紫癜性肾炎患儿肾组织podocalyxin的表达及其与尿足细胞数的相关分析(英文)

目的:分析肾脏足细胞特异蛋白podocalyxin(PCX)的表达和尿足细胞数在紫癜性肾炎(Henoch-Schnlein purpura nephritis,HSPN)病理进展过程中的变化。方法:56例HSPN患儿为病例组,根据肾脏病理改变分为4组:HSPN Ⅱ(Ⅱa+Ⅱb)级组(n=10),Ⅲ(Ⅲa+Ⅲb)级组(n=21),Ⅳ级组(n=16)和Ⅴ级组(n=9);另取非肾脏疾病死亡病例尸检切取的肾脏标本4例作为正常肾组织对照组;同时收集8例健康儿童的晨尿作正常尿液对照组。应用免疫荧光方法检测PCX在4例正常肾组织及56例HSPN肾组织中的表达,并对其结果进行定量分析;同时检测8例健康儿童及56例HSPN患儿尿足细胞阳性的发生率和尿足细胞数。结果:在正常对照组和HSPN Ⅱ(Ⅱa+Ⅱb)级组的肾组织中,PCX表达完整,2组之间肾组织PCX阳性面积占肾小球面积的百分比差异无统计学意义(P>0.05);在HSPN Ⅲ(Ⅲa+Ⅲb)级﹑Ⅳ级和Ⅴ级组的肾组织中,PCX表达均有不同程度缺失,从Ⅲ(Ⅲa+Ⅲb)~Ⅴ级其表达依次下降,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01);病理分级在Ⅲ(Ⅲa+Ⅲb)级以上的HSPN,尿中有PCX的阳性表达,提示尿中有足细胞存在;肾组织PCX荧光阳性面积占肾小球的百分比与尿中足细胞数呈负相关(r=-0.637,P<0.01)。结论:足细胞损伤在儿童HSPN病理进展中发挥一定作用;可以在一定程度上反映HSPN的病理损伤程度。     

尿足细胞阳性IgA肾病患者临床病理特点

目的探讨尿足细胞阳性原发性IgA肾病(IgAN)患者临床病理特点。方法50例肾活检明确诊断的IgAN患者和10例健康志愿者,利用足细胞的标记蛋白Podocalyxin(PCX)标记尿液和肾组织足细胞,采集IgAN患者肾活检时临床资料、肾活检光镜结果,其中光镜参照Hass分级,各项病理指标参照Fofi半定量积分法进行评分,荧光显微镜观察肾组织足细胞PCX荧光表达程度,电镜观察足细胞足突形态学改变。结果①尿足细胞阳性的IgAN患者尿蛋白水平、血肌酐水平、平均动脉压较尿足细胞阴性患者增高,血浆白蛋白、肾小球滤过率(GFR)较尿足细胞阴性患者降低(P<0.05);②光镜示尿足细胞阳性的IgAN患者肾小球硬化程度、新月体发生率较尿足细胞阴性患者增高(P<0.05),而两组比较,系膜增生、基质增多、肾小管萎缩、间质纤维化、间质炎细胞浸润、间质血管硬化程度的差异无统计学意义(P>0.05);③肾组织足细胞PCX抗体荧光表达显示:肾小球节段硬化和球性硬化处足细胞PCX抗体荧光表达缺失;④电镜观察提示,无论是否伴足细胞尿,其足细胞足突均可出现一系列形态学改变。结论足细胞尿是反映肾脏疾病轻重的一个指标,与肾脏病理类型有一定关系。     

