黄芪注射液对高糖或AGEs培养肾小球系膜细胞增殖和Na+-K+-ATP酶活性的影响

[目的]观察黄芪注射液对高糖或糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)增殖和Na⁺-K⁺-ATP酶活性的影响。[方法]用含高糖或AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,四甲基氮唑盐(MTT)法考察GMC的增殖情况,试剂盒测试细胞悬液中细胞蛋白含量,再进行Na⁺-K⁺-ATP酶测定。[结果]葡萄糖或AGEs中GMC的吸收度值增大,Na⁺-K⁺-ATP酶活性显著降低,与正常培养液比较具有显著性差异。而加入黄芪注射液后,则表现为对抗高糖或AGEs对GMC的增殖作用,并能提高Na⁺-K⁺-ATP酶活性。[结论]黄芪注射液能抑制高糖或AGEs对GMC的过度增殖,修复高糖或AGEs致GMC的Na⁺-K⁺-ATP酶活性降低,起到保护细胞的作用。     

内皮损伤引起血小板沉积测定方法的建立与应用

目的：研究建立血小板沉积模型的方法。方法：采用⁹⁹锝体外血小板标记与光化学血管内膜损伤法建立模型,通过血小板沉积数测定研究模型的应用性。结果：实验结果表明,⁹⁹锝体外血小板标记率受标记时间影响,最佳时间为30 min;洗涤2次可将未标记同位素基本分离掉;血小板沉积数表示法较直接CPM计数法优越;阳性对照欣维宁可减少血小板在内膜损伤动脉血管壁上的沉积。结论：通过⁹⁹锝体外血小板标记与光化学血管内膜损伤建立的血小板沉积方法,科学、可靠,有一定实用性。     

黄芪甲苷衍生物ASId治疗慢性心力衰竭的机制研究

目的 探讨黄芪甲苷衍生物ASId治疗慢性心力衰竭的作用机制。方法 大鼠、犬提取心肌细胞膜检测酶活性;大鼠结扎冠脉引起心肌梗死后取左心室,利用免疫组织化学检测心肌肥厚信号转导通路的钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）表达情况。结果 ASId对大鼠和犬心肌细胞膜Na⁺/K⁺-ATPase均有抑制作用,其IC⁵⁰分别为（1.58±0.27）×10^?6和（1.41±0.16）×10^?7 mol/L,在受试剂量下（10^?8～10^?5 mol/L）对Ca²⁺/Mg²⁺-ATPase活性无明显抑制作用;免疫组化研究表明,ASId 0.5、1.0 mg/kg可显著降低CaN表达,与模型对照组比较,其表达分别下降73.1%（P＜0.01）、78.0%（P＜0.001）,提示ASId抗心肌肥厚机制与抑制心肌肥厚信号转导通路的重要关键因子CaN有关。结论 ASId治疗心衰机制与Na⁺/K⁺-ATPase抑制产生的即刻心肌收缩效应,以及抗心肌肥厚的远期效应有关。     

14C尿素呼气试验固体闪烁法检测幽门螺杆菌感染的安全性及有效性

目的 评价¹⁴C尿素呼气试验（¹⁴C-UBT）新型固体闪烁方法检测幽门螺杆菌（HP）感染的安全性和有效性。方法 连续纳入2017年11月1~31日因上消化道症状就诊安徽医科大学第一附属医院和安徽医科大学第二附属医院内镜中心的门诊患者100例,对每位患者先后采用¹⁴C-UBT液体闪烁检测方法和YH10型固体闪烁法检测HP,以¹⁴C-UBT液闪检测的结果为金标准,观察比较YH10型固体闪烁法检测HP感染的安全性及诊断符合率。结果 ①在采用YH10型固体闪烁采样瓶对患者进行HP检测的过程中,均未发生机械、化学、电击、火灾等伤害,没有闪烁液倒吸入口和泼洒的风险。②YH10型固体闪烁采样瓶临床样本以100每分钟衰变率为判断分界值,固闪样本诊断HP为阳性的病例数为59例,液闪样本诊断HP为阳性的病例数为59例,两种检测方法检测HP感染阳性的符合率为100%。结论 与¹⁴C-UBT液闪检测法相比,新型¹⁴C-UBT固体闪烁法检测HP感染,安全有效,值得临床推广应用。     

