产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因检测与耐药性分析

目的 了解临床分离的产ESBLs大肠埃希菌耐药基因存在状况和菌株的耐药性关系.方法 自临床分离20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER.结果 20株大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER阳性率分别为75.0%、20.0%、95.0%、15.0%、70.0%、5.0%、85.0%、70.0%,β-内酰胺类药物及含酶抑制剂药物的耐药率较高.结论 临床分离的产ESBLs大肠埃希菌TEM、LEN、CTX-M-9、GES、PER基因携带率高,β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带β-内酰胺酶耐药基因有关,产ESBLs大肠埃希菌可导致克隆传播医院感染,并存在暴发性流行.     

餐饮业从业人员携带大肠埃希菌对β-内酰胺类药物耐药性分析

目的研究深圳龙华地区餐饮业从业人员携带大肠埃希菌对β-内酰胺类药物的耐药性,为该类人群的卫生细菌学检查提供依据。方法采用纸片法检测大肠埃希菌的药物敏感性;采用双纸片扩散法检测β-内酰胺类药物耐药菌株的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);采用PCR法检测β-内酰胺类药物耐药菌株ESBLs基因(TEM、SHV、OXA、CTX)。采用PCR法检测大肠埃希菌Ⅰ类整合子整合酶基因及其耐药基因盒。结果 108株大肠埃希菌对9种β-内酰胺类药物的耐药率从高到低依次为:氨苄西林87.0%、阿莫西林/棒酸60.2%、头孢呋辛59.3%、头孢唑林50.9%、头孢曲松36.1%、头孢他啶34.3%、头孢西丁31.5%、头孢吡肟16.7%、亚胺培南11.1%;其中61.1%(66/108)株菌对2种及2种以上β-内酰胺类药物耐药。在β-内酰胺类药物耐药株中,产ESBLs株的检出率为37.9%(25/66),其中产ESBLs菌对头孢呋辛、头孢吡肟、头孢曲松和头孢唑啉的耐药率与非产ESBLs菌的耐药率存在显著差异(均P0.01);ESBLs基因的检出率为72.7%(48/66),其中,携带TEM基因的为11株、SHV17株、CTX13株、OXA11株;有的菌株同时携带SHV和CTX,或TEM和CTX,或OXA和CTX2种基因。大肠埃希菌Ⅰ类整合酶基因检出率54.6%(59/108);Ⅰ类整合子阳性菌株中耐药基因盒检出率79.7%(47/59),其中超广谱β-内酰胺酶基因CTX-M、OXA占32.2%(19/59)。结论深圳龙华地区餐饮业从业人员携带的大肠埃希菌对β-内酰胺类药物的耐药率较高,其耐药性与ESBLs产生及ESBLs基因密切相关;该类基因易在细菌间传播,故餐饮业从业人员携带的大肠埃希菌耐药性监测值得重视。     

2277株大肠埃希菌的耐药性及TEM与SHV型β-内酰胺酶基因的研究

目的 了解大肠埃希菌的耐药性,尤其要了解TEM与SHVβ-内酰胺酶基因在产ESBLs大肠埃希菌的流行情况.方法 2006年1月-2008年11月医院分离的2277株大肠埃希菌用VITEK-32 GNI+鉴定,GNS-145和GNS-448检测对氨基糖苷类、β-内酰氨类、喹诺酮类等21种抗菌药物的耐药性,并对其中36株产ESBLs大肠埃希菌用聚合酶连反应(PCR)检测TEM和SHV基因型别的流行状况.结果 共检出1025株ESBLs阳性菌株,ESBLs检出率为45.0%;21种抗菌药物氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢呋辛、氨曲南、头孢匹肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、复方新诺明,呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和头孢西丁耐药率分别为83.0%、74.0%、52.0%、52.0%、29.1%、27.8%、16.5%、47.0%、31.0%、54.5%、53.0%、56.8%,10.0%、53.9%、38.5%、5.0%、4.0%、5.0%和5.0%,未检出哑胺培南、美罗培南耐药株;36株产ESBLs大肠埃希菌PCR检测结果TEM阳性25株,SHV阳性14株,检出率分别为69.4%和38.9%.结论 大肠埃希菌耐药性严霞,尤其足产ESBLs大肠埃希菌存在着严重的多药耐药性,产ESBLs大肠埃希菌菌株TEM和SHV基因检出率高,且与多药耐药关系密切.     

