喉癌和癌旁组织的端粒酶活性检测

目的：探索端粒酶活性与喉癌发生发展的关系。方法：采用重复序列扩增法（ＴＲＡＰ－ＰＣＲ）检测５６例手术切除的喉癌组织和癌旁粘膜组织的端粒酶活性。喉癌组织均经病理证实,喉癌旁粘膜组织中有正常喉粘膜４１例,轻度不典型增生１５例。结果：喉癌组织端粒酶活性率为９１．０７％（５１／５６）,正常喉粘膜和轻度不典型增生喉粘膜的阳性率分别为９．７６％（４／４１）和３３．３３％（５／１５）,喉癌组织和癌旁粘膜组织中端     

声门上型喉癌中端粒酶活性的检测及其意义

目的：探讨端粒酶活性在声门上型喉癌中的表达及其意义。方法：采用端粒重复序列扩增法检测了ＨＥＰ－２喉癌细胞系,２６例声门上型喉癌组织和１５例癌旁组织。结果：ＨＥＰ－２喉癌细胞系呈端粒酶阳性,癌组织的端粒酶阳性率为８４．６％,明显高于癌旁组织的阳性率４０％（Ｐ〈０．０１）,喉癌组织端粒酶活性的表达与临床分期和有无颈淋巴结转移未出现出相关性（Ｐ〉０．０５）。结论：端粒酶活化是喉癌发生的重要遗传学改变,但     

c-Met和TIMP-2在喉癌中的表达及其意义

目的检测c-Met、TIMP-2蛋白在喉鳞状细胞癌（简称喉癌）及癌旁组织中的表达水平,研究两者表达与临床、病理参数的关系,探讨两者在喉癌侵袭、转移过程中的作用及其两者的相互关系。方法选取喉癌患者41例,另选癌旁组织15例作为对照,采用免疫组织化学方法（SP法）检测c-Met、TIMP-2的表达。结果c-Met、TIMP-2蛋白在喉癌组织中的阳性率分别为56．1％（23／41）及63．4％（26／41）。c-Met蛋白在癌旁组织中的阳性率为13．3％（2／15）,TIMP-2蛋白在癌旁组织为阴性。结论c-Met与喉癌颈淋巴结转移及病理分级有关;TIMP-2与喉癌的颈淋巴结转移有关;c-Met与TIMP-2在喉癌中的表达无相关性。     

喉癌癌变过程中CyclineE的表达及临床病理学意义

目的：研究喉癌癌变过程中ＣｙｃｉｉｎＥ的临床病理学意义。方法：用免疫组化检测２０例正常喉粘膜，４０例喉不典型增生和６０例喉癌组织中ＣｙｃｌｉｎＥ的表达。结果：ＣｙｃｌｉｎＥ阳性表达定位于肿瘤细胞核。在喉癌癌变过程中，喉正常粘膜、不黄型增生病变和喉癌中ＣｙｃｌｉｎＥ阳性表达率分别为：５．０％（１／２０），２０．０％（８／４０）和４５．０％（２７／６０）（Ｐ〈０．００１）。喉癌淋巴结转移组Ｃｙｃｌｉｎ     

Survivin在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及喉黏膜白斑中的表达及意义

目的 探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及喉黏膜白斑中的表达及其意义。方法 应用免疫组化对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织、20例喉乳头状瘤、28例喉黏膜白斑和16例正常喉黏膜中Survivin的表达情况进行检测。结果 Survivin蛋白在喉癌组织和癌旁组织、喉黏膜白斑及喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71．74％（33／46）、33．33％（8／24）、46．43％（13／28）；40％（8／20），在正常黏膜组织中无表达。喉癌组中的阳性表达率显著高于癌旁组织、喉黏膜白斑、喉乳头状瘤及正常黏膜组织中的表达率。且喉乳头状瘤组及喉黏膜白斑组中发生恶变的组织中Survivin蛋白均为阳性表达。Survivin蛋白的阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级无关。结论 Survivin在喉癌组织中过度表达参与了喉癌的形成，对喉癌的癌前病变发展成恶性肿瘤的潜在可能性有预测作用。     

