载长春新碱长循环聚合物超声微泡造影剂的制备及性能评价

目的 制备载硫酸长春新碱的聚乳酸-乙醇酸-聚乙二醇共聚物(PLGA-PEG)超声微泡造影剂,观察微泡的一般特性及体内、外显影效果.方法 采用W/O/W复乳-溶剂挥干法制备超声微泡造影剂,正交实验设计获得最佳制备工艺,采用紫外分光光度法测定微泡的包封率和载药量,光学显微镜观察微泡形态,以马尔文激光粒径测量仪测定微泡造影剂的粒径、Zeta电位,并观察微泡在兔心腔的显影效果.结果 获得的微泡造影剂为球形,平均粒径约为1.27 μm,包封率为(37.63±0.61)%,Zeta电位为-24.88 mV,静脉注射载药微泡后,能增强兔心腔超声显影效果.结论 采用复乳-溶剂挥干法成功制备超声微泡造影剂,能增强体内外超声显影效果.     

一种新型高分子聚合材料微泡超声造影剂的制备与体外显影实验

目的 探索应用人工合成高分子聚合材料制备微泡超声造影剂的方法并观察其体外显影效果.方法 采用人工合成高分子聚合物乳酸/羟基乙酸共聚物（PLGA）作为成膜材料,通过双乳化法首先制备包裹水滴的PLGA微球,再通过真空冷冻干燥使微球内的水分升华,形成空隙,然后在冷冻干燥室内缓慢冲入氟烷气体,从而制备内含氟烷气体的PLGA微泡超声造影剂高聚显.将一定浓度的高聚显溶液水囊与脱汽水水囊在体外进行超声显影实验,观察其显影效果.结果 光镜和扫描电镜观察,采用该法制备的高聚显微泡造影剂呈球形,形态规则,大小均匀,表面光滑;高聚显冻干粉复溶后分散度好;激光测径仪检测其粒径分布窄,平均粒径大小与制备过程中声振仪的设置相关;体外显影效果好.结论 采用该方法制备的PLGA微泡超声造影剂高聚显具有大小均匀、显影效果好、抗压性强等特点,同时由于其外壳材料能在体内生物降解,对人体无毒副作用,因而具有广阔的应用前景.     

包裹Gd—DTPA的高分子材料超声造影剂的制备与体外显影实验

目的 制备一种多功能的超声造影剂,对其理化性质及体外显影进行研究.方法 采用在体内能生物降解的人工合成高分子聚合物乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)作为载体,通过双乳化法和冷冻干燥技术制备包裹磁共振对比剂钆喷酸葡胺(Gd-DTPA ,Gd)和氟碳气体的PLGA微泡造影剂(Gd-PLGA造影剂).观察其外观、形态、体外显影效果,检测其粒径、电位及包裹Gd的能力.结果 采用本法成功制备了Gd-PLGA造影剂;光镜及电镜观察其形态规则,呈球型,大小均匀,平均粒径为(1.47±0.38) μm,电位为(-28.0±12.4) mV;包封率为(64.37±2.5)%;能实现体外超声与磁共振显像.结论 PLGA包载Gd制备的Gd-PLGA理化性质稳定,具有较高的包封率,体外超声与磁共振显影效果好,有望成为一种新型的超声造影剂以及基因或药物治疗的载体.     

载血卟啉的乳酸/羟基乙酸共聚物超声微泡造影剂制备及工艺优化

目的 探讨载声敏剂血卟啉(hematoporphyrin,HP)的高分子材料乳酸/羟基乙酸共聚物[Poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]超声微泡造影剂的优化制备工艺.方法 采用双乳化法制备包裹HP的PLGA超声微泡造影剂,通过正交设计筛选出比较理想的制备工艺,并对所制备的造影剂进行药物体外释放评估及体外超声造影观察.结果 载HP的PLGA造影剂(HP-PLGA)平均粒径602.3 nm,平均包封率63.5%,平均载药量2.15%,电位-(17.1±1.6)mV,体外14 d缓释约86.5%,体外超声显影良好.结论 通过采用双乳化法制备的HP-PLGA造影剂,具备缓释长效的特性,体外显像效果好,符合理想药物载体的基本特性,为实时监控下体内声动力治疗肿瘤提供了一种新型的药物剂型.     

