植物油对顶头孢霉在发酵过程中菌体形态变化与头孢菌素C产量的影响

植物油加入到培养基后,促进了高度膨胀的菌丝体断片形成节孢子,同时增加了头孢菌素C的产量。     

培养基成分对顶头孢霉高产株生产头孢菌素C的影响

头孢菌素C(CPC)的生物合成曾由若干小组作过研究.多数研究利用低产株在合成培养基内进行.这些研究表明CPC的生物合成途径已完全确定.其中三肽L-a-AAA-L-CYS-D-VAL(ACV)是由三种氨基酸依靠单种酶或两种酶的作用形成的.业已分离出二肽L-a-AAA-L-CYS(AC),并证实由AC和缬氨酸(VAL)形成ACV的速率高于由L-a-氨基己二酸(a-AAA)和半胱氨酸(CYS)形成AC的速率,但由a-AAA、CYS和VAL形成ACV的速率更高.这种三肽可从胞内和胞外检出,尽管ACV合成酶是一种胞内酶.     

头孢菌素C酰基转移酶在顶头孢霉中的表达

以假单胞菌的头孢菌素C(CPC)酰基转移酶为基础,根据顶头孢霉密码子偏爱性及RNA二级结构预测分析,设计并合成了全长2349 bp的CPC酰基转移酶基因ecs,并将其在大肠杆菌中表达.结果证明,表达蛋白能将CPC转化为7-ACA.将ecs表达质粒转化CPC产生菌顶头他霉,通过PCR、Southern blotting以及Western blotting等方法验证,表明ecs基因已成功整合到顶头孢霉染色体上并得到表达,重组菌的发酵也显示部分CPC直接转化成了7-ACA.     

用重组DNA提高顶头孢霉的头孢菌素C产量

头孢菌素 C(CPC),系天然产生的β-内酰胺抗生素,可制造更为有效的头孢菌素类药物。顶头孢霉 ATCC 11550系 G.Brotzu 在萨迪尼亚沿海附近污水排出口处的海水中发现的一种无性丝状真菌,经诱变、筛选及选育后获得的许多菌株已在世界各地制药公司生产 CPC 达25年以上。     

头孢菌素C发酵曲线的测定

摇瓶发酵过程中，不同时间测定各项参数的值，绘制出发酵曲线     

采用接种体混合物培养顶头孢霉M25提高头孢C的产量

采用不同菌龄的接种混合物培养顶头孢霉M25，可提高头孢C的产量。早期与后期的接种体的比例为3：7时，得到CPC浓度的最大值(2．17g／L)。     

顶头孢霉生物合成头孢菌素C中限速步骤的识别

头孢菌素C(CPC)系顶头孢霉产生的一种天然β-内酰胺抗生素.目前工业上生产的CPC是作为进一步生产注射用头孢菌素的前体,后者在治疗由产生青霉素酶的细菌所引起的人体感染上更为有效.自发现CPC以来,由于工艺和菌株的改良,产量显著提高.当今工业生产上使用的高产菌株主要通过多次反复诱变筛选获得.然而,采用这些传统方法所得菌株,在没有扩大筛选的情况下已难以进一步改良.因此继续采用这些方法,效率低,在经济上已没有多大吸引力.     

搅拌对顶头孢霉丝形态和头孢菌素C生物合成的影响

搅拌能充分混合物料，增强氧的传递，但搅拌强度过强会影响工业生产菌的菌丝形态和产物生成。在头孢菌素C的发酵生产过程中，菌丝形态与产素的关系密切，通过采用显微图像定量分析技术，计算菌丝总长度和菌丝平均生长单位，表明过高的搅拌速度会打断菌丝，造成机械损伤．明显降低产率。更换80m^3生产罐搅拌桨之后，降低了剪切作用，大罐的发酵效价提高了33．3％，达到22926．8μg／ml。     

药酶在头孢菌素C发酵上的应用

目的：使用药酶部分替代头C发酵中的有机氮源，提高发酵水平；方法：采用“均匀设计”法优化原料配比；结果：使用药酶后，效价提高10．4％，总亿提高了8．2％；结论：药酶能够提高头C发酵的水平。     

发酵过程中条件特性对头孢菌素C生物合成的影响

头孢菌素 C(简称头 C)是获得许多半合成药物制剂的重要物质,这就决定了研究强化其生物合成过程条件的迫切性。目前,关于头 C 生物合成的工艺资料报     

剪切作用对头孢菌素C发酵的影响

要发酵放大通常采用几何尺寸比例放大,而忽视剪切力作用。剪切力作用对头孢菌素C的发酵水平影响较大。通过试验我们总结出对于种子罐和处于生长期的菌丝体搅拌叶末端线速度不易超过7m/s,对于生长期呈节孢子状态的菌体以7．5m/s的末端线速度为宜。以此为依据,在进行生产规模扩大上取得了较好效果。     

头孢菌素C生产工艺改进的研究Ⅰ.头孢菌素C新菌种C82—123发酵工艺研究

对Cephalosporium acremonium C82-123发酵过程中的温度,通气,pH调节,碳、氮源等组份的用量,氨水等的补料以及蛋氨酸的诱导作用进行了研究。采用改进后的发酵工艺,使该菌种在7 L 玻璃发酵罐中的发酵效价提高三倍以上。     

