Dieldrin对PC12细胞的增殖及酪氨酸羧化酶mRNA表达的影响

目的 :观察有机氯杀虫剂dieldrin对培养的PC12细胞增殖及对其酪氨酸羟化酶mRNA(THmRNA)表达的影响 ,探讨该毒物致帕金森病 (PD)的可能机制。方法 :以MPP+ 为阳性对照 ,用不同浓度 (10 -4 ～ 1mmol·L-1)的MPP+ 和dieldrin分别于预PC12细胞 2 4h后计细胞数 ,并采用半定量逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)方法测定THmRNA表达的改变。结果 :(1)MPP+ 和dieldrin对PC12细胞均有毒性 ,1mmol·L-1的MPP+ 可使细胞数减少至对照组的 45 % (P <0 0 1) ,低于此浓度的MPP+ 对细胞增殖无影响 ;但 0 1mmol·L-1的dieldrin就可使细胞数减少至对照组的 3 0 % (P <0 0 1) ,1mmol·L-1的dieldrin使PC12细胞全部死亡。 (2 )MPP+ 和dieldrin均可降低THmRNA的表达。 0 1mmol·L-1MPP+ 和dieldrin使细胞THmRNA的表达分别下降至对照组的 69 3 % (P >0 0 5 )和 61 7% (P <0 0 1)。结论 :Dieldrin不仅具有与MPP+ 相同的抑制培养的PC12细胞的增殖及THmRNA表达的作用 ,而且其对细胞的毒性强于MPP+ ,提示dieldrin是一种潜在的致PD物质 ,其与PD的关系值得进一步研究     

培高利特和左旋多巴对MPP^＋诱导的PC12细胞的作用

目的:研究不同剂量培高利特(pergolide)和左旋多巴(L-dopa)对MPP 诱导的PC12细胞的作用。方法:在细胞培养中用不同剂量的pergolide和L-dopa干预对MPP 所诱导的PC12细胞的影响。观察不同时点PC12细胞活力。酪氨酸羟化酶(TH)蛋白含量及细胞凋亡数。结果:0.01ìmol·L-1pergolid提高MPP 损害的PC12细胞的生长,细胞活力升高。0.01和0.1ìmol·L-1pergolid提高MPP 损害后的PC12细胞TH蛋白含量,减少该细胞的凋亡数。0.1ìmol·L-1L-dopa提高MPP 损害后PC12细胞的活力。随剂量递增细胞活力递量;当达1000ìmol·L-1L-dopa时细胞活力减少最明显。结论:提示小剂量pergolid对MPP 诱导的PC12细胞损害有一定的保护作用。高剂量则有一定的损伤。     

利福平对MPP+所致PC12细胞线粒体损伤的影响

目的 探讨利福平对1-甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的大鼠嗜铬细胞瘤细胞株(PC12)细胞形态、线粒体结构的影响.方法 利用MPP+诱导分化PC12细胞建立帕金森病体外细胞模型;Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡;透射电子显微镜观察各组细胞线粒体超微结构.结果 正常细胞组PC12细胞形态完整,线粒体结构完整清晰;MPP+作用后,凋亡细胞数量增多,核固缩、碎裂明显,线粒体空泡化明显,部分细胞见凋亡小体形成;利福平作用后,随着利福平浓度的增高,细胞凋亡程度及线粒体空泡化现象明显减轻,且存在浓度依赖性.结论 利福平可减轻MPP1+所致PC12细胞线粒体损伤的程度,推测可能是通过对线粒体的保护作用来减轻MPP+诱导的分化PC12细胞的凋亡,但其作用的具体途径还需进一步研究.     

胰岛素可抵抗MPP^＋诱导的PC12细胞的凋亡

目的观察胰岛素在MPP+诱导PC12细胞凋亡中的干预作用.方法应用MTT法研究细胞活性的改变,应用HOECHST33258染色结合荧光显微镜技术及流式细胞技术检测不同药物对PC12细胞的凋亡诱导作用,应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定胰岛素受体(insulin receptor,IR)mRNA的改变.结果①MPP+诱导PC12细胞凋亡,胰岛素可以抵抗此凋亡作用;②以上两种处理,均未见到胰岛素受体mRNA的改变,推测胰岛素受体的自身磷酸化有改变.结论胰岛素可以抵抗MPP+诱导的PC12细胞的凋亡.     

