用液相芯片技术定量测定人血清CEA、AFP和HBsAg

【目的】采用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和乙肝表面抗原（HBsAg），并对该方法进行评价。【方法】制备抗体交联微球及生物素标记抗体，用双抗体夹心法对临床血清标本进行测定。[结果]同时检测CEA、AFP和HBsAg时的线性范围分别为0．032-200ng／mL、0．022-55U／mL、0．26—1000ng／mL，最低检测限分别为8．90pg／mL、0．013U／mL、0．24ng／mL，批内变异系数（cv）〈9％，批间CV〈14％。检测CEA、AFP、HBsAg的灵敏度分别为96．4％、95．8％、92％，特异度分别为95．6％、94．2％、100％，准确度分别为96％、95％、96％。其检测结果与化学发光免疫分析法（CLIA）或时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）之间呈显著的等级相关关系。该方法仅需1μL标本，3h即可完成检测。【结论】液相芯片技术具有可联合检测多项指标、高通量、线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点，具有临床应用潜力。     

液相芯片技术一步反应法联合定量测定人血清CEA、AFP和tPSA

目的 建立用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和总前列腺特异性抗原(tPSA)水平的一步反应法,并对该方法进行评价.方法 制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗体夹心法测定临床血清标本.结果 联合测定CEA、AFP和tPSA的线性范围分别为0.063～200 ng/ml、0.052～66.6 ng/ml、0.016～20 ng/ml;最低检测限分别为31.3 pg/ml、26.0 pg/ml、7.8 pg/ml;批内精密度<10 %,批间精密度<14 %;血清标本CEA、AFP和tPSA检测值与化学发光免疫分析法(CLIA)测值的相关系数为0.920～0.940,与液相芯片两步反应法测值的相关系数为0.952～0.979.该方法仅需1 μl标本,2 h即可完成检测.结论 液相芯片一步反应法具有高通量、检测范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有较大临床应用潜力.     

液相芯片技术定量检测人血清CEA、AFP和NSE

目的建立利用液相芯片技术定量检测人血清中癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和神经原特异性烯醇化酶（NSE）的反应模式，并对该方法各项指标进行评价。方法制备抗体交联微球及生物素标记抗体，用双抗夹心法检测临床血清标本。结果同时检测CEA、AFP和NSE时的线性范围分别为0．078-200ng／ml、0．025-25U／ml、0．146．75ng／ml，最低检测限分别为39．1pg／ml、0．016U／ml、0．073ng／ml，分析内精密度〈10％，分析间精密度〈15％。检测CEA、AFP、NSE的灵敏度分别为97．2％、100％、93．5％，特异度分别为96．4％、97．7％、97．0％，准确度分别为96．9％、98．4％、95．3％。检测结果与化学发光免疫分析法（CLIA）呈显著的等级相关关系，而且仅需1μl标本，3h就可以完成检测。结论液相芯片技术具有可联合检测多项指标、高通量、线性范围宽、灵敏度高、重复性好和节省样品和时间等优点。具有极大的临床应用潜力。     

液相芯片技术定量检测人血清PSA反应模式的建立

目的 建立利用液相芯片技术定量检测人血清中前列腺特异性抗原的反应模式,并对该方法进行评价.方法 应用液相芯片技术检测50例前列腺增生患者血清中的前列腺特异性抗原(PSA),评价该方法的线性范围、最低检测限、精密度等指标,并将结果与化学发光免疫分析法(CLLA)进行相关性分析.结果 液相芯片技术检测PSA标准曲线的线性范围为0.022～129.6ng/mL,PSA的最低检测限为0.018ng/mL,检测PSA的批内CV为2.18%～2.28%,批间CV为1.61%～4.18%.用液相芯片技术和化学发光法分别对受检血清标本进行PSA定量分析,结果表明两法差异无显著性(P>0.05),r=0.9984,相关性良好.结论 液相芯片技术具有线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有临床应用潜力.     

