朱砂雄黄在安宫牛黄丸对内毒素脑损伤大鼠促清醒中的作用及机制

目的:探讨朱砂、雄黄的去留对安宫牛黄丸促清醒作用的影响及可能的机制。方法:将皮层放置永久电极的雄性SD大鼠分为6组:对照组、模型组、安宫牛黄丸(全方)高、低剂量组(AGNH,0.4,0.2 g·kg-1)、去朱砂雄黄安宫牛黄丸(简方)高、低剂量组(QZX-AGNH,0.32,0.16 g·kg-1)。连续灌胃给药3 d,末次给药后1 h,采用内毒素(LPS)16 mg·kg-1尾静脉注射造成大鼠脑损伤。动态记录LPS注射后大鼠皮层脑电图,测定快波β波及慢波δ波的功率及相对功率。以LPS注射6h的结果进行组间比较,并测定该时间点各组(除低剂量组)大鼠皮层和脑干乙酰胆碱含量(碱性羟胺比色法)及M胆碱受体亲和力(放射性配体结合法)。结果:全方高、低剂量可使β波活动增强,使其功率和相对功率增强,其中以高剂量组作用明显,即表现明显的脑电激活作用;简方的作用弱,仅简方高剂量可提高β波相对功率。全方高剂量可增加皮层M-R亲和力,同时增加脑干Ach的含量(同模型组比较P<0.05);简方不明显。结论:全方可提高LPS损伤后皮层胆碱系统的功能;加强脑干胆碱系统对皮层的上行激活作用,提高皮层的活动水平,激活ECo G,从而促进机体的觉醒,简方的作用弱。因此,朱砂、雄黄可能在安宫牛黄丸促清醒作用中发挥重要作用,其机制可能与影响皮层和脑干胆碱能系统的功能相关。     

含与不含朱砂、雄黄的安宫牛黄丸对内毒素脑损伤大鼠皮层脑电图的影响

目的：观察含与不含朱砂、雄黄的安宫牛黄丸（简称全方与简方）对内毒素脑损伤大鼠皮层脑电图作用的差异，探讨两者对脑功能影响的区别，评估朱砂、雄黄在安宫牛黄丸“醒脑开窍”中发挥的作用。方法：以内毒素尾静脉注射复制内毒素脑损伤模型。观察含与不含朱砂雄黄的安宫牛黄丸对内毒素脑损伤4h、6h大鼠脑电图δ波、β波功率及相对功率的影响。结果：LPS尾静脉注射4h、6h时，β波功率持续降低，6h降至最低点。δ波功率无明显改变。β波相对功率则在6h时降低明显，δ波相对功率则持续升高，在4h、6h升高最明显，即LPS引起脑电的抑制作用。全方、简方均可降低内毒素损伤后4h、6h δ波相对功率，全方则可提高内毒素损伤后6 h β波功率及相对功率，以全方高剂量作用明显；简方无明显作用，简方低剂量和全方高剂量比较差异显著。结论：全方和简方对慢波的作用相似，使慢波（δ波）的活动减少，全方高剂量可使快波（β波）活动增加，对内毒素脑损伤有明显的脑电激活作用，简方的作用不明显。这一差异的产生可能是朱砂、雄黄的去留所致。     

安宫牛黄丸及重金属组分对内毒素脑损伤大鼠脑电图的影响

目的：评估朱砂雄黄在安宫牛黄丸“醒脑开窍”中所发挥的作用,为安宫牛黄丸组方的合理性提供实验依据。方法：采用药物定量脑电图的方法,以内毒素尾静脉注射复制内毒素脑损伤模型,观察含与不含朱砂雄黄的安宫牛黄丸及朱砂、雄黄对内毒素致脑损伤脑电图δ波、β波功率及相对功率的影响。结果：内毒素可使大鼠脑电图的慢波（δ波）功率和相对功率增加,而快波（β波）功率和相对功率降低。几种药物均可降低内毒素（LPS）脑损伤大鼠脑电δ波功率和相对功率;全方、朱砂雄黄、单雄黄可提高β波的功率和相对功率,朱砂可提高β波相对功率,简方的作用不明显。结论：全方对内毒素脑损伤脑电图有明显的脑电激活作用,朱砂雄黄及单独朱砂、雄黄和全方的作用相似,推测朱砂雄黄可能是安宫牛黄丸醒脑开窍作用的重要物质基础之一。     

