原发性胆囊癌CD44v6表达的免疫组化研究

目的　研究CD44v6在胆囊癌中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组织化学Elivision二步法测定 40例原发性胆囊癌和 1 2例慢性胆囊炎 ,6例胆囊腺瘤、4例胆囊腺肌症等良性病变CD44v6表达。结果　CD44v6在胆囊癌组织中阳性表达率为 72 .5 % ,胆囊良性病变阳性表达率为 0 % ,胆囊癌组织与胆囊良性病变CD44v6表达水平之间有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,且CD44v6表达与胆囊癌淋巴结转移、临床分期、分化程度有关。结论　CD44v6基因的表达 ,有望成为判断胆囊癌淋巴结转移、病变发展以及评估预后的指标     

64例原发性胆囊癌中PTEN和c-erbB-2基因表达

[目的]研究PTEN和c-erbB-2基因在原发性胆囊癌（PGC）中的表达及其意义。[方法]应用原位杂交（DNA-RNA）技术与免疫组化SP法分别检测64例PGC中PTEN mRNA、PTEN蛋白和c-erbB-2蛋白的表达。以22例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎作为对照。[结果]PTEN mRNA和蛋白在PGC组织中的阳性表达率（56.3%,59.4%）均明显低于胆囊腺瘤组织（81.8%,90.8%）和慢性胆囊炎组织（100%,100%）（P〈0.05）。c-erbB-2蛋白在PGC组织中的阳性表达率（46.8%）均明显高于胆囊腺瘤组织（9.1%）和慢性胆囊炎组织（0）（P〈0.05）。[结论]PTEN低表达和c-erbB-2高表达共同参与了PGC的发生发展,其蛋白可作为判断PGC预后的指标。     

EMMPRIN在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的：研究细胞外基质蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）在原发性胆囊癌中的表达及临床病理意义。方法：应用免疫组化二步法检测EMMPRIN蛋白在44例原发性胆囊癌和12例慢性胆囊炎组织中的表达。结果：EMMPRIN蛋白在原发性胆囊癌中的阳性表达率为81.8%（36/44）,而在慢性胆囊炎中阳性率为8.3%（1/12）,具有显著差异（P〈0.05）。胆囊癌组织中EMMPRIN蛋白表达与肿瘤分化程度,AJCC分期有关（P〈0.05）,与性别、年龄、结石、病理类型均无关（P〉0.05）。结论：EMMPRIN蛋白在原发性胆囊癌组织中呈高水平表达,可作为判断原发性胆囊癌分化程度和预后的指标。     

胆囊癌组织细胞凋亡及PCNA表达的研究

目的检测胆囊癌细胞凋亡/PCNA比值与胆囊癌预后的关系.方法对38例胆囊癌石蜡包埋组织应用原位末端标记法(TUNEL)及免疫组化技术进行检测.结果不同分化程度癌组织中细胞凋亡和增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性率不同.分化程度高,细胞凋亡率高,PCNA阳性率低;分化程度低,细胞凋亡率低,PCNA阳性率高.结论细胞凋亡率与PCNA阳性率二者的比值可作为评估胆囊癌分化程度、判断患者预后的指标.     

慢性胆囊炎和胆囊癌组织中EGF、EGFR的表达及其意义

背景与目的:表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)及其受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)在肿瘤形成过程中起着重要作用,胆结石胆囊炎与胆囊癌关系密切,本研究通过观察EGF、EGFR在慢性胆囊炎、胆囊癌中的表达,探讨两者与胆囊癌发生的关系。方法:采用免疫组化SABC法检测手术切除的41例胆囊癌、26例单纯增生、14例不典型增生和10例正常胆囊组织中EGF、EGFR及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达。结果:EGF、EGFR阳性表达率在胆囊癌(63.4%、70.7%)、不典型增生(71.4%、85.7%)中分别高于单纯增生(15.4%、27%)和正常胆囊组织(0%、0%)(P<0.01);PCNA评分有随胆囊粘膜病变程度的加重而递增的趋势,在正常胆囊组织、单纯增生、不典型增生和胆囊癌中分别为1.0、1.0、1.9288±0.9972和3.0488±0.669,(P<0.01);EGF、EGFR表达与PCNA的表达有统计学意义(P<0.05),EGF、EGFR、PCNA的表达与胆囊癌TNM分期无统计学意义(P>0.05)。结论:EGF、EGFR的表达参与胆囊癌的发生,与细胞增殖活性相关。     

