哮喘儿童外周血可溶性干细胞因子的测定和临床意义

目的 探讨可溶性干细胞因子（solublestem cell factor，sSCF）在哮喘发病中的作用。方法 使用酶联免疫吸附法对90例哮喘患儿发作期和缓解期外周血血清sSCF的水平进行了检测。结果 哮喘发作期sSCF水平较缓解期和正常对照组明显降低（P均〈0．05）；缓解期水平有明显升高，但仍然低于正常对照组。结论 sSCF参与了儿童支气管哮喘的发病，检测患儿外周血sSCF水平可作为判断病情严重程度的重要指标。     

支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞17、白细胞介素-17、白细胞介素-21水平变化

目的 检测辅助性T淋巴细胞17(Th17)及细胞因子IL-17、IL-21在支气管哮喘(哮喘)患儿外周血中的表达,探讨其在儿童哮喘发病机制中的作用.方法 以哮喘患儿60例(哮喘组)为研究对象,根据病情分为哮喘发作期(发作期组,n=30)、哮喘缓解期(缓解期组,n=30);以健康儿童30例作为健康对照组.分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测其Th17细胞百分率.采用ELISA法检测各组IL-17、IL-21表达水平.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 哮喘发作期组患儿外周血中Th17及 IL-17 水平明显高于缓解期组和健康对照组(Pa<0.05);哮喘发作期组患儿血清IL-21表达水平明显低于缓解期组和健康对照组(Pa<0.05);哮喘缓解期组与健康对照组外周血Th17、IL-17、IL-21水平比较,差异均无统计学意义(Pa>0.05).结论 Th17、IL-17通过全身系统性炎症反应参与儿童哮喘的发病,IL-21可作为儿童哮喘的控制指标,亦有望为哮喘的治疗提供新的靶点.     

儿童哮喘外周血嗜酸细胞阳离子蛋白、内皮素和肿瘤坏死因子-α的水平变化及临床意义

为探讨细胞因子及炎性介质在哮喘病发病中的作用，采用放免方法对69例哮喘患儿外周血发作斯和缓解期血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）、血管内皮素（ET）及肿瘤坏死因子（TNF－α）的水平进行了检测。结果发现ECP、ET及TNF－α发作期水平较缓解期和正常对照组明显增高（P均＜0．01）；缓解期水平有明显下降，但仍然高于正常对照组。提示检测哮喘患儿外周血ECP、ET及TNF－α水平，对于判断哮喘病期、严重程度、预后及防治均有重要的指导意义。     

哮喘儿童血转化生长因子β_1及尿白三烯E_4水平的临床研究

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在哮喘发病及预后中的作用,寻找儿童哮喘防治的新靶点。方法分别检测缓解期和发作期(不同程度)哮喘儿童及正常儿童外周血TGF-β1及尿LTE4水平。结果哮喘组患儿外周血中TGF-β1及尿白三烯E4水平明显高于对照组(P0.01),且两者的水平与哮喘发作的严重程度成正相关(P0.01)。结论哮喘患儿的TGF-β1水平明显高于正常儿童,且发作程度越重,升高越明显。     

不同时期哮喘患儿血清白细胞介素-6变化的意义

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)在支气管哮喘中的临床意义。方法采用放射免疫法检测29例哮喘急性发作期患儿、32例缓解期患儿血清IL-6水平,并设20例健康儿童为对照组。结果1.哮喘急性发作期患儿血清IL-6水平明显增高,与缓解期哮喘组及对照组比较,差异均非常显著(P均<0.001)。2.缓解期哮喘患儿IL-6水平仍高于正常对照组(P<0.001)。3.缓解期>3岁哮喘患儿IL-6水平较≤3岁组高(P<0.001)。结论IL-6参与哮喘的发病,在哮喘的各个时期发挥不同的生物学效应。     