安宫牛黄丸及其简化方的药效学比较研究

目的:根据安宫牛黄丸的治疗学作用,比较研究安宫牛黄丸及其简化方(安宫牛黄丸全方仅缺朱砂和雄黄)的药效学作用,以探讨安宫牛黄丸中朱砂和雄黄对其药效作用的影响。方法:实验以伤寒菌苗致家兔发热、戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠、NaNO₂诱导小鼠缺氧死亡、硝酸士的宁及戊四唑诱发小鼠惊厥为模型,观察比较安宫牛黄丸及其简化方的药效学作用。结果:安宫牛黄丸及其简化方有明显的解热作用;安宫牛黄丸及其简化方与戊巴比妥钠有明显的协同镇静作用;对NaNO₂诱导的小鼠缺氧死亡有明显的保护作用;安宫牛黄丸及其简化方对硝酸士的宁及成四唑诱发小鼠惊厥无明显的保护作用。结论:安宫牛黄丸及其简化方在上述药效学研究中,两者在药效学上无明显差异。     

雄黄是安宫牛黄丸抗细菌脂多糖诱导神经胶质细胞致炎作用的有效成分

目的:观察安宫牛黄丸及其所含的雄黄和朱砂对细菌脂多糖(LPS)所致大鼠神经胶质细胞/神经元炎症的保护作用。方法:采用大鼠原代中脑神经元-胶质细胞联合培养,利用LPS激活小胶质细胞引起炎症反应。通过[3H]多巴胺掺入法检测多巴胺能神经元的功能;采用荧光探针检测细胞内超氧化自由基的水平;通过实时反转录聚合酶链反应(Real-timeRT-PCR)检测细胞中炎症因子mRNA的表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白免疫印记试验(Western blot)检测炎症因子蛋白含量的变化。结果:LPS(10μg.L-1)处理大鼠神经元-胶质细胞联合培养7 d后明显减少多巴胺能神经元对多巴胺的摄取。安宫牛黄丸(400 mg.L-1)和雄黄(40 mg.L-1)能明显拮抗LPS对多巴胺能神经元的毒性作用,而朱砂单用无效。LPS激活神经小胶质细胞,促进其释放超氧化自由基,此作用可被安宫牛黄丸和雄黄抑制。LPS诱导炎症因子的过度表达,大幅上调TNF-α,iNOS,IL-1β,COX-2 mRNA的表达以及蛋白质的水平,安宫牛黄丸和其所含雄黄明显抑制这些炎症因子的过度产生,而单用朱砂无效。结论:安宫牛黄丸能拮抗LPS引起的脑内炎症反应,而雄黄是其抗炎作用的有效成分之一。     

热毒宁注射液对细菌内毒素性脂多糖致热大鼠的解热作用研究

该实验观察热毒宁注射液(RDN)对细菌内毒素性脂多糖(LPS)发热大鼠的解热作用及对中枢发热介质的影响。将大鼠随机分为空白对照组、模型组、安乃近组、热毒宁注射液高、低剂量组(12,6 mL·kg^-1)。除对照组外, 所有大鼠均腹腔注射脂多糖(LPS, 80 μg·kg^-1)观察各组体温变化,并采用双抗体夹心ELSIA法测定发热高峰大鼠下丘脑中环磷酸腺苷(cAMP)含量和肺组织中髓过氧化物酶(MPO)含量。热毒宁注射液高剂量组能明显降低发热大鼠体温的升高程度, 并且能够降低发热大鼠下丘脑中cAMP含量和肺组织中MPO含量。热毒宁注射液有明显的解热作用,其作用机制可能主要与减少下丘脑中cAMP含量和肺组织中MPO含量有关。     