83株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶耐药基因检测与药敏结果分析

目的:了解产ESBLs大肠埃希菌耐药基因携带状况和菌株的耐药现状,以指导临床医师合理使用抗菌药物。方法:用K-B法测定自临床分离的83株产ESBLs大肠埃希菌对氨曲南等18种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-3、CTX-M-9基因型分布情况。结果:83株大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-3、CTX-M-9阳性率分别为85.5%、36.1%、22.9%、32.5%、13.3%,对丁胺卡那霉素、厄它培南、头孢替坦、亚胺培南完全敏感,对部分β-内酰胺类药物及含酶抑制剂药物的耐药率较高。结论:临床分离的产ESBLs大肠埃希菌TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-3基因携带率较高,β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带β-内酰胺酶耐药基因有关,临床应结合菌株的药物敏感试验选择最佳的抗菌药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药及TEM与SHV基因型分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在医院的耐药情况,并分析其TEM与SHV基因型的分布,为制定合理的治疗方案提供参考。方法收集医院2012年2月-2014年1月分离的214株大肠埃希菌和186株肺炎克雷伯菌,用双纸片协同试验确定产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,同时提取产ESBLs菌株DNA,用PCR扩增技术及电泳进行基因分型,K-B法比较产ESBLs阳性株与阴性株耐药率。结果 214株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌株51株,检出率为23.83%;186株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌株48株,检出率为25.81%;两种菌种产ESBLs与非产ESBLs的耐药情况均较相似,产ESBLs菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛等的耐药性均90%,且明显高于非产ESBLs菌株,且对庆大霉素及左氧氟沙星、环丙沙星有部分耐药性,耐药率均50%,具有明显的多重耐药性;产ESBLs与非产ESBLs均对碳青霉烯类抗菌药物耐药性较差,耐药率5%;大肠埃希菌TEM基因型31株,检出率为60.78%,SHV基因型27株,检出率为52.94%;肺炎克雷伯菌检出TEM基因型35株,检出率为72.92%,SHV基因型31株,检出率为64.58%。结论本地具有较高的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率,耐药形势严峻,TEM、SHV是其重要的基因分型。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的检测20株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的β-内酰胺酶基因,以便了解该20株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因亚型携带存在状况。方法收集医院2013年分离到的20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析16种A类β-内酰胺酶基因、6种C类β-内酰胺酶基因、3种D类β-内酰胺酶基因。结果 20株产ESBLs大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟的耐药率均为100.0%;共检出4种A类β-内酰胺酶基因,其中检出blaTEM16株、blaSHV1株、blaCTX-M-1 cluster 3株、blaCTX-M-9 cluster 14株,检出率分别为80.0%、5.0%、15.0%、70.0%,C类β-内酰胺酶基因检出blaDHA2株,检出率为10.0%,D类β-内酰胺酶基因检出blaOXA-1 cluster 3株,检出率为15.0%;20株产ESBLs大肠埃希菌每一株均有β-内酰胺酶基因检出,少者检出1种,多者同时检出2⁴种,且该组菌株blaCTX-M总检出率85.0%。结论产β-内酰胺酶基因是该组大肠埃希菌对β-酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。     