miR-98在哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达及意义

目的 探讨支气管哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-98的表达及其临床意义.方法 收集43例发作期和缓解期哮喘患儿,30例健康儿童(对照组)的外周血标本,分离PBMCs,采用实时定量PCR法检测PBMCs中miR-98及IL-13、IL-4 mRNA的相对表达量.结果 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中的表达低于缓解期和对照组儿童,而IL-13、IL-4在哮喘发作期患儿PBMCs中的mRNA水平均高于缓解期和对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);缓解期患儿和对照组间miR-98、IL-4 mRNA和IL-13 mRNA水平差异无统计学意义(P均>0.05).哮喘患儿发作期,miR-98水平与IL-4、IL-13 mRNA相对表达量均呈负相关(r=-0.794、-0.804,P均<0.001),IL-4和IL-13 mRNA相对表达量呈正相关(r=0.853,P<0.001).结论 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中表达降低,可能与小儿哮喘的发作相关.     

哮喘患儿外周血调节性T细胞和 Th1/Th2 的变化及其与哮喘病情的关系

目的：通过测定哮喘患儿外周血 CD4+CD25+Foxp3+ 调节性T细胞（Treg）以及 Th1/Th2 比值变化,探讨其与哮喘病情的关系。方法：150 例哮喘患儿按临床表现分为急性期组 (94 例) 和缓解期组 (56 例), 其中急性期组按病情再分为轻度组 (54 例) 和重度组 (40 例)。应用流式细胞仪检测各组外周血 CD4+CD25+Foxp3+ Treg、CD4+IFN-γ+ Th1 和 CD4+IL-4+ Th2 水平,并与正常儿童（对照组,n=50）进行比较。结果：哮喘组 Treg 水平明显低于对照组 (P<0.01)：其中急性期组 Treg 水平明显低于缓解期组和对照组(P<0.01),重度组 Treg 水平则明显低于轻度组(P<0.01)。哮喘组 Th1/Th2 比值显著低于对照组 (P<0.01)。哮喘急性期组 Th1/Th2 比值显著低于缓解期组和对照组 (P<0.01)。哮喘患儿外周血 Treg 水平与哮喘的病情严重程度呈负相关 (r=-0.737, P<0.01),Th1/ Th2 比值与哮喘病情严重程度亦呈负相关 (r=-0.615, P<0.01),且Treg 的水平与 Th1/ Th2 比值呈正相关(r=0.856, P<0.01)。结论：哮喘患儿外周血Treg 水平明显降低,Th 亚群失衡,提示 Treg 和 Th 免疫在哮喘发病中具有重要作用。外周血Treg 水平与 Th1/Th2 比值可用来评估哮喘病情。     

哮喘患儿外周血中CD4~+LAP~+调节性T细胞比例及功能变化研究

目的测定哮喘患儿外周血中CD4+LAP+调节性T细胞(CD4+LAP+Treg细胞)比例和功能的改变,探讨CD4+LAP+Treg细胞在哮喘发病中的作用。方法选取2014年3月至2015年9月确诊为哮喘的患儿75例为研究对象,依据病情将哮喘患儿分为哮喘急性期组(n=40)和哮喘缓解期组(n=35);另选取行健康体检儿童30例为健康对照组。采用流式细胞仪检测各组儿童外周血CD4+LAP+Treg细胞百分比;采用3H-脱氧胸腺嘧啶苷法检测各组CD4+LAP+Treg细胞的免疫抑制情况。结果哮喘急性期组患儿体内CD4+LAP+Treg比例(2.0%±1.0%)较缓解期组(4.1%±2.4%)及健康对照组(4.6%±3.0%)均降低(P0.05);哮喘急性期组患儿体内CD4+LAP+Treg细胞免疫抑制率(21%±4%)较缓解期组(55%±9%)及健康对照组(62%±11%)均降低(P0.05)。结论哮喘患儿外周血中CD4+LAP+Treg数量降低和抑制功能减弱可能参与了哮喘的急性发病过程。     