Ki-67抗原在原发性胆囊癌中的表达及其意义

目的探讨Ki-67抗原表达与原发性胆囊癌病理生物学行为的关系.方法采用免疫组化S-P法,检测胆囊良、恶性病变中Ki-67抗原的表达情况,以其表达阳性率评估胆囊癌组织的增生活性.结果Ki-67抗原在胆囊癌组织中的表达量显著高于胆囊良性病变(P＜0.01).但Ki-67抗原的表达强度与胆囊癌组织学类型、Nevin分期及病理分级无明显相关性(P＞0.05),与胆囊癌的突变型p53基因产物表达量呈明显正相关(P＜0.05).结论Ki-67抗原作为1个代表增殖活性的肿瘤标志,其过量表达是胆囊癌高度恶性的生物学行为的客观指标之一,对胆囊恶性肿瘤的病理诊断有较高的实用价值.p53基因可能通过基因突变增强胆囊癌细胞的增殖活性,从而使Ki-67抗原表达量明显增加.     

PTEN基因在非小细胞肺癌中表达的临床研究

目的研究PTEN基因在人非小细胞肺癌中的表达情况,探讨PTEN基因在人肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测143例非小细胞肺癌、20例正常肺组织及良性病变中PTEN蛋白的表达情况。结果在正常肺组织及肺良性病变组织中无失表达;肺癌组织中失表达率57.3%(82/143),两者比较差异有显著性(P<0.001)。肺癌组织中PTEN基因表达水平与肿瘤细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移程度存在相关性(P<0.001);PTEN蛋白失表达组肺癌患者的术后5年生存率显著低于表达组(P<0.001);吸烟组患者PTEN基因失表达率显著高于不吸烟组(P<0.001)。结论PTEN蛋白失表达与肺癌的发生、发展及预后有关;多因素分析表明,PTEN基因失表达是影响非小细胞肺癌预后的独立因素。     

癌基因c-fos和c-jun产物在胆囊癌中的表达

目的：探讨癌基因c-fos、c-jun产物在胆囊癌中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学SABC法观察c-fos、c-jun蛋白在10例正常胆囊组织、16例慢性胆囊炎和胆囊良性肿瘤28例恶性肿瘤中的表达。结果：c-fos、c-jun蛋白在胆囊癌中的阳性表达率均显著高于胆囊良性肿瘤、慢性胆囊炎和正常胆囊组织（P＜0．01），但c-fos、c-jun蛋白的表达强度与胆囊癌的TNM分期、组织学类型及癌组织分化程度无关（P＞0．05）。结论：癌基因c-fos、c-jun在胆囊癌的发生中可能起协同作用。     

原发性胆囊癌中PTEN和P53基因表达的研究

背景与目的：研究PTEN和P53基因在原发性胆囊癌（HGC）中的表达，以探讨它们在HGC发生发展中的作用，寻找胆囊癌诊断及预后的指标。方法：应用原位杂交（DNA-RNA）技术与免疫组化SP法分别检测64例HGC中PTEN mRNA、PTEN蛋白和P53蛋白的表达。以22例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎作为对照。结果：①PTEN mRNA和蛋白在HGC组织中的阳性率（56．3％，59．4％）均明显低于胆囊腺瘤组织（81．8％，90．8％）和慢性胆囊炎组织（100％，100％），（P〈0．05）。②P53蛋白在HGC组织中的阳性率（62．2％）均明显高于胆囊腺瘤组织（27．2％）和慢性胆囊炎组织（0．0％），（P〈0．05）。结论：PTEN缺失和P53突变型蛋白共同参与了HGC的发生发展。     

抑癌基因PTEN蛋白在胆囊癌中的表达及临床病理意义

目的:研究抑癌基因PTEN蛋白在胆囊癌组织中的表达及临床病理意义。方法:应用免疫组化检测PTEN在20例慢性胆囊炎,30例胆囊癌中的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果:PTEN蛋白在20例胆囊炎中全都呈阳性表达,而癌组织中PTEN的表达率为70.0%,癌组织中PTEN蛋白阳性表达与患者性别及年龄无明显相关性,但与组织分化程度明显相关。结论:PTEN蛋白在胆囊癌组织中阳性表达率降低,说明该基因表达下调可能在胆囊癌的发生发展中起重要作用。     

PTEN和p16基因蛋白在胆管癌和胆囊癌中表达的研究

目的探讨PTEN和p16抑癌基因在胆管癌和胆囊癌组织中的阳性表达及意义。方法用S-P免疫组化法测定PTEN、p16基因蛋白在63例胆管癌及胆囊癌石蜡标本的阳性表达率。结果胆管癌PTEN和p16阳性表达为42.4%和36.3%,低于胆囊癌的43.3%和46.6%(P>0.05);胆囊癌组低分化组p16表达明显低于高、中分化组(P<0.05);PTEN表达与分化程度差异无显著性(P>0.05),结论p16和PTEN基因在胆道恶性肿瘤组织中呈低表达,表明胆道恶性肿瘤的发生及发展有多基因变异或缺失。     