喉癌标本端粒酶活性的检测

目的：探讨端粒酶生在喉癌发生过程中的作用。方法：采用ＴＲＡＰ方法检测３４例头颈肿瘤组织标本中的端粒酶活性。结果：在２７例喉癌患者中有２３例同端粒是笥，阳性率８５．２％，２７例相应癌旁组织有７例检出端粒酶阳性，阳性率２５．９％，７例喉乳头瘤瘤患者中有３例检出，阳性率４２．９％，结论：端粒酶活化并非只发生在喉癌进展的晚期阶段，在肿瘤形成的早期也有一定程度的端粒酶激活。端粒酶活性可能民癌的恶性程度有关。     

p16蛋白在喉癌前期病变中的表达及意义

目的：通过喉粘膜上皮中p16表达的实验,讨论p19蛋白在喉癌发生过程中的作用。方法：用S－P法检测106例喉癌前期病变标本中p16蛋白的表达,并设30例喉正常上皮和32例喉鳞癌作对照。结果：p16蛋白在喉正常粘膜上皮中阳性率为86．67％;喉癌前期病变中为75．47％,喉鳞癌中为37．5％,两者差异有显著性（P＜0．05）,喉癌前期病变随病变程度加重p16阳性率呈下降趋势,单纯增生组（83．33％）与重度不典型增生组（55．56％）差异有非常显著性（P＜0．01）。结论：p16基因表达的缺失与喉癌的发生有关;p16蛋白的表达可作为判断喉癌前期病变向恶性肿瘤化危险性的一个参考指标。     

用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记核酸探针检测国人喉癌人类乳头瘤病毒DNA

应用聚合酶链反应（PCR）技术制备非放射性探针标记物——地高辛素标记人类乳头瘤病毒（HPV）共有引物探针，对146例喉不同病变的新鲜组织标本（喉癌68例，喉其它病变48例，正常喉组织30例）进行HPV6，11，16，18，31，33，35，42，58共9型HPVSDNAS感染的检测。结果表明，喉癌组HPV感染阳性率45．6％（31／68），喉癌颈转移淋巴结组阳性率21．0％（3／15），喉癌前病变阳性率11．8％（2／17），声带息肉组阳性率6．3％（1／16），15例癌旁及15例癌周正常喉组织均为HPVDNA阴性。文中还对HPV在喉癌中的致病作用及应用PCR技术制备地高李标记HPV共有引物探针的敏感性及特异性进行了讨论。     

喉鳞状细胞癌和喉乳头状瘤中Survivin表达的意义

目的：探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌和成人喉乳头状瘤中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和20例喉乳头状瘤以及16例正常喉粘膜标本中Survivin的表达进行检测。结果：Survivin蛋白在喉癌组织、癌旁组织和喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71.74%（33/46）、33.33%（8/24）和40.0%（8/20）,在正常黏膜组织中没有表达,喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织及喉乳头状瘤中的表达率（均P〈0.01）。且发生恶变的喉乳头状瘤Survivin蛋白均为阳性表达。但Sur-vivin阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论：Survivin在喉癌组织中过度表达,参与了喉癌的形成,是喉癌形成的一个早期事件,可望成为预测成人喉乳头状瘤恶变的一个诊断方法。     

HIF-1a和VEGF在喉癌中的表达及其与血管生成的关系

目的：研究缺氧诱导因子-1a（HIF-1a）及血管内皮生长因子（VEGF）在喉癌组织中的表达程度及其与喉癌临床病理学特征之间的关系,并探讨HIF-1a及VEGF在肿瘤血管生成中的作用。为喉癌的发生机制提供理论基础,并为喉癌的早期诊断提供新思路。方法：试验分组：60例喉癌标本及20例癌旁正常组织。采用免疫组织化学方法检测HIF-1a及VEGF表达情况,并用CD105标记血管内皮细胞,计算微血管密度（MVD）。结果：60例喉癌组织中,HIF-1a、VEGF阳性表达率分别为71．67％（43／60）、65．00％（39／60）,MVD平均值为33．82±10．15;20例癌旁正常组织中,HIF-1a、VEGF阳性表达率分别为10％（2／20）、20％（4／20）,MVD平均值为21．48±6．84。喉癌组织中HIF-1a、VEGF阳性表达率显著高于正常喉组织。HIF-1a在喉癌组织中的阳性表达率与癌组织的临床分期、分化程度和淋巴结转移密切相关。VEGF阳性表达率与临床分期及有无淋巴结转移相关,而与组织分化程度无关。HIF-1a与VEGF表达一致符合率为56．67％（34／60）,两者表达呈明显正相关。HIF-1a、VEGF均阳性的喉癌组织MVD高于两者均为阴性者,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：喉癌组织中存在HIF-1a蛋白及VEGF的过表达,HIF-1a、VEGF与MVD在喉癌中的表达呈正相关,协同促进肿瘤新血管形成。     