光激化学发光免疫分析法测定低浓度HBsAg效果评价

目的比较光激化学发光免疫分析法(LICA)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及胶体金法测定低浓度HBsAg,并评价LICA测定HBsAg的临床效果。方法以广西壮族自治区临检中心提供的临界值控制品作为质控,经ECLIA筛选的HBsAg标本吸光度与仪器所给临界值(Cut-off)的比值(COI)为1～50(低浓度)的临床标本80例(观察组),HBsAg COI<1的临床标本30例(对照组),分别使用LICA、ECLIA、ELISA及金标法测定。结果 LICA测定HBsAg的灵敏度为0.25ng/mL,平均批内变异系数(CV)为8.6%;ECLIA法测定HBsAg的灵敏度为0.12ng/mL,CV为7.8%;ELISA法测HBsAg灵敏度为0.50ng/mL,CV为11.9%,胶体金法灵敏度1ng/mL。观察组标本中LICA检出阳性为79例,ELISA检出阳性为75例,胶体金法检出阳性为20例。结论 LICA检测HBsAg与ECLIA有很高的符合率,在低浓度的HBsAg检测中,可最大程度地减少假阴性结果,且该法可进行自动化定量检测,适于临床使用。     

血清标志物AFP、CEA、GGT的联合检测在原发性肝癌 诊断中的临床价值

目的 探讨血清标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)及谷氨酸氨基转肽酶(GGT)联合检测对原发性肝癌诊断的临床意义.方法 随机选取检测者200例作为研究对象,分为原发性肝癌组、乙型肝炎肝硬化组、慢性乙型肝炎组、健康体检组,各50例,用电化学发光免疫分析检测AFP、CEA,用速率法检测GGT血清水平并计算阳性率、灵敏度、特异度.结果 乙型肝炎肝硬化组、慢性乙型肝炎组AFP、CEA、GGT多呈低浓度阳性,分别不超过200 ng/mL、10 ng/mL、100 U/L,乙型肝炎肝硬化组AFP、CEA、GGT分别为(4.440±2.850)ng/mL、(3.76160±2.14295)ng/mL、(33.420±36.169)U/L,慢性乙型肝炎组AFP、CEA、GGT分别为(15.010±30.346)ng/mL、(2.22260±1.43915)ng/mL、(55.880±37.365)U/L,健康体检组多正常,原发性肝癌组多异常升高,显著高于其它3组,差异具有统计学意义(P<0.05),三项联合检测阳性率高于单项检测阳性率及任意两项联合检测阳性率,差异具有统计学意义(P<0.05),任意两项联合检测阳性率与任意单项联合检测阳性率虽有差异,但差异无统计学意义.结论 血清标志物AFP、CEA、GGT联合检测可提高原发性肝癌的诊断率,对诊断原发性肝癌具有一定的临床应用价值.     

甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法的建立

目的:建立检测甲胎蛋白化学发光免疫定量分析方法.方法:采用双抗体异位点一步夹心法,以甲胎蛋白单克隆抗体作为固相包被,采用改良过碘酸钠法进行甲胎蛋白多克隆抗体与碱性磷酸酶偶联制备酶标抗体;以金刚烷胺衍生物CSPD作为底物,优化CSPD与SapphireII发光体系;用国家标准品校定定量标准品,建立了人血清AFP的化学发光免疫定量分析法.用该法检测800份正常人血清,确定正常值参考范围,将临床血清标本100份与bayer Acs:180全自动发光体系统进行比较.结果:本方法的最低检出量为2.0 ng /mL,线性范围2.0～600.0 ng/mL,批内和批间的变异率分别为6.7%和7.7%,回收率在98.2%～102.5%之间.与CEA(3 μg/mL)的交叉≤0.15%;与铁蛋白(10 μg /mL) ≤0.04%;与人血清白蛋白(200 g/L)≤2.5×10-8,与人血清丙球蛋白(100 g/L)≤2.0×10-8,与bayer Acs:180比较相关系数r=0.994(P＜0.001).结论:建立的甲胎蛋白化学发光免疫分析法可常规用于临床检测.     

