组、腹腔注射异丙酚后再行福尔马林痛刺激组、腹腔注射同等剂量异丙酚组、腹腔注射等容量生理盐水6组,取脊髓切片。结果：（1）予福尔马林痛刺激后,刺激侧脊髓背角出现大量Fos免疫样阳性神经元,I层及Ⅱ层外带的内侧部最为密集;（2）痛刺激之前或之后给予异丙酚,脊髓背角各层Fos免疫样阳性神经元的数量均减少（P＜0．01）,痛刺激之前给药效果优于痛后给药（P＜0．05）;（3）单纯腹腔注射异丙酚或生理盐水,脊髓未见或偶见Fos免疫样阳性神经元。结论：同侧相应脊髓节段的某些神经元参与了化学性致痛信息的传导和调控,异丙酚可抑制这些神经元的活动,从而产生一定的抗伤害作用。     

布托啡诺对大鼠κ-阿片受体mRNA表达的影响

目的 观察鞘内注射布托啡诺对大鼠中枢神经系统κ-阿片受体mRNA(κ-mRNA)表达的影响.方法 96只成年雄性SD大鼠随机分为布托啡诺10、20、30μg组(L、M、H组)和生理盐水组(N组),每组24只.观察鞘内注射不同剂量布托啡诺或生理盐水后甩尾潜伏期(TFL)的变化,检测脊髓、脑干及脑皮质κ-mRNA的表达.结果 鞘内注射布托啡诺具有镇痛作用,并呈时间和剂量依赖性地增加脊髓、脑干、脑皮质中的κ-mRNA的表达.结论 鞘内注射布托啡诺可促进大鼠脊髓、脑皮质和脑干κ-mRNA的表达.     

不同剂量布托啡诺硬膜外注射对大鼠血清髓鞘碱性蛋白与脊髓形态学的影响

目的 观察硬膜外注射不同剂量的酒石酸布托啡诺(布托啡诺)对大鼠血清髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和脊髓形态学的影响.方法 雄性SD大鼠,体重180 g～210 g,于L1-2处行硬膜外置入PE-530导管,3d后,取无运动障碍的大鼠32只,随机数字表法分为4组(每组8例):生理盐水组(...     

鞘内注射布托啡诺混合氯胺酮对炎性痛大鼠脊髓背角cAMP-PKA-CREB信号转导通路的影响

目的 探讨鞘内注射布托啡诺混合氯胺酮对炎性痛大鼠脊髓背角环磷腺苷-蛋白激酶A-环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-PKA-CREB)信号转导通路的影响.方法 雄性SD大鼠,体重240～280 g,取鞘内置管成功的大鼠24只,随机分为4组(n=6):炎性痛组(IP组)、布托啡诺组(B组)、氯胺酮组(K组)和布托啡诺+氯胺酮组(BK组).置管后5 d,于大鼠左后足掌面皮下注射5%甲醛50μl,以制备炎性痛模型.IP组、B组、K组和BK组于皮下注射甲醛前30 min分别鞘内注射生理盐水10 μl、布托啡诺12.5 μg、氯胺酮50μg、布托啡诺12.5μg混合氯胺酮50μg.注射甲醛后1 h内,每5 min观察大鼠痛行为学,并计算痛加权评分(PIS评分);于注射甲醛后2 h时处死大鼠,取L5脊髓组织,采用免疫组化法测定脊髓背角PKA和磷酸化CREB(p-CREB)的表达水平,并行免疫组化染色分级.结果 大鼠注射甲醛后均表现出典型的痛双相期,即急性痛时相(第1时相)和继发性痛时相(第2时相).与IP组比较,BK组第1、2时相PIS评分降低,大鼠脊髓背角PKA、p-CREB表达下调,免疫组化染色分级降低(P<0.05或0.01),B组、K组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 鞘内注射布托啡诺混合氯胺酮可减轻大鼠炎性痛,其机制可能与抑制脊髓背角cAMP-PKA-CREB信号转导通路有关.     