桔梗与氯丙嗪伍用对大鼠脑纹状体多巴胺的影响

目的：研究桔梗与氯丙嗪联合应用对大鼠脑纹状体单胺类神经递质多巴胺的影响,探讨中西药配伍应用后可能发生的药物相互作用与机制。方法：大鼠随机分成4组：生理盐水组、桔梗(生药15.2 g·kg^-1·d^-1)单独给药组、氯丙嗪(20 mg·kg^-1·d^-1)单独给药组、氯丙嗪与桔梗(20 mg·kg^-1·d^-1+15.2 g·kg^-1·d^-1)合并给药组,每组6只,给药10 d后,利用微透析法在大鼠脑纹状体取样,HPLC仪检测透析液中多巴胺水平。结果：药后140 min(取样点80 min)时,氯丙嗪＋桔梗组中多巴胺水平(1.52±0.34) μg·L^-1显著高于氯丙嗪组(1.25±0.22) μg·L^-1(P<0.05)和生理盐水组(1.06±0.24) μg·L^-1(P<0.01)。结论：桔梗与氯丙嗪合用后大鼠脑内多巴胺水平升高,治疗时同时给予桔梗,可以减少氯丙嗪的用量,达到保持疗效,降低其不良反应。     

EVAc膜及促进剂对左炔诺孕酮人皮肤渗透速率的影响

 目的：测定不同厚度、不同醋酸乙烯(VAc)含量的乙烯-醋酸乙烯控释膜(EVAc)及不同促进剂对左炔诺孕酮(LNG)人皮肤渗透速率的影响。方法：采用Valia-Chien渗透池与HPLC测定以上不同条件下LNG/体积分数为70%的乙醇(EtOH)饱和液中LNG人皮肤渗透速率。结果：LNG的皮肤/膜渗透速率随控释膜厚度的增加而减少，控释膜厚度的倒数与LNG皮肤渗透速率呈良好的线性关系，皂0.9929。控释膜中VAc含量(280,180,140g·kg^-1)会影响LNG的渗透速率 ，以280g·kg^-1VAc为最高，140g·kg^-1VAc最低。促进剂(20g·kg^-1油酸或20g·kg^-1月桂氮-酮)能明显增加LNG的人皮肤渗透速率。结论：以20g·kg^-1油酸为促进剂,50μm,280g·kg^-1VAc的EVAc膜为控释膜时，LNG人皮肤渗透速率可达设计要求。     

青蒿琥酯对内毒素诱导的一氧化氮合成的抑制作用

目的 :探讨青蒿琥酯对内毒素诱导的巨噬细胞一氧化氮 (NO)合成的影响。方法 :①用内毒素 (LPS)或LPS合并γ 干扰素作为巨噬细胞 (RAW 264.7)的NO合成诱导剂 ,加入不同浓度的青蒿琥酯 ,培养后取上清液 ,用Griess试剂测定NO产生量。②Balb/c小鼠肌肉注射青蒿琥酯 5 0mg·kg^-1·d^-1×3d ,收集腹腔巨噬细胞 ,测定LPS对细胞的NO诱生能力。结果 :LPS 1.0 ,0.2μg·ml^-1或γ-干扰素 100u合并LPS 1.0 ,0.2 ,0.04μg·ml^-1作用于RAW 264.7细胞 ,均可诱导大量NO合成。青蒿琥酯对LPS或LPS合并干扰素诱导的NO合成均有明显的抑制作用 ,其抑制作用具有明显的量效关系。经青蒿琥酯治疗后的小鼠 ,其腹腔巨噬细胞对LPS的反应性降低 ,其受LPS刺激后产生的NO量明显降低。结论 :青蒿琥酯可降低LPS诱导的炎性因子的产生 ,减轻炎症反应。     

安宫牛黄丸对脑出血大鼠脑组织超微结构的影响

目的：研究安宫牛黄丸对大鼠脑出血模型血肿周边脑组织超微结构的影响。方法：实验大鼠分为正常对照组、假手术组、模型组、全方干预组、简方干预组，采用立体定位技术制作脑出血模型，分别于造模后4h、24h取标本，透射电镜观察血肿周边组织超微结构。结果：模型组造模后4h即已出现明显的神经细胞、血管损伤性变化；假手术组、模型组、简方组造模后4h、24h均出现严重血管损伤；安宫牛黄丸全方干预组在造模后4h、24h均表现为受损细胞、血管少见；全组标本神经纤维出现明显损伤少见。结论：安宫牛黄丸全方干预的大鼠自发性脑出血后脑损害轻微，安宫牛黄丸简方效果不明显。     