自制高分子微泡超声造影机械指数与频率和峰值强度的相关性

目的 探讨兔体内自制高分子微泡CEUS机械指数和频率与峰值强度的相关性。方法 采用单乳化法制备包裹全氟戊烷的嵌段共聚物微泡造影剂,固定其他超声扫描条件,对6只新西兰大白兔于机械指数0.04、0.09、0.17、0.34和超声频率3.5、5.0、6.5、8.0 MHz下进行肾脏CEUS,分析机械指数和频率与峰值强度的相关性;静脉注射10倍造影剂量微泡,观察毒性反应。结果 自制微泡平均粒径为（3.92±1.43）μm。兔体内峰值强度与机械指数呈正相关（r=0.99,P<0.05）,与超声频率呈负相关（r=-0.93,P<0.05）;静脉注射大剂量微泡后,未见明显毒性反应。结论 采用自制高分子微泡作为造影剂对兔进行CEUS时,峰值强度与机械指数呈正相关,与超声频率呈负相关;微泡安全性良好。     

纳米级超声造影剂制备及成像的实验研究

目的 探讨纯度较高的纳米级超声微泡造影剂的理化性质及体内成像效果.方法 机械振荡法与低速离心法结合制备纳米级微泡,观察微泡形态,检测其平均粒径,并观察其增强正常兔肝显影的情况,并与微米级微泡造影剂进行比较.结果 光镜以及透射电镜观察,微泡呈圆形,分布均匀,无聚集现象.Zeta SIZIER 3000测定微泡粒径均值为623.4 nm,微泡表面电位均值1.3 mV.注射纳米级造影剂于新西兰大白兔体内能持续增强肝的显像效果,与微米级造影剂对比无明显差异.结论 纳米级的微泡造影剂大小合理,分布均匀,显像效果强,为下一步研制小型化靶向造影剂奠定了基础.     

一种载基因脂质超声造影剂的制备及特性的实验研究

目的制备一种可作为基因载体的脂质超声造影剂,对其理化性质和兔肾显影效果及载基因的能力进行研究。方法采用机械振荡法制备一种可作为基因载体脂质超声微泡造影剂,观察60Coγ射线灭菌前后造影剂外观、形态、浓度、平均粒径和电位改变,并观察其对正常兔肾显影效果,检测其结合基因的能力。结果自制脂质微泡的平均粒径范围为2.11~6.43μm,平均粒径2.79μm,粒径分布均匀,浓度约为(3.16±0.29)×109/ml;经60Coγ射线灭菌后在显微镜下观察微泡形态,粒径大小无明显变化;体内造影显示该造影剂能够有效增强兔肾实质回声;基因结合量效优化结果显示,造影剂的最大基因结合的效率为22%,最大基因结合量为0.45μg/ml。结论自制脂质超声造影剂符合理想超声造影剂的要求,性质稳定,制备简易,载基因效率高,可望成为一种新型的超声微泡造影剂以及基因或药物治疗的载体。     

含生物素化脂膜超声造影剂的制备与初步评价

目的 制备一种含生物素化脂膜的超声造影剂,并对其功能进行初步评价.方法 以冷冻干燥法在自制＂脂氟显＂（对照微泡）的基础上制备含生物素化脂膜超声造影剂微泡,检测其理化性质和造影功能,同时应用激光共聚焦显微镜和平行板流动腔法观察含生物素化脂膜微泡与链亲和素的黏附性.结果 ①含生物素化脂膜微泡造影剂在理化性质与小鼠肝脏造影显像方面能力与对照微泡比较差异无统计学意义（P〉0.05）;②与异硫氰酸荧光素（FITC）标记的链亲和素孵育后,含生物素化脂膜微泡荧光检测呈阳性,对照微泡为阴性;③含生物素化脂膜微泡可结合于链亲和素包被的培养皿上,且随着链亲和素包被浓度的增加其结合稳定性也相应提高.结论 应用冷冻干燥法在制备＂脂氟显＂微泡造影剂的基础上,可成功制备含生物素化脂膜超声微泡造影剂,为今后制备靶向显影及载药（基因）超声造影剂奠定了基础.     

载重组腺病毒Ad-EGFP/HIF-1α的超声造影剂的制备及其特性检测

目的 制备一种载重组腺病毒的脂质超声微泡造影剂,对其物理特性、载病毒的能力及在兔肝脏的显影效果进行研究.方法 采用机械振荡法及分层吸附法制备一种载重组腺病毒Ad-EGFP/HIF-1α的脂质超声微泡造影剂,用DFY-Ⅱ型超声图像定量分析诊断仪检测微泡粒径和浓度;检测其结合腺病毒的能力及观察对正常兔肝脏的显影效果.结果 载重组腺病毒Ad-EGFP/HIF-1α的超声微泡分布均匀,平均粒径为(1.17±0.82)μm,浓度为(2.50±0.12)×10~9/mL;该造影剂的最大腺病毒结合的效率为30%;体内造影显示该造影剂能够有效增强兔肝脏实质回声.结论 自制载重组腺病毒的微泡造影剂符合理想超声造影剂的要求,性质稳定,制备简易,载腺病毒效率高,为超声靶向微泡破裂基因释放技术的发展开辟新思路.     

