microRNA在慢性乙型肝炎肝纤维化中的诊断价值

寻找能够准确识别慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化的血清标志物十分重要。归纳了在CHB肝纤维化过程中存在表达差异的microRNA(miRNA),分析表明随着肝纤维化发展,血清miR-33a、miR-185、miR-222等表达量升高,而血清miR-122、miR-29、miR-27b等表达量下降。发现血清miR-185、miR-122等miRNA单独或联合其他指标在诊断CHB肝纤维化中已具有一定的临床应用价值。认为应进一步加大对存在差异表达的具有诊断CHB肝纤维化价值的血清miRNA的研究。     

慢性乙型肝炎患者血清miR-21和miR-148b水平变化及其预测肝组织炎症分级和纤维化分期价值探讨*

目的 探讨应用血清miR-21和miR-148b水平预测慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织病理学病变的价值。方法 2016年7月～2021年6月我院诊治的CHB患者134例,行快速肝穿刺活检,评估肝组织炎症活动度分级(G)和肝纤维化分期(S)。采用实时定量逆转录PCR法检测血清miR-21和miR-148b水平。应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估血清miR-21和miR-148b水平评估CHB患者肝组织炎症分级和纤维化分期的效能。结果 经肝组织检查,在134例CHB患者中,发现肝组织炎症活动度分级包括G1级23例、G2级39例、G3级47例和G4级25例,肝纤维化分期包括S1期31例、S2期46例、S3期28例和S4期29例;G1级、G2级、G3级和G4级血清miR-21水平分别为(1.1±0.2)、(1.5±0.3)、(1.8±0.4)和(2.2±0.6),血清miR-148b水平分别为(2.4±0.5)、(2.0±0.3)、(1.6±0.5)和(1.2±0.4),组间差异有统计学意义(P＜0.05);S1期、S2期、S3期和S4期血清miR-21水平分别为(0.9±0.4)、(1.4±0.3)、(1.9±0.5)和(2.7±0.5),血清miR-148b水平分别为(2.8±0.7)、(1.9±0.4)、(1.4±0.4)和(0.9±0.2),组间差异有统计学意义(P＜0.05);分别以血清miR-21=1.5和miR-148b=2.0为截断点,其联合评估肝组织炎症分级大于或等于G2的AUC为0.875,显著高于两项指标单独评估(分别为0.769和0.781,P＜0.05),其灵敏度、特异度和准确度分别为87.0%、82.9%和83.6%;分别以血清miR-21=1.4和miR-148b=1.9为截断点,其联合评估肝纤维化分期大于或等于S2的AUC为0.898,显著高于两项指标单独评估(分别为0.782和0.770,P＜0.05),其灵敏度、特异度和准确度分别为87.1%、73.8%和76.9%。结论 利用CHB患者血清miR-21高水平和miR-148b低水平的特点可以用于评估肝组织炎症分级和肝纤维化分期,值得深入研究。     

YKL-40、PCPE-1对慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度的评估价值

目的探究慢性乙型肝炎患者患者血清中YKL-40、PCPE-1水平及在肝纤维化程度评价中的价值。方法选择2015年1月至2018年2月在我院就诊的232例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,最终将符合条件的136例慢性乙型肝炎患者纳入本次研究。选择同期健康体检的人员36例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附法检测受试者血清中YKL-40、PCPE-1水平,探究其与肝纤维化程度评分的关系及诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的价值。结果慢性乙型肝炎组患者血清中YKL-40、PCPE-1水平分别为(31.6±3.6) ng/mL和5.9(2.5,9.1) pg/mL,健康对照组受试者血清中YKL-40、PCPE-1水平分别为(7.1±0.5) ng/mL和42.0(21.4,62.8) pg/mL。两组受试者血清YKL-40、PCPE-1比较,差异均有统计学意义(P0.001)。YKL-40在慢性乙型肝炎病理分期S0、S1、S2、S3和S4患者中的表达水平分别为(27.7±2.3) ng/mL、(30.7±1.9) ng/mL、(31.6±3.0) ng/mL、(34.8±2.1) ng/mL和(36.2±1.9) ng/mL;PCPE-1在慢性乙型肝炎病理分期S0、S1、S2、S3和S4患者中的表达水平分别为(11.5±2.7) pg/mL、(7.0±2.1) pg/mL、(3.9±2.7) pg/mL、(2.8±1.9) pg/mL和(1.5±1.3) pg/mL。五组患者血清YKL-40、PCPE-1水平比较,差异均有统计学意义(P0.001)。随肝纤维化程度加深,慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平升高,PCPE-1水平降低。慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平与肝纤维化程度评分呈正相关(P0.05),血清PCPE-1水平与肝纤维化程度评分呈负相关(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1诊断慢性乙型肝炎患者显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能均较高,两者诊断效能比较,差异均不具统计学差异(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测和FIB-4诊断显著纤维化的效能比较,差异不具统计学意义(P0.05);但二者诊断显著纤维化的效能均高于APRI,差异均有统计学意义(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测诊断进展期纤维化的效能高于APRI、FIB-4,差异有统计学意义(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断早期肝硬化的效能比较,差异均不具统计学意义(P0.05)。结论 YKL-40、PCPE-1是慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度判断的有效生物标志物,其诊断肝纤维化的效能优于APRI和FIB-4。     

