4种方法检测大气颗粒物PM2.5的细胞毒性

目的采用多种检测原理和观察终点的细胞毒性试验综合评估提取PM2.5的细胞毒性效应,为深入研究PM2.5生物学效应提供实验依据。方法用去离子水提取PM2.5,溶于二甲亚砜获得PM2.5悬液。不同浓度PM2.5染毒支气管上皮(HBE)细胞24 h,采用噻唑蓝比色(MTT)、乳酸脱氢酶释放法(LDH法)、台盼蓝拒染法、吖啶橙-溴化乙锭双染法(AO-EB双染法)4种细胞毒性实验评估PM2.5的细胞毒性,并计算半数抑制浓度(IC_(50))。结果去离子水提取的PM2.5溶于二甲亚砜后呈黑褐色,肉眼可见颗粒成分。不同浓度的PM2.5处理HBE细胞24 h后,台盼蓝拒染法(IC_(50)=815.5μg/m L)、LDH释放法(IC_(50)=827.3μg/m L)及AO-EB双染法(IC_(50)=887.5μg/m L)检测结果与空白对照组和溶剂对照组相比,细胞存活率均显著下降(P0.05);而MTT法的细胞存活率检测结果显著高于对照组1.5~4.0倍(P0.05),与细胞实际生长状态不符。结论用去离子水提取PM2.5可减少溶剂带入,能够最大程度反映空气污染实际情况;实验采用的4种方法都可检测出水提PM2.5细胞毒性,但由于样品颜色的特殊性,MTT实验不能准确检测本研究中PM2.5的细胞毒性。     

免疫避孕研究:精子抗原作为候选避孕疫苗

以精子抗原为基础的疫苗开发代表了一种大有希望的避孕途径。精子抗原在避孕疫苗开发上的应用在于其精子特异性,参与人类生育,并可在生殖道局部产生足以能够终止受精的抗体应答的免疫原性。几种涉及生育的精子表面抗原已被鉴定。例如:乳酸脱氢酶(LDH)-C4,兔精子自身抗原(RSAs)、PH-20,SP-10,HSA-63,受精抗原-1(FA-1),FA-2,卵裂信号蛋白-1(CS-1)。综述这些抗原对开发免疫避孕疫苗的重要意义。     

抗受精、抗着床、抗早孕

目前常用的避孕方法可综合为三种(1)用化学或机械方法阻止精子与卵子相遇。(2)用宫内节育器阻止受精卵着床。(3)用口服避孕药阻止排卵。一旦避孕失败,人流是进一步的弥补措施。虽然这些方法在控制生育方面起了很大作用,但远不能满足人们的需要。如从生殖生理方面深入研究人类的受精、着床、早孕过程,避孕措施将会更多样化。但有关这方面的知识,许多还停留在动物实验阶段。现仅从有关受精、着床、早孕的生理过程,进一步探索是否可找到更     

白芸豆植物凝集素对不同物种精子的凝集作用与抗孕效果研究

目的:观察和比较自白芸豆中提取的植物凝集素(PHA)对人、小鼠、牛、山羊和兔精子的凝集作用和整体给药的避孕和抗早孕作用。方法:体外实验中,在精液中加入不同浓度的PHA,对使不同物种精子发生凝集作用影响因素进行观察,高浓度PHA制动的精子用相应获能液洗涤后复苏;在体内实验中,对交配见阴栓后的雌鼠于不同时间一次性经阴道给予PHA;另外不同时间间隔对正常性周期小鼠多次给予PHA观察其避孕效果。结果:体外实验结果表明,人、小鼠和牛的精子在低浓度PHA(15.6～125μg/ml)作用下30min就完全发生凝集,但不会致死,不同物种的精子凝集方式有所不同。凝集后的精子可以在室温下(22±7℃)存活7～12h。而≥250μg/ml的高浓度PHA会使这5种精子完全制动并发生不可逆致死。并且在低pH值时,精子存活时间明显缩短。体内实验结果表明经阴道给予PHA具有抗早孕的效果;每天经阴道给予PHA具有100%的避孕效果。结论:在体外实验中,云南大白芸豆植物凝集素具有广泛的精子凝集作用;在体实验证明PHA可有效用于避孕和抗早孕,因此PHA有可能开发成为具有外用避孕作用的药物。     