老年患者中检出产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因分型

目的了解本地区老年患者临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药基因型别和耐药性的变化情况。方法收集来自老年患者分离鉴定的大肠埃希菌株1 327株,通过K-B法作药敏试验,采用美国NC-CLS1999年推荐的抑制剂增强纸片法确认产ESBLs株,并对ESBLs进行初步基因分型。结果检出产ESBLs菌株702株,检出率为52.9%,产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为54.5%~100.0%;PCR初步分型结果：单独携带TEM型基因的占56.7%,单独携带SHV型基因的占15.0%,携带两种基因的占25.8%。结论产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年上升,具有多重耐药的特点;产ESBLs大肠埃希菌主要携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因,其中绝大部分为产TEM型β-内酰胺酶。     

肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌基因型检测及耐药性研究

目的了解某地区肿瘤患者医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的基因型及耐药性。方法用CLSI推荐的双纸片扩散法表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌251株,随机抽取其中50株应用聚合酶链反应(PCR)方法分别扩增产ESBLs大肠埃希菌常见的β-内酰胺酶基因:TEM、SHV和CTX-M;微量稀释法测定产与非产ESBLs菌株对18种抗菌药物的耐药率并进行比较。结果 PCR扩增显示,50株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM 48株(96.00%)、CTX-M1 36株(72.00%)、CTX-M13 36株(72.00%)和SHV 20株(40.00%);45株(90.00%)携带2种或2种以上耐药基因。微量稀释法测定产与非产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南及美罗培南的耐药率均为0,但产ESBLs大肠埃希菌的耐药率除哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸以外的其余14种抗菌药物均高于非产ESBLs菌株,多种抗菌药物两者差异均有统计学意义(P0.05)。结论该地区肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌基因型以TEM、CTX-M1、CTX-M13型为主。产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药趋势。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌相关耐药基因监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌中常见的β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测了77株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中TEM、SHV和CTX-M等三种β-内酰胺酶基因,并进行了DNA测序。结果 50株产ESBLs的大肠埃希菌中,41株TEM基因阳性(82.0%),7株SHV基因阳性(14.0%),16株CTX-M基因阳性(32.0%),21株菌两种以上基因型同时阳性。27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,21株TEM基因阳性(77.8%),24株SHV基因阳性(88.9%),3株CTX-M基因阳性(11.1%),16株菌两种以上基因型同时阳性。结论产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带多种β-内酰胺酶基因,且以TEM和SHV型较为流行。     

大肠埃希菌老年患者分离株β-内酰胺酶基因与毒力基因研究

目的 了解大肠埃希菌(ECO)老年患者分离株β-内酰胺酶基因与毒力基因产生状况.方法 对20株ECO进行15种β-内酰胺酶基因(TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-9群、OXA-1群、OXA-2群、OXA-10群、PER、GES、VEB/CEF、CARB、DHA、ACT/MIR、LAT/CMY)及毒力基因(CNF-1、CNF-2)检验.结果 20株ECO检出TEM基因14株、SHV基因3株、CTX-M-1群基因1株,20株ECO中至少检出1种β-内酰胺酶基因,7株同时检出>2种β-内酰胺酶基因.结论 该20株ECO β-内酰胺类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶密切相关.     

耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究

目的 调查大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在及变异情况.方法 收集医院2009年6月-2010年6月临床分离的耐药大肠埃希菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR),分析A、B、C、D等4类β-内酰胺酶24种基因和膜孔蛋白ompC基因.结果 20株耐药大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群和OXA-1群等3种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为45.0％、40.0％和10.0％,其余21种基因均未检出;20株耐药大肠埃希菌共检测到19株占95.0％,膜孔蛋白编码基因ompC,经测序比对除11号株外,其余18株占90.0％均存在突变.结论 20株耐药大肠埃希菌对β-内酰胺类药物耐药为产β-内酰胺酶和膜孔蛋白变异的共同结果.     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌连续分离株的耐药性及多种β-内酰胺酶基因型分析

