转染p21基因对人动脉平滑肌细胞的影响

目的：探讨转染p21基因对人动脉平滑肌细胞（HASMC）的影响,以探讨转染p21基因实现抗冠状动脉支架内再狭窄的作用,为冠状动脉支架内再狭窄的治疗提供新思路。方法：以Lipo-fectamine 2000脂质体介导p21基因转染HASMC株;免疫组化法检测转染p21基因后,其编码蛋白在HASMCs的表达情况;描绘p21基因转染后HASMCs的增殖曲线;WST-1法测定OD值,计算细胞生长抑制率及流式细胞仪检测p21基因转染对HASMCs凋亡的影响。结果：免疫组化法显示p21基因成功转入HASMCs后,其编码的蛋白能在细胞核内进行高表达;转染p21基因的HASMCs在体外生长曲线较对照组明显降低;WST-1法显示转染p21基因的HASMCs细胞活力与对照组相比明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;流式细胞仪检测发现转染p21基因的HASMCs细胞凋亡率达40.26%＋0.013%,且显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：成功将p21基因转入HASMCs,其编码蛋白可能参与了抑制细胞生长和诱导细胞凋亡作用,提示p21基因转染HASMCs技术有可能为人冠状动脉支架内再狭窄的治疗提供一种新的防治策略与手段。     

转染p21基因对人动脉平滑肌细胞生长的作用

目的探讨转染p21基因对人动脉平滑肌细胞（HASMC）的影响,以探讨转染p21基因实现抗冠状动脉支架内再狭窄的作用,为冠状动脉支架内再狭窄的治疗提供新思路。方法以Lipofectamine2000脂质体介导p21基因转染HASMC株;免疫组化法检测转染p21基因后,其编码蛋白在HASMCs的表达情况;描绘p21基因转染后HASMCs的增殖曲线;WST-1法测定OD值,计算细胞生长抑制率及流式细胞仪检测p21基因转染对HASMCs凋亡的影响。结果免疫组化法显示p21基因成功转入HASMCs后,其编码的蛋白能在细胞质内进行高表达;转染p21基因的HASMCs在体外生长曲线较对照组明显降低;WST-1法显示转染p21基因的HASMCs细胞活力与对照组相比有显著性差异（P〈0．01）;流式细胞仪检测发现转染p21基因的HASMCs细胞凋亡率达40％以上,且显著高于对照组。结论成功将p21基因转入HASMCs,其编码蛋白可能参与了抑制细胞生长和诱导细胞凋亡作用,提示p21基因转染HASMCs技术有可能为人冠状动脉支架内再狭窄的治疗提供一种新的防治策略与手段。     

复方中药对人宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响

目的研究观察复方中药提取物（葆盛口服液）对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长的影响及其作用机制。方法以人宫颈癌Hela细胞为研究对象,用MTT法观察葆盛口服液对Hela细胞生长的影响,以肝细胞株7701作为比较;流式细胞仪分析Hela细胞凋亡以及凋亡基因Fas的表达情况,以顺铂作为对照。结果葆盛口服液对Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用,流式细胞术发现葆盛口服液能促进Fas表达,诱导Hela细胞凋亡。结论葆盛口服液诱导细胞凋亡,在抗肿瘤作用中可能具有重要意义。     

wt—P53基因对人膀胱移行细胞癌细胞系转染及其生物学特性影响的研究

目的：探讨膀胱肿瘤的治疗途径。方法：利用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ将外源性野生型ｐ５３（ｗｔ－ｐ５３）基因导入人膀销移行细胞癌细胞系ＴＢＣ－１细胞中,并得到表达,结果;细胞在体外标准条件下,生长增殖率降低,流式细胞计检测显示细胞周期Ｇ０＋Ｇ１细胞比例明显增高,凋亡指数升高,细胞生长速度减低,代表细胞增殖能力的ＡｇＮＯＲｓ计数下降,结论：增加ｗｔ－ｐ５３的基因表达具有抑制恶性肿瘤生长的作用。     

p21基因对肝癌细胞的生物学影响

目的探讨逆转录病毒介导的p21基因对肝癌Hep3B细胞的杀伤作用。方法通过脂质体将有p21基因的逆转录病毒载体MMLV-p21转染肝癌Hep3B细胞系,并用G418筛选。试验分为转p21基因的Hep3B-P21组及相同遗传背景及培养过程的两对照组肝癌Hep3B系细胞组、转Hep3B-MMLV组3组。采用RT-PCR检测实验组p21基因的表达;应用流式细胞计数分别分析3组细胞周期;MTT法检测细胞增殖并比较细胞抑制率。结果野生p21基因阻止Hep3B系细胞进入S期,停滞在G1期,Hep3B-P21组细胞增殖比两对照组明显受到抑制（P〈0.05）。结论逆转录病毒介导p21基因可有效抑制肝癌Hep3B系细胞的增殖并诱导肝癌细胞的凋亡。     