锰铅镉复合暴露对人神经母细胞瘤细胞的毒性作用

目的探索重金属复合暴露对人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞的毒性效应。方法将SK-N-SH细胞分别暴露于空白培养基(对照)和氯化锰(125、250、500、750、1 000、1 500、2 000、4 000、6 000μmol/L),乙酸铅(500、750、1 000、1 500、2 000、2 500、3 000μmol/L),氯化镉(5、10、15、20、30、40、60、80μmol/L)单一及二元、三元复合溶液24、48、96 h后,检测细胞存活率,计算锰、铅、镉的药物抑制浓度(IC)。其中,二元、三元复合溶液的浓度均为相应金属IC_(10)、IC_(20)、IC_(30)、IC_(50)的等毒效应比混合,分别用毒性单位法、混合毒性指数法对毒性效应进行评价。结果与对照组相比,不同浓度锰、铅、镉单独染毒不同时间SK-N-SH细胞的存活率均较低,除500μmol/L铅染毒24、96 h组和5μmol/L镉染毒24、48 h组外,差异均有统计学意义(P0.05);随着锰、铅、镉单独染毒浓度的升高和染毒时间的延长,SK-N-SH细胞的存活率均呈下降趋势。三种金属对SK-N-SH的细胞急性毒性依次为镉(IC_(50):38.728μmol/L)锰(IC_(50):442.739μmol/L)铅(IC_(50):1 624.850μmol/L)。同一金属不同染毒时间的IC_(50)排序均为96 h48 h24 h。锰和镉复合暴露对SK-N-SH细胞的联合毒性在24 h均表现为拮抗作用,在48 h均表现为协同作用;96 h在毒效应为IC_(10)、IC_(20)时均表现为部分相加作用,在IC_(30)、IC_(50)时均表现为协同作用。镉和铅对SK-N-SH细胞的联合毒性在24 h毒效应为IC_(10)、IC_(20)、IC_(30)时均表现为拮抗作用,在IC_(50)时表现为部分相加作用;在48 h毒效应为IC_(10)时表现为拮抗作用,在IC_(20)、IC_(30)、IC_(50)时均表现为部分相加作用;在96 h时均表现为部分相加作用。铅和锰对SK-N-SH细胞的联合毒性在24、96 h毒效应为IC_(50)时分别表现为简单相加、协同作用,其余均表现为部分相加作用。锰、铅、镉对SK-N-SH细胞的联合作用在24、96 h时均表现为部分相加作用;48 h时在IC_(10)、IC_(20)、IC_(30)均表现为协同作用,在IC_(50)时表现为部分相加作用。结论三种金属对SK-N-SH细胞的毒性均表现为随暴露时间的延长而增强的趋势。金属复合暴露呈现复杂的毒性效应,毒性效应与特定的金属组合、暴露时间、暴露浓度密切相关。     

天然产物与体外杀精

全球每年有2亿多妊娠发生,其中50％是计划外妊娠,因此避孕药的研发一直备受关注.杀精子剂在性交前用于阴道以避免妊娠,是一种可由女性主动采用的避孕措施.壬苯醇醚（N-9）是目前市场上占据主要地位的杀精子剂,但N-9会损伤阴道上皮细胞并提高患艾滋病的风险,而天然产物则具有更好的安全性.天然产物是指动物、植物、微生物,包括昆虫、海洋生物等的身体组成成分或其代谢产物.研究发现,多种天然产物,尤其是天然植物化合物具有体外杀精活性,可能研发为阴道用避孕剂.从化学结构看,目前发现的天然产物杀精剂可归为皂苷类、氨基酸类、生物碱类、多酚类等,本文就近年来发现的具有杀精活性的天然产物做一综述.     

新开发的阴道避孕海绵的避孕效果

避孕方法有口服避孕药、宫内节育器、子宫帽、阴茎套等多种。其中避孕药有每天服用的麻烦及影响肝功能和脂质代谢的缺点,而宫内节育器有可能诱发盆腔炎。作为避孕效果确实、副作用更少的避孕方法,Chvapil曾报道过与胶原海绵插入阴道阻止精子上升的避孕方法,这次试制了在阴道海绵内混入杀精子物质的阴道避孕海绵,并检验了它的临床效果。对象:10对志愿参加试验的年轻夫妇。5对夫妇一组分A和B二组。女方的年龄27～36岁(平均27.4岁),是有生育能力的健康妇女。配偶的年龄     