Ad-PTEN体外对SGC-7901胃癌细胞生长的抑制作用

目的:探讨腺病毒介导的PTEN基因表达体外对SGC-7901胃癌细胞生长抑制作用及其分子机制。方法:将携有PTEN基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-PTEN)感染SGC-7901胃癌细胞,用RT-PCR法检测Ad-PTEN在细胞中的表达,光学显微镜及荧光显微镜下观察Ad-PTEN感染细胞前后形态的变化,MTT法检测Ad-PTEN对SGC-7901胃癌细胞生长的抑制作用,用流式细胞术(FCM)检测SGC-7901胃癌细胞凋亡率。RT-PCR分析Bax、Bcl-2、p53、Survivin细胞凋亡相关基因的表达。结果:Ad-PTEN基因组感染SGC-7901胃癌细胞后,RT-PCR结果显示PTEN目的基因能在SGC-7901胃癌细胞中转录,其表达可明显抑制该胃癌细胞的生长,并诱导细胞凋亡。其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值、p53基因表达上调、Survivin下调有关。结论:重组腺病毒Ad-PTEN具有抑制SGC-7901胃癌细胞生长和诱导细胞凋亡的作用。     

结直肠癌中PTEN的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨PTEN在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌病理特征的关系.方法应用免疫组化法检测46例结直肠癌及癌旁正常组织标本中PTEN的表达,采用形态定量分析,计算每张切片的平均PTEN染色强度.结果结直肠癌组中PTEN的平均染色强度为899.2±119.6,而癌旁正常组为1820.3±205.1,两组间差异有显著性(P<0.01);淋巴转移组PTEN平均染色强度为1109.4±167.5,低于未转移组1581.8±207.1(P<0.01).按Ducks分期,A期1048.5±192.6,B期1021.6±204.8,C期981.3±190.2,D期899.7±142.1,各期间差异有显著性(P<0.01),各期两两比较,A、B两期PTEN平均染色强度高于C、D两期(P<0.05).结直肠癌PTEN的表达与肿瘤大小、病理分级无关.结论 PTEN的表达与结直肠癌的部分临床病理特征密切相关,可能是判断结直肠癌预后的一项重要指标.     

抑癌基因PTEN在人肝癌组织中的表达及其与HCV核心蛋白的关系

目的：研究抑癌基因PTEN在人肝细胞肝癌中的表达及其与HCV核心蛋白间的关系.方法：采用SP法检测人肝细胞肝癌组织中PTEN和HCV核心蛋白的表达.结果：42例肝癌组织中PTEN阳性表达14例（33.3%）,而在癌旁肝组织中全部为阳性表达（28例）,PTEN蛋白在癌旁组织中的阳性表达率明显高于肝癌组织（P＜0.01）,PTEN的表达在HCC组织病理分级间亦有显著差别（P＜0.01）;肝癌组织中HCV核心蛋白阳性表达17例（40.5%）,HCV核心蛋白的表达在HCC组织病理分级间无显著差别（P＞0.05）;spearman相关分析显示,在肝癌组织中HCV核心蛋白与PTEN表达之间呈负相关（r=-0.424,P＜0.01）,即HCV核心蛋白阳性表达的肝癌组织中PTEN低表达.结论：在人丙型肝炎相关性肝细胞肝癌中存在着PTEN的表达缺失或下降;在HCV导致的肝癌的发生中,丙肝核心蛋白可能通过抑制PTEN的表达最终导致癌变的发生.     

PTEN在肝癌中表达缺失的意义及其体外转染对人肝癌细胞系的作用

目的探讨PTEN表达与肝细胞癌发生、发展的关系,观察体外转染外源性PTEN对肝癌细胞的生长、细胞周期和超微结构的影响。方法检测PTEN在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达缺失情况,以观察该基因与肝癌病理分级、转移和预后的关系。将含PTEN的反转录病毒载体及空载体转入人肝癌细胞系HHCC,观察转染前后细胞的生长、超微结构、细胞周期及裸鼠致瘤能力改变情况。结果肝癌中PTEN表达缺失率为30.16%(19/63),显著高于正常肝组织0(0/8)和肝硬化组织7.15%(1/14)。随着恶性程度的增高,PTEN表达缺失率随之增加。PTEN表达缺失与转移及预后显著相关。PTEN在人肝癌细胞系hHCC中也不表达。将抑癌基因PTEN转入后,hH-CC细胞生长明显受到抑制,细胞超微结构失去部分恶性表型特征,细胞周期由G1→S0期受抑制,并出现凋亡峰,体外成瘤能力下降。结论抑癌基因PTEN失表达多见于肝细胞肝癌进展期,并与肝细胞肝癌分化程度、是否转移以及临床预后相关;体外PTEN的转入可以明显地抑制HHCC生长、体外成瘤能力。     