癌胚抗原时间分辨荧光免疫分析法的建立及方法学评价

目的建立癌胚抗原（CEA）时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）法。方法采用两株CEA单克隆抗体（CEA McAb），一株用于固相包被（4．00μg/mL），另一株用于标记铕（Eu3＋）制备Eu3＋-CEAMcAb（1：1600），固相双抗体夹心二步分析法检测人血清中的CEA，并对此方法进行方法学评价。结果本方法与甲胎蛋白（AFP）和糖类抗原19—9（CA19—9）的交叉反应率分别为O．25％和3．58％，而与其他常用肿瘤标志物无交叉反应；低、中、高浓度的CEA质控批内实验变异系数分别为4．75％，4．25％和2．89％，批间实验变异系数分别为9．55％，7．38％和3．69％；平均回收率为95．94％；试剂盒37℃烘烤7d后检测性能基本稳定；并与CEA化学发光免疫分析技术（CLIA）比对试验结果相关系数达0．9986；CEA—TrFIA法检测系统的检测低限（LLD）、生物检测限（BLD）和功能灵敏度（FS）分别为0．4315ng/mL、1．000ng/mL和1．000ng/mL；线性范围为1．000～500．0ng/mL。结论CEA—TrFIA法具有灵敏度高、特异性强、精密性好、线性范围宽、试剂有效期长和非放射性等优点，具有良好的临床应用价值。     

纤维支气管镜下气管镜活检联合肿瘤标记物检测对肺癌的诊断

目的 观察纤维支气管镜检查联合肿瘤标记物检测对肺癌的诊断价值.方法 对96例肺癌患者和88例肺部良性病变患者行纤维支气管镜检查和电化学发光法检测血清或胸水肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、糖链抗原125(CA125)及细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)水平.结果 肺癌患者血清CEA、CA125及CYFRA21-1水平分别为(46.34±18.28) ng/mL、(83.34±33.26) U/mL及(25.67±10.32) ng/mL,高于肺部良性病变患者血清上述肿瘤标记物水平[分别为(3.21±2.74) ng/mL、(38.75±18.43) U/mL及(1.67±1.46) ng/mL,P＜0.05];36例伴有胸腔积液的肺癌患者胸水中CEA、CA125及CYFRA21-1水平分别为(76.23±31.64) ng/mL、(319.61±102.78) U/mL及(78.42±25.39) ng/mL,高于血清中上述肿瘤标记物水平[分别为(51.42±12.26) ng/mL、(123.34±28.57) U/mL及(27.43±8.63) ng/mL,P＜0.05].96例肺癌患者中纤维支气管镜检查确诊58例,敏感度为60.4%,特异度和准确度分别为100.0%和79.4%;CEA敏感度37.5%,特异度和准确度分别为87.5%和63.6%;CA125敏感度67.7%,特异度和准确度分别为40.9%和54.9%;CYFRA21-1敏感度56.3%,特异度和准确度分别为81.8%和68.5%.纤维支气管镜联合肿瘤标记物检测后敏感度为90.6%,特异度和准确度分别为92.0%和91.3%.结论 纤维支气管镜检查联合肿瘤标记物检测,可以提高肺癌的诊断率.     

AFP电化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种快速、特异、灵敏的检测人甲胎蛋白(AFP)的电化学发光免疫分析法。方法用链霉亲和素包被的磁性微粒、生物素标记的抗AFP单克隆抗体、钌复合物标记配对的抗AFP单克隆抗体组成AFP电化学发光免疫分析法试剂,在电化学发光免疫分析仪上对其准确性、灵敏度、特异性等效能进行方法学评价,同时用所建方法与进口的同类电化学发光免疫分析法试剂(Roche)对80例肝癌患者血清AFP检测结果进行相关性分析。对218名健康志愿者血清AFP进行了正常值调查。结果自建电化学发光免疫分析法检测AFP的批内精密度在2.8%～4.5%之间,批间精密度在3.2%～9.8%之间,分析灵敏度为0.605ng/ml。与进口同类试剂比较,直线回归方程为y=0.9936x-0.4566(r=0.9877,P<0.05)。分析测量范围为0.605～1452.0ng/ml,自建试剂与CEA和CA199无交叉反应。自建电化学发光免疫分析法检测AFP的正常参考值为<6.7ng/ml。结论自建AFP电化学发光免疫分析法特异性高,灵敏度好,与进口同类试剂检测结果相关性达0.9877。确定的实验室正常参考范围接近进口同类试剂,具备产业化的潜能。     

