建立小鼠肿瘤模型的研究进展

人类疾病的动物模型（animal model of human diseases）是生物医学科学研究中所建立的具有人类疾病模拟性表现的动物疾病材料。这种方法是促进医学科学发展的重要途径之一，无论在疾病的发生、发展机制的探讨上或预防与治疗上，都起着不容忽视的作用。恶性肿瘤是一类严重威胁人类健康的多发病和常见病，与病毒性疾病、老年性疾病并称为现代医学的三大挑战，其发病机制尚未完全阐明，治疗效果亦不尽人意。而肿瘤模型，作为实验假说和临床假说的实验基础，可为研究恶性肿瘤的病因学、发展过程和治疗提供特有的条件。在各类动物中，由于小鼠已有明确定型的各种遗传品系，对肿瘤有易感性以及成本较低，因而在肿瘤研究方面较为常用。小鼠肿瘤模型按照建立的方法及研究目的可分为：（1）基因修饰小鼠肿瘤模型；（2）自发和诱发小鼠肿瘤模型；（3）移植小鼠肿瘤模型。     

人源化小鼠模型研究及应用进展

研究人类复杂疾病的发病机制,筛选有效药物,需要理想的动物模型来进行大量的体内试验。小鼠是应用最为广泛的生物模型之一,但考虑到小鼠与人类在生理、病理等诸多方面存在差异,构建具有人类功能性基因、细胞或组织的人源化小鼠模型尤为重要。该文对人源化小鼠模型的研究概况及其在肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病和代谢性疾病等方面的应用进行综述。     

人源化小鼠模型构建和应用的研究进展

人源化小鼠是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型,通常被用于人类疾病体内研究的活体替代模型,是利用转基因或同源重组的方法将人类基因"放置"在小鼠模型上所制备的模型,这类小鼠模型在模拟某些人类疾病时有效性较高。人源化小鼠模型在艾滋病、癌症、传染病和血液病研究领域等均有广泛的应用。具有人造血免疫系统组成的人源化小鼠模型已经被证明在解码人类疾病奥秘中具有巨大的优势和广泛的应用前景。本文从免疫系统人源化小鼠模型演变的历史过程、具体的分类方法及模型的应用等几个方面进行综述。     

红细胞人源化小鼠模型的构建及其临床应用研究进展Research progress in construction and its clinical application of humanized mouse model of red blood cells

红细胞人源化小鼠模型是一类能够稳定重建人红细胞的人源化小鼠，其对于人红细胞相关疾病临床前期研究起至关重要的作用。人源化小鼠模型的构建能够模仿人体免疫机能，在整体水平上反映人类生理和病理情况，探讨红细胞人源化小鼠模型的发展过程、构建方法及其在临床工作中的应用，可为后续优化该模型提供理论依据。现主要对人源化小鼠模型的发展、人源化小鼠人红细胞重建现状、人源化小鼠中人红细胞重建的影响因素、人红细胞相关疾病的研究和未来发展规划等几个方面进行综述。     

用于肝脏疾病研究的人源化小鼠模型概述

肝脏疾病是危害人类健康的重要疾病之一，合适的小动物模型的缺乏在很大程度上制约了肝脏疾病的相关研究。人源化小鼠作为重要动物模型之一，在肝脏疾病的研究中有巨大的应用价值。本文对早期的uPA小鼠，FAH小鼠，TK-NOG小鼠和近年来的AFC8小鼠等几种应用较为广泛且有代表性的人源化小鼠模型及其在肝脏疾病研究中的应用进行了对比分析，阐述了它们各自的模型原理和优缺点，以期对人源化小鼠应用于人类肝脏疾病的研究具有较为直观的认识。     

多发性骨髓瘤小鼠模型构建的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞肿瘤，随着其小鼠模型的不断优化创新，相关基础研究发展迅猛。基于人源细胞与免疫缺陷鼠的人源化小鼠模型在评估药物疗效、探索耐药机制与观察肿瘤-骨髓微环境相互作用等方面得到持续发展。近年来，基于鼠源细胞或基因编辑技术的同源小鼠模型在MM发病机制研究与药物开发方面也开始被广泛应用；此外，建立稳定的靶向脏器损伤模型正在成为MM小鼠模型未来发展的重要攻坚方向之一。本文综述了各类MM小鼠模型的特点及其应用的研究进展。     

免疫缺陷小鼠和人源化小鼠模型在干细胞质量控制中的应用

干细胞具有自我更新和多向分化的能力,在治疗糖尿病、脑损伤、急性心梗等疾病的治疗中有着巨大的潜力。由于干细胞产品种类繁多、批次差异性大、性质复杂,因此干细胞产品临床前的质量控制尤为重要。干细胞作为活性外源物质具有免疫原性,免疫缺陷小鼠和人源化小鼠在干细胞质量控制中发挥极大作用。本文综述了干细胞的免疫学特性、总结了常用的免疫缺陷和人源化小鼠模型,概述了免疫缺陷和人源化小鼠模型在干细胞质量控制中的应用,以期为干细胞质量控制标准化提供资料和信息。     

