聚合酶链反应检测沙眼衣原体的临床应用

本文应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术对１０５例非淋菌性尿道炎患者进行沙眼衣原体检测，捡出阳性者１２例，阳性率１１．４％。我们认为ＰＣＲ法检测沙眼衣原体具有快速简便、高度敏感性和特异性等优点，值得临床推广应用。     

247例子宫肌瘤患者沙眼衣原体PCR检测报告

子宫肌瘤是女性生殖器官中最常见的一种良性肿瘤，其发生可能与雌激素长期刺激有关[1]，而与遗传无关[2]。我们自1995年2月至1995年10月．应用多聚酶链式反应（PCR）技术，随机对来我院诊治的247名子宫肌瘤患者，取宫颈分泌物，进行了沙眼衣原体（Chlamydiatrachomatis，CT）检测，现将结果报告如下。材料与方法一、材料：l·样品：随机选择1995年2月至1995年10月来我院诊治，患有子宫肌瘤的患者247名，年龄最大为53岁，最小为29岁，用棉扶子采取宫颈分泌物，置装有lml生理盐水的试管中，洗脱细胞及分泌物后，置4℃冰箱待检。2·CT引物…     

荧光定量聚合酶链反应检测精液中沙眼衣原体

用荧光定量聚合酶链法对126名男性不育患者和60名正常生育男性的精液进行了沙眼衣原体检测,男性不育组阳性率为19.8%,生育组阳性率为5.0%,两组比较有显著差异。     

荧光定量聚合酶链反应检测宫颈炎患者沙眼衣原体感染的临床应用

目的了解宫颈炎患者沙眼衣原体的感染状况。方法采用荧光定量聚合酶链反应技术,对426例宫颈炎患者沙眼衣原体的感染状况进行了检测。结果在上述426例宫颈炎患者中检测出沙眼衣原体阳性标本60例,阳性率为14.08%(60/426)。结论在宫颈炎患者中沙眼衣原体有较高的感染率。     

沙眼衣原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告沙眼衣原体（ＣＴ）的套式（Ｎｅｓｔｅｄ）ＰＣＲ检测方法，本方法ＣＴ隐匿性质粒为靶基因，外套引物采用国外学者所报告灵敏度和特异性较高的序列，内套引物自行设计，经方法学考核表明本法灵敏度和特异性极高。１４６例临检标本套式ＣＴ，ＰＣＲ阳性检出率为３６．３％而市售ＰＣＲ试剂盒（其引物序列与本文外套引物相同）阳性检出率仅为４．１％，前者明显高于后者（Ｐ〈０．０１）。     

PCR检测支原体和沙眼衣原体在产科中的应用

采用常规聚合酶链反应（ＰＣＲ） 和套式ＰＣＲ（ＮＰＣＲ） 技术检测妊娠２１ ～３１ 周１９０ 份孕妇子宫颈分泌物中人型支原体（ＭＨ） 、解脲支原体（ＵＵ）和沙眼衣原体（ＣＴ）ＤＮＡ， 结果表明各感染原ＤＮＡ总阳性率为３７－９％ （７２／１９０） ； 其中ＭＨ、ＵＵ与ＣＴ ＤＮＡ检出率各为６－３％ （１２／１９０）， ２５－３ ％ （４８／１９０ ）与６－３％ （１２／１９０） ； 在ＤＮＡ阳性组中， 支原体与衣原体阳性率分别为８３－３％ （６０／７２） 与１６－７％ （１２／７２ ）。结果提示， 对上述感染者给予及时足量与足程的抗支原体与抗衣原体治疗， 将有利于胎儿的健康生长与发育。     

孕早期沙眼衣原体宫内感染的检测

本研究利用ＰＣＲ技术和地高辛标记的ＤＮＡ探针对５９例早孕绒毛组织中沙眼衣原体染进行研究。结果发现２例绒毛组织有沙眼衣原体感染，并感染率为３．４％，研究证实沙眼衣原体可引起孕早基歼宫内感染，建议对沙眼衣原体感染的孕妇进行宫内感染的产前诊断。     

FQ—PCR检测盆腔炎患者沙眼衣原体感染120例临床分析

目的 为了解盆腔炎患者沙眼衣原体感染状况。方法 采用荧光定量聚合酶链反应技术，对120例盆腔炎患者沙眼衣原体感染状况进行了检测。结果 在上述120例盆腔炎患者中检测出沙眼衣原体阳性标本20例，阳性率为16．67％。结论 在盆腔炎患者中沙眼衣原体有较高的感染率。     

实时荧光定量PCR检测沙眼衣原体的研究

目的采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法。方法根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因（ompA）序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法。结果建立的荧光定量PCR检测方法的最低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100～107线性关系良好（r2=0.997）,比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%。结论建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选。     

焦作地区不孕妇女生殖道沙眼衣原体检测99例分析

目的：找出不孕症与衣原体感染的相关证据。方法：应用套式聚合酶链反应（PCR）技术对99例不孕妇女进行沙眼衣原体检测。不孕妇女衣原体感染率为27．27％。结果：衣原体感染是导致妇女不孕的一个重要原因,做好孕前普查和做好孕早期检查工作非常重要。     