鞘内注射布托啡诺混合氯胺酮对炎性痛大鼠脊髓背角cAMP-PKA-CREB信号转导通路的影响

Objective To investigate the effect of intrathecal administration of a mixture of butorphanol and ketamine on cAMP-PKA-CREB signal transductian pathway in the spinal dorsal ham of the rats with inflammatory pain. Methods Twenty-four male SD rats, weighing 240-280 g,in which intrathecal catheters were successfully placed, were divided into 4 groups randomly (n = 6 each): inflammatory pain group (group IP), butorphanol group (group B), ketamine group (group K), and butorphanol + ketamine group (group BK). The inflammatory pain was induced by injection of 5% formalin 50 μl into the plantar surface of left hind paw. Normal saline 10 μl, butorphannl 12.5 μg, ketamine 50 μg, and a mixture of butorphanol 12.5 μg and ketamine 50 μg was injected intrathecally 30 min before subcutaneous injection of formalin in group IP, B, K and BK respectively.Pain intensity score (PIS) was used to assess pain behavior every 5 min within an hour after subcutaneous injection of formalin. The animals were killed at 2 h after subcutaneous injection of formalin, and the L5 segment of the spinal cord was removed for determination of protein kinase A (PKA) and phosphorylated cAMP response element binding protein (p-CREB) expression using immunohistochemistry. Results Fonnahn administration induced pain behaviour expressed as two phases. PIS scores, PKA and p-CBEB expression, and staining scores were significantly lower during the fast and second phases in group BK than in group IP (P < 0.05 or 0.01), while no significant differences were found in the indices mentioned above between group B and IP and between group K and IP (P>0.05). Conclusion lntrathecal injection of a mixture of butorphanol and ketamine can reduce inflammatory pain in rats, and the mechanism may be related to the cAMP-PKA-CREB signal transduction pathway.     

曲马多对福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓Fos蛋白表达的影响

本研究拟通过观察福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓Fos蛋白表达的改变，评价曲马多的镇痛作用及其机理。     

硬膜外注射布托啡诺或舒芬太尼对骨癌痛大鼠脊髓细胞和亚细胞结构及血清髓鞘碱性蛋白的影响

目的 观察硬膜外注射不同剂量的布托啡诺或舒芬太尼对骨癌痛大鼠脊髓细胞和亚细胞结构及血清髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的影响. 方法 SD雌性未交配大鼠,体重150～180 g,于L1～L2间隙行硬膜外置管,置管成功3d后,取无运动障碍的大鼠,行假手术及建立胫骨癌痛模型,共64只,按随机数字表法分为8组(每组8只):假手术组(C组)、生理盐水(NS)组(N组)、布托啡诺3组(B1组、B2组、B3组)、舒芬太尼3组(S1组、S2组、S3组).癌痛模型建立后第10～14天,C组和N组硬膜外注射NS 30μl,B1组、B2组、B3组分别硬膜外注射30μl布托啡诺25、50、100 μg(溶于NS),S1组、S2组、S3组硬膜外分别注射30μl舒芬太尼1、2、4μg(溶于NS),1次/d.动物在给药前1 h(T0)及末次给药后6 h(T1)、24 h(T2)、72 h(T3)采血,检测血清MBP.T3时取脊髓腰膨大,在光镜和电镜下观察其神经形态和细胞凋亡的变化. 结果 各时间点各组血清MBP差异无统计学意义(P＞0.05).与C组、N组、B1组、B2组、S1组、S2组、S3组比较,B3组光镜下可见的尼氏体阳性表达细胞数量减少[(37.6±3.7)、(39.3±3.6)、(36.1±3.1)、(37.3±2.9)、(38.4±2.9)、(35.7±3.3)、(35.3±3.2)比(22.3±2.7),P＜0.05],Bcl-2蛋白表达减少的阳性细胞数明显增加[(9.8±1.5)、(10.1±1.3)、(12.5±1.7)、(13.1±2.2)、(11.5±1.8)、(12.6±1.9)、(13.3±2.3)比(29.8±5.6),P＜0.05],Bax蛋白的表达明显增加[(8.6±2.2)、(9.3±1.6)、(10.1±1.7)、(9.9±1.9)、(8.4±2.1)、(10.7±1.3)、(11.3±1.8)比(31.8±5.3),P＜0.05],凋亡细胞明显增多[(6.6±2.3)、(6.3±2.6)、(7.1±1.7)、(7.9±1.3)、(8.4±1.1)、(9.7±1.3)、(8.3±1.7)比(15.2±2.3),P＜0.05];电镜下可见B3组脊髓髓鞘数量减少,结构破坏. 结论 布托啡诺50μg或舒芬太尼4 μg硬膜外连续给药对骨癌痛大鼠脊髓细胞和亚细胞结构、细胞凋亡及MBP无影响,但布托啡诺100 μg连续硬膜外给药会使骨癌痛大鼠脊髓神经细胞内尼氏体减少、细胞凋亡增加、髓鞘结构破坏,但对MBP没有影响.     