头颈部恶性肿瘤组织中端粒酶活性定量检测及其意义

目的：探讨头颈部恶性肿瘤组织中端粒酶活性水平及其与肿瘤发生、发展的关系。方法：用改进的PCR—TRAP法对36例头颈部肿瘤组织、正常组织、癌旁组织分别进行端粒酶活性定量检测。结果：36例头颈部恶性肿瘤中有32例(88．9％)阳性表达，癌旁组织有4例(11．1％)阳性表达，正常组织有l例(2．8％)阳性表达，肿瘤组织与癌旁组织和正常组织之间，差异有显著性意义(P＜0．05)。端粒酶活性水平与临床分期、病理类型和分化程度不呈线性相关，癌旁组织和正常组织阳性病例的端粒酶定量水平较肿瘤组织低。结论：端粒酶的激活与头颈部恶性肿瘤的发生、发展可能密切相关；端粒酶活性有可能成为恶性肿瘤分子诊断的标志物和治疗的新靶点。     

喉癌组织中FHIT基因蛋白表达的研究

目的:以喉鳞状细胞癌为研究对象,探讨FHIT基因蛋白表达在喉癌发生、发展中的作用及临床意义.方法:用免疫组织化学SP法检测52例喉癌组织、23例癌旁组织及10例正常组织中FHIT基因蛋白的表达,分析在不同临床病理指标下FHIT蛋白表达的情况.结果:FHIT蛋白在正常组织中的阳性表达率(90.0%)及癌旁组织中的阳性率(78.3%)均高于癌组织中的阳性率(46.2%),差异有统计学意义(均P＜0.01).癌组织FHIT蛋白阳性表达率与临床分期和颈淋巴结转移有关,与病理分级无关.结论:喉癌的发生、发展与FHIT抑癌基因的失活有密切关系,FHIT基因很可能是喉癌重要的侯选抑癌基因.     

肺癌肿瘤抑制因子-1在喉鳞癌组织中的表达及其意义

目的 研究肺癌肿瘤抑制因子-1(TSLC1)在喉鳞癌组织和癌旁正常组织的表达,探讨TSLC1与喉鳞癌的相关性,以期为喉癌的病因、诊断及治疗提供理论依据.方法 取喉鳞状细胞癌组织标本蜡块45例,其中8例有淋巴结转移.取20例癌旁正常组织标本蜡块作为对照.应用免疫组化PV-6000二步法测定二者中TSLC1的表达,分析TSLC1的表达水平与各临床病理参数的关系.结果用SPSS 10.0统计软件进行统计学分析.结果 TSLC1在喉鳞癌标本中的阳性表达率为17/45(37.8%),明显低于癌旁正常组织中TSLC1的阳性表达率15/20(75.0%),二者比较差异有统计学意义(χ²=7.68, P<0.01).TSLC1的表达下降与喉鳞癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移情况差异有统计学意义(χ²=4.15、6.11、4.11, P<0.05),而与年龄、发病部位及性别差异无统计学意义(χ²=0.25、0.09、1.0, P>0.05).结论 TSLC1在喉鳞癌中表达下降,且与喉鳞癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移情况有相关性.TSLC1在喉鳞癌中的表达下降可能与喉鳞癌的发生和侵袭有关,但需扩大样本进一步研究.     

Telomerase Activity Is Upregulated in Laryngeal Squamous Cell Carcinoma

Objective/Hypothesis The immortalizing enzyme telomerase has been linked to carcinogenesis and is being targeted as a novel molecular marker. This study investigated telomerase expression in patients with laryngeal squamous cell carcinoma and correlated telomerase activity with conventional prognostic parameters. Study Design A consecutive series of patients with laryngeal squamous cell carcinoma undergoing surgical salvage for persistent or progressive disease after failed radiation therapy. Methods Twenty patient samples of laryngeal squamous cell carcinoma and 20 adjacent histologically normal mucosal samples were assayed using the telomeric repeat amplification protocol (TRAP) method for detection of telomerase activity. The leukemic cell line, K562, acted as a positive control and the human fibroblast line, Hs21Fs, as a negative control. A sample was classified as telomerase positive when an RNase‐sensitive hexameric repeat ladder was observed. Absence of laddering was considered a negative result. Results Seventeen of 20 (85%) tumor samples and 4 of 20 (20%) adjacent histologically normal samples were telomerase positive. No statistically significant difference was observed when densitometric readings were compared by T category, tumor grade, or site (by ANOVA). Conclusions Although telomerase activity is present in laryngeal cancer, levels of activation do not correlate with conventional parameters used for prognostication. Our study indicates that the marker may be a useful adjunctive method in the diagnosis of malignancy after radiation failure.     