解郁丸抗抑郁作用机制的初步研究

目的 :初步探讨解郁丸抗抑郁作用机制。 方法 :采用高剂量阿朴吗啡导致体温下降试验,5-羟色胺酸(5-HTP)诱导甩头行为试验以及高效液相色谱-电化学检测法测定小鼠下丘脑、皮层、海马等脑内单胺类递质及其代谢产物含量。 结果 :解郁丸能显著拮抗高剂量阿朴吗啡所致小鼠体温下降;增加5-HTP诱导甩头行为。解郁丸单次和连续14 d给药,可提高下丘脑中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)与DA的代谢产物3,4-二羟基苯乙二醇(DOPAC)的比值;也可使皮层中5-HT,NE,5-HT的代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),DOPAC含量升高,降低5-HT与5-HIAA及DA与DOPAC的比值;并可提高海马中5-HT与5-HIAA及DA与DOPAC的比值。解郁丸可使利血平化小鼠下丘脑中NE,5-HIAA,海马中5-HT,5-HIAA,DA与DOPAC的比值明显升高。 结论 :解郁丸抗抑郁作用机制可能与调节不同脑区的5-HT,NE等神经递质有关。单次和连续14 d给药可增加不同脑区5-HT,NE,DA的含量,连续14 d给药对利血平化所致不同脑区单胺类递质含量下降也有不同程度的翻转效应。     

Neurotransmitter levels in brains of chronically Jiawey Siwu-treated rats

Levels of monoamines and metabolites, excitatory amino acids, and gamma-aminobutyric acid (GABA) were investigated in discrete brain areas of chronic Jiawey Siwu (JS)-treated rats. Male Sprague-Dawley rats were dosed orally for 3 months with normal saline or JS at 0.21, 1.05 or 4.2 g/kg/day. Body weights of these four groups were similar over 3 months. Most effects of JS revealed a dose dependency with levels of neurotransmitters. Levels of norepinephrine (NE) and epinephrine (EPI) in cerebral cortex; EPI, vanillylmandelic acid (VMA), dopamine (DA) and 5-hydroxytryptamine (5-HT) in medulla oblongata; DA in midbrain; NE and 5-HT in amygdala; and 5-HT in hypothalamus had decreased in JS-treated rats. 3-Methoxytyramine (3-MT) in cerebral cortex; 5-hydroxyindole-3-acetic acid (5-HIAA) in medulla oblongata; NE, 3-MT and homovanillic acid (HVA) in pons; EPI and 3-MT in midbrain; 3-MT and HVA in amygdala; 3-MT, 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC), HVA and 5-HIAA in cerebellum; HVA in hypothalamus; and DOPAC and HVA in hippocampus had all increased in JS-treated rats. In pons, 5-HT increased with low and decreased with high JS doses. Ratios of DA/3-MT in pons and midbrain; DA/HVA in pons and cerebellum; and 5-HT/5-HIAA in medulla oblongata, cerebellum and hypothalamus had decreased. Furthermore, aspartate (ASP) and glutamate (GLU) levels had decreased in cerebral cortex, midbrain, hypothalamus and hippocampus or amygdala, and increased in pons. GABA levels were reduced in cerebral cortex, and higher in medulla oblongata, pons, amygdala, cerebellum, hippocampus and striatum of JS-treated rats. These results indicate that the synthesis and (or) metabolism of NE, DA, EPI and 5-HT, and the levels of ASP, GLU and GABA in rat brains were differentially regionally altered by JS, which may contribute to the central manifestations of JS treatment.     