目的 了解β-内酰胺酶基因在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌连续分离株中的存在及流行情况,为临床用药及医院感染控制提供依据.方法 连续收集2010年1-10月医院临床分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,应用微生物分析仪进行鉴定和药物敏感试验,应用双纸片扩散法进行ESBLs确认;PCR方法对菌株进行21种β-内酰胺酶基因检测.结果 159株细菌中有81株检测到TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1等12种耐药基因,123个基因片段,主要耐药基因为TEM和SHV,其中大肠埃希菌以TEM为主,占33.3％,肺炎克雷伯菌则以SHV为主,占27.9％,且有7株SHV和LEN双阳性菌株和2株LEN得以准确区分;有16种基因型,51.9％含有＞2种耐药基因,其中产AmpC酶13株,4株与ESBLs并存.结论 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌连续分离株β-内酰胺酶基因携带率高,多药耐药性严重;加强对产β-内酰胺酶基因菌株的监测十分重要,严格掌握抗菌药物的使用指征,防止耐药菌株的传播流行.     

临床产ESBLs细菌的耐药特征和基因分型的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的流行和耐药特点,初步对产ESBLs细菌进行基因分型,确立耐药基因的位点和种类.方法收集分离鉴定菌株,通过K-B法药敏实验初筛以确认产ESBLs菌株,并对ESBLs基因进行初步分型.结果分离到产ESBLs细菌88株,检出率为38.9%,其中肺炎克雷伯菌阳性率为43.1%、大肠埃希菌阳性率为33.3%;产ESBLs细菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类耐药率约为90%～100%,加用酶抑制剂克拉维酸或他唑巴坦后耐药率降为18.7%～46.8%;PCR初步分型结果表明:大多数产ESBLs细菌携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因,其中单独携带TEM型基因的占42%,单独携带SHV型基因的占12.5%,携带两种基因的占31.8%.结论产ESBLs细菌具有多重耐药的特点;产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌大都携带TEM和(或)SHV型β-内酰胺酶基因,其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶.     

肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌临床分布与基因分析

目的了解本地区肿瘤患者医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的临床分布及基因型,以指导临床医师合理选择抗菌药物。方法对2014年3月-2016年10月医院恶性肿瘤患者临床标本中分离出的338株产ESBLs大肠埃希菌的分布进行分析,同时随机抽取其中60株应用聚合酶链反应(PCR)方法分别扩增产ESBLs大肠埃希菌常见的β-内酰胺酶基因:TEM、CTX-M和SHV。结果分离的498株大肠埃希菌中,产ESBLs 338株,占67.87%;科室分布以妇瘤科为主,共94株占27.81%;PCR扩增显示,60株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM55株,占91.67%,CTX-M1 42株,占70.00%,CTX-M13 42株,占70.00%,SHV24株占40.00%;且携带≥两种耐药基因53株占88.33%。结论本地区肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌主要分布在妇瘤科及胃肠科等科室;基因型以TEM、CTX-M1、CTX-M13型为主。     

产ESBLs与AmpC酶肠杆菌科细菌表型检测及基因型分析

目的了解肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与Amp C酶基因型特征。方法对临床分离的287株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌筛选产ESBLs/AmpC酶的菌株进行表型确证试验。对常见的SHV、TEM超广谱β-内酰胺酶基因型和DHA-1、ACT-1 AmpC酶基因型进行PCR扩增,并对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果表型确证产酶大肠埃希菌SHV、TEM、DHA-1、ACT-1基因的阳性率分别为46.5%、49.5%、50.9%、32.1%,产酶肺炎克雷伯菌SHV、TEM、DHA-1、ACT-1基因的阳性率分别为50.0%、26.7%、62.5%、45.8%。部分分离菌株同时携带2种或以上基因型。结论临床分离的产ESBLs与AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌携带多种耐药基因比率较高,临床检出多重耐药细菌逐年升高,临床对产酶的多重耐药菌的防治迫在眉睫。     