两株顶头孢霉生理生化特性的研究

通过对两株头孢菌素C产生菌顶头孢霉生理生化特性的研究,对发酵过程中各个参数的变化规律与头孢菌素产量之间的关系有了一定的认识,并根据不同菌种的代谢特性配置了一套与其相适应的控制条件,从而达到提高头孢菌素产量的目的。     

农杆菌转化法高效构建顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株提高头孢菌素C产量

目的 获得顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株，以阻断sorbicillinoids的合成，并研究其与头孢菌素C(CPC)产量的关系。方法 通过根癌农杆菌转化法，依据同源双交换的原理，同时敲除合成sorbicillinoids骨架结构的两个聚酮合酶基因sorA和sorB，并通过摇瓶发酵实验检测缺失菌和野生菌的产量。结果 筛选并验证了6株A. chrysogenum-?pks菌株，遗传稳定，转化效率约为20%。通过发酵实验测定发现，缺失菌株产CPC能力比野生菌提高了70%。结论 农杆菌转化法是一个高效的顶头孢霉遗传操作系统，并且顶头孢霉中sorbicillinoids的缺失可以提高CPC产量。     

豆油对头孢菌素C发酵影响的初步研究

本文主要考察了基础培养基添加豆油以及不同发酵时间流加豆油对头孢菌素C发酵特性的影响.实验结果表明在72h,84h,96h三个时间添加点中,以72h添加豆油为最佳:72h的豆油添加中以0.8%的添加量效果最好,其脂肪酶活比对照平均高出14.8%,放瓶效价提高6.6%.为以后进行的发酵罐实验提供了有参考价值的数据.     

头孢菌素类产品的市场情况及头孢菌素C发酵工艺

简要的分析了头孢菌素类抗生素目前的市场发展状况,结果表明头抱菌素的研究开发速度减缓,开发广谱、高效、长效的新头孢菌素已成为当务之急。分别从发酵培养基的组成、发酵操作条件以及发酵过程控制三个层面分析了发酵工艺对头孢菌素C产量的影响,为发酵生产头孢菌素C提供了理论和现实意义。     

头孢菌素C3—位功能化及合成中间体的研究进展

头孢菌素自发现以来本世纪有了很大的发展,目前其品种,数量居各类抗生素的首位,头孢菌素的研究主要在不改变其母核结构的基础上进行侧链的结构改造和化学修饰,以提高药效及抗菌活性,扩大抗菌谱,提高对β－内酰胺酶的稳定性,减少毒副作用,改善药物动力学性质,据此原则,头孢菌素目前已开发到第四代,在头孢菌素的研究中,Ｃ３－位结构改造及功能化研究,一直受到人们的重视,本文重点对头孢菌素的Ｃ３－位功能化研究及其合成     

生物氮素在头孢菌素C发酵生产上的替代应用

目的：选择不同氮素对头孢菌素C发酵的影响。方法：在相同的工艺条件下,用不同的氮素代替玉米浆,改变配比寻找最佳方案。结果：只有生物氮素能够满足条仕,进行部分替代。结论：通过生物氮素在头孢菌素C发酵生产上的替代,能够大幅度提高发酵单位,降低成本。     

50L罐头孢菌素C发酵过程豆油流加控制策略的优化

目的 优化头孢菌素C(CPC)发酵过程的豆油补料控制策略,提高发酵整体性能.方法 提出了一种匀速+DO-Stat结合型补油策略.在50L罐上对使用该策略和使用匀速补油以及传统DO-Stat自动补油策略的发酵性能进行比较,确定最优补油控制策略.结果 采用匀速+DO-Stat结合型补油策略时,CPC终浓度最高,CPC得率也从使用匀速补油策略时的19.61％提高到25.74％,代谢主副产物去乙酰氧头孢菌素C(DAOC)的积累量少,DAOC/CPC(W/W)只有0.46％,达到生产要求.结论 使用匀速+DO-Stat结合型补油策略,可控制CPC发酵过程中的碳源浓度和溶解氧浓度(DO)于合适水平,在维持较高的CPC生产强度的前提下,CPC得率大幅提高,代谢副产物的积累得到抑制、产品质量得到控制.     

经不同无害化及资源化技术处理后头孢菌素C发酵菌渣中抗菌活性物质的变化情况

目的：建立有效评价抗生素发酵菌渣无害化处理效果的手段。方法：采用敏感菌株对无害化处理菌渣的抗菌活性进行筛查,利用HPLC-MS对菌渣中残留/转化组分的结构进行推断,再结合相关化合物数据库对残留组分生物学/安全性信息进行检索。结果：所研究的4种头孢菌素C菌渣中：未经处理菌渣中具有β-内酰胺类活性物质;3种经无害化处理的菌渣中仅有1种不再具有抑菌活性,其余2种与市政污泥混合进行堆肥处理的菌渣中均产生了有别于未经处理菌渣活性的非β-内酰胺类抑菌物质。结论：在对无害化处理效果进行评价时,除利用菌渣中特定的残留抗生素为评价指标外,还应考虑堆肥过程中菌渣残留成分的生物转化问题。