盐酸贝那普利对早期糖尿病大鼠肾组织足糖萼蛋白表达的影响

目的观察盐酸贝那普利对早期糖尿病大鼠肾组织足糖萼蛋白(PCX)表达的影响,初步探讨其对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其可能的机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC)组和实验组。实验组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。造模成功后,随机分为糖尿病(DM)组和盐酸贝那普利干预(DT)组,每周检测各组大鼠血糖。4周后,检测大鼠尿白蛋白(UALB)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)、尿足细胞特异性标志蛋白PCX(UPCX)、尿肌酐(UCR)、肾脏肥大指数(KI)及糖化血红蛋白(HbA1C)。采用免疫组化及RT-PCR法检测肾脏组织PCX蛋白及mRNA的表达。结果 DM组大鼠血糖、UALB、URBP、UPCX、KI、HbA1C均高于NC组(P<0.01),肾组织病理改变较重,肾组织PCX蛋白及mRNA的表达显著降低(P<0.01);DT组除血糖及HbA1C外,生化指标均明显低于DM组(P<0.01),肾组织病理改变亦减轻,肾组织PCX蛋白及mRNA的表达显著增高(P<0.01)。结论 PCX表达减少可能是糖尿病肾病发病机制之一,盐酸贝那普利可通过减轻尿液PCX排泄,上调肾组织PCX蛋白及mRNA的表达。     

糖尿病肾病MKR小鼠蛋白尿与尿中nephrin、PCX含量相关性分析

目的 通过检测糖尿病肾病（DN）MKR小鼠足细胞结构蛋白nephrin 与足细胞标记蛋白（PCX）在肾组织中的表达量及尿中的含量,分析尿微量白蛋白(UmAlb)与尿中nephrin、PCX蛋白含量的相关性。方法 取30只8周龄MKR小鼠随机分为2组（空白组和DN组）,空白组以普通饲料喂养,将DN组小鼠单肾切除并加以高脂喂养2个月复制DN模型;另取15只同龄C57野生鼠为正常对照组,以普通饲料喂养。造模前1 d、喂养4周及8周后,采用电化学法检测各组小鼠空腹血糖(FBG);喂养8周后,取各组小鼠肾脏组织,用电镜观察肾组织足细胞形态结构;Western blot检测肾组织中nephrin、PCX蛋白表达含量;ELISA 法测定尿中UmAlb含量及nephrin、PCX蛋白表达含量。结果 电镜结果显示:喂养8周后,与C57组比较,DN组小鼠肾小球足细胞结构损伤明显,DN组FBG升高( P<0.01),且肾组织中nephrin、PCX蛋白表达下调,而尿中nephrin、PCX蛋白含量及UmAlb 含量均升高( P<0.01)。相关分析显示,尿UmAlb与尿中nephrin和PCX蛋白含量呈正相关（相关系数r=0.920,决定系数R 2=0.829, P<0.05)。结论 尿中nephrin、PCX蛋白含量与UmAlb含量呈正相关,足细胞结构蛋白丢失可能是导致糖尿病肾病蛋白尿的机制之一。     

儿童紫癜性肾炎临床病理与尿Podocalyxin的关系

目的紫癜性肾炎(henoch-Schnlein purpura nephritis,HSPN)是儿童最常见的继发性肾小球疾病。为寻找评价肾组织病理损伤的分子标志物,文中探讨儿童HSPN的临床分型、病理分级、足细胞损伤情况与尿Podocalyxin的联系,将尿Podocalyxin作为分子标志物评估儿童肾组织病理损伤的程度。方法分析72例经肾活检病理检查诊断为过敏性HSPN的住院患儿,对其进行肾穿刺活检和尿Podocalyxin检测。肾组织病理除常规进行病理分级和免疫荧光分型外,还在电镜下观察肾小球足细胞损伤程度,按照足突融合情况进行分类。分析其临床特点、肾组织病理、尿Podocalyxin的关系。结果病理分级集中在Ⅱ级和Ⅲ级,其中病理分级为Ⅱ级的患儿34例,占47.2%;Ⅲ级患儿38例,占52.8%,与Ⅱ级的患儿比较,尿Podocalyxin检测值高(P<0.05)。电镜下观察肾小球足细胞损伤情况:足突广泛融合21例,足突节段融合35例和无足突融合11例,5例电镜下未见肾小球。患儿足突融合程度加重,尿中Podocalyxin检测值升高。孤立性蛋白尿型患儿尿中Podoca-lyxin检测值较孤立性血尿型高,较肾病综合征型低(P<0.05)。结论儿童HSPN的肾小球病理改变除系膜细胞的增生外,还存在足细胞损伤的情况。尿Podocalyxin检测可作为分子标志物,评估儿童HSPN肾小球足细胞损伤情况和肾组织病理分级的严重程度。     