组织多肽特异性抗原细胞角蛋白19和癌胚抗原联合检测在肺癌诊断中的临床意义

目的评价组织多肽特异性抗原(TPS)、CYFRA21-1和癌胚抗原(CEA)在各种病理类型肺癌中诊断的应用价值,通过联检观察它们在肺癌诊断中的敏感性和有效性.方法收集血清标本127例,其中肺鳞癌22例,腺癌19例,小细胞肺癌16例,不能分型肺癌组13例,肺部良性疾病组27例和正常对照30例.采用酶联免疫吸附试验进行检测.结果TPS、CYFRA21-1和CEA在肺癌各病理类型组的血清水平与正常对照组有差异(P＜0.05),TPS和CEA在肺癌各病理类型组的血清水平高于良性病变组(P＜0.05),CYFRA21-1在肺癌各病理类型组的血清含量与肺癌良性疾病组无差异(P＞0.05).TPS在肺癌组的灵敏度最高,为85.7%,在肺部良性病变组的灵敏度为29.6%,TPS在肺癌各病理类型组的灵敏度无差异(P＞0.05),其特异性为78.9%.CYFRA21-1和CEA在肺癌的灵敏度分别为27.1%和22.8%,CYFRA21-1在肺鳞癌中灵敏度最高36.4%,CEA在肺腺癌中最高为31.6%.TPS、NSE,CYFRA21-1和CEA三项联检,可明显提高肺癌诊断的灵敏度,但同时特异性有所下降.结论TPS在肺癌诊断上灵敏度较高,但特异性较差,不宜单独用于肺癌诊断.CYFRA21-1和CEA在肺癌诊断上灵敏度较低,但特异性强,在肺癌诊断上有一定的参考价值,上述3项标志物联检可提高肺癌的检出率,有一定的临床价值.     

血清与胸水ADA、LDH、CEA联合检测在胸水鉴别诊断中的价值

目的探讨血清和胸水腺苷脱氢酶(ADA)乳酸脱氢酶(LDH)及癌胚抗原(CEA)联合检测在胸腔积液鉴别诊断中的价值。方法对88例结核性胸腔积液患者和36例癌性胸腔积液患者进行胸水和血清ADA和LDH及CEA的定量分析,胸水/血清ADA、胸水/血清LDH和胸水/血清CEA的比值,并进行统计学分析。结果两组胸水ADA、胸水/血清ADA比值、LDH、胸水/血清LDH胸水CEA、胸水/血清CEA比较均有显著性差异(P<0.01)。结论胸水ADA与胸水/血清ADA比值、胸水LDH与胸水/血清LDH、胸水CEA、胸水CEA/血清CEA比值联合检测具有互补作用,能提高诊断准确率。     

鼻咽癌组织中的癌胚抗原

应用未标记免疫酶技术(PAP法)显示94例鼻咽癌和52例慢性鼻咽炎组织切片中的癌胚抗原(CEA)。鼻咽癌的CEA阳性率为28.7％,分化差的腺癌CEA阳性率(53.8％)显著高于分化差的鳞癌(17.6％),未分化癌失去产生CEA的能力。CEA含量与癌瘤分化程度有关。分化好的鳞癌角化区域和慢性鼻咽炎中正常鳞状上皮CEA阳性反应可能是抗CEA血清与角质或前角质物质交叉反应的结果。鼻咽假复层纤毛柱状上皮CEA阳性率为35.7％(15/42),似与鼻咽的粘膜炎症轻重有关,本组轻度炎症者仅10例CEA均为阴性。本文还对鼻咽癌组织中CEA出现的生物学意义作了初步分析。     

