慢性乙型肝炎血清标志物少见模式分析

HBV感染后血清标志物的模式表现呈多样化。本科血清免疫室2004年共检测到42例少见模式，占阳性总例数的0．6％（42／6744）。其中HBsAg（-）、抗HBs（-）、HBeAg（＋）、抗HBe（-）、抗HBc（＋）者33例，HBsAg（＋）、抗HBs（-）、HBeAg（＋）、抗HBe（＋）、抗HBc（＋）者9例。更换不同厂家试剂检得相同结果。HBVDNA．PCR检测42例均呈阳性。笔者分别对上述2种少见模式的HBsAg（-）（P／N0．1～2．0）和抗HBe（＋）（抑制率0．6～0．8））作进一步检测分析。     

156份血标本乙肝五项指标定量与定性检测结果分析

目的观察乙肝五项指标定量与定性检测结果的差异及临床意义。方法对156份血标本分别采用ELISA法定性检测乙肝五项指标、以电化学发光法进行定量检测,对上述两种检测结果有差别的标本用雅培AX-SYM免疫分析仪进一步行定量测定。结果 ELISA法和电化学发光法分别检测出7种和13种阳性模式,后者HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBsAg、HBsAb检测阳性率均显著高于后者（P均〈0.05）;共有35份血标本上述两种检测结果不同,免疫分析检测显示HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb结果与电化学发光定量检测完全一致。结论定量检测乙肝五项指标敏感性及准确性均高于常规定性检测方法,临床可用以进行HBV感染的早期诊断、疗效观察及治疗方案调整。     

乙型肝炎患者胃粘膜中HBcAg和HBVDNA表达分析

目的 探讨乙型肝炎患者胃粘膜中是否有HBcAg和HBVDN的存在。方法 随机选择120例乙型肝炎患者并对其行胃粘膜活检。采用ELISA法检测其静脉血HBVM，采用免疫组织化学SP法检测其胃粘膜中的HBcAg，采用原位分子杂交法检测其胃粘膜中的HBVDNA。结果 乙型肝炎患者胃粘膜中有HBcAg和HBVDNA的存在，主要呈胞浆型分布，少数在胃粘膜腺细胞胞核上表达。胃粘膜腺腔、胃小凹及间质中也可见HBcAg和HBVDNA颗粒。血清HSsAg合并HBeAg和抗HBc阳性、HBsAg和抗—NBe及抗—HBc均阳性与抗—HBc阳性或HBsAg阳性或抗HBe阳性，但HBeAg阴性者的乙型肝炎患者胃粘膜中HBcAg、HBVDNA阳性率比较，差异无显著性(P＞0．05)。结论 乙型肝炎患者胃粘膜中有HBcAg和HBVDNA的存在，与其血清中HBV复制状态不相关。     

定量检测710例肝病患者HBsAg和H BeAg临床意义

目的：了解乙型肝炎与肝硬化患者表面抗原（HBsAg）与e抗原（HBeAg）定量变化规律,探讨分层次联合抗病毒治疗并争取满意效果的可行性。方法采用荧光磁微粒酶免法检测710例 HBV 相关肝病患者 HBsAg 和HBeAg,用SPSS19．0软件包进行统计学处理。结果 HBsAg＜0．2 IU/mL 61例,占8．5％;HBsAg＞0．2 IU/mL～＜100 IU/mL 为低水平 HBsAg组,55例,占7．7％;HBsAg ＞100 IU/mL～＜1000 IU/mL 为中等水平 HBsAg 组,142例,占20％;HBsAg 1000～5000 IU/mL为高水平 HBsAg 组,211例,占29．7％;HBsAg＞5000 IU/mL 为超高水平HBsAg组,241例,占33．9％;各型肝炎随年龄增大,HBsAg 定量值逐步下降,转阴高峰集中在46岁左右;HBeAg 阴性组（＜1．0 CI）453例,占63．8％;低水平 HBeAg阳性组（＞1．0 CI～＜10 CI）96例,占13．5％;中等量水平 HBeAg 阳性组（＞10 CI～＜100 CI）55例,占7．7％;高水平 HBeAg 阳性组（＞100 CI～＜500 CI）23例,占3．2％;超高水平HBeAg阳性组（＞500 CI）83例,占11．6％;从慢性 HBV携带者,慢性乙型肝炎,代偿期肝硬化到失代偿期肝硬化,年龄逐步增大,HBsAg和 HBeAg定量秩均值逐步下降,卡方检验有显著性差异。结论 HBsAg 和 HBeAg 定量随年龄增加与病情发展逐步下降,根据 HBsAg,HBeAg 和 HBV DNA定量进行分层次联合抗病毒治疗可争取较满意效果。     