布托啡诺在术后镇痛的应用

目的观察布托啡诺用于术后镇痛的效果。方法105例硬膜外麻醉术后患者随机均分为芬太尼镇痛组（Ⅰ组）,曲马多镇痛组（Ⅱ组）和布托啡诺镇痛组（Ⅲ组）,比较术后镇痛效果和副作用。结果三组均获得了满意的术后镇痛效果。其中Ⅰ组术后4h VAS和术后24h D1／D2值分别小于Ⅱ组（P〈0．05）。头痛头晕Ⅱ组多于Ⅰ组（P〈0．05）。排尿困难Ⅲ组少于Ⅰ组（P〈0．05）。OAA／S评分Ⅲ组分别大于Ⅰ组和Ⅱ组（P〈0．05或P〈0．01）。结论布托啡诺在下腹部和下肢手术是一种有效术后镇痛药物,副作用较少,但嗜睡副作用应引起高度重视。     

鞘内注射艾司洛尔对福尔马林疼痛大鼠脊髓背角c-fos蛋白表达的影响

目的探索大鼠鞘内注射艾司洛尔能否抑制福尔马林大鼠脊髓背角c-fos蛋白表达。方法雄性SD大鼠,鞘内置管成功后,随机分为三组(n=8):生理盐水组(N组),艾司洛尔300μg/kg组(E1组),艾司洛尔600μg/kg组(E2组)。在异氟醚麻醉下,鞘内注射上述药物10μl,5 d后,所有大鼠一侧后肢爪掌背侧皮下注射福尔马林(5%,50μl),观察大鼠在Ⅰ相(0~5 min)和Ⅱ相(15~50 min)疼痛行为学变化(包括添足、咬足、抬腿动作等),并进行Dubuisson评分。采用免疫组织化学方法检测脊髓背角c-fos蛋白表达。结果与N组比较,E1、E2组大鼠Ⅱ相阶段的疼痛相关行为均有减少,呈量效关系(P<0.05),且E1、E2组L4~5节段脊髓表达的c-fos蛋白均较N组减少(P<0.05)。结论鞘内注射艾司洛尔可减少福尔马林大鼠脊髓背角c-fos蛋白表达。     

酒石酸布托啡诺对舒芬太尼诱发咳嗽反射的影响

目的观察酒石酸布托啡诺对舒芬太尼诱发咳嗽反射的影响。 方法择期行腹腔镜胆囊切除术患者82例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为两组,分别于麻醉诱导前静注以生理盐水稀释至5 ml的酒石酸布托啡诺1 mg (试验组)或生理盐水5 ml(对照组),5 min后在3 s内静注舒芬太尼0.3 μg/kg,观察并记录两组患者2 min内咳嗽反射的发生率和强度。 结果试验组患者咳嗽反射的发生率、强度明显低于对照组。 结论酒石酸布托啡诺1 mg可以抑制舒芬太尼诱发的咳嗽反射。     