旋覆代赭汤及其拆方对RE大鼠血浆Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响

[目的] 探讨反流性食管炎(RE)食管黏膜血浆细胞能量代谢与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。[方法] 将120只Wistar大鼠按照随机数字法随机分为10组,每组12只,即正常组、模型组、旋覆代赭汤全方组(全方组)、苦降组、甘升组、升降相因组、去苦降组、去甘升组、去升降相因组和西药组;除正常组外,其余9组行"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"造模。治疗14 d后,即造模后第22天处死,检测各组大鼠血浆Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性。[结果] 实验后各模型组大鼠ATP酶活性低于正常组;全方组、西药组酶活性较好,与正常组差异无统计学意义(P>0.05),与模型组相比有统计学差异(P<0.05);苦降组及去甘升组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),与全方组及西药组比较差异有统计学意义(P<0.05);正常组与其他各组比较,均有统计学差异(P<0.05);西药组与全方组比较,差异无统计学意义。[结论] 旋覆代赭汤全方组能提高模型大鼠血浆Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性,改善模型大鼠食管黏膜组织形态学病变,且作用优于各拆方组。     

维胃方对胃溃疡大鼠胃黏膜MPO、H+-K+-ATP酶活性的影响

[目的]观察维胃方对胃溃疡大鼠胃黏膜髓过氧化物酶(MPO)和H⁺-K⁺-ATP酶的影响,探讨维胃方治疗胃黏膜损伤的可能机制。[方法]采用乙酸烧灼法,建立胃溃疡模型,用比色法测定胃黏膜MPO和H⁺-K⁺-ATP酶活性,并观察胃黏膜组织病理学变化。[结果]从胃黏膜大体标本、切片观察,维胃方中剂量组疗效最佳。与自愈组和模型组比较,维胃方各组胃黏膜MPO活性显著降低(P<0.01或P<0.05),其中以维胃方中剂量组值最小。维胃方各剂量组的H⁺-K⁺-ATP酶活性均高于自愈组(P<0.01或P<0.05),接近正常组(P>0.05),表明维胃方能恢复其活性。[结论]维胃方对大鼠实验性胃溃疡具有明显的保护作用,其机制可能是通过降低大鼠胃黏膜MPO活性,进而减轻炎症介质对胃黏膜的损伤。同时其能修复已损伤的胃黏膜,故能恢复H⁺-K⁺-ATP酶活性。     

中高危甲状腺乳头状癌患者术后临床特征与131Ι治疗临床转归的影响因素分析

目的 探讨中高危甲状腺乳头状癌患者的术后临床特征与¹³¹Ι治疗后临床转归的影响因素。方法 选择2017年5月至2019年10月在中国科学技术大学附属第一医院行¹³¹Ι清甲治疗的104例甲状腺乳头状癌患者，回顾性分析其术后临床相关资料。¹³¹Ι治疗后8~12个月进行二次¹³¹Ι治疗或诊断性碘扫，结合甲状腺球蛋白和其他影像学检查为疗效评价依据，对数据进行统计学分析，结果分为满意、可接受及欠佳。对患者临床特征进行单因素分析和多因素logistic回归分析。结果 单因素分析结果显示原发肿瘤直径（>2 cm、1~2 cm、<1 cm）、病灶数目（单发、多发）、甲状腺癌合并症（慢性淋巴细胞性甲状腺炎、结节性甲状腺肿、其他、无）及颈部淋巴结转移数目（<5个、5~10个、≥ 11个）差异有统计学意义（P<0.05）。多因素分析显示，原发肿瘤直径（原发肿瘤直径<1cm）和颈部淋巴结转移数目（颈部淋巴结转移数目<5个、颈部淋巴结转移数目5~10个）是甲状腺癌¹³¹I治疗后临床转归的影响因素。结论 原发肿瘤直径（原发肿瘤直径<1 cm）和颈部淋巴结转移数目（颈部淋巴结转移数目<5个、颈部淋巴结转移数目5~10个）是甲状腺癌¹³¹I治疗后临床转归影响的独立因素，与临床转归的关系十分密切。     

CD19+ CD24high CD27+调节性B细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）在儿童传染性单核细胞增多症（IM）中的作用。方法 应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显降低（t=19.99,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显增高（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值降低（t=16.79,P<0.01）。IM恢复期组与急性期组比较,CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显增高（t=21.54,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显降低（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值增高（t=16.68,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义（t=14.61,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关（r=-0.52,P<0.01）。经治疗后IM恢复期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义（t=12.61,P<0.01）。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义（t=11.50,P<0.01）。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义（t=9.40,P<0.01）。结论 IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3⁺ CD8⁺ T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