血清HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者APRI、FIB-4和血清TGF-β1水平变化*

目的 调查血清HBeAg阴性的慢性乙型肝炎(CHB)患者天门冬氨酸氨基转移酶与血小板比值(APRI)、基于4因子指数(FIB-4)和血清转化生长因子-β1(TGF-β1)的变化。方法 2018年1月～2019年5月我院诊治的血清HBeAg阴性的CHB患者78例和同期健康人78例,采用ELISA法测定血清TGF-β1水平,常规检测血生化指标,计算APRI和FIB-4评分。CHB患者接受肝活检,并行肝纤维化分期。结果 CHB患者APRI评分为(0.9±0.4),显著高于健康人【(0.3±0.1),P<0.05】;FIB-4评分为(1.4±0.4),显著高于健康人【(0.5±0.2),P<0.05】,血清TGF-β1水平为(14.5±5.3)ng/ml,显著高于健康人【(7.4±3.5)ng/ml,P<0.05】;33例CHB患者肝组织F0～1者APRI评分为(0.5±0.2),显著低于24例肝组织F2者【(1.0±0.3),P<0.05】,显著低于12例肝组织F3者【(1.3±0.5),P<0.05】,也显著低于9例肝组织F4者【(1.8±1.6),P<0.05】;F0～1患者FIB-4评分为(0.9±0.3),显著低于F2患者【(1.5±0.4),P<0.05】,显著低于F3患者【(1.9±0.4),P<0.05】,也显著低于F4患者【(3.2±0.6),P<0.05】;F0～1患者血清TGF-β1水平为(9.7±3.6)ng/ml,显著低于F2患者【(10.5±4.4)ng/ml,P<0.05】,显著低于F3患者【(15.8±5.9)ng/ml,P<0.05】,也显著低于F4患者【(19.5±6.2)ng/ml,P<0.05】。结论 血清HBeAg阴性的CHB患者APRI、FIB-4和血清TGF-β1水平发生了显著的变化,随着肝纤维化程度的加重,这些指标变化更明显,可能有助于提高对肝纤维化的诊断。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制因子基因的表达

目的 比较外周血单个核细胞(PBMC)及自身血清中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达水平,探讨MMP-1及TIMP-1基因表达对肝纤维化的诊断价值.方法 实时荧光定量反转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法分别检测37例慢性乙型肝炎患者及20例健康对照者PBMC中MMP-1及TIMP-1 mRNA的表达水平,双抗体央心酶联免疫吸附方法检测血清MMP-1及TIMI-1水平;慢性乙型肝炎患者均行肝组织穿刺活检,行纤维化程度分期(S).组间比较采用多个独立样本非参数检验,并作Spearman相关性分析.结果 健康对照组PBMC中MMP-1 mRNA及TIMP-1 mRNA呈低水平表达,慢性乙型肝炎患者PBMC中MMP-1mRNA表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义,而TIMP-1 mRNA表达水平显著高于健康对照组的(0.48±0.80)lg拷贝/μL,血清TIMP-1也高于健康对照组的(158.29±58.58)μg/L.随着慢性乙型肝炎肝纤维化程度加重,各期之间MMP-1 mRNA的表达水平及血清MMP-1水平比较差异无统计学意义(χ~2=8.960,P=0.111;χ~2=7.898,P=0.211);从S1～S4,TIMP-1 mRNA表达水平依次为(1.67±0.84)、(3.48±2.08)、(5.86±3.47)及(8.14±6.48)lg拷贝/μL,血清TIMP-1水平依次为(233.73±64.84)、(262.10μ71.12)、(301.15μ62.74)及(381.15±152.75)μg/L,各期之间TIMP-1mRNA表达水平及血清TIMP-1水平比较差异均有统计学意义(χ~2=14.290,P=0.002;χ~2=12.209,P=0.007).PBMC中TIMI-1 mRNA、血清TIMP-1与肝纤维化呈正相关(r=0.752.P<0.01;r=0.530,P=0.008).结论 PBMC中TIMP-1 mRNA表达水平及血清TIMP-1水平与肝脏纤维化程度密切相关.PBMC中TIMP-1 mRNA及血清TIMP-1可以作为诊断肝纤维化的新指标,尤其PBMC中TIMP-1 mRNA诊断价值最大.     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中miR-155和细胞因子信号转导抑制分子1相对表达量与肝功能损伤程度的相关性