新型聚内酯超声造影剂的体外基本特性研究

目的观察新型聚内酯微泡的体外物理化学特性及声学特性,以评价其作为超声造影剂的可行性。方法采用水/油/水乳液-溶剂蒸发法制备聚内酯中空微泡,部分在制备过程中加入荧光剂。光学显微镜、扫描电镜及激光共聚焦显微镜观察微泡大小形态及内部特征;Coulter计数仪测定粒径分布和微泡浓度;体外声学装置测试微泡的体外背向散射和声衰减特性。结果该新型聚内酯超声造影剂为含空气的冻干粉剂,扫描电镜和激光共聚焦显微镜证明该聚内酯微球是中空微泡,平均粒径1.5μm,98%的微泡粒径<8μm,0.1 g多聚体微泡干粉溶于5 ml蒸馏水中的浓度为0.1×109~1×109/ml。体外声学测试微泡具有较强的散射性能。结论该聚内酯微泡符合作为超声造影剂的条件,是一种新型的超声造影剂。     

携紫杉醇和抗人表皮生长因子受体2抗体高分子造影剂的制备及体外寻靶实验研究

目的制备一种携紫杉醇和抗人表皮生长因子受体2（HER-2）抗体的高分子造影剂,并考察其体外寻靶能力及体外显像效果。 方法通过双乳化法及碳二亚胺法制备携紫杉醇和抗HER-2抗体的高分子造影剂,并对其一般性质进行检测,激光共聚焦显微镜观察制备的靶向载药造影剂与SKBR-3乳腺癌细胞的结合能力,并使用高频超声观察其体外显影效果。 结果载药靶向羧基端乳酸（PLGA）纳米粒平均粒径为（318.07±12.51）nm,表面电位（-2.16±0.31）mV,包封率为（60.00±3.40）%,载药量为（6.00±0.34）%,粒子呈规则球形,大小均一,分散性好。激光共聚焦显微镜观察到抗HER-2抗体和羧基端乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA-COOH）造影剂大量结合,流式细胞术观察到两者的结合率高达（99.59±0.42）%,体外寻靶实验示靶向载药高分子超声造影剂与SBKR-3乳腺癌细胞较强的结合在一起。体外成像实验显示,靶向载药高分子造影剂显像呈细腻均匀点状强回声。 结论成功制备了携抗HER-2抗体和紫杉醇高分子造影剂,该纳米粒相关性能良好,有较高的载药量及包封率,且与高表达HER-2受体的乳腺癌细胞有较强结合能力,有较好的体外显像效果。     

全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释剂研制及其可行性

背景：如何提高全反式维甲酸疗效、稳定性和降低毒副作用是临床治疗所面临的最大问题。近年来用可生物降解的聚合物为材料,通过乳化包囊等分散技术将药物制备成微粒分散体系,用作缓释、控释注射剂的研究日益增多。目的：研制全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释微球肿瘤治疗剂,观察其体内外全反式维甲酸经时缓释变化规律。方法：采用乳剂-扩散溶剂挥发法制备全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释微球肿瘤治疗剂,扫描电镜检测微球外观及微球粒径,高效液相色谱法检测微球载药量、包封率及体内外释药量。结果与结论：所制微球治疗剂光滑圆整,大小均一,平均粒径（154.42±26.76）nm,载药率（16.5±1.45）%,包封率（87.84±4.79）%;体外释放实验证明该微球治疗剂可持续释放全反式维甲酸约50d,将其肌肉注射到大耳白兔体内,可稳定缓释全反式维甲酸近45d。结果表明该微球治疗剂载药量及包封率均较高,体内外释药平稳并且具有明显的长效缓释作用。     