Effect of hydrochloride benazepril on Podocalyxin expression in diabetic rats

目的 观察盐酸贝那普利对早期糖尿病大鼠肾组织足糖萼蛋白(PCX)表达的影响,初步探讨其对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其可能的机制.方法 将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC)组和实验组.实验组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型.造模成功后,随机分为糖尿病(DM)组和盐酸贝那普利干预(DT)组,每周检测各组大鼠血糖.4周后,检测大鼠尿白蛋白(UALB)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)、尿足细胞特异性标志蛋白PCX(UPCX)、尿肌酐(UCR)、肾脏肥大指数(KI)及糖化血红蛋白(HbA1C).采用免疫组化及RT-PCR法检测肾脏组织PCX蛋白及mRNA的表达.结果 DM组大鼠血糖、UALB、URBP、UPCX、KI、HbA1C均高于NC组(P＜0.01),肾组织病理改变较重,肾组织PCX蛋白及mRNA的 表达显著降低(P＜0.01);DT组除血糖及HbA1C外,生化指标均明显低于DM组(P＜0.01),肾组织病理改变亦减轻,肾组织PCX蛋白及mRNA的表达显著增高(P＜0.01).结论 PCX表达减少可能是糖尿病肾病发病机制之一,盐酸贝那普利可通过减轻尿液PCX排泄,上调肾组织PCX蛋白及mRNA的表达.     

检测肾病综合征患者尿中足细胞的临床意义

目的:探讨尿中肾小球上皮细胞(足细胞)检测在人局灶节段性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)诊断中的意义.方法:病例选自我科经肾活检病理证实的FSGS患者12例,微小病变性肾小球病(minimal change disease,MCD)20例,8例健康人作对照.取晨尿离心,沉渣甩片,间接免疫荧光法检测尿中足细胞特异蛋白Podocalyxin(PCX)阳性染色细胞.采用免疫荧光法检测肾小球足细胞PCX的表达.结果:FSGS组尿中足细胞阳性8例(阳性率66.67%),MCD组和正常对照组中尿足细胞均为阴性.FSGS患者中,尿足细胞阳性者临床上呈肾病综合征表现.FSGS患者肾活检标本中,肾小球内均可见足细胞特异标记蛋白PCX表达呈节段性缺失,并与肾小球节段硬化部位一致;而MCD患者肾活检标本的肾小球中,上述标记蛋白表达完整.结论:在肾病综合征中,尿足细胞检测可作为FSGS与MCD鉴别的一项可靠、方便、无创性的辅助手段.     