目的分析慢性乙型肝炎(chronic hepatitis C,CHB)患者外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclearcells,PBMC)中miR-155和细胞因子信号转导抑制分子1(suppressorofcytokine signaling1,SOCS1)的表达水平,并探讨其与肝功能损伤程度的相关性。方法连续纳入2016年3月至2018年6月于南京中医药大学附属南京医院就诊的95例CHB患者为研究对象(CHB组),根据患者肝组织病理学检查结果分为轻度CHB组(31例)、中度CHB组(38例)和重度CHB组(26例)。另选取同期健康体检者50例作为对照组。采用RT-PCR检测受试者外周血PBMC中miR-155和SOCS1 mRNA相对表达量,ELISA法检测CHB患者血清肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和总胆红素(total bilirubin,TBil)],分析外周血miR-155和SOCS1mRNA相对表达量与CHB严重程度及肝功能指标的相关性。结果 CHB组患者miR-155相对表达量(0.64±0.15)显著低于对照组(0.86±0.27),SOCS1 mRNA相对表达量(1.25±0.37)显著高于对照组(0.69±0.18),差异均有统计学意义(t=6.314,P 0.001;t=10.081,P 0.001)。重度CHB组miR-155相对表达量为0.52±0.13,显著低于中度CHB组(0.65±0.16)和轻度CHB组(0.73±0.20);SOCS1 mRNA相对表达量为1.50±0.25,显著高于中度CHB组(1.21±0.33)和轻度CHB组(1.09±0.31),差异均有统计学意义(P均0.05)。CHB患者mi R-155和SOCS1 mRNA表达水平呈显著负相关(r=-0.695,P 0.01)。重度CHB组血清ALT、AST、TBil水平分别为(95.97±11.98)U/L、(75.93±10.27)U/L、(22.21±4.09)μmol/L,均显著高于轻度CHB组[(79.73±10.86)U/L、(61.57±9.16)U/L、(18.06±3.14)μmol/L]和中度CHB组[(86.05±12.14)、(66.66±9.38)U/L、(19.73±3.52)μmol/L],差异有统计学意义(P均0.05),中度CHB组血清ALT、AST、TBil水平与轻度CHB组相比,差异无统计学意义(P均 0.05)。CHB患者mi R-155相对表达水平与ALT、AST、TBil水平呈负相关(r=-0.457、-0.531、-0.389,P均0.05),SOCS1 mRNA与ALT、AST、TBil水平呈正相关(r=0.419、0.520、0.371,P均0.05)。结论 CHB患者PBMC中mi R-155和SOCS1 mRNA的异常表达与肝功能损伤程度密切相关。     

血浆miR-30a、miR-29c联合FIB-4、APRI评分对慢性乙型肝炎肝纤维化及早期肝硬化的预测价值

目的 探讨血浆miR-30a、miR-29c联合FIB-4、APRI评分对慢性乙型肝炎患者不同程度肝纤维化及早期肝硬化的预测价值。方法 收集2019年12月1日至2021年12月31日河北省人民医院收治的慢性乙型肝炎患者，根据瞬时弹性成像(transient elastorgraphy, TE)结果选取轻中度(F₀～F₂)、重度肝纤维化(F₃)及早期肝硬化(F₄)各40例，健康志愿者40名作为对照组。收集一般临床资料，检测血浆miR-30a、miR-29c在各组中的表达量，计算FIB-4、APRI评分。经Logistic多因素回归分析建立联合模型。用ROC曲线分析其对早期肝硬化的预测价值。结果 血浆miR-30a、miR-29c表达和FIB-4、APRI评分对慢性乙型肝炎患者不同程度肝纤维化及早期肝硬化有一定的预测价值。将四者纳入Logistic多因素回归分析，提示miR-29c表达和FIB-4、APRI评分是预测早期肝硬化发生的独立影响因素，建立早期肝硬化的联合预测模型Y=2.717×FIB-4+...     

