金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨中药金叶败毒制剂(简称中药)对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(HEL)增殖及凋亡的影响。方法:用HCMVAD169感染人胚肺成纤维细胞,分别用金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预后,采用MTT法检测HCMV感染及药物干预后HEL细胞的增殖活性,并采用流式细胞术检测HEL、HCMV感染及药物干预后细胞凋亡指数。结果:在HCMV感染48h内,细胞增殖及凋亡指数与细胞对照组无明显差异。HCMV感染72h后,细胞增殖明显受抑制,凋亡指数明显增高;而两种药物干预后,72h后明显促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论:金叶败毒制剂可能通过促进HCMV感染细胞的增殖,抑制感染细胞的凋亡而发挥抗病毒作用。     

金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染宿主细胞周期的调节作用

目的:探讨中药金叶败毒制剂(简称中药)对人巨细胞病毒(HCMV)感染宿主细胞周期的影响。方法:用HCMV AD169感染人胚肺成纤维细胞(HEL),用金叶败毒制剂干预后,采用免疫组织化学法检测HCMV感染及中药干预后宿主细胞P16蛋白的表达,并采用流式细胞技术检测HCMV感染及药物干预后宿主细胞周期。结果:在HCMV感染48h后,金叶败毒制剂能明显抑制宿主细胞P16蛋白的表达。经中药干预后,在病毒感染24h后,宿主细胞处于S期细胞明显减少;病毒感染48h后,宿主细胞处于G2/M期的细胞明显增多;在HCMV感染72h后,宿主细胞均表现为S期细胞明显减少,G2/M期细胞明显增多,而G0/G1期细胞亦明显增多。结论:金叶败毒制剂可能通过抑制HCMV感染细胞P16蛋白的表达,促进感染细胞从S期进展到G2/M期,促进细胞周期进程而发挥抗病毒作用。     

金叶败毒颗粒抑制人巨细胞病毒vMIA蛋白表达及作用的实验研究

目的:通过研究金叶败毒颗粒对人巨细胞病毒vMIA蛋白表达及作用的调节,探讨金叶败毒颗粒体外对HCMV感染的预防、阻断和治疗效应及其机制。方法:采用细胞形态观察测定病毒的感染性。应用免疫荧光检测vMIA蛋白在病毒感染过程中表达的规律,在病毒感染不同阶段(病毒吸附前、吸附时和吸附后)应用金叶败毒颗粒,观察药物对HCMV vMIA蛋白表达水平的影响。转染pcDNA UL37xl质粒,经G418筛选,Western blot鉴定vMIA的表达。应用流式细胞术检测药物对TNFα+CHX攻击后细胞凋亡指数的影响。结果:HCMV感染后4 h vMIA开始表达,在病毒感染48h表达最显著。金叶败毒颗粒可显著抑制HCMV vMIA蛋白的表达,其作用较更昔洛韦弱。金叶败毒颗粒可以恢复被vMIA抑制的TNFα诱导的凋亡,但更昔洛韦无此功效。结论:金叶败毒颗粒可显著抑制HCMV vMIA蛋白的表达及其作用,这可能是金叶败毒颗粒抗HCMV效应的主要作用机制之一。     

人巨细胞病毒主要立即早期蛋白功能研究进展

人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染在人群中广泛存在,是导致新生儿出生缺陷最主要的感染性因素和免疫低下病人的重要病原,其最先表达的主要立即早期蛋白(major immediate-early proteins,MIEPs)在HC-MV与宿主细胞的相互作用中发挥重要作用。本文对MIEPs在病毒增殖,调控宿主细胞基因表达、细胞周期和凋亡以及诱导免疫和炎症反应中的作用进行综述。     

核因子-kB、p53及Bcl-2在铅诱导PC12细胞凋亡中的作用

目的 探讨核因子kB(NF-KB),p53及Bcl-2在铅诱导PC12细胞凋亡中的作用.方法 应用细胞培养、流式细胞术、RT-PCR、Western Blot的方法分析NF-kB、p53、Bel-2基因的表达情况,研究醋酸铅诱导PC12细胞凋亡及其分子机理.结果 PC12细胞经不同浓度醋酸铅(100、200和400μmol/L)处理24h后,用流式细胞仪检测其凋亡率(n=3),铅组凋亡率明显高于对照组,改变呈剂量依赖性.差异有显著性(P<0.05).RT-PCR结果显示NF-kB p65 mRNA、p53 mRNA转录水平随铅剂量升高而升高(P<0.05),两基因表达的改变呈剂量依赖性.Western Blot结果显示,表明随着铅浓度的增加,Bcl-2蛋白表达逐渐降低.结论 铅诱导PC12细胞凋亡的这种效应可能与增强NF-kB及D53基因的活性、降低Bcl-2基因的活性有关.     