白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

近年我国宫颈癌(Cervical Carcinoma)的发病率呈逐渐上升趋势,成为危害妇女生命及降低妇女生活质量的主要疾病之一。从中草药和天然植物中提取和寻找防治肿瘤的有效成分己成为治疗肿瘤的希望和新途径。很多学者认为,治疗肿瘤最有效的途径是诱导肿瘤细胞凋亡,因而,诱导细胞凋亡己成为寻找抗肿瘤药物的新切入点及评价疗效的一项新     

人剪切修复基因XPD对p52和p21基因的影响

目的:探讨人剪切修复基因XPD转染人HepG2肝癌细胞后p52和p21基因表达的变化以及对肝癌细胞生长的影响。方法:人肝癌细胞HepG2为靶细胞,XPD基因通过Lipofectamine2000脂质体转染HepG2。将细胞分为重组质粒HepG2-pEGFP-N2-XPD组(XPD组)、空载质粒HepG2-pEGFP-N2组(N2组)和HepG2空白对照组。分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Westernblot)法检测各组细胞中XPD、p52以及p21的mRNA和蛋白质的表达量,并用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测各组细胞的增殖能力。结果:XPD组中的p52的mRNA表达较其他2组显著下调,XPD、p21的mRNA表达较其他2组明显上调(均P<0.01)。Westernblot检测结果显示各组细胞中XPD、p52及p21的蛋白表达各组间差异与其mRNA各组间差异一致。MTT检测显示XPD转染入HepG2后细胞增殖能力减弱。结论:XPD基因可以抑制癌细胞的生长和基因p52的表达,促进p21的表达。     

青蒿琥酯抗人宫颈癌Hela细胞的实验研究

目的探讨青蒿琥酯的抗肿瘤作用。方法采用四甲基二氮唑蓝（MTT）法观察青蒿琥酯及其含药血清对人宫颈癌Hela细胞的体外抑制作用。结果青蒿琥酯及其含药血清均能明显抑制体外培养的人宫颈癌Hela细胞的生长，青蒿琥酯的半数抑瘤浓度（IC50）为31、21μg／mL，20％和10％的含药血清的抑制率分别为29．78％和21、91％。结论青蒿琥酯对体外培养的人宫颈癌Hela细胞有明显的抑制作用。     

EGFP基因在不同细胞中的转染效率

目的旨在比较EGFP基因不同细胞中的转染效率。方法本试验使用阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)介导质粒pEGFP-N1转染AAV-293、NIH-3T3、CEF3种细胞,转染48h后在荧光倒置显微镜下观察,并分析转染效率。结果 3种细胞系都能够观察到绿色荧光。结论 EGFP基因在NIH-3T3细胞中的转染效率最高,其次是AAV-293细胞,而在CEF细胞中转染效率较低。     

齐墩果酸对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的:研究齐墩果酸对宫颈癌Hela细胞增殖的影响;初步探讨齐墩果酸诱导Hela细胞凋亡的作用机制.为临床治疗宫颈癌提供实验和理论依据.方法:MTT法检测OA对宫颈癌Hela细胞增殖的影响.HE染色检测OA对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响.结果:OA以时间和剂量依赖性的特点抑制宫颈癌Hela细胞的增殖.不同程度地显示典型的...     