莱菔硫烷拮抗PC12细胞氧化应激损伤的机制

目的 探讨莱菔硫烷对体外1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞氧化损伤模型是否具有保护作用及其机制.方法 以MPP+损伤PC12细胞制备氧化损伤模型.不同浓度的莱菔硫烷加入培养基观察各组细胞生长情况.后续实验分成4组:正常对照组(A)、莱菔硫烷组(B)、MPP+损伤组(C)、莱菔硫烷预处理+MPP+损伤组(D).通过MTT比色法检测细胞活力,观察不同浓度莱菔硫烷预处理PC12细胞活力变化及不同分组PC12细胞活力变化;流式细胞术检测不同分组PC12细胞中细胞凋亡率的变化;免疫印迹法测定不同分组PC12细胞内转录因子相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)及醌还原氧化酶1(NQ01)蛋白的表达变化.结果 A组细胞存活率(98.70％)与MPP+(500μmol/L)组(58.16％)相比差异有统计学意义(F =21.83,P＜0.05),D组细胞存活率明显提高.C组细胞凋亡率升高,D组细胞与C组相比差异有统计学意义,莱菔硫烷预处理后细胞凋亡率明显减低.C组Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达下降,D组Nrf2、HO-1、NQ01蛋白表达升高.结论 莱菔硫烷对MPP+诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,莱菔硫烷对MPP+诱导的PC12细胞损伤的保护作用可能通过激活Nrf2-抗氧化反应元件通路途径实现.     

促红细胞生成素对1-甲基-4-苯基吡啶损伤的PC12细胞的保护作用(英文)

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞变性损伤的保护作用及机制。方法用MPP+处理PC12细胞制作帕金森病细胞模型,采用四甲基偶氮唑蓝法检测暴露于不同浓度EPO后细胞的活性;流式细胞术与DNA断端原位标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTPnick end labeling, TUNEL)检测各组的细胞凋亡率;免疫印迹法检测不同处理组PC12细胞Bcl-2和Bax的表达,并采用荧光法观察不同处理组PC12细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)与线粒体膜电位水平以及caspase-3活性的变化。结果 MPP+可以使PC12细胞存活率下降,凋亡率增高;同时PC12细胞内ROS增多,线粒体膜电位下降。MPP+还可以明显地提高Bax/Bcl-2比值并激活caspase-3。而EPO可以抑制这些由MPP+引发的改变,并在1 U/mL时发挥最大保护作用。结论 EPO可抑制MPP+诱导的PC12细胞死亡,其作用机制可能与其自身抗氧化和抗凋亡的特性有关。     

IGF-1对MPP~+诱导PC12细胞凋亡的保护作用及其机制

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制。方法以250μmol/L的MPP+损伤PC12细胞作为帕金森病(PD)细胞模型,实验分组如下:空白对照组、MPP+组,IGF-1+MPP+组和抑制剂组。抑制剂组再分为:(1)空白对照组;(2)MPP+组;(3)IGF-1组;(4)IGF-1+MPP+组;(5)MPP++LiCL组;(6)IGF-1+MPP++LiCL组。孵育24h后采用AO-EB法检测细胞凋亡率;采用MTT法检测细胞存活率;孵育4h之后采用Western Blot免疫印迹法检测糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、phospho-GSK-3β蛋白表达。结果(1)100nmol的IGF-1对MPP+处理的PC12细胞有保护作用,减少了MPP+所致的细胞凋亡。(2)LiCL起到了与IGF-1相似的对PC12细胞的保护作用。(3)总GSK-3β含量各处理组没有太大改变,但磷酸化的GSK-3β含量IGF-1组高于与MPP+单独处理组。结论IGF-1可减少MPP+所致的细胞凋亡,其保护作用与上调磷酸化的GSK-3β的表达相关。     