维生素D3治疗糖尿病肾病患者的疗效及肾组织足细胞损伤与ROS、AOPP、SOD的相关性分析

目的分析维生素D3治疗糖尿病肾病(DN)患者肾组织足细胞损伤与活性氧(ROS)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)及超氧化物歧化酶(SOD)的相关性。方法选择2017年3月-2019年1月内蒙古自治区人民医院肾内科诊治DN患者86例作为研究对象,根据患者尿清蛋白排泄率(UAER)水平分为大量组(UAER≥200μg/min,n=46)和微量组(20μg/min≤UAER<200μg/min,n=40)。所有患者经6周的洗脱期后,予骨化三醇0.25μg/d治疗3个月。比较2组患者治疗前后血清ROS、AOPP、SOD及尿足细胞标志蛋白(PCX)、足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、肾脏组织内synaptopodin和WT-1表达水平的变化,并分析肾组织足细胞损伤与血清ROS、AOPP、SOD的相关性。结果与治疗前比较,2组患者治疗后血清ROS、AOPP水平,尿PCX、Nephrin水平及肾脏组织内synaptopodin、WT-1表达水平均明显降低,血清SOD明显升高;与大量组治疗后比较,微量组上述指标变化更为显著(t=9.631、6.544、18.729、7.386、25.410、8.602、4.703,P均<0.01)。经Pearson相关性分析,患者尿PCX、Nephrin及肾脏组织内synaptopodin、WT-1表达水平与血清ROS、AOPP均呈正相关,与血清SOD呈负相关(r/P=0.781/0.005、0.537/0.014,0.575/<0.001、0.684/0.015,0.654/0.035、0.537/0.014,0.374/0.023、0.456/<0.001,-0.368/<0.001,-0.543/<0.001,-0.741/<0.001,-0.344/<0.001)。结论维生素D3可以一定程度改善DN患者足细胞损伤及氧化应激状态,且DN患者足细胞损伤与血清ROS、AOPP水平呈正相关,与血清SOD水平呈负相关。     

高血压大鼠足细胞的超微病变和podocalyxin的表达及其作用研究

目的观察高血压大鼠足细胞的超微结构病变,探讨足细胞蛋白podocalyxin(PCX)在高血压大鼠肾组织中的表达及作用。方法随机将30只雄性SD大鼠以改进的"两肾一夹"方法建立高血压大鼠模型,分为高血压组和对照组。分别于造模前和造模后1、5、10周检测两组大鼠的尿β2-微球蛋白(β2-MG)、血尿素氮(BUN)及血肌酐(Scr)水平;免疫荧光方法观察PCX在肾组织的表达,并用Image-pro plus 6.0软件,以面积密度值进行分析;光镜、电镜观察肾小球及足细胞超微结构改变。结果 (1)术后2周起高血压组收缩压(SBP)较对照组显著升高(137.2±9.4mmHg vs 92.3±10.3mmHg,P<0.01),并且逐渐升高至术后4周趋于平稳。(2)术后5周起高血压组尿β2-MG显著高于对照组[(110.28±11.25)ng/L vs(56.68±9.51)ng/L,P<0.01],并且有继续增高的趋势。两组BUN、Scr在整个实验过程中没有显著性差异。(3)光镜、电镜观察均可见高血压组肾脏发生病理改变;足细胞超微结构发生病变。(4)免疫荧光可见高血压组PCX表达明显减少,其面积密度值显著低于对照组(0.204±0.042 vs 0.296±0.039,P<0.01),且PCX表达与尿β2-MG呈显著负相关(r=-0.927,P<0.01)。结论 PCX蛋白表达降低可能是参与高血压肾损害的机制之一,其可能是导致肾小球电荷屏障受损、尿蛋白排泄增加、肾功能受损、肾脏病理及足细胞超微结构发生病变的基础之一。     

检测尿足细胞在活动性肾小球疾病中的意义

目的:探讨检测尿足细胞的方法可否作为无创评估肾小球损伤的指标.方法:采用抗人足细胞标记蛋白-Podocalyxin(PCX)抗体进行间接免疫荧光染色.60份尿标本采自我院肾内科住院患者,于肾活检前留取晨尿检测尿沉渣中足细胞,30份尿标本采自健康志愿者作为对照.60例患者均经皮肾活检,肾组织行光镜、免疫荧光和电镜检查作出病理诊断.根据肾小球病变活动性炎症损伤与慢性损伤分为两组,并与尿足细胞阳性和阴性发生率进行对比分析.结果:⑴间接免疫荧光尿沉渣染色抗足细胞PCX抗体仅与足细胞特异结合,可用于检测尿足细胞.⑵尿足细胞见于成人多种类型肾小球疾病,而健康成人尿足细胞阴性.⑶肾小球活动炎症性损伤者尿足细胞阳性率72%,慢性损伤者尿足细胞阳性率22.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).⑷尿足细胞阳性组肾小球病理平均活动指数积分154±60,尿足细胞阴性组肾小球病理平均活动指数积分82±46,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:小鼠抗人足细胞PCX单克隆抗体尿沉渣染色,是一种特异性检测尿足细胞的方法,这项无创检查可作为预测肾小球疾病活动的指标.     

