染料木黄酮诱导人卵巢癌HO-8910 细胞凋亡的实验研究

目的研究染料木黄酮对人HO-8910卵巢癌细胞的抑制效应和诱导凋亡作用,探讨其机制。方法将不同浓度的染料木黄酮作用于人HO-8910卵巢癌细胞,利用MTT法检测其有效作用浓度,分别采用瑞氏染色、TUNEL、流式细胞仪观察和检测HO-8910细胞凋亡情况。结果MTT法测得其IC50值为28.63 mg/L,浓度为8~128 mg/L的染料木黄酮具有诱导人HO-8910卵巢癌细胞凋亡的作用,且随药物作用时间延长凋亡率逐渐增加。结论染料木黄酮具有抗卵巢癌作用,其重要作用机制之一是诱导人HO-8910卵巢癌细胞凋亡。     

Genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3诱导内皮细胞迁移的作用及机制探讨

目的:研究Genistein对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3诱导人内皮细胞系ECV-304迁移的作用,以探讨Genistein抑制血管生成作用的机理.方法:采用微孔滤膜培养小室及双室联合细胞培养方法,观察在0.5%BS培养条件下,SKOV3细胞或其条件培养基诱导的ECV-304细胞迁移以及Genistein对SKOV3细胞或其条件培养基诱导的ECV-304细胞迁移的影响;用免疫组化方法检测血管生长因子VEGF、bFGF及TGFβ-l蛋白的表达水平.结果:SKOV3细胞或其条件培养基对内皮细胞均有较强的趋化作用,Genistein对SKOV3细胞或其条件培养基诱导的ECV-304细胞迁移有呈剂量依赖性的抑制作用.20μmol/L Genistein处理ECV-304细胞48h后,VEGF、bFGF蛋白的表达水平降低,而TGFβ-1蛋白的表达水平升高.结论:GenIStein可明显抑制人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3及其条件培养基对人内皮细胞系ECV-304细胞的诱导迁移作用Genistein可能通过抑制促血管生成调节因子VEGF和bFGF的蛋白表达,增强血管生成的负性调节因子TGFβ-1的蛋白表达来抑制这种迁移诱导作用.     

染料木黄酮抑制子宫内膜癌细胞HEC-1B增殖作用的研究

目的 研究染料木黄酮（Genistein,GST）对人子宫内膜癌细胞株HEC-1B的作用。方法 应用MTT法测定染料木黄酮对HEC-1B的生长抑制率,流式细胞术检测是否发生细胞凋亡。结果 染料木黄酮能够明显抑制人子宫内膜癌细胞株HEC-1B细胞增殖,其作用随时间的延长和剂量的增加而增强,并引起HEC-1B的凋亡。结论 染料木黄酮抑制HEC-1B的增殖,诱导凋亡。     

γ-干扰素对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖的影响

目的 :研究γ 干扰素 (IFN γ)对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖的影响。方法 :采用MTT法计算细胞存活率、Giemsa染色观察细胞形态变化及凋亡情况、流式细胞术检测细胞周期变化。结果 :姜黄素可明显抑制 3AO细胞的生长 ,其半数生长抑制率 (IC50 )约为 1 8.5 μmol/L;姜黄素将肿瘤细胞聚集在S期和G2 /M期并可诱导细胞凋亡。IFN γ与姜黄素联用后 ,使上述作用明显增强 ,与两药单用组相比有统计学差异(P <0 .0 5 )。结论 :IFN γ可协同姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖     

紫杉醇联合木黄酮对人卵巢癌细胞系OC_3的作用

目的利用Chou-Telalay联合指数(即中效原理)体外定量分析紫杉醇及染料木黄酮联合应用时对人卵巢癌细胞系OC3细胞的效应,并判断联合用药的效果是协同、相加还是拮抗。方法 采用MTT法观察药物的抗癌作用,并用中效原理计算两药的中效浓度和合用指数(CI),判断联合用药的效果。结果两种药物单独使用时随着药物剂量的增加,其抑制效应也增加,紫杉醇的中效浓度为9.44 mol/L,染料木黄酮的中效浓度为263.02 mol/L,两药合用时的中效浓度为60.53 mol/L。当两者在本实验所用浓度范围内合用时,CI<1,为协同作用。结论紫杉醇联合染料木黄酮对人卵巢癌细胞系OC3细胞生长有抑制效应,两种药物适当剂量合用为协同作用。     