利福平对MPP~＋所致PC12细胞线粒体损伤的影响

目的探讨利福平对1-甲基-苯基-吡啶离子（MPP＋）诱导的大鼠嗜铬细胞瘤细胞株（PC12）细胞形态、线粒体结构的影响。方法利用MPP＋诱导分化PC12细胞建立帕金森病体外细胞模型;Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡;透射电子显微镜观察各组细胞线粒体超微结构。结果正常细胞组PC12细胞形态完整,线粒体结构完整清晰;MPP＋作用后,凋亡细胞数量增多,核固缩、碎裂明显,线粒体空泡化明显,部分细胞见凋亡小体形成;利福平作用后,随着利福平浓度的增高,细胞凋亡程度及线粒体空泡化现象明显减轻,且存在浓度依赖性。结论利福平可减轻MPP＋所致PC12细胞线粒体损伤的程度,推测可能是通过对线粒体的保护作用来减轻MPP＋诱导的分化PC12细胞的凋亡,但其作用的具体途径还需进一步研究。     

美满霉素对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的在离体细胞培养中探讨美满霉素(Minocycline,MC)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP )诱导的帕金森病细胞凋亡模型的保护作用.方法将MC或MPP 加入培养的PC12细胞中,建立多巴胺神经元凋亡模型,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞代谢活性,电泳法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果MPP 浓度为10μmol/L时建立多胺神经元凋亡模型;MC 100 μmol/L预处理可明显升高MPP 处理的PC12细胞活性;MC MPP 组细胞凋亡率显著低于MPP 组(P＜0.01),但仍明显高于阴性对照组(P＜0.05).结论MC对MPP 诱导的细胞凋亡有一定的保护作用.     

活化素A对MPP^＋所诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的观察重组人活化素A(rhAcT)对MPP+所诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法将MMP+或活化素A,L-deprenyl加入体外培养的PC12细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力的变化;用免疫细胞化学法和RT-PCR评价细胞的酪氨酸羟化酶和bcl-2蛋白及mRNA含量的变化,用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡的变化,比较各组的差异.结果预先给予rhAcT和L-deprenyl的两组细胞活力明显高于MPP+损害组,酪氨酸羟化酶和bcl-2的蛋白及mRNA表达强于损害组,同时两组的凋亡细胞明显减少,rhAcT和L-deprenyl两组间无显著差异.结论rhAcT和L-deprenyl通过上调bcl-2的表达,抑制凋亡的发生,而对MMP+所诱导的PC12细胞的损伤具有保护作用.     

Update on the language disorders of individuals on the autistic spectrum

Inadequate language is a defining feature of the autism spectrum disorders (autism). Autism is a behaviorally and dimensionally defined developmental disorder of the immature brain that has a broad range of severity and many etiologies, with multiple genes involved. Early studies, which focused on the language of verbal children on the autistic spectrum, emphasized aberrant features of their speech such as unusual word choices, pronoun reversal, echolalia, incoherent discourse, unresponsiveness to questions, aberrant prosody, and lack of drive to communicate. Persistent lack of speech of some individuals was attributed to the severity of their autism and attendant mental retardation rather than possible inability to decode auditory language. Clinical study of unselected children with autism indicated that the language deficits of preschoolers fall into two broad types, perhaps with subtypes, those that involve reception and production of phonology (sounds of speech) and syntax (grammar), and those that do not but involve semantics (meaning) and pragmatics (communicative use of language, processing, and production of discourse). Except for the preschoolers' universally deficient pragmatics and comprehension of speech, many of their language deficits parallel those of non-autistic preschoolers with developmental language disorders. There is now biological support for the clinical observation that young autistic children are language disordered as well as autistic. Recent electrophysiological studies disclose auditory input abnormalities in lateral temporal cortex even in verbal individuals on the autistic spectrum. Severe receptive deficits for phonology enhance the risk for epilepsy. Genetic studies indicate that linkage to chromosome 7q31-33 is limited to families with evidence for phonologic impairment as well as autism. Clearly, social and cognitive disorders alone provide an inadequate explanation for the range of language deficits in autism.