异氟醚对外周伤害性刺激大鼠模型脊髓c-fos表达的影响

目的 观察异氟醚对外周伤害性刺激大鼠模型脊髓ｃ－ｆｏｓ表达的影响,初步探讨异氟醚在脊髓的可能作用部位。方法 ＳＤ大鼠６０只随机分为３组。于大鼠左后掌心皮下注射５％,损尔马林１５０μＩ建立外周伤害性刺激模型。Ａ组（伤害性刺激组,ｎ＝２５）,Ｂ组（异氟醚组,ｎ＝２５）,在建立模型前１０ｍｉｎ开始吸入１．５ＭＡＣ异醚。Ａ、Ｂ 按刺激模型建立的时间（０ｈ,０．５ｈ,１ｈ,２ｈ,３ｈ）模型前１０ｍｉｎ开始吸     

持续性术后痛大鼠脊髓星形胶质细胞的活化

目的 探讨持续性术后痛大鼠脊髓背角星形胶质细胞的活化.方法 成年雄性SD大鼠48只,体重200～250 g,随机分为2组(n=24):假手术组和模型组.模型组采用皮肤肌肉切口牵拉术制备持续性术后痛模型,假手术组仅暴露内收肌,不牵拉皮肤肌肉组织.分别于模型制备前(基础状态)、制备后1、3、12、22和32 d时测定大鼠机械缩足阈值(MWT).各时点MWT测定结束后随机取4只大鼠,处死后采用免疫组织荧光法测定脊髓胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达水平.结果 与基础值比较,假手术组各时点MWT和脊髓GFAP表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),模型组模型制备后1～22 d MWT降低,12 d时最低,模型制备后3～22 d脊髓GFAP表达上调,12 d时达峰值(P＜0.05或0.01);与假手术组比较,模型组MWT降低,脊髓GFAP表达上调(P＜0.05).结论 大鼠持续性术后痛与脊髓星形胶质细胞的活化有关.     

鞘内吗啡对切口疼痛模型大鼠脊髓背角P物质的影响

目的研究鞘内(IT)吗啡对切口疼痛模型大鼠脊髓背角P物质(SP)的影响.方法雄性SD大鼠16只,随机分为四组(每组4只)假手术组(组Ⅰ)、术前30min IT 0.9%氯化钠20μl组(对照组,组Ⅱ)、术后30min IT吗啡5μg组(组Ⅲ)和术前30min IT吗啡5μg组(组Ⅳ).按Brennan法制成切口疼痛模型,以累积疼痛评分确定疼痛行为.免疫组织化学方法观察脊髓背角SP免疫反应(SP-LI).结果组Ⅲ和组Ⅳ大鼠的累积疼痛评分均明显低于组Ⅱ(P＜0.01).组Ⅱ大鼠术侧脊髓背角浅层SP-LI物质积分光密度明显高于组Ⅰ及对侧(对照组0.62±0.07,假手术组0.40±0.09,P＜0.01);与组Ⅱ比较,组Ⅳ的大鼠术侧脊髓背角浅层SP-LI物质积分光密度(0.37±0.06)明显降低(P＜0.01),但两用药组间比较无显著差别.结论在大鼠切口疼痛模型中,术前IT吗啡的抗伤害作用与其抑制SP在脊髓背角的释放有关.     