肾病综合征患者尿足细胞与临床病理关系的分析

目的通过观察肾病综合征（NS）患者尿足细胞与临床病理关系,探讨尿足细胞检测代替肾活检的可能性。方法选取80例NS患者被肾穿前1d的晨尿和20例正常对照的晨尿各100ml,离心涂片。用抗人足细胞标记蛋白Podocalyxin（PCX）单克隆抗体分别对尿沉渣涂片和肾组织切片进行免疫组化及免疫荧光检测,并于光学显微镜下计数尿足细胞数目及肾小球足细胞密度,比较NS各种类型尿足细胞排泄情况与。肾脏临床病理的相关性;同时收集患者的临床一般资料和实验室资料,并分析其与尿足细胞和肾组织足细胞的关系。结果各组间年龄、性别构成及临床生化指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。正常对照组免疫组化及免疫荧光检测尿未见足细胞,免疫组化及免疫荧光检测肾组织PCX,可见大量足细胞;NS不同类型组与正常对照组尿足细胞及肾小球足细胞密度相比有统计学差异（P〉0．05）;各类型组中,以局灶节段性。肾小球硬化（FSGS）组患者尿中检出的足细胞数最多,其次是系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）组,再次是膜性肾病（MN）、微小病变性肾病（MCD）。各组患者尿足细胞数与24h尿蛋白量及肾小球病理积分呈正相关（P〈0．05）,与血浆白蛋白、肾小球肾足细胞密度呈负相关（P〈0．05）,与血肌酐无相关性（P〉0．05）;各组患者肾小球足细胞密度与24h尿蛋白量及尿足细胞呈负相关（P〈0．05）,与血浆白蛋白及肾小球病理积分呈正相关（P〈0．05）,与血肌酐无相关（P〉0．05）。结论尿足细胞的检测是一项可反映肾病综合征不同病理类型病情轻重的无创性指标;尿足细胞数有可能作为反应肾脏病变进展的重要指标。     

紫癜性肾炎患儿血清基质金属蛋白酶水平与肾脏损害的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在紫癜性肾炎(HSPN)患儿中的作用及其与肾脏损害的关系。方法收集24例紫癜性肾炎(HSPN)、27例过敏性紫癜(HSP)患儿及20例健康对照组儿童的血清。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组儿童血清MMP-9、TIMP-1及TNF-α的含量,生化分析仪检测HSPN组和HSP组儿童的血清肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG),双缩脉法检测24 h尿蛋白定量。结果①HSP组和HSPN组患儿的血清MMP-9、TIMP-1及TNF-α水平均高于对照组。②HSPN组患儿血清β2-MG、24 h尿蛋白量较HSP组患儿显著增高;HSP组患儿血清β2-MG和血Cr高于对照组,24 h尿蛋白无显著性差异。③HSPN组患儿血清MMP-9及TNF-α含量与24 h尿蛋白定量、血β2-MG、Cr呈显著正相关;血清TIMP-1含量与24 h尿蛋白定量、血β2-MG、血Cr、均无显著相关性。结论血清MMP-9水平增高与肾脏损害的程度密切相关,血清MMP-9可能参与了HSPN的发生发展。     