强肝丸对肝纤维化患者血清TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响

目的观察强肝丸对肝纤维化患者血清TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响,并探讨其抗肝纤维化的分子机制。方法纳入2016年8月至2018年6月就诊于空军军医大学唐都医院传染病科的慢性乙型肝炎合并肝纤维化的患者228例,随机分为强肝丸组(A组,n=114)和对照组(B组,n=114),两组患者抗病毒治疗不改变,A组同时服用强肝丸。入组时及6个月后分别采取外周血5 ml用于TIMP-1、TIMP-2检测。结果治疗前A组、B组患者血清TIMP-1、TIMP-2的表达水平分别为(428±180)ng/ml、(429±168)ng/ml,(132±48)ng/ml、(136±43)ng/ml,两组间比较差异无统计学意义(P0.05);治疗6个月后下降为(351±157)ng/ml、(402±173)ng/ml,(112±37.2)ng/ml、(129±44)ng/ml;治疗后两组间TIMP-1、TIMP-2比较,差异有统计学意义,治疗前后相比,A组TIMP-1、TIMP-2差异有统计学意义(P0.05),而B组的TIMP-1、TIMP-2差异无统计学意义(P0.05)。结论强肝丸可显著降低肝纤维化患者血清TIMP-1、TIMP-2水平,该效应与其抗肝纤维化的分子机制相关,且具有减轻肝脏炎症的作用。     

慢性乙型肝炎患者血清MMP-2和TIMP-2水平及超声检查指标评估肝纤维化分期意义探讨

目的探讨超声检查门静脉指标及血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)变化在慢性乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化分期中的诊断价值。方法 2014年5月～2018年5月我院收治的CHB患者43例和同期健康体检者40例,使用超声B超检查测定门静脉宽度、脾静脉宽度和脾脏厚度,采用ELISA法检测血清MMP-2和TIMP-2水平,采用微孔板单光子计数仪检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(IV-C)和III前胶原氨基端肽(P III P)水平。常规行肝穿刺活检。结果肝穿组织病理学检查提示,S0～S1患者13例,S2患者11例,S3患者14例和S4患者5例;自S2期到S4期,随着肝纤维化程度的不断加重,患者门静脉宽度、脾静脉宽度和脾脏厚度不断增大,差异具有统计学意义(P0.05);S0～1、S2、S3和S4期患者血清MMP-2水平分别为(291.5±35.3) mg/L、(357.7±32.5) mg/L、(446.8±47.1) mg/L和(595.3±85.4) mg/L,血清TIMP-2水平分别为(154.3±28.6) mg/L、(210.7±24.1) mg/L、(255.7±31.9) mg/L和(302.5±74.3) mg/L,均显著高于健康人[分别为(246.5±32.1) mg/L和(126.5±20.1) mg/L,P0.05];存在显著肝纤维化的CHB患者血清HA、LN、IV-C和P III P水平显著高于健康人(P0.05),且随着肝纤维化加重而逐渐升高。结论超声检测门静脉指标联合血清指标检测将有助于对CHB患者肝纤维化程度的判断,对诊断和治疗疗效的判断可能具有指导意义。     