糖尿病患者活动性人巨细胞病毒感染监测及临床意义

目的 临测糖尿病患者活动性人巨细胞病毒(HCMV)感染,并探讨其临床意义.方法 在HCMV pp65基因内自行设计一对引物,建立RT-PCR检测727例糖尿病患者及230名健康献血者外周血白细胞HCMVpp65 mRNA转录水平,同时应用抗体捕获酶联免疫法检测HCMV pp65-IgM.结果 糖尿病患者HCMV-IgM及mRNA阳性率分别为11.14%和16.64%,与对照组(0.87%、2.17%)相比均差异有统计学意义(P<0.01);比较不同年龄段HCMV感染率,结果发现发病年龄<30岁的患者中HCMV-mRNA阳性率明显高于其他年龄组,从病程来看,病程<1年的糖尿病患者HCMV-mRNA阳性检出率最高.结论 糖尿病患者易发生活动性的HCMV感染,RT-PCR检测HCMV pp65和抗体捕获HCMV pp65特异性IgM可快速有效地确诊HCMV活动性感染的发生.     

人巨细胞病毒蛋白IE1及pp65在HEL细胞中表达的时空特性

目的研究HCMV感染HEL细胞后,病毒蛋白IE1及pp65在不同时间点的亚细胞分布及其表达量-时效变化相关性。方法HCMV感染HEL细胞后,吸附2h,维持培养0、2、4、6、10、22及46h后,用病毒蛋白IE1的单克隆抗体及蛋白pp65的单克隆抗体做免疫细胞化学染色,检测此两种蛋白的胞内分布;同时运用图像分析系统对此检测结果进行灰度值测定,并利用方差分析分析此测定结果。结果IE1蛋白仅在核内检测到;表达趋势是4~6hp.i.呈表达上升趋势,6~8hp.i.又下降。pp65首先于仅在核内被检测到,之后也分布于胞浆中。pp65表达于2~8hp.i.表达增多,8~24hp.i.呈胞内稳定表达,24~48hp.i.表达降低。结论IE1蛋白及pp65表达的亚细胞分布具有时空特异性;两种蛋白的表达量上都表现为量-时效相关性;本研究间接反映了病毒复制增殖的连续过程。     

铅抑制NF-kB、Bcl-2蛋白表达诱导人肾小管上皮细胞凋亡

目的 研究醋酸铅对人肾小管上皮细胞系HK-2细胞NFJeB、Bcl-2表达的影响及与细胞凋亡的关系.方法 体外培养HK-2细胞分为0、2.5、5、10、20 μmol/L醋酸铅组,分别染毒72 h,应用间接免疫荧光-流式细胞术检测HK-2细胞NF-kB、Bel-2蛋白表达的改变,用Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡.结果 随着染铅剂量增加HK-2细胞NF-KB、Bcl-2蛋白表达逐步降低,NF-kB与Bcl-2降低显著相关(r＝0.71,P＜0.01);细胞凋亡率随着铅剂量增加而增加,在5、10、20μmol/L铅组与对照组比较差别有统计学意义(P＜0.01);细胞凋亡率与NF-kB、BcI-2蛋白表达呈明显负相关(r＝-0.625,P＜0.01;r＝0.709,P＜0.01).结论 醋酸铅能下调HK-2细胞.NF-kB、Bcl-2基因的表达,这可能是其诱导HK-2细胞凋亡的途径之一.     

microRNA x凋亡信号通路Y在人巨细胞病毒感染所致神经细胞凋亡中的作用及机制研究

目的研究microRNA x凋亡信号通路Y在人巨细胞病毒(HCMV)感染致神经细胞凋亡中的机制。方法选取2015年1月-2016年12月60例HCMC感染致神经细胞凋亡患者为观察组,选择正常凋亡60例为对照组,选择60例体检正常者为健康组,分析miRNAs在健康人、正常神经凋亡及HCMC感染致神经细胞凋亡患者中的表达。结果健康组、对照组miR-27a、miR-664b表达低于观察组,miR-30a表达高于观察组(P<0.05);TNM分级Ⅲ级~Ⅳ级、肿瘤数量>1个、肿瘤>5 cm及有血管侵犯HCMC感染致神经细胞凋亡血清miR-27a高表达率高于TNM分级为Ⅰ级~Ⅱ级、肿瘤数量1个、肿瘤≤5 cm及无血管侵犯HCMC感染致神经细胞凋亡患者(P<0.05);转染48 h、72 h后,HCMC感染致神经细胞凋亡细胞Caspase-3增殖计数高于未转染组(P<0.05)。结论microRNA x控制HCMV病毒复制,在HCMV感染致神经细胞凋亡中有抗病毒作用,可为HCMV感染治疗靶向点。     