母亲血清乙型肝炎表面抗原、e抗原滴度与新生儿接种乙型肝炎疫苗免疫失败的关系

目的 研究孕妇血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）滴度与其新生儿接种乙型肝炎（乙肝）疫苗发生免疫失败的关系,探讨能否用孕妇血清HBsAg、HBeAg滴度代替血清HBV DNA浓度来衡量新生儿接种乙肝疫苗后发生免疫失败的危险性。方法 178例HB-sAg、HBeAg双阳性母亲的新生儿接种乙肝疫苗后,随访至24月龄,32例发生免疫失败,用斑点杂交法检测孕妇临产前血清乙型肝炎病毒（HBV）DNA浓度、用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定孕妇HBsAg和HBeAg浓度,研究孕妇HBsAg、HBeAg的滴度与其新生儿接种疫苗发生免疫失败的关系,并与孕妇血清HBV DNA浓度与其新生儿发生免疫的关系相比较。结果 随着母亲血清HB-sAg、HBeAg滴度的升高,其新生儿发生免疫失败的危险性升高,当孕妇血清HBsAg滴度≥1:1000、HBeAg≥1:100时,分别有26.3%、31.4%的新生儿发生乙型疫苗免疫失败,与当孕妇血清HBV DNA浓度≥125pg/ml,新生儿发生免疫失败的危险性相当。结论 孕妇血清HBsAg、HBeAg高滴度与其新生儿接种疫苗发生免疫失败有密切联系,孕妇血清HBsAg滴度≥1:1000、HBeAg滴度≥1：100能够代替血清HBV DNA浓度≥125pg/ml作为衡量孕妇的乙肝高传染性的指标来预测新生儿发生免疫失败的危险性。     

乙型肝炎病毒低水平复制引起丙氨酸氨基转移酶升高三例

病例1：男，43岁，慢性乙型肝炎，ALT 350IU／L，HBV-M：“HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阳性”，HBVDNA3．1×10^5拷贝／ml。给予拉米夫定100mg／d治疗6个月，HBV DNA降至〈5．0×10^5拷贝／ml，ALT复常，HBV—M转为“HBsAg阳性、抗HBe阳性、抗-HBc阳性”；继续治疗1年后仍维持上述结果停药。停药后2个月ALT升高至103IU／L，HBV DNA8．68×10^2拷贝／ml，     

献血者HBV筛查模式的探讨

目的:对献血者血液筛查HBV阳性样本进行深入分析,探讨献血者HBV筛查模式,以提高献血者HBV筛查的有效率,减少不必要的血液浪费。方法:收集165例经胶体金检测HBsAg阴性而HBsAg酶联免疫(ELISA)阳性和(或)HBV核酸检测阳性的血液样本,定量检测其HBV血清学标志物,进行HBV S区序列分析。结果:2种ELISA试剂检测为阳性的样本共73例(44.24%),抗-HBc抗体阳性率为90.41%,HBsAg定量检测阳性率为75.34%;仅1种ELISA试剂检测为阳性的样本共68例(41.21%),抗-HBc抗体阳性率为26.47%,HBsAg定量检测阳性率为1.47%;HBsAg定量检测阳性样本中79.31%的HBsAg低于10 IU/mL;共扩增出35例HBV S区片段,30例确定为HBV C型基因,5例确定为B型基因,未发现影响HBsAg检测的突变。结论:HBV病毒载量、HBsAg水平极低可导致HBV筛查假阴性,而单独1种ELISA试剂检测HBsAg存在较多假阳性结果。实验室可结合HBV检测方法及检测试剂的性能验证结果,制订适合自身的检测策略。     

化学发光仪与免疫分析仪对HBV血清标志物测定结果的比较

目的观察厦门波生ZT480全自动化学发光仪与美国雅培ARCHITECT I2000SR全自动免疫分析仪对HBV血清标志物检测结果的一致性。方法采用美国雅培ARCHITECT I2000SR型全自动免疫分析仪及配套试剂和厦门波生的ZT480全自动化学发光仪及配套试剂分别检测120例血清样本中的五种HBV标志物。对检测数据进行Kappa统计分析,其中HBsAg、抗-HBs的定量结果用线性回归统计法分析两种检测系统间在医学参考水平处的相对偏差。结果①两种检测系统对HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe的检测结果具有极强的一致性,符合率分别为100%、99.2%、96.7%、95.8%;而抗-HBc的检测结果为高度一致,符合率为92.5%。②两种检测系统对HB-sAg、抗-HBs的检测结果直线相关性良好(r>0.995),HBsAg、抗-HBs在相应医学决定水平浓度测定结果的相对偏差临床均可接受。结论厦门波生ZT480与雅培ARCHITECT I2000SR对血清HBV标志物的检测具有高度一致性。     