IL-33在诊断慢性乙型肝炎肝纤维化中的应用评价

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清IL-33水平与肝纤维化的关系。方法:收集2017年1月至2019年6月于新乡医学院第一附属医院感染科住院的98例CHB患者和35例健康体检者作为研究对象,CHB患者均行B超检查和肝脏穿刺评估肝纤维化严重程度,肝脏生化及血常规指标均由我院检验科检测并计算FIB-4和S指数,血清IL-33水平采用ELISA试剂盒检测。分析IL-33与CHB患者肝纤维化严重程度的相关性及其诊断效能。结果:CHB患者血清IL-33水平同健康对照者相比显著升高(t=43.67,P<0.000),且随CHB患者肝纤维化程度的加重而升高(F=63.547,P<0.000);CHB患者血清中IL-33表达水平与PCⅢ(r=0.214,P=0.001)、Ⅳ-C(r=0.336,P=0.001)、HA(r=0.320,P=0.002)、LN(r=0.214,P=0.001)、B超评分(r=0.538,P<0.000)、FIB-4(r=0.614,P<0.000)和S指数(r=0.629,P<0.000)均呈显著正相关性。ROC结果显示,血清IL-33、FIB-4、S指数及B超评分诊断CHB患者发生肝纤维化的AUC分别为0.951(95%CI:0.905~0.996)、0.893(95%CI:0.830~0.955)、0.889(95%CI:0.826~0.951)和0.744(95%CI:0.641~0.847),与FIB-4、S指数和B超评分相比,血清IL-33诊断CHB患者发生肝纤维化的AUC较高,差异均有统计学意义(Z=24.03,Z=24.86,Z=40.21,P<0.05)。当IL-33截断值为563.52 pg/ml时,敏感度和特异度分别为92.14%和96.33%。结论:IL-33能准确评估CHB患者发生肝纤维化的程度,IL-33可成为诊断CHB患者发生肝纤维化的一项血清学标志物。     

慢性乙型肝炎患者血清α1酸性糖蛋白、α1-抗胰蛋白酶和触珠蛋白变化及其临床意义探讨

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清α1酸性糖蛋白(AAG)、α1-抗胰蛋白酶(AAT)和触珠蛋白(HP)及其诊断肝纤维化分期的效能。方法 2017年10月～2019年10月我院收治的CHB患者196例,采用免疫比浊法检测血清AAG、AAT和HP水平,常规行肝穿刺活检,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评价血清AAG、AAT、HP及三者联合诊断肝纤维化的效能。结果 在本组196例CHB患者中,肝纤维化分期S0者18例(9.2%),S1者为38例(19.4%),>S2(显著性肝纤维化)者140例(71.4%);显著性肝纤维化患者血清AAG和HP水平分别为(0.5±0.2)g/L和(0.4±0.1)g/L,显著低于S1期【分别为(0.7±0.2)g/L和(0.8±0.3)g/L,P<0.05】或S0期【分别为(1.0±0.3)g/L和(1.3±0.4)g/L,P<0.05】,而血清AAT水平为(59.7±7.2)μmol/L,显著高于S1期【(38.4±5.5)μmol/L,P<0.05】或S0期【(29.8±3.9)μmol/L,P<0.05】;ROC曲线分析显示,血清AAG、AAT和HP诊断显著性肝纤维化的截断点分别为0.6g/L、50.2μmol/L和0.5g/L,三者联合诊断的AUC为0.844(0.769～0.902),显著高于AAG、AAT或HP单项指标诊断的AUC【分别为0.645(0.555～0.727)、0.730(0.644～0.804)和0.773(0.685～0.839),P<0.05】,与基于4因子模型(FIB-4)或天门冬氨酸氨基转移酶/血小板指数(APRI)诊断的AUC比,差异无统计学意义【分别为0.789(0.725～0.870)和0.805(0.725～0.870),P>0.05】。结论 应用血清AAG、AAT和HP联合诊断CHB患者显著性肝纤维化显示出有意义的苗头,值得进一步深入探讨。     

湿热型慢性乙型肝炎患者血清TGF-β1及TIMP-1水平的研究

目的:探讨湿热型慢性乙型肝炎(CHB)患者血清TGF-β1、TIMP-1的水平。方法:选择HBeAg阳性CHB患者63例进行观察,其中,湿热型27例,非湿热型36例。同时,选择健康人16例为对照组。血清TGF-β1检测采用ELISA法、血清TIMP-1检测采用单克隆抗体透射比浊法。结果:63例CHB患者血清TGF-β1、TIMP-1水平分别为(98.22±23.52)μg/L、(122.67±26.06)μg/L,与对照组比较差异均有非常显著性意义(P<0.01)。湿热型CHB患者血清TGF-β1水平及TIMP-1水平均明显升高,与非湿热型患者相比差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:湿热型CHB患者血清TGF-β1、TIMP-1水平明显升高,预示肝纤维化进程已经启动,中医论治肝纤维化不可忽视湿热为患的影响。     