在短尾猴评价一种新型阴道避孕剂的在体效力

近20年来在发展新型阴道避孕剂方面进展甚微.然而,阴道避孕剂可避免口服避孕药和宫内节育器的某些不利副反应。目前市场用的阴道避孕剂主要是些表面活性剂,如 nonoxynol-9,但其避孕效力较差。因此亟待发展一些活性更强的阴道避孕剂,可以迅速地使精子制动并能穿过凝集的精液。最近,离体实验证明一种非表面活性剂—RS37367是一种极强的杀精子剂,对兔、狗、食蟹猴及人类精子均有毒杀作用。本文即评价 RS37367的在体避孕效力。选择排卵期前后(月经周期第9～14天)的雌性短尾猴,用1ml TB 注射器插入阴道直至达宫颈,注入1ml 配方(药或对照剂),缓慢撤除注射器。令雌猴与有生育力的雄猴合笼,一般在5分     

外用避孕药物及其剂型研究的进展

阴道避孕药是人类用以控制生育的最古老的方法之一。古埃及、希伯来、希腊、印度及中国、日本都曾采用蜂蜜、乳香、橄榄油、软羊毛、麻、含有柠檬汁的海绵等不同物质,放入阴道以达避孕的目的。从现代避孕观点看,这些物质实际上起了双重作用:一是物理的机械屏障作用,阻止精子进入子宫颈上行与卵子结合。发展演变成现代的外用避孕工具—阴茎套、子宫帽,二是化学的杀死或抑制精子作用,即现代外用避孕药—杀精子剂的起源。在口服避孕药和官内节育器问世之前,阴道避孕法(包括外用     

比较壬苯醇醚(NP-9)和洗必泰对精子游动力的影响

杀精子药都是在生物学上能明显阻断生育力的一种药物。这类药物在发展中国家和发达国家中的应用正在不断地增加。遗憾的是这类药物的选择品种目前不多,因此发展新杀精子药是很重要的一个课题。壬苯醇醚(NP-9)是目前最广泛应用的一种杀精子药,它是一种非离子型表面活性剂。这类药可立即导致精子不能游动,从而无法使卵受精。不过目前人们对这种药的毒性仍然存在争议。至今明显的一种有害的实验发现是阴道应用壬苯醇醚杀精药后可降低血浆胆固醇水平。洗必泰是五十年代初期发现的一种消毒剂,它具有破坏细胞的渗透性屏障和阻断细胞色素系中电子传递的双重杀菌能力。目前在医药上已广泛应     

紧急避孕知多少

一、什么是“紧急避孕” 紧急避孕是指那些在无防护性生活后几小时或几天内，女方为防止妊娠而使用的一种临时性补救措施。紧急避孕在月经周期的任何时间都可以使用。它是通过干扰妇女生殖周期而起作用，进行阻止或延期排卵，干扰受精和阻止受精卵植入。     

用抗精子抗体抑制人精子透明带结合和精子卵膜结合

约5％的男性不孕是由精子的自身免疫引起。抗精子抗体可通过几种途径导致不孕,如阻止精子穿透宫颈粘液或通过降低精子与卵母细胞结合和穿透卵母细胞透明带的能力以干扰受精。精子抗体也能抑制人精子穿入去透明带的仓鼠卵母细胞,这提示抗体能干扰顶体反应或精子-卵膜的相互作用。以免疫珠试验(Immunobead test)检出抗精子抗体阳性(Ab~+)的病人为研究对象,通过手淫收集精液标本。并收集抗精子抗体阴性(Ab~-)的正常精液作为对照。病人精液平均精子数为79×10~6/ml,平均活动百分比为48％,正常形态精子的平     

卵母细胞化学激活在精子及精细胞体外受精中的应用

卵母细胞未完全激活是胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后受精失败或受精率低下的主要原因之一.单倍体圆形/长形精细胞(round/elong spermatid,RS/ES)与成熟精子相比,其受精能力及胚胎发育潜能较差.而卵母细胞化学激活可以显著改善由于卵母细胞未能激活导致的ICSI后受精失败或受精率低下,并可提高单倍体精细胞体外受精率及胚胎发育潜能.综述不同化学激活剂的作用原理及其在精子及精细胞体外受精中的应用.     