抑癌基因PTEN在喉癌中的表达及临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法,检测PTEN在68例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）及33例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的表达。结果：①喉癌组PTEN蛋白阳性表达率为61．8％（42／68）,对照组为100．0％（33／33）,喉癌组PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组（P＜0．01）。②PTEN蛋白阳性表达与喉癌临床病理特征的关系：高、中分化组与低分化组之间PTEN蛋白阳性表达率比较（79．3％：48．7％）差异有统计学意义（P〈0．01）;淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率（55．0％）显著低于无淋巴转移者（71．4％）（P＜0．05）;根据临床病理分期,Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期之间PTEN蛋白阳性表达率（76．0％：53．5％）差异有统计学意义（P＜0．05）;随临床分期增加、喉癌分化程度降低及淋巴结的转移,PTEN蛋白阳性表达率逐渐降低。另外,PTEN蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤组织大小及部位无关（P〉0．05）。结论：抑癌基因PTEN在喉癌的发生及发展中起重要作用,对其蛋白的检测可作为判定喉癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ受体和蛋白激酶C在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨胰岛素样生长因子-I受体(IGF-IR)和蛋白激酶C(PKC)在喉鳞状细胞癌中的表达情况及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法及Westernblot技术检测60例喉鳞状细胞癌组织、25例癌旁组织及10例正常喉部组织中IGF-IR及PKC的表达情况。结果:IGF-IR及PKC在喉鳞状细胞癌中的表达阳性率较正常喉部组织及癌旁组织明显增高(P<0.05)。IGF-IR在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、颈淋巴结转移及高分化癌患者中的表达水平分别较Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移及中低分化癌患者表达增强(P<0.05)。PKC的阳性表达与喉癌临床分期及淋巴结转移相关(P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中IGF-IR与PKC蛋白的表达呈正相关(rs=0.338,P<0.05)。结论:IGF-IR及PKC在喉鳞状细胞癌中表达增高且两者密切相关,可能参与了喉癌的发生、发展过程,检测IGF-IR和PKC的表达对喉癌的早期诊断及治疗具有重要指导意义。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的：了解细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在喉鳞状细胞癌(LSCC)及喉癌前病变的表达情况,探讨其与LSCC浸润和转移的关系。方法：用免疫组织化学SP法对42例LSCC、28例喉癌前病变和20例正常喉组织中的EMMPRIN表达情况进行检测。结果：EMMPRIN在LSCC和喉癌前病变的阳性表达率分别为88．1％和57．1％,明显高于正常喉组织的5．0％,Ⅲ～Ⅳ期LSCC组织的强阳性表达率为76．0％,高于Ⅰ～Ⅱ期的强阳性表达率17．6％。伴有颈淋巴结转移的LSCC组织的EMMPRIN强阳性表达率高于无淋巴结转移组。结论：EMMPRIN在LSCC有较高的阳性表达。EMMPRIN的表达与LSCC的分期和是否存在淋巴结转移有关。LSCC组织EMMPRIN的表达影响LSCC的浸润和转移。     

喉非典型增生和鳞癌的PCNA,p21表达及其意义

为探索增殖细胞核抗原和ｐ２１在喉非典型增生与其转化后的鳞癌中的表达有无差异。     

端粒酶RNA组分和端粒酶活性与喉癌的相关性研究

目的：进一步了解端粒酶活性和端粒酶ＲＮＡ组分（ｈＴＲ）与喉癌发生、发展的关系，并建立喉癌的早期诊断标准。方法：采用端粒酶重复扩增法和原位杂交法对正常组织、声带息肉、癌前病变和喉癌进行ｈＴＲ和端粒酶活性分析。结果①所有组织均表达不同水平的ｈＴＲ，ｈＴＲ阳性率随着喉癌的临床分期逐渐增加，但无统计学差异。②３９例（７８％）的喉癌组织表达端粒酶活性，声带息肉仅１例（８．３％）表达，不同分化的喉癌组织端粒酶