微小RNA-133和RNA-208对老年急性心肌梗死患者预后的预测价值

目的探讨微小RNA(miR)-133和miR-208对老年急性心肌梗死患者预后的预测价值。方法连续收集2015年1月～2018年1月我院收治的老年急性心肌梗死患者180例,根据患者1年内是否发生不良心血管事件,分为预后不良组32例和对照组148例。采用qRT-PCR法检测miR-133和miR-208相对表达量。随访1年,比较2组患者临床特征差异,用ROC曲线分析miR-133和miR-208对预后的预测价值。结果与对照组比较,预后不良组患者miR-133和miR-208相对表达量增加(4.10±0.75 vs 3.21±0.64,P=0.000;43.57±6.54 vs 29.55±6.88,P=0.000);N末端钠尿肽前体(NT-proBNP)增加[(608.66±140.66)pmol/L vs (541.53±121.02)pmol/L,P=0.006];再次手术率增高(37.50%vs 2.03%,P=0.000);病死率增高(9.38%vs 0,P=0.003)。miR-133和miR-208相对表达量对老年急性心肌梗死患者预后的预测价值均较NT-proBNP高,其中miR-208相对表达量最好,曲线下面积为0.924(95%CI:0.879～0.969,P=0.000)。结论 miR-133和miR-208对判定老年急性心肌梗死患者预后具有一定价值,尤其是miR-208。     

慢性病毒性肝炎患者血清中瘦素与肝纤维化指标的关系

研究血清瘦素水平与慢性病毒性肝炎和肝纤维化之间的关系。用放射免疫法检测 4 5例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中的瘦素和肝纤维化指标的水平。发现CHB患者血清瘦素水平 (7 6 3± 2 19)ng/ml显著高于正常对照组 (3 82± 1 0 9)ng/ml,其瘦素 /BMI值也显著高于正常对照组 ,CHB患者的血清瘦素水平与肝纤维化指标层粘蛋白 (LN)、透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )和Ⅳ胶原 (ⅣC)的水平呈正相关。瘦素与慢性病毒性肝炎肝纤维化的形成密切相关     

慢性乙型肝炎患者血清血管生成素样蛋白2和高尔基体蛋白73水平变化及其诊断显著肝纤维化的效能分析*

目的 评价血清血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)和高尔基体蛋白73（GP73）诊断慢性乙型肝炎（CHB）患者肝纤维化程度的价值。方法 2015年3月~2017年10月我院收治的117例CHB患者,采用ELISA法检测血清ANGPTL2和GP73水平,采用受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）评价血清ANGPTL2和GP73诊断CHB患者肝纤维化和肝硬化的效能。结果 15例CHBS3~S4期患者血清ANGPTL2和GP73水平分别为（9.1±2.4）ng/ml和（84.9±15.2） ng/ml,显著高于78例S1~S2期[分别为（6.7±2.3） ng/ml和（65.1±14.8） ng/ml,P<0.05]或24例S0期患者[分别为（4.4±1.4） ng/ml和（53.7±14.3） ng/ml,P<0.05];以肝组织纤维化大于等于S3为严重肝纤维化,分别以血清ANGPTL2水平等于8.6 ng/mL和9.6 ng/ml或血清GP73水平等于75.6 ng/ml和103.5 ng/ml为诊断严重肝纤维化和肝硬化的截断点, 结果ANGPTL2诊断慢性乙型肝炎患者严重肝纤维化和肝硬化的AUC与GP73比,差异无统计学意义（Z=1.872,P=0.061;Z=0.328,P=0.743）;ANGPTL2与GP73联合诊断慢性乙型肝炎患者严重肝纤维化的效能显著高于单指标诊断,即AUC联合检测>AUCANGPTL2（Z=3.310,P=0.001）或AUC联合检测>AUCGP73（Z=2.004,P=0.045）,血清ANGPTL2与GP73联合诊断乙型肝炎肝硬化的效能与单指标诊断的效能比,差异无统计学意义（Z=1.471,P=0.141;Z=1.575,P=0.115）;采用血清ANGPTL2与GP73联合诊断肝纤维化的效能与基于4因子模型（FIB-4）或天门冬氨酸氨基转移酶/血小板指数（APRI）比,差异无统计学意义（Z=0.869,P=0.386;Z=0.492,P=0.623）;血清ANGPTL2与GP73联合诊断肝硬化的效能与FIB-4或APRI比,差异也无统计学意义（Z=1.834,P=0.067;Z=0.610,P=0.512）。结论 慢性乙型肝炎患者血清ANGPTL2和GP73水平有一些变化规律,应用两者诊断肝纤维化分期有一些有意义的苗头,值得进一步探讨。     