哮喘患儿外周血单个核细胞microRNA-206表达及意义

目的探讨哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMCs)microRNA-206(miR-206)表达在哮喘发生发展中的作用。方法收集27例哮喘患儿发作期和缓解期,以及25名健康对照儿童的外周血标本,分离PBMCs,采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测PBMCs中microRNA-206及锌指样转录因子4(KLF4)、白介素-17(IL-17)mRNA的相对表达量。结果miR-206、KLF4 mRNA和IL-17 mRNA水平在哮喘发作期、缓解期患儿以及健康对照组儿童三组间的差异均有统计学意义(F=46.58~72.81,P均=0.000)。哮喘发作期的miR-206水平分别低于缓解期和健康对照组,而KLF4 mRNA和IL-17 mRNA水平均分别高于缓解期和健康对照组,差异有统计学意义(P均0.01);缓解期和健康对照组间miR-206、KLF4 mRNA和IL-17 mRNA水平的差异无统计学意义(P均0.05)。哮喘患儿发作期,microRNA-206水平与KLF4和IL-17 mRNA相对表达量均呈负相关(r=–0.66、–0.81,P均0.01),KLF4和IL-17 mRNA相对表达量呈正相关(r=0.70,P0.01)。结论哮喘患儿外周血单个核细胞microRNA-206表达水平下降,与疾病的发生发展关系密切。     

哮喘患儿CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10和TGF-β1的变化

目的：通过测定和分析哮喘急性发作期与缓解期儿童外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及其相关细胞因子白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β1）在哮喘发病中的变化情况,探讨哮喘发作的新的免疫机制。方法：分别采集74例哮喘发作期和28例哮喘缓解期患儿及20例健康儿童外周静脉血,通过流式细胞仪分析及酶联免疫吸附试验（ELISA）测定CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平。结果：①哮喘发作期患儿外周血中CD4+CD25+调节性T细胞百分率及IL-10水平较缓解期及对照组明显降低（P<0.01）,而哮喘缓解期明显升高接近正常水平; ②哮喘急性发作期患儿TGF-β1水平较缓解期及对照组明显升高（P<0.05）。哮喘缓解期患儿TGF-β1水平明显降低,仍高于对照组水平; ③哮喘发作期、缓解期及对照组各组之间CD4+CD25+T细胞百分率与IL-10、TGF-β1无相关性（P>0.05）。结论：哮喘发作期患儿CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10数量和分泌水平降低、TGF-β1水平增高,导致了全身和局部对炎症反应的抑制作用减弱,可能是导致哮喘发作的原因之一。［中国当代儿科杂志,2009,11（10）：829-832］     

哮喘患儿血一氧化氮及血型的相关研究

目的　探讨一氧化氮 (NO)在哮喘发病中的作用及血型与哮喘的相关性 ,以提高对哮喘的诊治水平。方法　采用比色法测定 87例哮喘患儿和 3 0例健康儿童血浆亚硝酸根离子 /硝酸根离子 (NO2 - /NO3- )含量。对 113例哮喘患儿和 1872例健康儿童行血型测定。结果　哮喘患儿急性期及缓解期血浆NO2 - /NO3 - 含量明显高于健康儿童。急性期血浆NO2 - /NO3 - 含量高于缓解期。哮喘患儿和健康儿童血型构成无显著差别(P >0 .0 5)。结论　NO参与哮喘发病的病理生理过程 ,缓解期气道炎症仍存在。血浆NO2 - /NO3 - 水平可作为判定哮喘病情程度的重要指标之一。血型与哮喘无明显相关性     

哮喘儿童 PBMC培养上清中 IL-13变化及其与嗜酸细胞计数、IgE关系探讨

目的 探讨白介素13（IL-13）在儿童支气管哮喘发病中的作用及其与嗜酸细胞（EOS）、IgE之间的关系。方法 测定32例哮喘儿童急性发作期外周血单个核细胞（PBMC）培养上清中IL-13水平,其中20例测定了恢复期PBMC培养上清中IL-13水平,20例正常儿童PBMC培养上清IL-13作对照,同时检测外周血EOS及血清IgE。结果 哮喘儿童在急性期和恢复期PBMC培养上清中IL-13均高于正常对照组,差异有统计学意义（P均〈0．05）,IL-13水平变化与EOS、IgE呈显著正相关（r=0.7498,0．9218,P均〈0.001）。结论 IL-13参与了儿童支气管哮喘的发病,在嗜酸细胞激活、活化及炎性介质的释放以及IgE分泌、合成方面可能具有一定的作用;减少IL-13生成的治疗对控制儿童支气管哮喘发作可能有重要意义。     