全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释剂研制及其可行性

背景:如何提高全反式维甲酸疗效、稳定性和降低毒副作用是临床治疗所面临的最大问题。近年来用可生物降解的聚合物为材料,通过乳化包囊等分散技术将药物制备成微粒分散体系,用作缓释、控释注射剂的研究日益增多。目的:研制全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释微球肿瘤治疗剂,观察其体内外全反式维甲酸经时缓释变化规律。方法:采用乳剂-扩散溶剂挥发法制备全反式维甲酸-聚酸酐长效缓释微球肿瘤治疗剂,扫描电镜检测微球外观及微球粒径,高效液相色谱法检测微球载药量、包封率及体内外释药量。结果与结论:所制微球治疗剂光滑圆整,大小均一,平均粒径(154.42±26.76)nm,载药率(16.5±1.45)%,包封率(87.84±4.79)%;体外释放实验证明该微球治疗剂可持续释放全反式维甲酸约50d,将其肌肉注射到大耳白兔体内,可稳定缓释全反式维甲酸近45d。结果表明该微球治疗剂载药量及包封率均较高,体内外释药平稳并且具有明显的长效缓释作用。     

聚乳酸羟基乙酸/纳米羟基磷灰石-5-氟尿嘧啶复合微球的制备及体外释放

背景:由聚乳酸羟基乙酸/纳米羟基磷灰石复合材料制备的微球,在体外磷酸盐缓冲液中能够持续释放药物.目的:制备聚乳酸羟基乙酸/纳米羟基磷灰石-5-氟尿嘧啶复合微球,探讨纳米羟基磷灰石对复合微球的载药量、包封率和体外释放等性质的影响.设计、时间及地点:材料学体外观察,于2009-02/2009-07在华南理工大学材料学院实验室完成.材料:聚乳酸羟基乙酸为济南岱罡生物有限公司产品,纳米羟基磷灰石由华南理工大学特种功能材料教育部重点实验室自制,5-氟尿嘧啶为上海楷洋生物技术有限公司产品.方法:以水溶性抗癌药物5-氟尿嘧啶作为模型药物,先用纳米羟基磷灰石吸附药物,外包裹生物相容性好且可生物降解的聚乳酸羟基乙酸,采用单乳化溶剂挥发法(S/O/W)制备聚乳酸羟基乙酸,纳米羟基磷灰石-5-氟尿嘧啶复合微球.对载药前后的纳米羟基磷灰石进行透射电子显微镜、扫描电子显微镜观察和FTIR分析.采用扫描电镜、激光粒度仪和紫外分光光度计对微球的理化性质及体外释药性质进行分析.主要观察指标:纳米羟基磷灰石与5-氟尿嘧啶分子之间的相互作用,微球载药量和包封率,药物体外释放.结果:FTIR结果表明,纳米羟基磷灰石对5-氟尿嘧啶有较强的吸附作用.聚乳酸羟基乙酸/纳米羟基磷灰石-5-氟尿嘧啶复合微球的载药量和包封率分别为3.83%,86.78%,明显高于单纯的聚乳酸羟基乙酸-5-氟尿嘧啶微球.经过体外释放药物突释后,复合微球比单纯聚乳酸羟基乙酸微球的药物释放慢.在第27天,复合微球和单纯的聚乳酸羟基乙酸微球累积药物释率放分别为84.87%,99.87%.结论:与单纯的聚乳酸羟基乙酸-5-氟尿嘧啶微球相比,由于纳米羟基磷灰石对5-氟尿嘧啶存在较强的吸附作用,使聚乳酸羟基乙酸/纳米羟基磷灰石-5-氟尿嘧啶复合微球的载药量和包封率得到了较大提高,具有更好的药物缓释效果.     

携HMME-Gd液态氟碳纳米粒造影剂的制备及体外双模态成像研究

目的 制备携带血卟啉单甲醚-钆(HMME-Gd)的液态氟碳纳米粒(HMME-Gd-PFPNPs),观察体外US/MRI的成像效果。方法 以磷脂、胆固醇、HMME-Gd和全氟戊烷(PFP)为原料,用薄膜水化法和乳化法制备脂质体纳米粒HMME-Gd-PFPNPs。倒置光学显微镜、透射电子显微镜及激光共聚焦显微镜检测其基本表征;粒径分析仪分析粒径及表面电位;紫外分光光度计分析HMME-Gd的包封率;观察HMME-Gd-PFPNPs体外US/MRI成像的效果。结果 成功制备HMME-Gd-PFPNPs,光镜下为形态规则、大小均一的球形,电镜下为黑色的球形结构。HMME-Gd-PFPNPs平均粒径为(250.27 ± 11.9)nm,电位为(-26.17 ± 0.45)mV,HMME-Gd的包封率为(84.7 ± 0.35)%。在低强度聚焦超声辐照下,体外US成像信号显著增强,与LIFU激发强度成正相关。随HMME-Gd-PFPNPs浓度增加,体外MRI成像效果显著增强。结论 成功制备了携带HMME-Gd的液态氟碳纳米粒,可用于体外US/MRI双模态成像。     