慢性肝损伤致肝纤维化过程中微小RNA200家族的表达

目的观察肝组织中微小RNA200(miR-200)家族成员在慢性肝损伤致肝纤维化过程中表达变化并探讨其机制。方法雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,分别在2、4、6、8周处死大鼠测定肝脏指数、血清ALT、AST含量,观察肝组织病理改变,Real-time PCR检测肝组织miR-200a、b、c、141、429mRNA表达变化。结果模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT、AST含量显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显,8周模型组肝组织中miR-200a、b、c、141、429mRNA表达较正常组显著增加(P<0.05)。结论 miR-200s在慢性肝损伤致肝纤维化过程中的表达变化,提示其参与慢性肝损伤及肝纤维化的发生发展。     

乙型病毒肝炎及晚期肝纤维化患者血清中miR-223的表达及临床意义北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-223(miR-223)在乙型病毒肝炎及晚期肝纤维化患者血清中的表达及临床意义。方法选择2018年1月-2021年4月在本院治疗的乙肝患者168例为研究对象,根据病理穿刺检查分期:S0-1期58例,S2期42例,S3期33例,S4期35例。另选择本院体检健康者50例作为对照组。qRT-PCR检测受试者血清miR-223的表达情况,Pearson法分析血清miR-223与生化指标的相关性,Spearman法分析血清miR-223与肝纤维化分期的相关性,ROC曲线分析血清miR-223对乙肝患者肝纤维化程度的诊断价值。结果 S0-1、S2、S3、S4期患者的年龄、性别差异均无统计学意义(均P>0.05),4组患者ALT、AST、PLT、GGT、ALB、HBV-DNA、FIB-4指数和APRI指数差异均有统计学意义(均P<0.01);S0-1、S2、S3、S4期患者血清miR-223分别为1.37±0.15、2.05±0.21、2.84±0.36、3.52±0.43,与对照组比较显著升高(P<0.01);S0-1、S2、S3、S4期患者之间血清miR-223水平差异有统计学意义(P<0.05),且患者肝纤维化分期越高,血清miR-223水平越高;Spearman相关性分析显示,乙肝患者血清miR-223水平与肝纤维化分期呈正相关(r=0.564,P<0.01);Pearson相关性分析显示,乙肝患者血清miR-223与APRI、Fib-4呈正相关(r值分别为0.525和0.621,均P<0.01);ROC曲线分析显示,血清miR-223对不同肝纤维化程度均有一定诊断价值,尤其是晚期纤维化和肝硬化诊断效能更佳,其曲线下面积、敏感度和特异度均高于对S0-2期的诊断。结论乙肝患者血清miR-223水平升高,且与肝纤维化程度有关,可用于评估乙肝患者纤维化进展,尤其是晚期纤维化。     

结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1shRNA表达质粒对肝星状细胞细胞因子表达及细胞外基质分泌的影响