骨癌痛大鼠脊髓CX3CR1表达的变化

目的 评价骨癌痛大鼠脊髓趋化因子Fractalkine受体1(CX3CRl)表达的变化.方法 雌性未交配SD大鼠650只,体重150～180 g,随机分为3组:对照组(n=10)、假手术组(n=10)和骨癌痛组(n=40).对照组不给予任何处理,假手术组、骨癌痛组分别在左胫骨上端注射Hank液和Walker 256乳腺癌细胞5 μl.对照组和假手术组于术前1 d、术后6、12、18 d时测定机械痛阈和双后肢负重;骨癌痛组于术前1 d、术后6、12、18 d时各取10只大鼠测定机械痛阈和双后肢负重.对照组和假手术组于术后18 d时,骨癌痛组于术后6、12、18 d时各处死10只大鼠,取L4-6脊髓组织,采用免疫组化法测定CX3CR1阳性细胞计数,采用Western blot法测定CX3CR1表达.结果 与对照组和假手术组比较,骨癌痛组术后各时点机械痛阈降低,双后肢负重差,CX3CR1阳性细胞计数升高,CX3CR1表达上调(P<0.01).结论 脊髓CX3CR1可能参与了大鼠骨癌痛的发生和维持.     

神经病理性疼痛大鼠脊髓突触后致密物质-95 mRNA的表达

目的研究神经病理性疼痛大鼠脊髓背角突触后致密物质-95（PSD95）mRNA的表达。方法雌性SD大鼠12只，体重150—200g，随机分为2组（n=6），对照组和SNI组。SNI组于左肢制备坐骨神经保留性神经损伤模型（SNI），对照组实施假手术。分别于术前3d、术后即刻、1、3、5、7、9、11d测定机械刺激诱发的缩腿反应次数。术后11d，每组取3只大鼠灌注固定，采用免疫组织化学方法检测脊髓N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体NR2B亚单位（NR2B）和神经型一氧化氮合酶（nNOS）的表达；每组余下3只大鼠断头处死后分离L4-5脊髓，提取组织RNA，采用RT-PCR方法检测PSD95 mRNA的表达。结果SNI组术后3d术侧缩腿反应次数高于对照组（P〈0．05），术后5dSNI组各时间点缩腿反应次数差异无统计学意义（P〉0．05）。NR2B和nNOS主要表达于脊髓背角的Ⅰ或Ⅱ层，SNI组nNOS和NR2B的表达高于对照组（P〈0．05）；SNI组PSD95 mRNA的表达低于对照组（P〈0．05）。结论神经病理性疼痛大鼠脊髓背角NR2B和nNOS表达增加，但是脊髓中PSD95mRNA转录水平降低。影响了突触后三者复合物的形成。     

鞘内注射吗啡对福尔马林炎性疼痛大鼠脊髓背角环氧化酶-2表达的影响

目的评价鞘内注射吗啡对福尔马林炎性疼痛大鼠脊髓背角环氧化酶-2（COX-2）表达的影响。方法32只鞘内置管成功的雄性SD大鼠，随机分为4组（n=8）：对照组（C组）、模型组（F组）、生理盐水组（NS组）及吗啡组（M组）。鞘内置管后5d，F组、NS组及M组大鼠于左后足掌部皮下注射5％福尔马林50μl，注射福尔马林前30min，NS组鞘内注射20μl生理盐水，M组鞘内注射10μl（10μg）吗啡和10出生理盐水，C组不给任何处理，采用疼痛加权评分评价疼痛行为学。F组、NS组及M组于注射福尔马林后24h，C组于鞘内置管后6d处死大鼠，取L5脊髓，采用免疫组织化学方法观察脊髓背角COX-2表达。结果吗啡可减轻福尔马林炎性疼痛；与C组比较，F组、NS组脊髓背角COX-2表达增加（P〈0．01）；与F组、NS组比较，M组脊髓背角COX-2表达降低（P〈0．01）。结论鞘内注射吗啡可抑制福尔马林炎性疼痛引起的脊髓中COX-2表达增加，可能与吗啡的抗伤害和镇痛作用有关．     