紫杉醇和姜黄素联用对人卵巢癌细胞系OC3的抑制作用

目的：观察姜黄素和紫杉醇联用对卵巢癌细胞系OC3生长的影响。方法：采用MTT法计算细胞抑制率；Giemsa染色观察细胞形态学变化；TUNEL染色计算细胞凋亡指数。结果：姜黄素可明显抑制OC3细胞的生长，其半数生长抑制率(ID50)约为11．2μmol／L；Giemsa染色显示紫杉醇、姜黄素或二者联合用药均可诱导细胞凋亡，联合用药后诱导细胞凋亡的作用增强；姜黄素能增加紫杉醇的细胞凋亡指数，并呈剂量依赖性。结论：姜黄素与紫杉醇协同可抑制人卵巢癌细胞系OC3的增殖；二者联合化疗有增效减毒作用。     

视黄酸对人卵巢癌细胞系3AO增殖分化的影响

观察不同浓度的高黄酸对人卵巢癌细胞系增殖及分化的影响。方法：以不同浓度ＲＡ处理培养的３ＡＯ细胞后，采用活细胞计数法细胞观察细胞增殖情况，用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶活性；用酶联免疫法测定３ＡＯ细胞标志抗原ＣＡ１２５水平的变化。结果；ＲＡ对３ＡＯ细胞的增殖有明显抑制作用，１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ ＲＮ作用５ｄ后活细胞计数为对照的４２．３％；用不同浓度的ＲＡ处理细胞５ｄ后，ＡＬＰ活性均有不同程度增加，呈     

糖皮质激素对人卵巢癌细胞系(3AO)的诱导分化作用

目的　观察不同浓度的地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系 ( 3AO)增殖及分化的影响 ,在 3AO细胞中是否有糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　以不同浓度Dex( 1× 10 -10 ～ 1× 10 -6 mol/L)处理培养 3AO细胞后 ,采用活细胞计数法观察细胞增殖情况 ,采用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶 (AKP)活性 ;采用酶联免疫法测定 3AO细胞分化标志抗原CA12 5水平的变化 ;测定GR拮抗剂RU486作用于 3AO细胞后能否阻断糖皮质激素的效应 ,用放射配体结合分析法和定量RT PCR法检测 3AO细胞中GR的表达。结果　Dex对 3AO细胞的增殖有明显抑制作用 ,1× 10 -6 mol/LDex作用 5d后活细胞计数为对照组的 5 6.78% ,同时伴有细胞形态的变化 ;Dex还可使 3AO细胞AKP活性增高 ,这种作用具有时间和剂量依赖性 ;1× 10 -6 ～ 1× 10 -10 mol/LDex作用于3AO细胞后 ,明显抑制卵巢癌细胞标志抗原CA12 5的表达 ;RU486可完全阻断Dex对 3AO细胞活性的诱导作用 ;在细胞中存在高亲和力、低容量GR。结论　Dex对 3AO细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用 ,在 3AO细胞中存在GR ,Dex调节 3AO细胞增殖分化的作用通过GR介导     

三氧化二砷诱导人卵巢癌耐药细胞系3AO/cDDP细胞凋亡及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对人卵巢癌耐药细胞系3AO／cDDP细胞生长的影响及其机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法,检测不同浓度As2O3作用后,3AO／cDDP细胞的生长抑制率;采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,细胞周期变化,以及Fas、FasL基因表达的变化。所有结果均与人卵巢癌细胞系3AO细胞相比较;采用细胞骨架染色法观察3AO／cDDP细胞凋亡细胞形态变化,通过吖啶橙染色,荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果：As2O3能明显抑制3AO／cDDP细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性（P＜0．05）;在定一浓度范围内,3AO／cDDP细胞凋亡率与As2O3的浓度和作用时间呈依赖关系,诱导凋亡的最适浓度是3μmol/L;As2O3低浓度时,3AO／cDDP细胞周期S期通过受阻,高浓度时诱导S期细胞凋亡;As2O3作用后,两种细胞系Fas基因的表达均呈升调节,FasL基因的表达无变化;与3AO细胞相比,差异无显著意义（P＞0．05）;As2O3作用后3AO及3AO／cDDP形成典型的凋亡小体。结论：As2O3通过Fas/FasL系统,诱导S期细胞凋亡,有效地抑制人卵巢癌耐药细胞系细胞的生长。     