PTEN在乳腺癌及癌前病变中的表达及意义

目的：探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen, PTEN）在乳腺导管上皮不典型增生（ atypical ductal hyperplasia,ADH）、导管内癌（ ductal carcinoma in situ, DCIS）、浸润性导管癌（invasiveductal carcinoma,IDC）三组病变组织中的表达及意义。方法：收集 ADH 60例、DCIS 100例、IDC 165例,利用 Real - time RT - PCR 检测 ADH、DCIS、IDC 病变组织中 PTEN 基因在 mRNA 水平的表达情况;利用 Western - Blot 方法和免疫组织化学技术检测 ADH、DCIS、IDC 病变组织中 PTEN 蛋白的表达情况。结果：Real - time RT - PCR 技术结果显示,ADH 组 PTEN mRNA 表达水平最高,DCIS 组次之,IDC组最低差异具有统计学意义（t =26.661,P <0.05）。Western - Blot 技术检测 PTEN 蛋白在 ADH、DCIS、IDC 三组病变组织中的表达呈逐渐下降趋势,差异具有统计学意义（t =9.355,P <0.05）。免疫组织化学检测 PTEN蛋白在 ADH、DCIS、IDC 三组病变组织中的阳性表达率分别为91.9%、51.0%、36.9%,差异有统计学意义（χ2=54.734,P <0.05）。分析 PTEN 蛋白表达水平与乳腺癌患者临床资料的相关性,结果显示其与患者年龄无相关性（P >0.05）,而与患者的肿瘤分化程度、临床分级及转移有相关性,且差异有统计学意义（χ2=15.8,P <0.05）。结论：无论是在蛋白水平还是 mRNA 水平,PTEN 基因的表达从 ADH 到 DCIS 再到 IDC 呈下降趋势,提示 PTEN 可能参与了乳腺癌发生发展的过程,为日后治疗提供靶点理论依据。     

胃癌组织Skp2表达的意义及其与P27、PTEN表达的关系

背景与目的:S期激酶相关蛋白2(S-phaseKinase-associatedProtein2,Skp2)促进泛素介导的细胞周期素依赖激酶抑制剂P27蛋白降解,是细胞G1-S期转化所必需。研究发现Skp2过表达参与细胞转化和肿瘤的形成。本研究旨在探讨人胃癌Skp2表达的意义及Skp2与P27和PTEN表达的关系。方法:采用免疫组化法检测胃癌组织及配对癌旁胃粘膜138例、配对淋巴结转移癌组织102例、非典型增生30例、肠上皮化生30例、慢性浅表性胃炎10例和正常胃粘膜5例Skp2表达及138例胃癌P27和PTEN的表达。结果:Skp2的标记率(%)在肠化(12.68±0.86)及癌旁胃粘膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃粘膜(0.47±0.19)(P<0.001),后两者无显著性差异(P﹥0.05);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P<0.001);原发胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃粘膜(P<0.001);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2标记率与分化程度(rs=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rs=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rs=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白P27表达(rs=-0.451,P=0.000)和肿瘤抑制蛋白PTEN(rs=-0.480,P=0.000)表达呈负相关;胃癌PTEN表达与P27表达呈正相关(rs=0.642,P=0.000)。结论:胃癌Skp2蛋白过表达与P27蛋白降解及PTEN蛋白低表达有关,提示Skp2蛋白过表达可能是胃癌发生和发展的一个重要原因。     

PTEN和p53蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨PTEN和p53蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其在癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化方法检测40例子宫内膜癌组织和23例正常子宫内膜组织中PTEN和p53蛋白的表达,观察二者与子宫内膜癌临床病理学参数的关系,分析其在肿瘤发生发展中的作用。结果：40例子宫内膜癌组织中,PTEN阳性表达率为52.5%（21/40）,与全部为阳性表达的正常子宫内膜相比,子宫内膜癌中PTEN表达明显下降,χ^2=15.643,P〈0.01。PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的分化程度、临床分期、病理类型、肌层是否浸润及有无淋巴结转移均无关,P均〉0.05。在正常子宫内膜组织中未见p53阳性染色,而在内膜癌组织中17.5%（7/40）染色呈阳性。p53蛋白的表达与肿瘤分化程度有关,随着分化程度下降,表达增加。在子宫内膜癌中,PTEN和p53蛋白的表达具有相关性,χ^2=4.969,P=0.026。结论：与正常子宫内膜相比,子宫内膜癌中PTEN表达明显下降;p53则随着肿瘤细胞分化程度下降而表达增加。PTEN和p53在子宫内膜癌的发生发展过程中,发挥着重要作用。