Mannose-binding lectin levels in children with asthma

Mannose-binding lectin (mbl), one of the important components of innate immunity, can activate the lectin pathway of the complement system. After binding mannose containing carbohydrate structures of foreign antigen, mbl initiates and regulates the inflammatory responses. Asthma is a complex inflammatory disease of the lung involving many components of the immune system. Our objective was to investigate the serum mbl levels of asthmatic children in comparison with healthy controls. Serum mbl levels were determined by nephelometric assay in 72 asthmatic children (5-15 yr old) and 30 healthy age-matched controls. Mbl levels of asthmatic children were measured both during acute attack and after complete remission. There was no significant difference between the mbl levels during acute attack (median 4.1 mg/l) or quiescence of symptoms (median 3.6 mg/l). Serum mbl levels both during acute attack or quiescence of symptoms was significantly higher in asthmatic children than in the healthy controls (median 2.8 mg/l, p < 0.0001 for each). Furthermore, mbl levels of asthmatic children positively correlated with peripheral blood eosinophils (r = 0.377, p < 0.001), which is a systemic component of airway inflammation in asthma. Our findings indicate that mbl may be implicated in the pathogenesis of asthma by contributing to airway inflammation or by increasing the risk of developing asthma.     

脑源性神经营养因子与儿童哮喘严重程度的关系

目的探讨血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平与哮喘患儿病情严重程度的关系。方法选取60例哮喘急性发作期儿童(轻度组18例、中度组25例、重度组17例)及60例健康体检儿童作为研究对象,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清BDNF,分析BDNF水平与哮喘严重程度的关系。结果哮喘急性发作组及症状缓解组的BDNF水平均高于对照组,以急性发作组最高(P0.05);治疗后处于缓解期时,BDNF水平较发作期明显降低(P0.05)。发作期哮喘患儿病情严重程度不同,其血清BDNF水平不同:轻度组最低、重度组最高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 BDNF可能在儿童哮喘的发病机制中发挥一定的作用,并且与病情严重程度相关。     

哮喘患儿血清IL 12 TGFβ1 与IgE 水平变化的研究

目的：检测哮喘患儿不同病期的白细胞介素12 ( IL-12) 、转化生长因子β1 ( TGFβ1 ) 与免疫球蛋白E( IgE) 水平变化的规律,并探讨不同病期IL-12,TGFβ1水平与IgE水平的相关性,据此阐述它们在哮喘中的临床意义。方法：采用ELISA 方法检测85例哮喘患儿及30例正常儿童的血清IL-12,TGFβ1与总IgE 水平。结果：哮喘组血清IL-12,TGFβ1水平明显低于对照组,而IgE 水平则哮喘组明显高于对照组,且发作期IL-12,TGFβ1 水平（28.42±10.73 ng/L,40.25±11.73 pg/mL）明显低于缓解期（40.42±15.26 ng/L,65.41±22.38 pg/mL）,差异有显著性 (P< 0. 01),缓解期血清IL-12,TGFβ1 水平明显低于对照组（67.42±20.58 ng/L,178.54±90.56 pg/mL）,差异有显著性(P<0.01),发作期血清IgE 水平（280.35±80.54 IU/mL）明显高于缓解期（145.67±51.25 IU/mL）, 差异有显著性(P< 0.01), 缓解期血清IgE 水平明显高于对照组（53.61±13.32 IU/mL）, 差异有显著性(P<0.01),哮喘患儿血清IL-12,TGFβ1水平与IgE呈负相关(P< 0.01)。结论：哮喘患儿存在IL-12,TGFβ1及IgE 水平失衡,提示IL-12,TGFβ1 在哮喘的发病中起着重要作用,检测它们的水平可为哮喘的诊断及判断病情提供依据。     