大黄素体外抗人巨细胞病毒药效实验研究

目的研究大黄素体外抗人巨细胞病毒(HCMV)的作用并探讨其抗病毒的分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的大黄素与更昔洛韦对人胚肺成纤维细胞存活率及其对HCMV抑制率的影响,采用曲线回归计算药物浓度与细胞存活率、病毒抑制率的回归方程,计算药物的半数毒性浓度(TC50)和病毒半数抑制浓度(IC50),以及治疗指数(TI),建立HCMV病毒感染细胞模型,予以更昔洛韦及大黄素干预,分为病毒对照组、大黄素组,采用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞感染后0.5h!2h!24h即刻早期基因(ul122)!早期基因(ul54)与晚期基因(ul83)mRNA动态表达情况。结果大黄素与更昔洛韦的TC50分别为75.96μg/ml和167.43μg/ml,IC50分别为7.31μg/ml和26.50μg/ml,TI分别为10.39和6.31;病毒感染后三个时间点检测大黄素组ul122mRNA表达量(0.61±0.06、1.62±0.16、2.16±0.18)与ul54mRNA表达量(0.82±0.04、4.23±0.08、970.33±52.04)均低于病毒对照组与更昔洛韦组;24h后大黄素组ul83mRNA表达量(1529.33±107.06)低于病毒对照组与更昔洛韦组。结论大黄素的治疗指数高于更昔洛韦,大黄素具有良好的抗人巨细胞病毒HCMV的临床应用前景,同时大黄素在细胞水平上可抑制HCMV AD169株的即刻早期、早期、晚期基因的转录水平,表明大黄素对HCMV病毒基因的早期干预是其抗病毒的主要环节。     

SENSITIVITY of human populations to human and avian tuberculins

In reviewing the development in veterinary practice of comparative testing with tuberculins prepared from different types of mycobacteria for the purpose of separating cattle with specific and non-specific tuberculin sensitivity, it appeared that similar methods might be useful for the analogous problem of separating specific and non-specific tuberculin sensitivity in human populations. The results of a preliminary investigation along this line are reported in the present paper.Working in several parts of India, a special TRO research team tested more than 3,000 persons with serial doses of both a human and an avian PPD tuberculin corresponding to 1, 10, and 100 TU. An additional 6,000 were tested only with serial doses of human tuberculin.Presumptive evidence of non-specific sensitivity in some of the populations was found from the results of the tests with human tuberculin. Discrepancies in the frequencies of weak-dose and strong-dose reactors in different geographic areas, together with evidence from previous studies, suggested that most of the persons with strong-dose reactions could be regarded as having non-specific tuberculin sensitivity.RESULTS OF COMPARATIVE TESTS WITH HUMAN AND AVIAN TUBERCULINS FURTHER INDICATED THAT THE TUBERCULIN SENSITIVITY IN THE POPULATIONS STUDIED MUST BE CAUSED BY DIFFERENT SENSITIZING AGENTS: one producing a high degree of sensitivity brought out more effectively by the human than by the avian tuberculin, the other producing a low degree of sensitivity brought out more effectively by the avian than by the human tuberculin. The groups with high-grade sensitivity-those who react to the weak-dose test-can undoubtedly be regarded as having specific sensitivity, the kind caused by infection with virulent tubercle bacilli; the group who react only to the 100 TU test have apparently been sensitized by a different agent (or agents). Though the identity of the non-specific agent is still unknown, its antigenic properties would seem to be more closely related to avian than to human tuberculin.     

人才资源向人才资本转变在我院的实践

大型综合性医院面对我国加入WTO的严峻挑战，必须转变观念，形成创新机制。总结四川大学华西医院在实施人才资源向人才资本转变战略中的原则、做法及取得的成效，可以看出，华西医院主要从调整人才增量和人才存量两方面进行实践，保证了医院可持续发展。     

Double immunoelectron microscopic labelings of human chorionic gonadotropin and human placental lactogen in human chorionic villi

Simultaneous immunoelectron microscopic localization of human chorionic gonadotropin (HCG) and human placental lactogen (HPL) was examined on the same ultrathin section of human chorionic villi by means of the double labeling technique. Using specific rabbit antisera against HCG and HPL followed by goat anti-rabbit IgG-coated colloidal gold of different sizes (15 nm and 5 nm), immunoreactions of HCG were concentrated on middle-sized secretory granules of 200-300 nm and large dense bodies of 500-1000 nm, while those of HPL were exclusively located on small secretory granules of 80-180 nm. The present experiment provides direct evidence for our previous data that HCG and HPL seem to be stored in different granular components in the syncytiotrophoblast.     

Navigating human development

This paper sets out to examine the role which affect may have in the understanding of human development. An ecological approach to perception provides a base from which which to discuss issues concerning both the adaptive function of affect as well as the role it plays in events, affordances and attunements. A contextual metaphor is employed to show what typically happens with human interactions. The role of affect in development is explored and a metaphor of “navigation” is put forward as an appropriate means for describing purposive negotiations of whole events.