癌胚抗原和糖类抗原测定在胸水诊断中的价值

目的:探讨测定血清和胸水中糖类抗原(CA153、CA199、CA125)、癌胚抗原(CEA)对鉴别良恶性胸水的价值。方法:采用放射免疫分析法,测定良恶性胸水患者的血清和胸水CA153、CA199、CA125、CEA进行比较。结果:恶性胸水患者的血清和胸水中CA153、CA199、CEA均高于良性胸水[差异有极显著性(P<0.01)],血清CA125在良性组和恶性组差异无显著性,而胸水CA125在两组中差异有极显著性(P<0.01)。结论:联合检测CEA和糖类抗原有助于提高良恶性胸水的鉴别诊断。     

肾癌增殖细胞核抗原的研究

为探讨肾癌的生物学行为及预后，采用免疫组化ＡＢＣ法对５３例肾癌组织中ＰＣＮＡ进行检测，取６例肾错构瘤及正常肾组织作为对照。结果发现：肾错构瘤中未见ＰＣＮＡ着色，在正常肾组织中仅见少许细胞着色，而肾癌所有切片均呈阳性反应。肾癌组织的ＰＣＮＡ表达与肿瘤分期、分级均相关，ＰＣＮＡ高表达组（３～４级）术后５年生存率显著较ＰＣＮＡ低表达组（１～２级）短。ＰＣＮＡ可定量地判断肿瘤分化程度及恶性度，可作为肾癌预后判断的独立指标     

New antirheumatic agents: Fenoprofen calcium (Nalfon), naproxen (Naprosyn), and tolmetin sodium (Tolectin).

The new antirheumatic agents, fenoprofen calcium, naproxen, and tolmetin sodium, are effective in the management of rheumatoid arthritis. Their efficacy is comparable, but not superior, to that of aspirin in usual oral doses. These agents also may be useful in degenerative joint disease and ankylosing spondylitis and as analgesics and antipyretics; however, there are insufficient data available to establish their efficacy and dosages for these uses. The incidence of adverse reactions, including gastrointestinal bleeding, is lower with these agents than with aspirin; thus, these drugs may be useful substitutes in patients who cannot tolerate the gastrointestinal effects of aspirin.     

增殖细胞核抗原和脑缺血损伤

增殖细胞核抗原(PCNA)是真核生物复制复合体的核心成分,为DNA合成所必需。此外它与多种蛋白结合,参与了DNA修复、DNA甲基化、染色体重塑、细胞周期调控和凋亡等许多细胞重要事件。脑缺血后出现神经元细胞DNA修复、胶质细胞增生以及细胞凋亡等,PCNA在其中发挥了重要作用,因此受到人们的广泛关注。兹将PCNA的分子生物学特点、功能及其在脑缺血损伤中的作用简要综述。     

早孕妇女外周血、宫颈分泌物及绒毛组织巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型、弓形虫检测情况的分析

目的探讨早孕妇女中人巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)、弓形虫(TOXO)、沙眼衣原体(CT)感染的发生情况.方法采用PCR技术对486例早孕妇女的外周血、宫颈分泌物、绒毛组织检测CMV、HSV-Ⅱ、TOXO和CT.结果486例早孕妇女的外周血、宫颈分泌物、绒毛组织中CMV、HSV-Ⅱ、TOX-O、CT的总检出率分别为7.62%、2.67%、1.86%和17.08%.外周血中CMV、HSV-Ⅱ、TOXO检出率分别为1.64%、0.82%及1.65%;绒毛组织中CMV、HSV-Ⅱ、TOXO检出率均为0.21%;分泌物中CMV、HSV-Ⅱ、CT的检出率分别为5.76%、1.64%、17.08%.除CT的检出率随年龄增长而下降外,其余各项检测在不同年龄组中的检出率差异均无显著性(P均＞0.05),未产妇与经产妇的检出率差异无显著性(P＞0.05).结论孕早期血清CMV、HSV-Ⅱ、TOXO及CT的检测不必定为筛查的项目,对早孕妇女,可首先考虑作分泌物检测.