Serum levels of eosinophilic cationic protein (ECP), myeloperoxidase (MPO), lipid peroxidation products, interleukin (IL)-5 and interferon (IFN)-gamma in children with bronchial asthma at acute asthma attack and remission

We determined serum levels of myeloperoxidase (MPO), eosinophilic cationic protein (ECP), reactive oxygen species measured as thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), interleukin (IL)-5, and interferon (IFN)-gamma in 14 asthmatic children during an asthma attack and remission. Twelve healthy children served as controls. In atopic asthmatics, asthma attack resulted insignificant elevations of ECP, MPO, and TBARS compared to remission. TBARS levels were also higher at remission compared to controls. However, there was a great deal of overlap in the values of asthmatics and controls. IL-5 and IFN-gamma were detectable at low levels and only in a few patients. These results provide further evidence for participation of eosinophils, neutrophils and reactive oxygen species in the pathogenesis of acute asthma, and suggest that their products may be used in monitoring asthma attack. Serum IL-5 and IFN-gamma levels are not appropriate for use in the follow-up of asthmatic children.     

哮喘患儿支气管诱导痰液中P物质含量变化的临床研究

目的　研究支气管哮喘患儿急性发作期、缓解期支气管诱导痰液中P物质含量变化及临床意义。方法　用高渗盐水超声雾化吸入法留取研究组及对照组儿童支气管诱导痰液。其中哮喘急性发作期组 34例 (3d内无静脉或口服激素史 ) ;哮喘缓解期组 30例 ;健康对照组 2 2例。用放射免疫方法检测各组支气管诱导痰中P物质含量。结果　哮喘患儿急性发作期支气管诱导痰中P物质含量明显高于缓解期及正常对照组 ,差异显著 ,P均 <0 0 1。缓解期组与正常对照组比较 ,差异无显著性 ,P >0 0 5。结论　哮喘患儿急性发作期支气管诱导痰中P物质含量显著增高 ,缓解期降低 ,接近正常水平 ;提示支气管诱导痰中P物质含量与儿童哮喘的发作及缓解关系密切 ,可做为一种临床监测指标。     

脉冲振荡肺功能与黏附分子在儿童哮喘中的临床意义

目的：脉冲振荡肺功能是近年来开展的一项肺功能测定新技术, 特别适用于学龄前儿童,但目前有关报道不多,且尚无统一正常值。可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、内皮细胞黏附分子-1（sVCAM-1）是已明确的反映哮喘严重程度的指标,该文旨在探讨上述指标在儿童哮喘中的临床意义。方法：应用Master Screen系列肺功能测定系统,对25例健康儿童、40例哮喘发作期儿童用脉冲振荡法（IOS)进行肺功能检测,其中23 例患儿激素治疗达缓解期后再次检测;同时对部分上述儿童（发作期23例,缓解期20例, 对照组16例）进行sICAM-1、sVCAM-1水平检测。 结果：IOS肺功能测试发作期R5,R20,R5-R20,X5,Fres,Zrs均高于对照组和缓解组,差异均有显著性(q= 2.91 ~15.61,P<0.01或P<0.05),缓解期与对照组比较,R5,R5-R20,Fres,Zrs差异有显著性(q=3.08~9.19,P<0.01或 P<0.05)。发作期血清sICAM-1,sVCAM-1明显高于缓解期及对照组(q= 6.23~26.15,P＜0.01）,而缓解期仍高于对照组(q=16.86,12.46, P<0.01)。发作期sICAM-1,sVCAM-1与R5-R20呈正相关（r=0.45,0.57 P<0.05） 结论：IOS肺功能和sICAM-1、sVCAM-1都可以作为儿童哮喘病情严重程度和治疗效果的评价指标,两者之间有一定的相关性,IOS肺功能测定简便、无创,适合于学龄前儿童。［中国当代儿科杂志,2007,9（5）：415-418］