慢性髓细胞性白血病K562细胞适体的筛选与鉴定

目的：筛选并鉴定出慢性髓细胞性白血病（CML）K562细胞的寡核苷酸适体.方法：体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA（ssDNA）文库,采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库,以正常人血液中提取的中性粒细胞为反筛细胞,利用指数富集的配基系统进化（SELEX）技术筛选出与CMLK562细胞特异结合的适体.将筛选得到的适体回收纯化后连接pGEM-T质粒载体,经蓝白筛选后,随机挑选24个克隆子进行序列测定.采用荧光标记引物法检测ssDNA文库与K562细胞的亲和力,并用Clustal 2.05和DNA sis V2.5软件对适体序列进行一级结构同源性分析和二级结构预测.结果：经过13轮循环筛选,CML K562细胞适体的A值从0.12上升到1.25,至第13轮A值无明显增高.一级结构分析无同源序列,但可分为6个家族,其中5个家族各自具有保守序列,家族6无保守序列.二级结构分析表明,适体形成的茎环、凸环结构可能是与K562细胞特异性结合的结构基础.结论：利用SELEX技术成功筛选出高亲和性的CML K562细胞适体.     

多色流式细胞术对60例成人急性髓系白血病免疫分型的研究

目的探讨成人急性髓系白血病(AML)多色流式细胞术免疫分型的特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行多色流式细胞术免疫表型分析。结果髓系抗原CD13和CD33在AML各亚型中均有很高的表达,阳性率分别为98.3%和85.0%。CD14和CD64在AML-M4及AML-M5患者中的表达率较高。CD14和CD64在AML-M4的表达率分别为60.0%和100.0%,在AML-M5的表达率分别为80.0%和100.0%,但CD14的特异性要高于CD64。AML患者CD34、CD117、HLA-DR的表达率分别为59.3%、84.3%和71.7%;AML-M3患者CD117表达率为76.9%,CD34及HLA-DR呈低表达。AML患者淋系抗原CD7和CD19阳性率分别为20.0%和3.3%。结论采用CD45/SSC双参数散点图设门方法,使成人AML免疫分型结果更可靠。CD13、CD33、CD14可作为AML免疫分型的髓系单抗。CD34及HLA-DR低表达为AML-M3的特征。成人AML淋系抗原表达以CD7较常见。     

成人急性髓性白血病免疫学表型分析

目的：分析成人急性髓性白血病（AML）免疫学表型特征。方法：采用三色流式细胞仪（FCM）,以CD45/SSC双参数散点图设门,对213例AML患者进行免疫学表型分析。结果：AML主要表达CD117（88.73%）、CD13（90.61%）、CD33（75.59%）、CD34（62.91%）、HLA-DR（63.85%）抗原;CD14和CD64在AML-M4中表达率为54.55%和31.82%,在AML-M5中表达率为40.00%和60.00%,CD14的特异性高于CD64。30.5%的AML患者伴有淋系抗原表达,主要是CD7（23.0%）。AML-M3患者CD117表达率为86.67%,CD34和HLA-DR表达率偏低（P〈0.05）。结论：CD13、CD117和CD33联合应用更有利于确定髓性白血病。CD14和CD64有助于确定AML-M4、M5,前者特异性更强。CD34及HLA-DR低表达为AML-M3的特征。     

急性粒-单核细胞白血病免疫分型及与预后的关系探讨

目的 分析急性粒-单核细胞白血病(AML-M4)患者的免疫分型及与预后的关系.方法 使用流式细胞仪检测白血病细胞的免疫分型,通过免疫分型评价患者预后.结果 25例患者中,髓系抗原总表达率为100%.其中CD13、CD33表达比例80%以上,CD117、CD64表达比例在50%~80%之间,CD14表达为16%.淋系抗原总表达率为55.6%,单个抗原表达率均小于20%,HLA-DR、CD34及CD38表达率为64%~88%.采取化疗的23例患者中,单一表达的病例占60.8%,缓解率为71.4%;杂合表达的病例占39.2%,缓解率为55.6%.结论 杂合表达的AML-M4患者的预后比单一表达的AML-M4患者差,其对制定治疗方案具有一定的指导意义.     