靶向相变型载药纳米造影剂的制备及其基本性能和显像特性检测

目的 制备一种叶酸靶向相变型载羟基喜树碱(HCPT)的纳米粒(FA-HCPT-Fe3O4-PFP NDs),检测其基本性能和多模态显像特性.方法 采用旋转蒸发-超声法制备FA-HCPT-Fe3O4-PFP NDs.于制备后不同时间点使用电子显微镜测定纳米粒粒径以检测其稳定性;将纳米粒乳液加热后置于显微镜下观察其相变特性...     

肽功能化载GOD智能响应型相变纳米粒用于乳腺癌超声诊疗的实验研究

目的制备一种肿瘤归巢穿膜肽tLyp-1介导的载葡萄糖氧化酶（GOD）和全氟正戊烷（PFP）纳米粒（tLyp-1-GOD@PFP NPs），观察其基本表征、体内外超声成像以及对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向及体内外抗肿瘤能力。 方法采用乳化法制备tLyp-1-GOD@PFP NPs，观察其形态特点，检测其理化性质（粒径、电位、包封率、释药率）；低强度聚焦超声（LIFU）辐照纳米粒后，光镜下观察其相变情况，并观察其体内外超声成像效果；激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测纳米粒对MDA-MB-231细胞的靶向能力；使用CCK-8法和流式法评估在LIFU辐照下该纳米粒对MDA-MB-231细胞的抗肿瘤能力；通过荷瘤裸鼠尾静脉注射纳米粒并观察肿瘤体积变化和裸鼠体重以探索其体内抑瘤效果。 结果制备的纳米粒呈球形壳核结构，大小均一，其平均粒径为（227.4±12.5）nm，平均电位为（-16.5±2.7）mV，GOD的包封率为（12.93±0.46）%，载药率为（1.62±0.06）%，24 h释药率可达（51.73±3.22）%。光镜下相变和体外超声成像具有辐照时间依赖性。CCK-8和流式细胞仪检测结果证明tLyp-1-GOD@PFP NPs具有良好的生物安全性，并且在LIFU辐照后其抑瘤效果较好。同时，体内实验证实该纳米粒具有良好的超声造影能力和靶向能力，体内治疗结果也表明该纳米粒可有效抑制肿瘤增殖。 结论本研究成功制备了tLyp-1介导的载GOD和PFP的相变型纳米粒，对MDA-MB-231细胞具有特异靶向能力，在LIFU辐照下，可实现体内外超声成像，同时产生良好的抗肿瘤效果。     

载诺帝脂质微泡的制备及特性的实验研究

目的 制备载诺帝(去甲二氢愈创木酸)脂质微泡并测定其包封率、载药量及观察其体内超声显像效果.方法 采用机械振荡法制备载诺帝脂质微泡,测定其粒径大小、分布和Zeta电位、包封率、载药量;超声造影观察其在兔肝内的显像效果.结果 载药脂质微泡的浓度为(2.53±0.52)×109个/ml,粒径为(2.61±0.32)μm,Zeta电位为+(17.52±2.04)mV;脂质微泡诺帝的包封率(27.1±2.01)%,载药量为(10.9±0.90)%;微泡经外周静脉注射后,兔肝可见良好、持续的增强显像效果.结论 采用机械振荡法可以成功制备携带诺帝的脂质微泡,微泡可以通过肺血管床,符合静脉注射要求,在家兔体内获得了良好的显像效果.     

载基因及穿膜肽脂质超声造影剂制备的实验研究

目的 研究自制的脂质超声造影剂载基因及穿膜肽的能力,评价其物理性质及显影效果.方法 采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽的脂质超声造影剂,检测微泡形态、分布、浓度、粒径、表面电位及载基因和穿膜肽的能力,并观察其对兔心脏的显影效果.结果 自制载基因及穿膜肽脂质超声微泡造影剂的粒径为(2.27±0.38)μm,浓度为(3.07±0.42)×109个/ml,表面电位为(1.95±0.13)mV.该造影剂中基因的包封率为32%,穿膜肽的包封率为35%.体内造影显示该造影剂能有效增强心肌显影.结论 自制载基因及穿膜肽脂质超声造影剂符合理想超声造影剂的要求,载基因及穿膜肽的效率高,可作为携带基因等生物活性物质的载体材料.