唐山地区献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染分析

目的了解唐山地区无偿献血人群隐匿性乙型肝炎感染情况。方法用ELISA法检测无偿献血者的乙型肝炎血清标志物,对于HBsAg阴性样本,进行HBV核酸检测（NAT）,NAT阳性样本,用罗氏试剂确证HBV DNA载量。结果共检测116 741例血样,证实隐匿性乙型肝炎感染者35例,占总献血人数的0.29‰。其中97.1%隐匿性乙型肝炎感染者样本的HBV DNA滴度低于102IU/ml。在HBV DNA阳性人群中,抗-HBc阳性率较高,占81.5%,抗-HBs阳性或乙型肝炎病毒血清标志物全阴性也可检出HBV DNA分别占55.6%和22.9%。结论唐山地区献血人群中血清HBsAg阴性者存在一定比例的隐匿性HBV感染,其HBV病毒载量均较低,核酸检测能够提高HBV感染的检出率。     

不同HBV标志物模式的乙型肝炎患者HBV表面大蛋白的检测及与HBVDNA水平的相关性

目的通过检测乙型肝炎病毒标志物（HBVM：HBsAg／抗-HBs、HBeAg／抗一HBe、抗一HBc）不同模式的乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白（HBV—LP）、乙型肝炎病毒前s1抗原（HBVpreSl）、HBVDNA,探讨HBV—LP与HBVDNA及HBVM模式间的关系,研究HBV—LP用于乙型肝炎患者临床诊治的意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对HBV—LP、HBVpreS1和HBVM进行检测;采用荧光定量PCR方法对HBVDNA进行检测。结果乙型肝炎患者大蛋白检测结果与HBVDNA检测结果差异无统计学意义（X^2=1．97,P〉0．05）。HBV—LPA值随HBVDNA拷贝数的增加呈上升趋势,二者之间存在良好的相关性（r=0．565,P〈0．01）,在不同HBVDNA拷贝数组别间,HBV—LPA值差异有统计学意义（F=9．23,P〈0．01）。结论HBV—LP是反应HBV感染者体内病毒复制程度的良好的血清免疫学指标,血清中的HBV—LP与HBVDNA具有较好的相关性,特别是可作为HBeAg阴性患者体内监测病毒复制及预后判断的良好的血清学指标。     

新生期树鼩接种人乙型肝炎病毒的长期实验观察

目的 观察新生期树鼩接种HBV后体内HBV感染标志物的长期动态.方法 6只树鼩于新生期接种人HBV DNA阳性血清,每4-6周抽血1次和每6～12周做肝活体组织检查1次,应用巢式聚合酶链反应(nPCR)、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、Southern blot、酶联免疫吸附试验和免疫组织化学染色等方法动态观察血清和肝组织中HBV感染标志物的消长,用电镜寻找肝组织内的HBV颗粒和用光镜观察肝组织病理变化.结果 新生期树鼩接种后48周,3只动物(1、2和6号)血清和肝组织标本经多对引物进行的nPCR,均稳定显示HBV DNA阳性,肝组织HBVcccDNA阳性;FQ-PCR显示血清和肝组织HBV DNA的拷贝数分别为103-104/ml和每微克肝组织总DNA 107～108拷贝;Southern blot检测显示肝组织存在HBV复制中间体HBV cccDNA和HBV单链DNA;酶联免疫吸附试验检测显示血清HBsAg持续阳性;免疫组织化学染色可见数量逐步增多的HBsAg阳性肝细胞.其中的1号动物至接种后2年每微克肝组织总DNA仍可测得107～108拷贝的HBV DNA,电镜下可见疑似HBV颗粒.另3只动物除nPCR显示肝组织HBV DNA阳性条带和FQ-PCR显示低拷贝数(每微克肝组织总DNA103拷贝)HBV DNA外,其余的HBV感染标志物均为阴性或一过性阳性.结论 新生树鼩能够长期感染HBV,并且HBV能够在树鼩体内稳定复制和长期存在.     