放射性125I粒子植入治疗胸腺肿瘤胸膜复发的短期临床疗效

目的 探讨放射性¹²⁵I粒子植入治疗胸腺肿瘤复发患者的短期临床疗效。方法 收集2016年9月至2017年6月于复旦大学附属华东医院行放射性¹²⁵I粒子植入的胸腺肿瘤患者资料。纳入标准：局部胸膜复发病灶;不能耐受系统化学治疗,或既往化学治疗失败;先前接受过胸部高剂量放射治疗;凝血功能正常。术前行胸部计算机断层扫描（CT）、超声、正电子发射断层显像-计算机断层扫描（PET-CT）等检查,依据放射治疗计划系统（TPS）制定治疗计划,在CT或超声引导下于穿刺点进针,插植粒子针,间距一般为0.5 cm。观察2个月后治疗病灶的临床疗效和不良反应,并随访3~9个月。结果 全组共13例患者行放射性¹²⁵I粒子植入术,男7例、女6例,年龄30~78岁。植入粒子数中位数为30粒,范围为20~58粒;总剂量中位数为1.9×10⁷ Bq,范围为（1.5~2.6）×10⁷ Bq。随访2个月后发现客观缓解率达到100%（7例完全缓解,6例部分缓解）,伴有胸壁疼痛的4例患者症状均得到缓解。1例患者在粒子植入过程中发生气胸。在3~9个月的随访过程中,没有患者出现粒子植入部位的疾病进展。结论 放射性¹²⁵I粒子植入治疗胸腺肿瘤患者胸膜复发安全、有效,可作为传统放射治疗和化学治疗失败后的挽救性治疗,但其长期疗效有待进一步观察。     

细菌显像剂18F-FDS的合成及动物显像应用研究

目的 探讨细菌显像剂2-脱氧-2-氟山梨醇(2-deoxy-2-[18F]-fluorosorbitol, ¹⁸F-FDS)的合成过程、正常小鼠显像并计算内照射剂量,比较小鼠模型中大肠杆菌感染病灶及肿瘤病灶对FDS的摄取情况。方法 ¹⁸F-FDS由氟多功能模块经"一锅法"由PET常用显像剂2-氟-2脱氧葡萄糖(18F-fluorodeoxyglucose, ¹⁸F-FDG)经NaBH₄还原制备;实验组感染小鼠及荷瘤鼠尾静脉注射¹⁸F-FDS后60min进行microPET显像,通过Inveron Research软件测量病灶靶/本底比值;对照组注射¹⁸F-FDG,同样方法测量病灶靶/本底比值进行对照分析。结果 ¹⁸F-FDS放化收率为80%±5%(n=8,未进行时间衰减校正),合成时间25min,放化纯度>99%。正常小鼠尾静脉注射¹⁸F-FDS后microPET显像提示示踪剂从泌尿系统排泄;背景组织肺及脑内的非特异性放射性摄取较低;大肠杆菌感染小鼠microPET显像,感染灶有较高的感染灶/肌肉比值,荷瘤鼠显像示¹⁸F-FDS肿瘤组织靶/本底比值明显低于¹⁸F-FDG。结论 ¹⁸F-FDS放化合成方法操作简单,收率高,细菌感染灶有特异性摄取,在分辨感染和肿瘤上具有应用前景。     

The non-invasive 13C-methionine breath test detects hepatic mitochondrial dysfunction as a marker of disease activity in non-alcoholic steatohepatitis

Introduction

Mitochondrial dysfunction plays a central role in the general pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), increasing the risk of developing steatosis and subsequent hepatocellular inflammation. We aimed to assess hepatic mitochondrial function by a non-invasive ¹³C-methionine breath test (MeBT) in patients with histologically proven NAFLD.

Methods

118 NAFLD-patients and 18 healthy controls were examined by MeBT. Liver biopsy specimens were evaluated according to the NASH scoring system.

Results

Higher grades of NASH activity and fibrosis were independently associated with a significant decrease in cumulative ¹³C-exhalation (expressed as cPDR(%)). cPDR_1.5h was markedly declined in patients with NASH and NASH cirrhosis compared to patients with simple steatosis or borderline diagnosis (cPDR1.5h: 3.24 ± 1.12% and 1.32 ± 0.94% vs. 6.36 ± 0.56% and 4.80 ± 0.88% respectively; p < 0.001). ¹³C-exhalation further declined in the presence of advanced fibrosis which was correlated with NASH activity (r = 0.36). The area under the ROC curve (AUROC) for NASH diagnosis was estimated to be 0.87 in the total cohort and 0.83 in patients with no or mild fibrosis (F0-1).