人绒毛膜促性腺激素抑制卵巢癌细胞株3AO凋亡

目的　分析hCG对卵巢癌细胞株 3AO凋亡的影响 ,探讨hCG在卵巢癌发生、发展中的作用。方法　首先用顺铂诱导 3AO细胞凋亡 ,然后在顺铂处理前后用不同浓度的hCG作用 48h ,采用丫啶橙 (AO)和溴化乙锭 (EB)荧光双染色法对凋亡细胞计数。结果　hCG能显著地抑制 3AO细胞凋亡 (P <0 .0 5 ) ,而且这种抑制作用具有浓度依赖性 ,随着hCG浓度的增加抑制作用加强。结论　hCG可以通过抑制顺铂介导的凋亡而影响卵巢癌细胞的化疗敏感性。     

染料木黄酮对卵巢癌HO-8910PM裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：观察植物雌激素染料木黄酮（GEN）与顺铂（DDP）联合应用治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤的效应及其机制．方法：建立20只人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,随机分成4组,分别为对照组、GEN组、DDP组及GEN＋DDP组．4wk后处死裸鼠,计算抑瘤率,用Ⅷ因子抗原多克隆抗体测定肿瘤内微血管密度（MVD）,用细胞增殖指数（PI）反映细胞增殖状态,并进行形态学观察．结果：DDP组及GEN组均可有效抑制卵巢癌移植瘤生长,二者联合应用有协同作用．GEN＋DDP组MVD和PI低于GEN组和DDP组（P〈0．01）,3组均显著低于对照组（P〈0．01）．形态学观察可见GEN组和GEN＋DDP组细胞凋亡、凋亡小体及变性坏死增多,而对照组少见．结论：GEN对人卵巢癌HO-8910PM细胞裸鼠移植瘤有明显抑制作用,且与DDP有协同作用;GEN对肿瘤细胞的作用,与抑制肿瘤细胞的增殖和肿瘤区新生血管的生长、阻断肿瘤血供有关．     

槲皮素对人卵巢癌细胞系增殖的影响

目的;观察槲皮素对人卵巢癌细胞系增殖过程的影响。方法;以不同浓度槲皮素处理培养的３ＡＯ细胞后,采用活细胞计数法观察细胞增殖情况及去除槲皮素作用后细胞生长的变化;用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶活性。结果;槲皮素对３ＡＯ细胞的增殖有明显抑制作用,具有明显的剂量及时间依赖性;４０μｍｏｌ／Ｌ槲皮素作用５ｄ后活细胞计数为对照的４７．０６％;去除其作用后,细胞生长得到恢复。     

Genistein对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3体内和体外侵袭的抑制作用

目的研究genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 体内外侵袭能力的抑制作用.方法建立Borden小室体外侵袭模型以及瘤细胞体内皮下移植瘤侵袭模型,观察genistein对SKOV3的影响.结果 20 μmol/L genistein处理SKOV3细胞3 d后,细胞侵袭重建基底膜明显受到抑制,其抑制率呈剂量效应曲线.40 μmol/L genistein作用细胞后侵袭至滤膜下表面的细胞数最低.体内实验半定量分析结果表明,对照组SKOV3细胞的体内侵袭程度随时间延长而呈进行性,genistein处理组可明显阻止侵袭的进程,使肿瘤局限于0级或Ⅰ级,并明显降低Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的侵袭百分比.结论 Genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 体内和体外的侵袭均有抑制作用.     

染料木黄酮与顺铂联用对耐药卵巢癌细胞SKOV-3的影响

目的:探讨染料木黄酮与顺铂联用对耐药卵巢癌细胞系SKOV-3增殖与凋亡的影响. 方法:采用MTT比色法检测染料木黄酮和顺铂联用对SKOV-3细胞增殖的影响,Hoechst染色荧光显微镜下观察联合用药后细胞形态的改变,流式细胞仪分析细胞周期并检测凋亡率. 结果:联用不同浓度的染料木黄酮后顺铂对SKOV-3细胞IC50降低率为32.3%～79.8%,两药联合作用系数在0.586～0.869之间,为轻度至高度协同作用. 染料木黄酮与顺铂联用可显著提高凋亡率,两药联用诱导SKOV-3细胞凋亡和阻滞G2/M期、干扰S期进程,凋亡率与G1期细胞比例呈负相关(rs=-0.953, P<0.05). 结论: 染料木黄酮可以增强顺铂对SKOV-3细胞的增殖抑制作用和杀伤作用,两种药物具有协同作用. 染料木黄酮阻滞细胞于G2/M期并同时干扰S期进程可能是两药发挥协同作用的重要机制.     