阿司匹林诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及机制

目的:探讨阿司匹林对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及机制。方法:体外培养HeLa细胞,分别以0.5,1.0,5.0mmol.L-1阿司匹林干预。采用Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒检测凋亡;碘化丙锭(PI)染色法检测细胞周期;Western-blot法检测NF-κB p65蛋白表达。结果:0.5,1.0,5.0mmol.L-1的阿司匹林均能使Hela细胞凋亡率明显增加,S期、G2/M期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例显著增加,细胞中NF-κB p65蛋白表达水平明显下降,且上述作用均呈剂量依赖性。结论:阿司匹林在体外可以通过下调NF-κB p65蛋白表达,影响细胞周期,诱导Hela细胞凋亡。     

大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖影响及其作用机制

目的探讨大蒜素对体外培养宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度大蒜素对Hela细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达。结果 MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性关系;流式细胞术测定结果显示10μg/ml大蒜素可明显诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期;可降低癌基因蛋白Bcl表达（P〈0.01）,而促进Bax表达（P〈0.01）。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有抑制作用,与细胞周期阻滞和凋亡相关蛋白表达有关。     

槲皮素对HeLa细胞P21、CDK4蛋白表达的影响

目的:探讨不同浓度的槲皮素对HeLa细胞P21、CDK4蛋白表达的影响及意义。方法:采用不同浓度槲皮素处理体外培养的HeLa细胞,培养48h后免疫组织化学法检测HeLa细胞P21、CDK4蛋白表达的变化。结果:不同浓度的槲皮素均能显著增高P21和降低CDK4蛋白在HeLa细胞中的表达,且与空白对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论:槲皮素可能通过上调HeLa细胞P21蛋白表达和下调CDK4蛋白表达,促进HeLa细胞凋亡。     

小剂量顺铂对Hela细胞凋亡的实验研究

目的：实验研究小剂量顺铂对放疗诱导Hela细胞凋亡的作用。方法：将细胞分为空白对照组、单纯化疗组、单纯放疗组、放疗加化疗组4组,采用TUNEL法分另1检测各组细胞的凋亡率。结果：单纯放疗、化疗都可诱导Hela细胞凋亡,顺铂(化疗)可以明显增强放疗诱导的细胞凋亡。结论：小剂量顺铂可明显增加放疗诱导的Hela细胞凋亡,为临床应用小剂量顺铂使放疗增效提供了理论依据。     

p21WAF1和p53在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨p21WAF1和p53蛋白在宫颈鳞癌发生发展中的表达以及相互关系。方法采用免疫组化方法研究50例宫颈鳞癌和30例正常子宫颈组织p21WAF1和p53蛋白的表达。结果宫颈鳞癌组织中p21WAF1蛋白阳性表达率42.0%,明显低于正常对照组73.33%(P<0.05);p53蛋白的阳性表达率为54%,明显高于正常对照组6.67%(P<0.05)。p21WAF1与p53表达存在明显负相关。结论 p21WAF1蛋白的低表达和p53蛋白的高表达与宫颈鳞癌的发生发展相关。     

苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株p21和survivin基因表达的影响

目的研究苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的生长、凋亡及其对p21和survivin分子表达的影响。方法应用MTT法检测苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的抑制作用,采用流式细胞仪研究苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用,应用Western blot和RT-PCR检测p21和survivin基因的转录和表达。结果实验表明苯丁酸钠对Tca8113细胞株增殖有明显的抑制作用;流式细胞仪检测显示苯丁酸钠诱导Tca8113细胞株G1期阻滞和细胞凋亡;苯丁酸钠能使p21的mRNA及蛋白质表达升高,同时survivin的mRNA及蛋白质表达下降。结论苯丁酸钠通过刺激p21表达增加和抑制survivin的表达,从而抑制Tca8113细胞株增殖,诱导细胞G1期阻滞和细胞凋亡;并且p21mRNA水平的上升和survivin mRNA水平的下降变化呈负相关(rs=-0.548,P<0.01),二者蛋白表达的变化亦如此(rs=-0.514,P<0.01)。     

血竭素高氯酸盐诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制

目的研究血竭素高氯酸盐诱导HeLa细胞凋亡机制。方法MTT法测定血竭素高氯酸盐对HeLa细胞的细胞毒作用。通过显微镜，荧光染色观察细胞形态学变化，用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片断化。用Western印迹法分析药物对蛋白质表达的影响。结果血竭素高氯酸盐明显抑制HeLa等细胞的增殖，诱导HeLa细胞调亡。Caspase-1，-3，-8，-9及家族抑制剂可明显抑制血竭素高氯酸盐诱导的凋亡。Western印迹结果显示血竭素高氯酸盐作用12 h后Bax及Bcl-X_L的表达明显改变，caspase-3，-8前体及caspase-3底物ICAD和PARP发生降解。结论血竭素高氯酸盐(60 μmol·L^-1)通过改变Bax/Bcl-X_L的表达激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。