Conclusion

The ¹³C-methionine breath test indicates mitochondrial dysfunction in non-alcoholic fatty liver disease and predicts higher stages of disease activity. It may, therefore, be a valuable diagnostic addition for longitudinal monitoring of hepatic (mitochondrial) function in non-alcoholic fatty liver disease.     

Interpretation of non-invasive breath tests using 13C-labeled substrates - a preliminary report with 13C-methacetin

Non-invasive breath tests can serve as valuable diagnostic tools in medicine as they can determine particular enzymatic and metabolic functions in vivo. However, methodological pitfalls have limited the actual clinical application of those tests till today. A major challenge of non-invasive breath tests has remained the provision of individually reliable test results. To overcome these limitations, a better understanding of breath kinetics during non-invasive breaths tests is essential. This analysis compares the breath recovery of a ¹³C-methacetin breath test with the actual serum kinetics of the substrate. It is shown, that breath and serum kinetics of the same test are significantly different over a period of 60 minutes. The recovery of the tracer ¹³CO₂ in breath seems to be significantly delayed due to intermediate storage in the bicarbonate pool. This has to be taken into account for the application of non-invasive breath test protocols. Otherwise, breath tests might display bicarbonate kinetics despite the metabolic capacity of the particular target enzyme.     

国产~（13）C-辛酸呼气试验评估小鼠胃排空的实验研究

目的通过建立国产13C-辛酸呼气试验胃排空检测系统,评估糖尿病小鼠胃排空异常以及胃动力药物对胃动力功能的影响。方法 13C-辛酸采用格利雅方法合成标记。四氧嘧啶尾静脉注射制作糖尿病小鼠模型。多时间点（0、5、10、15、20、25、30、45、60、75、90、105、120min）采集小鼠13C-辛酸灌胃后呼出的气样,红外线同位素能谱仪测定气样并获得参数13CO2峰值（Cmax）与半排空时间（T1/2）。分析13C-辛酸剂量对胃排空参数的影响及试验的可重复性,评估胃动力药物对糖尿病小鼠胃排空的干预作用,以及13C-辛酸的异常毒性作用。结果 13C-辛酸剂量与Cmax呈正相关（r=0.954,P〈0.05）,但对T1/2无显著影响。重复呼气试验的T1/2变异系数为（4.76±1.43）%。正常对照组和糖尿病组小鼠的T1/2分别为（28.2±6.8）min和（28.1±4.8）min,差异无统计学意义（P〉0.05）;格瑞林使糖尿病小鼠T1/2显著缩短为（19.6±4.9）min（P〈0.05）,而硫酸阿托品则使T1/2明显延长至（40.7±7.0）min（P〈0.05）。13C-辛酸异常毒性试验未见明显毒副反应。结论该研究所建立的小鼠13C-辛酸呼气试验胃排空检测系统具有非侵入性及良好的可重复性,能够有效检测胃排空异常和胃动力药物对胃排空的影响。     

国产13C-辛酸呼气试验评估小鼠胃排空的实验研究

目的 通过建立国产13C-辛酸呼气试验胃排空检测系统,评估糖尿病小鼠胃排空异常以及胃动力药物对胃动力功能的影响。方法 13C-辛酸采用格利雅方法合成标记。四氧嘧啶尾静脉注射制作糖尿病小鼠模型。多时间点（0、5、10、15、20、25、30、45、60、75、90、105、120 min）采集小鼠13C-辛酸灌胃后呼出的气样,红外线同位素能谱仪测定气样并获得参数13CO2峰值（Cmax）与半排空时间（T1/2）。分析13C-辛酸剂量对胃排空参数的影响及试验的可重复性,评估胃动力药物对糖尿病小鼠胃排空的干预作用,以及13C-辛酸的异常毒性作用。结果 13C-辛酸剂量与Cmax呈正相关（r= 0.954,P<0.05）,但对T1/2无显著影响。重复呼气试验的T1/2变异系数为（4.76±1.43）%。正常对照组和糖尿病组小鼠的T1/2分别为（28.2±6.8）min和（28.1±4.8）min,差异无统计学意义（P>0.05）;格瑞林使糖尿病小鼠T1/2显著缩短为（19.6±4.9）min（P<0.05）,而硫酸阿托品则使T1/2明显延长至（40.7±7.0）min（P<0.05）。13C-辛酸异常毒性试验未见明显毒副反应。结论 该研究所建立的小鼠13C-辛酸呼气试验胃排空检测系统具有非侵入性及良好的可重复性,能够有效检测胃排空异常和胃动力药物对胃排空的影响。     