动态评价联合检测乙肝病毒前S1抗原与核心抗原的临床意义

目的：探讨联合检测乙肝病毒前S1抗原和核心抗原与HBVDNA的关系以及在乙肝诊疗中的意义。方法：对100例慢性乙肝患者的346份系列血清和486例正常对照血清采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）进行DNA定量检测,酶联免疫吸附试验（ELISA）进行乙肝病毒前S1抗原和核心抗原的联合检测（检测结果以HBV NRAg表示）及对乙肝血清标志物进行定性检测。结果：342份HBV DNA（＋）的血清中,有338份HBV NRAg检测为阳性,灵敏度为98．8％（95％CI：0．970-0．995）,HBV NRAg特异度为99．6％（95％CI：0．985-0．999）。45例患者的系列血清HBV NRAg的OD均值随着HBVDNA拷贝数降低而下降,且具有一定的相关性（r=0．721）。其中有两位患者的血清标本出现了HBV DNA阴转。此外在46例不明原因肝功能不良患者中,发现3例HBsAg（-）,HBV DNA（＋）的慢性乙肝患者。结论：联合检测乙肝病毒前S1和HBcAg不仅能反映乙肝患者体内HBV复制情况,而且对抗病毒药物在临床的使用具有一定的指导作用。     

HBV vaccine efficacy and detection and genotyping of vaccineé asymptomatic breakthrough HBV infection in Egypt

AIM:To evaluate the impact of mass vaccination against the hepatitis B virus (HBV) in Egypt,and to search for vaccinee asymptomatic breakthrough HBV infection and its genotype.METHODS:Seven hundred serum samples from vaccinated children and adults (aged 2-47 years) were used for quantitative and qualitative detection of HBsAb by ELISA.Three hundred and sixty serum samples representing undetectable or low or high HBsAb were screened for markers of active HBV infection (HBsAg,HBcAb (IgG) and HBeAb by ELISA,plus HBsAg by AxSYM) and HBV-DNA genotyping by nested multiplex PCR and by DNA sequencing.RESULTS:It was found that 65% of children aged 2-4 years,and 20.5% aged 4-13 years,as well as 45% adults were good responders to HBV vaccination mounting protective level HBsAb.Poor responders were 28%,59.5% and 34%,and non-responders were 7%,20% and 21% respectively,in the three studied groups.Markers of asymptomatic HBV infections were HBsAg detected by ELISA in 2.5% vs 11.39% by AxSYM.Other markers were HBcAb (IgG) in 1.38%,HBeAb in 0.83%,and HBV-DNA in 7.8%.All had HBV genotype E infection.CONCLUSION:It is concluded that HBV vaccine is efficient in controlling HBV infection among children and adults.The vaccine breakthrough infection was by HBV genotype E.A booster dose of vaccine is recommended,probably four years after initial vaccination.     

乙型肝炎患者血清HBV标志物与HBV DNA相关性分析

目的探讨乙型肝炎患者血清学标志(HBVM)与HBV DNA的关系。方法对257例乙型肝炎患者同时检测HBVM与HBV DNA。HBVM检测用EHSA法，HBV DNA检测用PCR法。根据不同检测结果进行对比分析。结果在HBsAg HBeAg HBcAb阳性的血清中HBV DNA阳性率和含量最高，血清HBeAg与HBV DNA含量密切相关，但部分HBeAg阴性或抗-HBe阳性患者也有较高的HBV DNA阳性率及含量。结论PCR定量检测HBV DNA含量更有助于判断体内HBV复制的情况及传染性强弱，在临床上有重要意义。     

乙肝患者血清ALT及乙肝病毒标志物与病毒含量的关系探讨

采用ELISA检测620例乙肝患者血清乙肝标志物,采用FQ-PCR检测HBV-DNA。发现单凭HBeAg阳性或单凭HBV-DNA阳性来判断乙肝患者的传染性,将会漏掉10%左右具有传染性的乙肝患者。在判断乙型肝炎患者的预后方面,HBV-DNA检测比血清标志物检测更敏感而特异,而PCR方法可定量检测病毒DNA的浓度,真实反映HBV的感染和复制状况。     