急性髓系白血病细胞淋巴系分化抗原的表达

目的:探讨急性髓系白血病(AML)中淋巴系分化抗原(LyAg)的表达情况.方法:475例AML患者,FAB分型:AML-M0 31例,AML-M1 45例,AML-M2 218例,AML-M3 54例,AML-M4 18例,AML-M5 101例,AML-M6 4例,AML-M7 4例.采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:在475例AML患者中,38.95%表达LyAg,其中T细胞相关抗原CD7表达最常见(27.58%),其在AML各亚型的表达依次为AML-M0 61.29%、AML-M1 40.00%、AML-M2 34.86%、AML-M5 16.83%.B细胞相关抗原CD19表达于少数AML患者(7.37%),主要是AML-M1(11.11%)、AML-M2(10.55%)和AML-M0(9.68%)患者.结论:CD7和CD19是AML最常表达的LyAg,其与AML-M0、AML-M1、AML-M2有关,与AML-M3关系不明显.     

CD34~+细胞在急性髓细胞白血病骨髓组织中的表达研究

目的:探讨CD34+细胞在急性髓细胞白血病骨髓组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法,检测急性髓细胞白血病患者初发未治及标准化疗后完全缓解时骨髓组织中CD34+细胞的表达情况。结果:急性髓细胞白血病初发未治组骨髓组织中CD34+细胞阳性表达率与完全缓解组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD34+细胞与急性髓细胞白血病的发生、发展及预后存在一定关联。     

CD117在急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨CD117在急性白血病中的表达及其临床意义。方法应用CD45/SSC设门,直接荧光标记法,经流式细胞术对73例急性髓系白血病(AML)和47例急性淋巴细胞白血病(ALL)进行CD117的检测。结果对照组、ALL及AML3组CD117的表达阳性率差异有统计学意义(χ2=41.681,P﹤0.01)。AML组CD117的表达阳性率(58.9%)明显高于对照组(0)及ALL组(8.5%)。CD117/CD34的共表达率ALL组明显低于AML组(4.3%vs45.2%,P﹤0.05)。AML组CD117+患者的CR率为60.5%,CD117-患者为76.7%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);而CD117+/CD34+患者的CR率为54.5%,明显低于CD117-/CD34-患者的CR率(88.2%,P﹤0.05)。结论 CD117可作为辅助诊断AML的髓系标志抗原,CD34+/CD117+可作为进一步排除ALL的指标。CD117+/CD34+可能是AML中一类预后不良的特殊亚型,可以作为AML预后判断的指标之一。     

急性髓细胞白血病免疫分型特点及临床意义

目的: 探讨急性髓细胞白血病(AML)免疫分型特点及其临床意义。方法: 采用流式细胞术(FCM)对145例AML患者进行白血病免疫分型检测。结果: 145例AML患者中MPO、CD13、HLA-DR、CD33、CD34表达率分别为93.1%、90.3%、77.2%、71.7%、70.3%。CD14仅表达于急性粒单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)。AML伴淋系抗原表达者以CD7(34.5%)最为多见,其中以预后较差的M5型表达率为最高,其次为CD19(10.3%),且在急性粒细胞白血病部分分化型(M₂)中表达率最高。CD2仅表达于部分急性早幼粒细胞白血病(M3),共发现2例急性混合细胞白血病,同时有淋系和髓系抗原表达。结论: MPO、CD13、CD33为髓系最敏感的抗原,CD7、CD19、CD2淋系抗原在AML诊断及预后判断上有重要指导意义,FCM免疫分型对白血病的准确分型诊断,预后判断有重要的指导意义。     