荧光定量聚合酶链反应检测HBV-DNA的意义

目的　研究HBV DNA与HBV M、乙型肝炎临床类型的相关性 (意义 )。方法　用荧光定量聚合酶联反应 (FQ PCR)检测 10 5例乙型肝炎患者HBV DNA含量 ,分析其在乙型肝炎 5项指标(HBV M)中的检出率 ,在乙型肝炎不同类型中的分布。结果　HBV DNA与HBV M对比 ,HBsAg( )、HBeAg( )、HBcAb( )患者的检出率为 97% ,HBsAg( )、HBeAb( )、HBcAb( )患者的检出率为75 % ,HBsAg( )、HBcAb( )患者的检出率为 6 0 % ,HBsAg( )患者的检出率为 4 0 % ,HBsAb( )、HBeAb( )、HBcAb( )的 (或HBsAb阳性、HBcAb阳性 )病例未检测到HBV DNA。表明HBV DNA与HBV M的抗原呈正相关 ,组间差异有非常显著意义 (P <0 0 5 )。急性乙型肝炎血清HBV DNA检出率为 72 2 % ,慢性乙型肝炎检出率为 75 % ,肝硬化检出率为 70 %。血清HBV DNA与乙型肝炎不同临床类型差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　HBV DNA的复制状态与不同乙型肝炎临床类型无明显相关性。与乙型肝炎抗原呈正相关。     

Direct fluorescent antibody assay and polymerase chain reaction for the detection of Chlamydia trachomatis in patients with vernal keratoconjunctivitis

OBJECTIVES:

To identify Chlamydia trachomatis via polymerase chain reaction and a direct fluorescent antibody assay in patients with vernal keratoconjunctivitis while comparing the efficacies of both tests for detecting Chlamydia trachomatis in these conditions.

METHODS:

Conjunctival scraping samples were obtained from 177 patients who were divided into two groups: a vernal keratoconjunctivitis group (group A) and a control group (group B). The polymerase chain reaction and a direct fluorescent antibody assay were performed. Sensitivity, specificity, receiver operating characteristic curves, and areas under the curve were calculated for both tests in groups A and B. Receiver operating characteristic curves were plotted using a categorical variable with only two possible outcomes (positive and negative).

RESULTS:

Statistical analysis revealed a significant association between vernal keratoconjunctivitis and Chlamydia trachomatis infection detected by a direct fluorescent antibody assay with high sensitivity and specificity. All patients in group A with positive polymerase chain reactions also presented with positive direct fluorescent antibody assays.

CONCLUSION:

The association between vernal keratoconjunctivitis and Chlamydia trachomatis infection was confirmed by positive direct fluorescent antibody assays in 49.4% of vernal keratoconjunctivitis patients and by positive polymerase chain reactions in 20% of these patients. The direct fluorescent antibody assay detected Chlamydia trachomatis in a higher number of patients than did the polymerase chain reaction. Although the diagnosis of trachoma is essentially clinical, the disease may not be detected in vernal keratoconjunctivitis patients. Due to the high frequency of chlamydial infection detected in patients with vernal keratoconjunctivitis, we suggest considering routine laboratory tests to detect Chlamydia trachomatis in patients with severe and refractory allergic disease.     

聚合酶链反应检测丝虫病患者泌尿道沙眼衣原体及解脲支原体的研究

本文采用聚合酶链反应方法,检测了５０ 例丝虫病患者尿中沙眼衣原体（ＣＴ） 及解脲支原体（ＵＵ）ＤＮＡ,同时选择３０ 例正常人作为对照。结果显示,丝虫病患者尿中ＣＴＤＮＡ、ＵＵ ＤＮＡ 和两者混合感染检出率分别为３０ ％ 、２５ ％ 和２０ ％ ,高于正常对３６３％ （Ｐ＜０－０１）,ＣＴ及ＵＵ 感染与病人的病情、病程有一定的关联。提示乳糜尿的发生、发展与泌尿道ＣＴ 和ＵＵ感染有关。     

反转录酶活性检测实时荧光定量PCR方法的建立

目的在传统产物增强性反转录酶（PERT）活性检测方法基础上建立检测反转录酶活性的实时荧光定量PCR方法。方法以噬菌体MS2RNA为模板,设计、合成引物和探针,并分别以连续10倍倍比稀释的AMV反转录酶（1×10-1～1×10-9U/μl）标准品催化体外反转录反应合成相应cDNA。采用实时荧光定量PCR法检测底物cDNA模板量,并获得相应的PCR荧光值曲线,分析AMV反转录酶的相对活性。同时应用传统PERT方法对cDNA进行扩增,测定该方法的灵敏度。结果将AMV反转录酶标准品连续10倍倍比稀释后催化反转录反应,实时荧光定量PCR分析所得的反转录产物cDNA,结果得到与理论值完全相符合的PCR标准荧光值曲线;定量分析结果显示,浓度为1×10-2～1×10-8U/μl的AMV反转录酶均可得到相应的荧光值。不同稀释度的AMV反转录酶,经传统PERT方法扩增后,结果显示浓度为1×10-3～1×10-7U/μl的AMV反转录酶均可见大小为112bp的阳性条带,检测灵敏度达到1×10-7U/μl。结论成功建立了基于实时荧光定量PCR技术的检测反转录酶活性的新方法,实验操作简单,具有高精确性和无污染性,为生物制品外来污染尤其是反转录病毒污染的检测提供了参考指标。     

PCR检测沙眼衣原体与习惯性流产和女性不孕相关性研究

本文应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ），对１２０例不孕和１００例查体妇女的宫颈内膜标本进行沙眼衣原体检测，以了解女性沙眼衣原体感染与自发流产的关系，并与一般细胞培养法进行了比较。结果：不孕妇女中沙眼衣原体感染率为１８．３％，显著高于对照组（８％Ｐ＜０．０５），并且自发流产３次、４次的妇女沙眼衣原体阳性率明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）．敏感性也较一般培养法高（Ｐ＜０．０１）。本研究提示：沙眼衣原体感染与自发性习惯性流产关系十分密切，而且ＰＣＲ法在检测沙眼衣原体感染方面较一般培养法更敏感、快速，是早期诊断生殖道沙眼衣原体感染的一项有价值的方法。