都梁丸提取液的镇痛作用及其对小鼠脑组织中5-HT、5-HIAA、DA及NE含量的影响

目的观察都梁丸提取液的镇痛作用及其对脑组织中5-羟胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量的影响。方法实验设正常组、模型组、都梁丸提取液大、中、小剂量组;除生理盐水组外,其余各组足趾部注射完全福氏佐剂(FCA)复制炎性疼痛模型后,连续灌胃给药3天,正常组及模型组灌服生理盐水(简称 NS),都梁丸提取液大、中、小剂量组分别灌服都梁丸提取液13.36、6.68、3.34g/kg。热刺激法测定小鼠疼痛模型的痛阈值,高效液相色谱法测定脑组织中5-HT、5-HIAA、DA、NF 含量。结果都梁丸提取液明显提高动物模型痛阈,增加脑组织中5-HT、5-HIAA、DA 含量,降低 NE 的含量,与模型组比较有差异显著性(P<0.05)。结论都梁丸提取液具有镇痛作用,其机制可能与其影响痛觉调制的神经递质5-HT、5-HIAA、DA、NE 含量有关。     

ICP—OES法测定安宫牛黄丸中重金属的含量

目的：通过对安宫牛黄丸中重金属元素铅、砷和汞进行含量测定,探究其是否符合限量规定,为该药品的质量控制和安全用药提供可靠依据。方法：采用HNO3-HCIO。混酸对样品进行湿法消化,运用ICP-OES法测定安宫牛黄丸中重金属的含量。结果：重金属元素检测分析方法考察结果表明3种重金属元素As、Hg和Pb的含量分别为：3．46X4μg／g、2．19×4μg／g、1．66×2μg／g。结论：该药品因含有以治疗为目的的矿物类药物朱砂（HgS）和雄黄（As：S,）,故砷、汞、铅的含量均超出国家限量标准。因此,为了进一步提高含重金属中药的用药安全性,中药中重金属含量应采取更进一步的控制。     

舒肝方对心理应激肝郁大鼠神经生殖内分泌的作用

目的:探讨舒肝方(柴胡、芍药、枳壳等)对心理应激肝郁雌性大鼠神经生殖内分泌的影响。方法:以夹尾激怒法建立心理应激肝郁证大鼠模型,检测疏肝补肾中药对大鼠下丘脑垂体和血清NE、DA、5-HT、HVA、DOPAC、5-H IAA以及血清LH、FSH、E2、T、P、PRL水平。结果:模型大鼠下丘脑垂体NE减少,DA、5-HT及5-H IAA含量增加,血清FSH、LH、E2、P降低,NE、DA、5-HT、5-H IAA及T水平升高(P<0.05,P<0.01)。舒肝补肾组血清P及LH水平明显升高;舒肝及舒肝补肾方均能升高模型大鼠下丘脑垂体NE及血清FSH、E2水平,降低下丘脑垂体DA、5-HT、5-H IAA及血清NE、5-HT、T水平;补肾方亦能抑制下丘脑垂体NE、血清FSH、P水平下降及下丘脑垂体与血清5-HT、血清NE、T水平升高。(P<0.05)。结论:心理应激状态下肝郁证雌性大鼠的神经生殖内分泌功能紊乱,舒肝补肾中药具有改善神经生殖内分泌功能的作用。     

安宫牛黄丸中汞、砷在正常和脑缺血模型大鼠体内的吸收与分布研究

目的:在正常大鼠和脑缺血大鼠灌胃服用安宫牛黄丸后,比较研究该药的朱砂和雄黄中汞和砷在大鼠体内的吸收和分布特点。方法:安宫牛黄丸以灌胃正常大鼠和脑缺血模型大鼠,药后在不同时间采血样、断头处死动物,取出大鼠的肝脏、肾脏和脑组织并制备匀浆,经微波消解,以原子吸收光谱仪检测总汞、总砷。结果:安宫牛黄丸灌胃正常大鼠后1h血液中的总汞、总砷含量最高;总汞在血液、肾脏中含量最高;总砷在血液中含量最高。安宫牛黄丸灌胃于脑缺血24 h模型大鼠后1 h在体内的汞和砷的分布特点同于正常大鼠。结论:安宫牛黄丸在血液中的达峰时间为1h;汞主要分布于血液、肾脏,而砷在血液中的浓度最高;汞和砷在正常大鼠和脑缺血模型大鼠的体内分布特点没有明显区别。     