急性髓细胞白血病与CD25表达的相关性探讨

目的：探讨CD25与急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia,AML）的常见免疫表型标记间的相关性,及CD25与 FLT3-ITD 基因的关系。方法通过流式细胞术检测 CD7、CD117、CD33、CD34、CD38、cyMPO、CD13、CD36、CD56、CD11b、CD19、CD16、CD14、CD64及白介素2三条受体链CD25（α链）、CD122（β链）、CD132（γ链）在36例AML患者骨髓表达,运用PCR技术检测本组患者FLT3-ITD基因的表达。结果36例AML患者中, CD25＋表达率为13.89%（5/36）,在AML-M2组为12.5%（1/8）、AML-M4组为18.18%（2/11）、AML-M5组为20%（2/10）, CD25＋表达率在各组间差别无统计学意义（P＞0.05）。表达CD7、CD117、CD33、CD34、CD38、cyMPO、CD13、CD36、CD56、CD11b、CD19、CD16、CD14、CD64、CD122、CD132单克隆抗体的骨髓原始细胞百分比在CD25＋AML-M2组和CD25-AML-M2组间、CD25＋AML-M4组和CD25-AML-M4组间、CD25＋AML-M5组和CD25-AML-M5组间无统计学差异（P＞0.05）。PCR结果显示,7例AML患者出现FLT3-ITD突变基因,5例CD25＋AML患者组中FLT3-ITD＋者为3例,CD25＋AML合并FLT3-ITD＋率为60%,高于CD25-AML组（P＜0.05）。结论（1）CD25在AML患者中可出现阳性表达,但阳性率较低,CD25与AML患者的FAB亚型和常见的髓系免疫表型标记无明显相关性;（2）CD25＋AML患者合并FLT3-ITD基因突变率较高,明确CD25与FLT3-ITD基因的相关性有一定临床意义。     

Characteristics of abnormal immunophenotype and clinical significance in acute myelocytic leukemia

目的 探讨急性髓细胞白血病( acute myelocytic leukemia,AML)患者的异常免疫表型特点及临床意义.方法 采用多色流式细胞术对初诊的38例AML患者进行白血病免疫表型检测.结果 AML患者髓系特异性抗原表达阳性率高低依次为:CD33、CD13、cMPO、CD117、CD11b:部分患者异常表达淋巴系抗原,表达率高低依次为CD19、cCD79a、CD7等.CD19+、CD7+患者完全缓解( complete remission,CR)率低于CD19-、CD7-患者,差异有统计学意义(P＜0.05);部分患者表达非特异性早期抗原CD34、HLA-DR、CD38,CD34+患者CR率与CD34 -患者CR率相比差异无统计学意义(P＞0.05),CD56+患者CR率与CD56 -患者CR率相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CD33、CD13、cMPO、CD117为髓系常见且敏感的抗原.伴有CD19、CD7表达的患者,化疗后完全缓解率低于阴性者.     

EFFECTS OF ARSENIC TRIOXIDE ADMINISTRATION STYLES ON LEUKOCYTOSIS

ARSENIC trioxide ( As2O3) is effective in thetreatment of acute promyelocytic leukemia(APL) and many other kinds of malignant he-matopathies and solid carcinomas·1-5However, leukocytosisis commonly noticed with As2O3use, which severelythreatens the survi…     

急性早幼粒细胞白血病中白血病细胞CD_(117)的表达

为观察CD117分子在急性早幼粒细胞白血病 (APL)中的表达及探讨其意义 ,采用三色流式细胞术对 2 2例APL骨髓白血病细胞表面CD117的表达进行分析。结果 :CD117在APL中的表达率为 1 9/2 2 ,在急性粒细胞白血病(AML M1)和AML M2 中的表达率分别为 2 /2和 1 8/2 1。 1 9例CD117+ 的APL患者中 ,1 8例CD34 - 、HLA DR- ,1例部分细胞HLA DR+ 。提示 :APL患者有较高水平的CD117表达 ,CD117与CD34 、HLA DR联合进行多色流式细胞术分析 ,可用于APL微小残留病灶的检测。     

应用RT—PCR和基因扫描分析TCR Vβ谱系的CDR3长度了解急性单核细胞白血病病人克隆性增殖T细胞

目的：了解急性单核细胞白血病（AML-M5）病人TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法：利用RT-PCR分别扩增9例M5病人外周血单个核细胞的TCR Vβ24个亚家族基因的CDR3,了解TCR Vβ谱系的表达情况。PCR 产物进一步经基因扫描分析,确定T细胞克隆性。结果：9例AML-M5病人仅存在1-10个Vβ亚家族T细胞,而正常血标本则可检测到24个Vβ亚家族。基因扫描分析显示：8例病人的某些Vβ亚家族出现这一主峰图象（寡克隆性T细胞）。Vβ2寡克隆T细胞发现于6例病人中。结论：结果提示AML-M5病人存在克隆性增殖的T细胞,主要为Vβ2亚家族,推测这可能是对白血病细胞（M5）相关抗原的特异性免疫反应并可能具有抗白血病的活性。     