天地乳胶提醒您:关爱自己 从健康开始

使用避孕套能防6种疾病避孕套除了有很好的避孕作用外,还能起到男女生殖器官的部分隔离作用,从而可以防止多种疾病传播。1 预防异位妊娠异位妊娠又称宫外孕。因避孕套能阻止精子进入阴道,所以不会怀孕,也就不会发生宫外孕。     

阴道隔膜的使用要点

我们已经知道，传统的子宫颈屏障避孕器具是阴道隔膜。阴道隔膜依其弹簧圈外缘直径毫米数，分为7种规格（50，55，60，65，70，75，80），我国常用的是65、70和75号三种。放置后的阴道隔膜能遮盖住宫颈，性交时让精子留在阴道里，阻止其上行与卵子相会（图2）。[第一段]     

避孕失败的妊娠不利于优生

因避孕失败而妊娠的妇女不乏其人,此时犹如站在十字路口——究竟是继续妊娠,还是施人工流产?从优生的角度看,以终止妊娠为上策。 外用避孕药 外用避孕药包括避孕药膜、避孕药膏、外用避孕药片、避孕栓等,放入阴道后短时间可以杀死精子。避孕成功率在90％。如果放置时间不足,未杀死的精子仍可进入子宫内。这样的精子     

精子特异性透明质酸酶PH-20结构与功能

精子表面特异性透明质酸酶(PH-20)是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的单链膜蛋白,特异性分布于精子头部浆膜和顶体内膜,是一种多功能蛋白,在受精过程中具有重要作用。鉴于PH-20在精子表面的特异性分布及其在受精中的作用,PH-20作为免疫避孕候选疫苗对象一直受到关注。继续深入研究PH-20的结构与功能,将有助于全面揭示精卵结合的分子过程。     

一种新的阴道避孕剂(ORF13904)具多种避孕机制

目前,已有多种阴道避孕剂,但它们都含有表面活性剂作为其活性成份,后者可破坏精子表面膜,引致细胞死亡。Homm等新近报道,ORF13904具有很强的阴道避孕活性,但它既不是表面活性剂也缺乏毒杀精子的特性。实验证明,ORF13904为水溶性化合物,用兔进行实验其避孕效力强于目前常用的阴道避孕剂,而且在交配前置于阴道内,它具有长效作用。与目前常用的阴道避孕剂不同,ORF13904不杀伤精子,而是抑制精子穿透宫颈粘液。本文进一步研究了该阴道避孕剂改变精子与宫颈粘液相互作用的机制。作者用兔作为动物模型,于整体与体外条件下研究了ORF13904的作用机制。为观察ORF13904对兔精子运动的影响,用人工阴道收集具正常生育     

精子特异性透明质酸酶PH-20结构与功能

精子表面特异性透明质酸酶(PH-20)是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的单链膜蛋白,特异性分布于精子头部浆膜和顶体内膜,是一种多功能蛋白,在受精过程中具有重要作用.鉴于PH-20在精子表面的特异性分布及其在受精中的作用,PH-20作为免疫避孕候选疫苗对象一直受到关注.继续深入研究PH-20的结构与功能,将有助于全面揭示精卵结合的分子过程.     

利用实时细胞分析法和Alamar Blue法测定雾霾细颗粒物对呼吸系统的细胞毒性

目的利用实时细胞分析(real time cell analyze,RTCA)法及Alamar Blue法测定雾霾细颗粒物对于人支气管上皮细胞(BEAS-2B)和人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的毒性作用,比较两种方法检测雾霾细颗粒物对呼吸系统影响的差异。方法分别将BEAS-2B及MRC-5细胞接种于RTCA配套16孔板及普通96孔板。接种24 h后,分别用终浓度为2500、1250、625、312.5、156.25和78.125μg/m L的雾霾细颗粒物进行染毒。选择3、12、24、36和48 h通过RTCA法及Alamar Blue法两种方法进行测定,计算IC_(50)。采用SPSS 16.0,利用配对t检验,对两种方法所得IC_(50)进行统计分析,并分析其相关性。结果雾霾细颗粒物作用于两种细胞后分别利用RTCA法及Alamar Blue法测得的IC50具有相关性,但差异无统计学意义。结论雾霾细颗粒物对于呼吸系统细胞有毒性,RTCA法可以应用于雾霾细颗粒物体外毒性检测。