大蒜素诱导卵巢癌细胞株OVCA-3凋亡

目的:探讨大蒜素诱导卵巢癌细胞株OVCA-3凋亡规律。方法:应用DNA断裂点标记（TUNEL）法、DNA凝胶电泳以及光镜等技术观察有关细胞的凋亡情况。结果:0.01-100μg/ml的大蒜素作用OVCA-3细胞2h及10μg/ml的大蒜素作用OVCA-3细胞不同时间,锥虫蓝染色阳性率均在18.5％以下。TUNEL显示：1-100μg/ml的大蒜素作用OVCA-3细胞2h,即出现典型的细胞凋亡特征;50μg/ml时凋亡率为65.9％。结论:一定剂量范围内的大蒜素可在直接杀伤作用较小的情况下明显诱导OVCA-3细胞凋亡,不会因细胞坏死而引起炎症反应,这对于大蒜素应用于临床将有重要意义。     

金雀异黄素联合顺铂对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞生物学行为影响的研究

目的 观察金雀异黄素联合顺铂对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞生物学行为的影响,探讨其可能的作用机制.方法 培养SK-OV-3人卵巢腺癌细胞,分别给予金雀异黄素(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L、200μmol/L)、顺铂(1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16...     

三羟异黄酮与化疗药物联合作用对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453增殖的影响

目的观察三羟异黄酮(genistein,GEN)与紫杉醇(paclitaxel,PTX)或阿霉素(doxorubicin,DOX)联合作用对体外培养的HER2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB -453增殖的作用,探讨三羟异黄酮和化疗药物的联合抗癌效应.方法 GEN和化疗药物PTX、DOX单独或联合处理体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-453,MTT法测定细胞增殖抑制率并用联合用药公式分析合并效应,流式细胞仪分析细胞周期,形态学观察和Annexin-V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡.结果 GEN、PTX、DOX单独作用于乳腺癌MDA-MB-453细胞,均可抑制细胞增殖,引起细胞周期阻滞,并诱导细胞凋亡.10、20 μmol/L的GEN与DOX联合作用时,q值在0.85～1.15之间,二者的联合效应为相加效应;40 μmol/L的GEN与DOX联合作用时,q＞1.15,二者的联合效应为协同效应;而各剂量的GEN与PTX联合作用时,q＜0.85,二者的联合效应为拮抗作用.GEN(40 μmol/L)可增强DOX诱导MDA-MB-453细胞凋亡的作用,而削弱PTX诱导MDA-MB-453细胞凋亡的作用.结论 GEN能增加或协同DOX对MDA-MB-453细胞的抑制增殖作用,而拮抗PTX的抑制增殖作用.     

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株3AO细胞增殖和凋亡影响的研究

目的 探讨三氧化二砷对人卵巢癌细胞株3AO细胞体外增殖和凋亡的影响作用。方法 人卵巢癌细胞株3AO细胞体外培养。实验组三氧化二砷浓度分别为0．5、1．0、2．0、4．0、8．0μmol/L,设加入空白培养液为对照组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）及流式细胞技术（FCM）,计算各组细胞的生长抑制率、细胞凋亡率,并进行细胞周期分析。结果 三氧化二砷有效地抑制3AO细胞生长,具有时间及浓度依赖性,P＜0．01;三氧化二砷作用后,3AO细胞凋记随时间及浓度升高而升高,P＜0．01;三氧化二砷使3AO细胞S期增加。结论 三氧化二砷抑制3AO细胞生长,诱导其凋亡,并使其S期阻滞。     

zebularine对卵巢癌细胞的生长抑制作用

目的:观察去甲基化制剂zebularine(Zeb)对体外培养的卵巢癌细胞A2780的生长抑制作用,并进一步探讨其作用机制。方法:应用不同浓度(50、100、200μmo.lL-1)的Zeb处理体外培养的卵巢癌细胞A2780;应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡率。结果:100、200μmo.lL-1的Zeb处理卵巢癌细胞A2780 24~72 h后,细胞增殖显著受到抑制(P<0.05);100、200μmo.lL-1的Zeb处理72 h后A2780细胞G2期细胞数量显著增加(P<0.05),S期细胞数显著减少(P<0.05);100、200μmo.lL-1组细胞凋亡率均增加(P<0.05)。结论:Zeb对卵巢癌细胞A2780具有生长抑制作用,其机制与阻滞细胞周期及诱导凋亡有关。