正常核型成人AML患者NPM1基因突变及临床特征分析

目的 探讨正常核型成人急性髓细胞白血病(AML)患者核仁磷酸蛋白1(NPM1)基因突变情况,并分析NPM1突变阳性AML患者的临床特征.方法 采用高分辨熔解曲线(HRM)法检测正常核型成人AML患者NPM1基因突变,结合临床资料分析NPM1突变阳性的临床特征.结果 85例正常核型成人AML中有19例出现NPM1突变,阳性率为22.4％,NPM1突变型患者分别为M2 4例,M4 5例,M5 9例,M6 1例.NPM1突变组女性占52.6％(10/19),NPM1野生型组女性占31.8％(21/66),两组有统计学差异(P＜0.05);NPM1突变组患者外周血白细胞(WBC)为(66.6±59.1)×109/L,血小板(PLT)为(146.4±155.8)×109/L,而NPM1野生型组患者外周血WBC为(44.1 ±40.1)×109/L,PLT为(71.8 ±46.1)×109/L,两组间WBC有统计学差异(t=0.04,P＜0.05),PLT差异无统计学意义;NPM1突变组患者高表达CD33、CD13、CD117,低表达CD34.结论 NPM1突变阳性的正常核型的成人AML在临床、病理以及免疫表型方面具有独特的特质,值得深入研究.     

CD34+细胞的WT1表达及其意义

目的：观察CD34^ 细胞分化过程中WT1表达水平的变化，探讨WT1作为白血病基因标志物的可行性。方法：以免疫磁珠从脐带血中分取CD34^ 细胞，以IL－3及GM－CSF促使其向髓系分化，采用半定量RT－PCR法检测分化过程中WT1表达的变化，比较CD34^ 细胞，K562，AML－M5等WT1的表达水平。结果：CD34^ 细胞的WT1表达水平不低于K562细胞及AML－M5白血病细胞，CD34^ 细胞在向髓系分化过程的0d或第1d表达水平较高，随即迅速降低至不可检测水平。以去除CD34^ 细胞的脐血细胞对K562细胞倍比稀释后再以RT－PCR检测WT1表达，当敏感度达10^-3时，1／10正常骨髓及2／5脐带血亦可检测出WT1表达。结论：正常CD34^ 细胞有较高水平的WT1表达，细胞分化早期WT1表达的迅速降低可能是正常造血细胞分化的必要环节，WT1作为白血病基因标志物有缺陷，会出现假阳性。     

Trisomy 21 as a sole acquired abnormality in an adult Omani patient with CD7- and CD9-positive acute myeloid leukemia

We describe a case of acute myeloid leukemia (AML) in which trisomy 21 was the sole acquired cytogenetic abnormality. The immunophenotype showed positivity for CD7 and CD9 along with CD13, CD33, and CD34. The chromosomal analysis of bone marrow showed 47,XY +21 in all the metaphases analyzed. The constitutional karyotype was normal. The patient was an adult and did not have any features of Down's syndrome. The bone marrow morphology was AML-M2 as per the French-American-British (FAB) criteria. A final diagnosis of CD7- and CD9-positive AML-M2 was established with trisomy 21 as a sole cytogenetic abnormality. The patient responded remarkably well to chemotherapy and achieved complete clinical remission. This is the first case of CD7- and CD9-positive AML with trisomy 21 as a sole abnormality. A putative role for the co-expression of abnormal lymphoid markers in achieving quick remission is discussed.     

急性白血病CD116表达研究

目的　探讨急性白血病CD116表达水平测定的临床意义。方法　对 47例初诊急性白血病患者采用直接免疫荧光法检测CD116生化法测定血清LDH ,并于标准化疗第二疗程结束时计算MBDI评价化疗疗效。结果(1)CD116的高表达主要见于AML -M5和AML -M0 患者 ;(2 )CD116的高表达主要见于髓系抗原表达的AML患者 ;(3 )CD116的表达水平在血清LDH升高与正常两组间、在MBDI≥ 5 0 %与 <5 0 %两组间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　 (1)急性白血病CD116表达水平测定对于AML尤其是AML -M5和AML -M0 的诊断与鉴别诊断有帮助 ;(2 )临床使用GM -CSF制剂应监测CD116表达水平 ;(3 )CD116表达水平似乎与白血病细胞负荷和近期化疗疗效无关