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的短发夹RNA(shRNA)表达质粒分别及共转染肝星状细胞(HSC)对CTGF、TIMP-1、I型前胶原(PCI)mRNA表达及细胞外基质(ECM)分泌的影响. 方法 筛选并成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1有效RNA干扰靶位的shRNA表达质粒,分别及共转染转化生长因子β1刺激活化的大鼠HSC-T6细胞,荧光定量PCR检测各组细胞中CTGF、TIMP-1、PCI mRNA的表达;放射免疫法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN)的含量.组间比较采取方差分析;多组间两两比较采用SNK-q检验. 结果 CTGFshRNA转染和双质粒共转染HSC-T6的CTGFmRNA相对表达量分别为0.59±0.03、0.62±0.01,与空白对照组、CTGFshRNA转染组的1和1.00±0.07比较,CTGF mRNA表达量均明显下降,F=66.515,P值均＜0.05,差异有统计学意义;而TIMP-1 shRNA组和双质粒共转染组的TIMP-1 mRNA相对表达量分别为0.66±0.04、0.68±0.03,与空白对照组、CTGFshRNA转染组的1和1.05±0.03比较,TIMP-1 mRNA表达量均明显下降,F=83.835,P值均＜0.05,差异有统计学意义;CTGFshRNA转染、TIMP-1shRNA转染和共转染组的PCI rnRNA相对表达量分别为0.55±0.02、0.57±0.02和0.41±0.01与空白对照组的1比较,PC I mRNA表达量均明显下降,F=709.905,P值均＜0.05,差异有统计学意义;双质粒联合转染对CTGF、TIMP-1、PC I的mRNA表达量抑制作用优于单质粒转染.CTGF shRNA转染、CIGF shRNA转染和双质粒共转染组的PCⅢ含量分别为(78.02±6.50) ng/ml、(79.03±5.47) ng/ml、(53.91±4.01)ng/ml,与空白对照组的(113.79±15.88)比较,PCⅢ含量均明显下降,P值均＜0.05,差异有统计学意义; CTGF shRNA转染、CTGF shRNA转染和双质粒共转染组的HA含量分别为(127.36±8.33)ng/ml、(116.55±3.37) ng/ml、(82.84±9.03) ng/ml,与空白对照组的(163.10±7.01)ng/ml比较,HA含量均明显下降,P值均＜0.05,差异有统计学意义CTGFshRNA转染、CTGF shRNA转染和双质粒共转染组的LN含量分别为(55.41±9.37)ng/ml、(49.77±6.70) ng/ml、(30.72±1.22) ng/ml,与空白对照组的(83.99±4.67) ng/ml比较,LN含量均明显下降,P值均＜0.05,差异有统计学意义.CTGF shRNA与TIMP-1 shRNA双质粒联合转染对PCⅢ、HA、HA分泌的抑制作用优于单质粒转染.结论 CTGF shRNA.TIMP-1 shRNA可明显抑制HSC的CTGF、TIMP-1、PCI基因表达及ECM的分泌,且shRNA联合干扰效果更显著,有望成为抗肝纤维化基因治疗的有效方法.     

微小RNA-302b在急性心肌梗死患者血清中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-302b(miR-302b)在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达,并探讨其与心肌损伤的关系。方法选取2016年陕西省第四人民医院72例AMI患者为AMI组,采用随机数字表法选取同期体检的48名健康人作为对照组。两组均通过实时荧光定量PCR法检测血清miR-302b含量(AMI组患者在临床确诊后12 h内检测),spearman法分析血清miR-302b表达与心肌酶谱的相关性。结果 miR-302b在AMI组患者血清中的相对表达量显著高于对照组(3.14±0.76比1.13±0.22,t=17.706,P<0.001);AMI患者的血清miR-302b相对表达量与天门冬氨酸氨基转移酶(r=0.428,P=0.017)、乳酸脱氢酶(r=0.519,P=0.045)、肌酸激酶同工酶(r=0.718,P=0.003)和心肌肌钙蛋白I(r=0.772,P<0.001)呈正相关。ROC曲线分析示miR-302b诊断AMI的敏感度为88.6%、特异度为64.3%。结论 miR-302b在AMI患者血清中呈高表达,并与心肌损伤相关。     

丹酚酸B对肝纤维化大鼠TGF-β1、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的:观察丹酚酸B盐(salvianolic acid B,SA-B)对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响,并探讨SA-B抗肝纤维化的可能机制.方法:♂SD大鼠30只随机分为正常对照组、模型组和丹酚酸B治疗组,以5 mL/L的二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化模型,治疗组在造模4 wk后给予SA-B治疗4 wk.应用HE,Masson染色观察肝组织病理纤维化分级,全自动生化分析仪检测ALT、AST和Alb,放免法检测HA和LN,S-P免疫组织化学方法检测TGF-β1、MMP-2和TIMP-2蛋白质的表达.结果:与模型组相比,SA-B能改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构,治疗组血清ALT、AST、HA和LN水平明显减低(87.0±28.7 U/L vs 190.4±27.4 U/L.85.6±25.3 U/L vs 178.2±15.9 U/L,179.7±32.8 mg/L vs 433.3±86.1 mg/L,135.6±21.1 mg/L vs 224.7±29.2 mg/L,均P<0.01),经SA-B干预后TGF-β1和TIMP-2表达明显下降,与模型组相比有显著性差异(18.53±2.54 vs 12.78±2.65,21.88±3.83 vs 14.69±4.51,均P<0.01),而MMP-2表达水平无明显变化.结论:SA-B能改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构,可能通过抑制TGF-β1和TIMP-2表达而促进肝纤维化的逆转.