胫骨癌痛大鼠脊髓细胞外信号调节激酶5活性的变化

目的 评价胫骨癌痛大鼠脊髓细胞外信号调节激酶5(ERK5)活性的变化.方法 雌性未交配SD大鼠108只,体重160～ 180 9,采用随机数字表法,将其分为3组(n=36):对照组(C组)、假手术组(S组)和胫骨癌痛组(BCP组).BCP组胫骨骨髓腔内注射Walker256乳腺癌细胞混悬液制备大鼠胫骨癌痛模型;S组胫骨骨髓腔内注射等容量生理盐水;C组不作任何处理.于接种前1d、接种后3、5、7、14和21 d时,测定机械痛阈.C组和S组于接种后21 d痛阈测定结束后随机处死6只大鼠,BCP组分别于接种后3、5、7、14和21 d痛阈测定结束后随机处死6只大鼠,取脊髓组织,采用Westernblot法测定脊髓背角磷酸化ERK5(p-ERK5)、ERK5和Fos蛋白的表达.结果 C组和S组各时点机械痛阈、脊髓背角p-ERK5、ERK5和Fos蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05).与C组和S组比较,BCP组接种后7-21 d时机械痛阈下降,接种后5-21 d时脊髓p-ERK5和Fos蛋白表达上调(P＜0.05),ERK5表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠胫骨骨髓腔内注射肿瘤细胞可能通过增强脊髓ERK5活性,导致其下游Fos蛋白的释放,从而诱发骨癌痛.     

脊髓背角γ-氨基丁酸转运体-1在大鼠骨癌痛中的作用

目的 评价脊髓背角γ-氨基丁酸转运体-1 (GAT-1)在大鼠骨癌痛中的作用.方法 清洁级健康雌性SD大鼠80只,体重150～180 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=16):假手术组(Ⅰ组);骨癌痛组(Ⅱ组)采用胫骨上段骨髓腔接种Walker-256乳腺癌细胞的方法制备大鼠骨癌痛模型;假手术+ GAT-1选择性抑制剂NO-711组(Ⅲ组)和骨癌痛+NO-711(Ⅳ组)于术后第14天鞘内注射NO-711 20 μg,1次.d,连续3d;骨癌痛+生理盐水组(Ⅴ组)于术后第14天鞘内注射10μl生理盐水,1次/d,连续3d.于术前1d、术后第3、5、7、10、14、16天时测定大鼠机械痛阈,术后第16天机械痛阈测定后处死大鼠,取腰段脊髓,采用Western blot法检测脊髓GAT-1的表达,采用免疫荧光双标法观察Ⅰ组和Ⅱ组大鼠患侧脊髓GAT-1和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫反应阳性产物的共表达.结果 与Ⅰ组和Ⅲ组比较,Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组术后第7～ 16天机械痛阈降低,Ⅱ组和Ⅴ组术后GAT-1表达上调(P＜0.05);与Ⅱ组和Ⅴ组比较,Ⅳ组术后第16天鞘内给药后机械痛阈升高,脊髓背角GAT-1表达下调(P＜0.05);与Ⅰ组比较,Ⅱ组患侧脊髓GFAP和GAT-1共表达增加(P＜0.05).结论 脊髓背角GAT-1的表达上调参与了大鼠骨癌痛的形成与维持,该作用可能与脊髓星形胶质细胞的活化有关.     

曲马多对福尔马林诱发大鼠脊髓背角神经元c-fos基因表达的抑制作用

目的：研究曲马多对疼痛刺激诱发大鼠脊髓c-fos蛋白的抑制作用及其在脊髓的可能作用部位。方法：SD大鼠60只，随机分为对照组（N组，生理盐水）、三个曲马多处理组（T1组1mg/kg、T2组10mg/kg、T3组20mg/kg）、两个吗啡处理组（M1组1mg/kg、M2组５mg／kg），每组各10只。于左后足趾皮下注射5％福尔马林前10分钟静脉注射上述药物。致痛2小时后，取出脊髓，用免疫组化检测FLI阳性神经元。结果：N组FLI细胞主要分布在I－Ⅱ及Ⅴ-Ⅵ层，T2、T3、M1和M2组FLI细胞与N组相比减少。结论：曲马多预处理能对疼痛引起的脊髓灰质背角FLI阳性神经元增多效应产生剂量依赖性的抑制作用；脊髓灰质背角I－Ⅱ及Ⅴ-Ⅵ层可能是曲马多产生痛觉调制的主要部位。