产超广谱β-内酰胺酶临床分离株的耐药性及基因分型研究

目的了解深圳地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法采用纸片扩散法及E-test法检测产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性;多重聚合酶链反应(Multiple-PCR)检测ESBLs基因并进行初步分型。结果大肠埃希菌产ESBLs阳性率为24.14%,肺炎克雷伯菌为34.55%;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药的多重耐药率高达70%以上,未发现亚胺培南耐药株,对头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物多数敏感。ESBLs基因型以CTX-M型最为常见,占84.62%;30.77%检出了TEM或SHV型基因;未定型菌占3.85%。结论深圳地区产ESBLs菌对亚胺培南、头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物较敏感;ESBLs基因以CTX-M型为主。     

大肠埃希菌的耐药特点与产超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 探讨大肠埃希菌的耐药特点和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型分布.方法 对2009年1月-2010年12月临床分离的231株大肠埃希菌进行耐药性统计和ESBLs基因分析.结果 尿液、痰液为最主要标本来源,占43.29％、22.08％;大肠埃希菌对氨苄西林(耐药率85.28％)等多数β-内酰胺类、环丙沙星(75.76％)等氟喹诺酮类、庆大霉素(52.38％)等氨基糖苷类耐药率较高,对美罗培南(4.33％)等碳青霉烯类、头孢哌酮/他唑巴坦(6.93％)等含他唑巴坦β-内酰胺类抗菌药物耐药率低;CTX-M型、TEM型、SHV型耐药基因均可见,CTX-M型多见,可见复合基因.结论 大肠埃希菌耐药率高,应根据药敏及耐药基因合理使用抗菌药物.     

临床分离产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药基因分型研究

目的对本院分离的产ESBLs大肠埃希茵进行耐药基因分型研究,为指导临床合理用药提供依据。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准,进行产ESBLs大肠埃希菌的初筛确证实验得到的产ESBLs大肠埃希菌28株,采用PCR方法进行耐药基因的分型研究。结果 28株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM型为11株(39.29%),SHV型为6株(21.43%),非TEM非SHV细菌有9株(32.14%),TEM型对氨苄西林100%耐药,而SHV型主要对三代头孢类抗生素耐药,其治疗的首选药物为亚胺培南。结论本院检出的产ESBLs大肠埃希菌主要型别为TEM型,耐药基因分型研究将为临床用药和医院感染监控提供较有价值的参考。     

大肠埃希菌胆汁培养分离株ESBLs基因分型报告

目的了解深圳市人民医院来自肝胆外科胆汁培养的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的基因型和耐药性。方法应用PCR及DNA测序方法分别分析产酶株的TEM、SHV及CTX-M编码基因,并分析11种抗生素对产酶株的最低抑菌浓度(M IC)。结果在20株产ESBLs大肠埃希菌中,13株检出CTX-M-14基因;5株检出CTX-M-15基因,1株检出SHV-2 a基因,1株三种基因均未检出。结论该院胆汁培养分离的产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M-14。     

结直肠癌术后切口感染患者分离产ESBLs大肠埃希菌耐药性及分子分型

目的 探究结直肠癌术后切口感染患者分离产β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及分子分型。方法 收集2018年5月-2021年5月于中国医科大学附属盛京医院进行手术治疗的结直肠癌患者术后切口感染分泌物分离出的大肠埃希菌105株，筛选产ESBLs大肠埃希菌菌株48株，采用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验，采用聚合酶链式反应(PCR)扩增鉴定产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因型，采用多位点序列分型(MLST)分析产ESBLs大肠埃希菌ST分型。结果 48株产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物完全敏感，对阿米卡星、妥布霉素耐药率分别为18.75%和25.00%,但对其他抗菌药物耐药率均较高，表现为多重耐药；产ESBLs大肠埃希菌对常用抗菌药物(阿米卡星、妥布霉素、亚胺培南和美罗培南除外)的耐药率高于非产ESBLs大肠埃希菌(P<0.05);48株产ESBLs大肠埃希菌均检出β-内酰胺酶基因，其中31株(64.58%)检出携带TEM-1基因，19株(39.58%)检出携带CTX-M-14基因；48株产ESBLs大肠埃希菌共有10种ST分型，以ST131(31.25%)为主...