雷米普利对糖尿病肾病患者尿足细胞数量的影响

目的：应用雷米普利治疗2型糖尿病（T2DM）的肾病患者,比较治疗前、后尿足细胞数量的变化,并探讨雷米普利对肾脏的保护机制。方法：选取56例糖尿病肾病（DN）微量白蛋白尿期的患者,随机分为治疗组和对照组。治疗组每日给予雷米普利5mg,连续服用3个月。应用小鼠抗人。肾小球足细胞特异性蛋白（Podocalyxin,PCX）单克隆抗体,采用间接免疫荧光技术检测尿中PCX阳性染色细胞,计数尿足细胞数量。比较治疗前、后两组的尿足细胞数量。结果：雷米普利治疗组的尿足细胞数量较基线明显下降（P〈0．05）,与对照组相比差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：雷米普利可以减少DN患者的尿足细胞数量,保护肾功能。     

血清及尿液单核细胞趋化蛋白1检测在过敏性紫癜肾炎患儿诊断中的价值比较

目的比较血清及尿液单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）检测在过敏性紫癜肾炎（HSPN）患儿诊断中的临床价值。方法选取淮安市肿瘤医院2008年2月至2012年10月住院治疗的78例过敏性紫癜肾炎患儿,根据尿白蛋白排泄率（UAER）分为正常白蛋白尿组（A组,27例）,微量白蛋白尿组（B组,25例）,大量白蛋白尿组（C组,26例）,根据疾病病情分为缓解期（n=36例）,急性期（n=42例）,比较各组血清及尿液MCP-1表达水平及其与尿蛋白排泄率（UAER）的相关性。结果随UAER增加各组尿液MCP-1表达水平呈明显递增趋势（P〈0.05）,而各组血清MCP-1表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;急性期尿液MCP-1表达水平显著高于缓解期（P〈0.05）;缓解期及急性期HSPN患儿血清MCP-1表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;HSPN患儿尿液MCP-1表达水平与UAER呈正相关（r=0.782,P〈0.05）,HSPN患儿血清MCP-1表达水平与UAER无相关（r=0.327,P〉0.05）。结论尿液MCP-1表达水平与HSPN患儿肾脏组织病变程度和尿蛋白有着密切相关性,对HSPN患儿疾病预后情况判断和临床治疗方案指导有着十分重要的意义。     

小儿过敏性紫癜性肾炎肾脏病理分级与中医辨证的关系

目的探讨小儿过敏性紫癜性肾炎肾脏病理分级与中医辨证分型的关系。方法对114例小儿过敏性紫癜（血尿伴蛋白尿型）患儿肾组织活体检查结果与中医证型的关系进行研究。结果中医辨证分型中,血热夹瘀型最多,构成比为0.614 0,其次为阴虚夹瘀型（构成比为0.245 6）、风热夹瘀型（构成比为0.096 5）,气阴两虚夹瘀型（构成比为0.043 9）。病理分级以Ⅲ级病变为最多,构成比为0.561 4,其中Ⅲa型最为常见,构成比约为0.412 3。结论目前中医水肿辨证分型并不完全适用于过敏性紫癜性肾炎的辨证,应加强对血瘀证的认识。     

硫辛酸对糖尿病肾病Ⅲ期患者PCX 和VEGF 的影响

目的 探讨糖尿病肾病（DN）Ⅲ期患者尿足细胞标志蛋白（PCX）及血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化及α- 硫辛酸（ALA）对其的影响。方法 122 例2 型糖尿病患者根据24 h 尿白蛋白排泄率分为单纯糖尿病组（SDM 组）62 例、DN Ⅲ期组（NA 组）60 例。NA 组随机分为ALA 治疗组（NA Ⅰ组30 例）和常规治疗组（NA Ⅱ 30 例）,另选正常对照者（NC 组）60 例。比较ALA 治疗前及治疗2 周后丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、尿PCX 及血VEGF 的变化。结果 NA Ⅰ组经ALA 治疗后MDA、UAER、PCX 及VEGF 较治疗前下降（P <0.05）,SOD 及GSH-px 较治疗前上升（P <0.05）。结论 ALA 可通过抗氧化应激保护DN Ⅲ期患者肾小球足细胞。