具有人红细胞重建的人源化小鼠模型构建和应用的研究进展

人源化小鼠是具有人类基因、细胞、组织和器官的小鼠。具有人造血免疫系统重建的人源化小鼠模型作为唯一能够活体研究人淋巴造血过程和人免疫应答的小动物模型,已经在感染、肿瘤、自身免疫病及异种/异体移植等领域的基础研究和药物开发中得到广泛应用。然而,普通人源化小鼠的外周血循环中人红细胞的重建缺陷严重限制了其在人红细胞相关疾病（如遗传性贫血和疟疾感染等）研究中的应用。因此开发具有高水平人红细胞稳定重建的人源化小鼠模型是该领域的难点之一。本文作者从人源化小鼠模型的基本情况、模型中人红细胞重建缺失的主要原因和制备具有人红细胞重建的人源化小鼠模型的可行方法等方面进行综述,并对其应用进行阐述。     

人源化小鼠人源细胞检测方法

目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细胞嵌合体小鼠进行了检测。结果在人源化动物模型的人类DNA检测中,这种人线粒体DNA的PCR检测方法能够达到理想的特异性与灵敏性,是一种理想的嵌合体小鼠检测方法。结论获得了一种理想的人源化小鼠人源细胞检测方法。     

刊中报

中科院客座教授发表里程碑成果2012年8月13日记者获悉,来自美国北卡罗莱纳大学教堂山分校、中科院生物物理所的研究人员成功地构建出了第一个具有人类免疫系统和肝细胞的人源化丙型肝炎小鼠模型。这一研究成果将推动研究人员深入了解肝炎病毒的生物学特性,诱导肝脏疾病的发病机制以及开发出有效的治疗新策略。相关论文发布在2012年8月9日的《自然-实验手册》(Nature Protocols)杂志上。北     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌系统性感染小鼠模型的制备

目的 采用临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染ICR小鼠,建立MRSA系统性感染小鼠模型。方法 采用连续3 d腹腔注射环磷酰胺（100 mg/kg）进行免疫抑制后,将浓度为1×10⁷ cfu/mL的MRSA菌液经尾静脉接种ICR小鼠,通过生存分析、外周血白细胞计数、组织载菌量和病理学检查对模型进行评价。结果 MRSA接种后第2天小鼠开始死亡,14 d内累积死亡率达60%;外周血白细胞总数显著升高,细菌在多个器官定植,载菌量由高到低依次是肾、关节、肺、肝和脑,肾载菌量高达10⁹ CFU/g,关节、肺、肝和脑的载菌量范围在10⁴~10⁹ CFU/g。病理观察显示肾、心脏、肺、肝、脑和关节多器官感染的组织病理学改变。结论 采用环磷酰胺免疫抑制后静脉接种MRSA的方法首次成功建立MRSA系统性感染小鼠模型,该模型可应用于MRSA发病机理及药物筛选等研究领域。     

Effects of down-regulation of integrin-β<Subscript>1</Subscript> expression on migration and hepatic metastasis of human colon carcinoma

Organ-specific tumor cell adhesion to extracellular matrix (ECM) components and cell migration into host organs often involve integrin-mediated cellular processes. Direct integrin-mediated cell adhesion to ECM components in the space of Disse appears to be required for the successful liver metastatic formation of colon cancer. In the present study, human colon cancer HT-29 cells were transfected by liposome with integrin-β1 antisense oligodeoxynucleotide (ASODN). The integrin-β1 gene expression in HT-29 cel...     

小鼠小肠类器官体外培养体系的建立与应用

目的 建立一种研究肠上皮细胞的体外模型—小肠类器官培养体系，探索其相关病理检测技术方法，为肠道相关疾病的体外研究提供便利平台。方法 将小鼠肠上皮隐窝分离并培养成小肠类器官，体外模拟肠上皮的生长发育过程。通过制作石蜡切片，探索应用免疫组化技术以及基于基质胶中类器官三维水平免疫荧光技术对相应的增殖与分化信号进行检测。结果 探索并建立了小肠类器官体外培养体系，应用石蜡切片免疫组化技术与三维水平免疫荧光技术能够准确检测小肠上皮结构的生长发育状态。结论 小肠类器官体外培养体系的建立与免疫检测技术的应用，将逐渐使其成为人们研究肠道相关疾病最为有利的技术手段。     