慢性乙型肝炎重叠急性戊型肝炎3种血清细胞因子表达及意义

目的分析慢性乙型肝炎重叠急性戊型肝炎患者血清γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定慢性乙型肝炎重叠急性戊型肝炎患者（重叠组）、急性戊型肝炎患者（AHE组）、慢性乙型肝炎患者（CHB组）和健康体检者（对照组）的血清IFN-γ、IL-2、IL-10水平;分别采用实时荧光PCR和ELISA方法测定重叠组和CHB组的乙肝病毒（HBV）基因定量（HBV DNA）和HBV血清标记物;同时检测重叠组、AHE组和CHB组的主要肝功能指标。结果 重叠组IFN-γ高于CHB组和对照组,IL-10低于CHB组和对照组,IL-2高于CHB组（P〈0.05）;CHB组IL-10高于其他3组（P〈0.05）。重叠组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、血清总胆红素（TBIL）高于CHB组,胆碱酯酶（CHE）、白蛋白（ALB）、凝血酶原活动度（PTA）低于CHB组（P〈0.05）。重叠组乙型肝炎e抗原（HBeAg）和HBV DNA阴性率高于CHB组（P=0.00）。重叠组组中HBV-DNA阴性者IFN-γ、IL-2水平高于HBV-DNA阳性者,IL-10水平低于HBV DNA阳性者（P〈0.01）。结论 IFN-γ、IL-2、IL-10参与慢性乙型肝炎重叠急性戊型肝炎肝细胞免疫损伤过程;IFN-γ、IL-2、IL-10可作为判断重叠感染后肝细胞损伤程度的指标;重叠感染后IFN-γ、IL-2可能影响HBV的复制。     

乙型肝炎病毒核酸定量检测与临床的关系

目的：探讨血清HBV DNA水平与HBV标志（HBV M）表现模式，肝功能状态，肝内炎症的关系。方法：对219例排除甲，丙，丁和戊型肝炎病毒的混合与重叠感染患者中的HBsAg阳性的慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺病理检查。HBV DNA定量采用荧光定量PCR分析系统，HBV M采用ELISA法。结果：血清HBV DNA水平与HBVM表现模式有关，HBsAg与HBeAg的存在影响HBV DNA水平变化。在HBsAg阳性患者中，HBV DNA水平与Scheuer分级无明显相关。血清谷丙转氨酶水平与HBV DNA水平无明显相关。结论HBeAg和HBV DNA有明显的相关，抗－HBe阳性者病毒未完全停止复制，只是复制水平降低。单抗HBe阳性，单抗HBc阳性，抗HBs阳性和抗HBc阳性未检出HBV DNA，肝内炎症活动程度与血清HBV DNA水平无明显关系。     

乙肝病毒外膜大蛋白检测对于判定HBV DNA复制的意义

目的:通过检测患者血清乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV DNA以及乙肝病毒标志物(HBV M),探讨HBV-LP对于反映体内乙肝病毒复制的意义．方法:采用荧光定量PCR方法对254份HBV 感染血清的HBV DNA进行检测,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法对HBV-LP、 Pre-S1蛋白及HBV M进行检测．结果:大蛋白的检出结果与HBV DNA的检出结果无明显差异．不同HBV M模式的HBV DNA与HBV-LP的检出结果均无显著性差异． HBV DNA拷贝数的对数值与HBV-LP表达具有相关关系(r=0．945,P<0．001),HBV DNA拷贝数的对数值变化的89%可以用HBV-LP A值为解释变量的线性回归模型来解释．结论:HBV-LP能够反应HBV的复制情况,血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数具有较好的相关性．     

孕期干预阻断乙肝病毒母婴垂直传播效果评价

目的　探讨孕期干预治疗阻断乙型肝炎病毒母婴垂直传播的效果。方法　将 6 0例 HBs Ag/ HBe Ag阳性孕妇分成治疗组 31例 ,对照组 2 9例。治疗组均在孕 2 6周起开始注射乙肝免疫球蛋白 (HBIG)及外用左旋咪唑涂布剂 ,采用 EL ISA法检测孕妇和新生儿血清 HBs Ag、HBAb、Hbe Ag、HBe Ab、HBc Ab,用 PCR电泳和 RT-PCR法测定 HBV- DNA及全长型和顿挫性转录体。分析母婴之间乙肝病毒分子水平上的关系。结果　新生儿外周血中 HBs Ag阳性者 2例 ,宫内感染率为 6 .4 5 %。对照组 4例 ,宫内感染率 13.7%。与对照组比较差异有显著性。 (P<0 .0 1) ,两组都有超过一半的患儿携带顿挫型病毒转录体。结论　携带 HBV孕妇于孕晚期给 HBIG和左旋咪唑涂布剂联合治疗后 ,可有效降低婴儿 HBs Ag和 HBV- DNA携带率