异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节作用研究

目的阐明异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的调节。方法根据维吾尔医学理论采用多因素复制小鼠异常黑胆质载体动物模型,并用异常黑胆质成熟剂不同剂量(8.58,17.16,34.32g/kg),14d全程干预给药,此后用ELISA法检测血清ACTH和CORT含量;采用高效液相-荧光检测分析法分析了异常黑胆质载体动物模型小鼠血清和脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、3,4二羟基本乙酸(DOPAC)等单胺类神经递质含量。结果异常黑胆质成熟剂不同剂量可以降低异常黑胆质载体动物模型血清NE含量(P<0.01),增加血清DA、5-HT和DOPAC含量(P<0.01),同时发现异常黑胆质成熟剂能降低异常黑胆质载体动物模型脑组织中NE含量(P<0.01),异常黑胆质成熟剂大剂量能增加DA含量(P<0.05),小剂量和大剂量能增加DOPAC含量(P<0.01)。结论提示异常黑胆质成熟剂可能通过参与神经内分泌系统的内在调节,改善异常黑胆质载体动物模型的丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的紊乱。     

安宫牛黄丸的实验药理学研究

目的:探讨安宫牛黄丸的实验研究内涵。方法:根据安宫牛黄丸实验研究资料分类介绍。结果:安宫牛黄丸实验研究内涵主要体现在:对方中黄芩、栀子、郁金、黄连、牛黄、麝香、朱砂、雄黄做了质量控制研究;对方中朱砂、雄黄是否必需及其药代动力学状况进行了初步研究;该药通过对急性脑损伤动物模型脑组织、脑电波、单胺类和氨基酸类神经递质、一氧化氮、氧化损伤与抗损伤因子、乳酸脱氢酶及其同工酶、肌酸激酶的调节,产生清热解毒、镇惊开窍的效用;实验还发现该药有解热、镇静、抗缺氧等作用,未发现抗惊厥作用;可试用于白血病的治疗;对肺、肝有保护作用;生理状态下较长时间服用对心肌、肾、红细胞、脾等有一定的损伤,病理状态下损伤较小。结论:这些研究成果对进一步提升该药的质量标准、推广临床应用具有重要意义。     

Anxiolytic effect of ting-chih-wan in mouse behavior models of anxiety

The anxiolytic effect of the alcoholic extract of ting-chih-wan (TCWa) was studied using the black and white test (BWT) and the elevated plus-maze (EPM). We further demonstrated the anxiolytic mechanism of TCWa by combining with diazepam (DIZ), serotonin (5-HT) agonists or antagonists, and measuring the levels of monoamines and its metabolites in the brain stem and cortex. In the BWT, TCWa (0.1-1.0 g/kg, p.o.) increased the time spent in the white chamber and total change between the two chambers, and decreased the time spent in the black chamber. TCWa (0.1-0.5 g/kg, p.o.) increased the arm entries and the time spent on the open arms, and decreased the arm entries and the time spent on the closed arms in the EPM. On the other hand, TCWa (1.0 g/kg, p.o.) decreased horizontal activity and prolonged pentobarbital-induced sleeping times. TCWa (0.1, 0.5 g/kg) decreased the levels of norepinephrine (NE), dopamine (DA), 5-HT and 5-hydroxy-indoleacetic acid (5-HIAA) and increased the levels of vanillylmandelic acid (VMA) and homovanillic acid (HVA) in the brain stem. TCWa (0.1 and 0.5 g/kg) decreased the levels of NE, DA and increased the levels of VMA and HVA in the cortex. TCWa also attenuated the anxiogenic effect of 5-hydroxytryptophan (5-HTP) and enhanced the anxiolytic effect of 9p-chlorophenylalanine (PCPA), buspirone (BUS) and ritanserin (RIT) in the EPM. From these results, TCWa at 0.1 and 0.5 g/kg possessed an anxiolytic effect T heanxiolytic mechanisms of TCWa might be due to decreased catecholaminergic activity caused by the increase in the turnover rate of catecholamines in the brain and decreased concentrations of 5-HT in the brain stemvia activating somatodendritic 5-HT1A autoreceptors and inhibiting postsynaptic 5-HT receptors.