含对硝基苯丙氨酸的B淋巴细胞刺激因子疫苗对狼疮肾炎模型小鼠的保护作用

考察含对硝基苯丙氨酸的B淋巴细胞刺激因子(BAFF)治疗BAFF过表达的自身免疫性疾病的效果。利用本研究前期构建的工程菌,表达纯化了B淋巴细胞刺激因子的可溶型突变体(smBAFF)以及在其65位定点引入了对硝基苯丙氨酸的改构体(pNO₂Phe⁶⁵smBAFF)。通过考察pNO₂Phe⁶⁵smBAFF体外促小鼠淋巴细胞增殖活性、免疫原性以及所诱导的抗血清对天然BAFF活性的抑制作用,评价了其用于治疗BAFF过表达的自身免疫性疾病的可行性;同时采用了cGVHD(graft-versus-host disease)诱导的狼疮肾炎小鼠模型评价了pNO₂Phe⁶⁵smBAFF的药理活性。结果表明:定点引入了对硝基苯丙氨酸的pNO₂Phe⁶⁵smBAFF不具有促进小鼠淋巴细胞增殖的能力;由于对硝基苯丙氨酸的引入显著增强了蛋白的免疫原性,诱导机体产生了可以抑制天然BAFF活性的交叉抗体;在cGVHD诱导的狼疮肾炎小鼠模型中,pNO₂Phe⁶⁵smBAFF可显著减轻疾病症状。定点引入了对硝基苯丙氨酸的pNO₂Phe⁶⁵smBAFF可以作为治疗BAFF过表达的自身免疫性疾病的候选分子。     

小鼠模型与人类疾病

小鼠是人类疾病理想的动物模型,不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富,其大量的传变异可作为研究人类的借鉴。另外,高分辨率的小鼠遗传及物理连锁图谱已经建成,小鼠基因组的测序工作不久即将完成,而且维修小鼠基因组的技术（包括建立转基因小鼠,基因敲除,以及改建小鼠染色体的技术）也已具备,分析复杂遗传病的方法也相继建立……。这些进展加速了对小鼠疾病基因位点的鉴定与克隆,同时也促进了新模型的建立,从而使得小鼠成为人类疾病动物模型的首选。小鼠传学分析的技术与资源,将简要介绍用于建立人类疾病的动物模型的基本技术与方法,以及现有的小鼠传资源,在以后各部分中,将列举涉及多种人类疾病的100多个小鼠模型,其中大多数的模型的变异,在小鼠与患者的表型极为相似;因而有助于人们理解人类疾病及寻找有效的预防,治疗方法。     

斑马鱼模型在常见骨疾病研究中的应用

斑马鱼作为一种新型的脊椎模式生物,近年来在人类疾病模型中已广泛应用,特别是在人类骨疾病模型的研究中已显示出优势,如在疾病的相关基因及其功能表达和药效筛选评价等方面。这对于在骨疾病领域发挥特色疗效的传统医药而言,也具有重大的现实意义。本文就斑马鱼在骨质疏松、骨折、骨关节炎等常见骨疾病中的研究应用进行综述,以便给未来的临床相关研究提供一定的思路。     

条件性感染金黄色葡萄球菌关节炎小鼠模型的建立和分析

目的 建立与分析条件性感染金黄色葡萄球菌感染关节炎模型,为关节炎机理研究及药物开发提供动物模型。方法 先对小鼠进行环磷酰胺免疫抑制处理,再尾静脉接种金黄色葡萄球菌,通过关节表观特征观察、关节炎指数分析和病理观察评分对模型进行评价。结果 接种后第1天开始,小鼠关节部位轻微肿胀,关节组织病变由少量滑膜增生且排列疏散紊乱,发展至滑膜增厚,往关节腔内延伸生长,中性粒细胞浸润增多等病理变化。结论 成功建立条件性感染SA模型,能在较短时间内模拟人关节炎的临床症状和病程发展,且在感染和免疫机理方面体现了人关节炎发病病因。     

治疗性单克隆抗体研究新进展

治疗性单克隆抗体的快速发展在人类以肿瘤为主的多种疾病的治疗方面发挥至关重要的作用。为了降低鼠源抗体引起的超敏反应,治疗性单克隆抗体已由改型抗体,人源化抗体发展到全人抗体。随着生物技术的不断发展,相信人源化单克隆抗体的前景会越来越广泛。     

大鼠和小鼠辨证论治标准的建立和用途

大鼠和小鼠辨证论治方法和标准是具有中医药行业特色的方法和标准,其建立有助于满足中医药辨证论治研发的需要。本文介绍了建立大鼠和小鼠辨证论治标准所开展的系列研发工作,发现：（1）大鼠和小鼠可以用于模拟中医临床的诊法和辨证,可以采集到大量的四诊信息,满足辨证论治的需要;（2）利用大鼠和小鼠可以实现诊法和辨证的标准化、计量化,所建立的方法便于实验操作与普及;（3）正常大鼠和小鼠存在体质和证候的差异,常见疾病大鼠和小鼠会自发形成证候,发生证候的兼夹和演变,与人类近似;（4）证候存在复杂的物质基础,涉及神经内分泌免疫网络各组织基因表达与剪接的差异;（5）利用大鼠和小鼠可以开展个体化辨证论治及计量化疗效比较与评价。该方法和标准的主要用途包括：（1）证候模型动物的证候属性鉴定;（2）中医基础学科的研究,如藏象理论、证候的物质基础、辨证论治方法和作用机制、中医诊断学等研究;（3）中医临床学科的研究,如辨证论治疗效的比较与评价、辨证论治方案的优化、防治未病的研究;（4）中药学科的研究,如中药药性的研究、中药和方剂的药理研究等。