Shkbp1缺失对小鼠T淋巴细胞系亚群的影响

目的探讨Shkbp1缺失小鼠(Shkbp-1~(-/-))的血液、骨髓、脾脏中血液细胞分类和T细胞亚群的变化。方法采用Shkbp-1~(-/-)转基因小鼠,经PCR鉴定基因型;利用全自动血液检测仪测定血液细胞分类;采用流式细胞仪检测Shkbp-1~(-/-)和对照组小鼠血液、骨髓、和脾脏中T淋巴细胞亚群。结果血常规结果:中性粒细胞和嗜酸性粒细胞有增高趋势,且有显著差异。淋巴细胞未见显著差异。流式结果显示:对照组血液中CD4~+CD8~+双阳性细胞降低,骨髓中CD3~+、CD4~+升高。但脾脏组织中,其CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+CD8~+双阳性细胞均呈下降趋势。结论 Shkbp1参与血液细胞的成熟分化,影响了免疫细胞数量,本研究为探索Shkbp1如何参与血液细胞的分化奠定了研究基础。     

奥硝唑对映体对小鼠中枢抑制作用研究

探讨左旋和右旋奥硝唑静脉注射(iv)对小鼠中枢神经系统抑制作用的机制,以及奥硝唑光学对映体之间神经毒性的差异,为临床用药提供指导。左旋及右旋奥硝唑(40,60,80 mg/kg,iv)给药30 min后,用转棒实验测定小鼠运动协调能力,以评价药物对小鼠中枢抑制作用的强弱。测定并比较对小鼠给药30 min后全脑Na⁺,K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响。右旋奥硝唑可使小鼠呈现中枢抑制状态,影响其运动协调能力,并呈剂量相关性地抑制脑内Na⁺,K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶、SDH活性。左旋奥硝唑组则均与对照组无显著性差异。右旋奥硝唑的中枢抑制作用可能与抑制脑内Na⁺,K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性,抑制呼吸链关键酶SDH有关。     

双哌嗪类化合物的合成及钙通道阻滞活性

为寻求活性更好、毒性更低的新结构类型钙通道阻滞剂,以氟桂利嗪为先导化合物,设计合成了一系列双哌嗪类新化合物,并经光谱证明其结构。初步药理实验结果表明,9个新化合物在⁴⁵Ca²⁺跨膜内流动药理实验中,对大鼠主动脉电压依赖型钙离子通道（PDC）均有钙阻滞活性,且部分化合物的活性强于阳性对照药硝苯吡啶。     

健脾清化方对阿霉素肾病大鼠免疫炎症损伤的作用机制

目的 从细胞免疫介导的炎症损伤角度,探讨健脾清化方对阿霉素致局灶节段硬化（focal segmental glomurular sclerosis,FSGS）模型大鼠FSGS的影响。方法 左侧肾切除加尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS,观察健脾清化方对模型大鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质纤维连接蛋白（FN）mRNA、Ⅲ型胶原（Col Ⅲ）mRNA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）6表达的影响。结果 健脾清化方能明显降低模型鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肾小管间质FN mRNA、Col Ⅲ mRNA、TNF-α、IL6水平。结论 健脾清化方对阿霉素肾病模型大鼠肾脏FSGS有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方抑制细胞免疫介导的炎症损伤有关。     

肺积方对Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的抑制作用

目的:观察肺积方对Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法:30只近交系C57BL/6纯系小鼠行Lewis肺癌细胞移植造模后随机分为模型组、肺积方组及环磷酰胺(CTX)化疗组,每组10只。模型组只行造模,肺积方组予每日0.4 ml(含生药0.8 g)灌胃给药;CTX组按15 mg/kg溶于0.2 ml生理盐水中腹腔注射,每周1次;各组均常规喂食。30 d后观察记录各组小鼠瘤体大小;观察期满后各组小鼠断颈处死,留取肿瘤组织进行CD4~+CD25~+Treg流式细胞检测。结果:CTX组及肺积方组肿瘤相对体积(RTV)均较模型组缩小(P0.05),肺积方组RTV低于CTX组(P0.05);各组相对肿瘤体积抑制率比较,肺积方组高于CTX组(P0.05);各组肿瘤组织中CD4~+CD25~+Treg比例比较,肺积方组及CTX组均较模型组降低(P0.05),CTX组与肺积方组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:肺积方有抑制Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的作用,其抑制作用可能与减少CD4~+CD25~+Treg细胞分化有关。