多巴胺舒张猪冠状动脉及激活冠状动脉平滑肌细胞钾通道

采用血管环实验和膜片钳细胞贴附式技术分别在器官和细胞分子水平观察多巴胺舒张猪冠状动脉作用及对平滑肌细胞大电导型钙激活钾通道(BKCa)的影响 .结果表明多巴胺引起前列腺素 F2α(PGF2α)预收缩动脉环浓度依赖性舒张反应 ,而不引起高 K 预收缩动脉环舒张反应 .表明多巴胺引起的冠状动脉血管舒张反应依赖于 K 生理浓度梯度的存在 ,结果提示钾通道参与了多巴胺的血管舒张反应 .向细胞浴液内灌流多巴胺增强冠状动脉血管平滑肌细胞膜 BKCa通道活性 .用 DA1受体阻断剂 SCH2 3390预处理细胞 ,完全阻断多巴胺的这一作用 ,而用 β受体阻断剂普萘洛尔无影响 .提示多巴胺通过 DA1受体激活 BKCa通道引起 PGF2α预收缩动脉环舒张反应     

肾血管性高血压大鼠内脏血管多巴胺１受体反应性的变化

采用狭窄左肾动脉的方法建立肾血管性高血压大鼠模型,观察在高血压形成过程中内脏血管多巴胺1 (DA₁)受体反应性的变化. 结果表明在左肾动脉狭窄后2,4和12周, 肾动脉和肠系膜动脉对去甲肾上腺素引起的收缩反应增强,12周时收缩反应较4 周时有所减弱(P<0.05);对DA₁受体激动剂非诺多泮介导的舒张反应减弱,4周时达高峰,12周时舒张反应减弱保持在4 周水平. 提示血管舒张性降低在高血压维持期中起重要作用.     

去甲肾上腺素引起大鼠后肢血管平滑肌收缩的Ca2＋依赖特征

在大鼠后肢血管床灌流标本功能性实验中，以灌流压为指标，研究了去甲肾上腺素(NE)引起血管平滑肌细胞收缩的Ca^2＋依赖特征. 标本经无Ca^2＋ Krebs液预灌流30 min后，血管床对NE的最大反应降至对照时的8％；如再经咖啡因和NE耗竭胞内贮存Ca^2＋后，则反应完全消失. 硝苯地平(0.01-10 μmol ·L^-1)呈浓度依赖性抑制NE的收缩反应，最大抑制作用为65％. 硝苯地平不能抑制的反应可被CdCl₂抑制. 肌浆网Ca^2＋-ATP酶抑制剂环匹阿尼酸(CPA)能使NE升高灌流压的效应降低80%左右. 在无Ca^2＋ Krebs液中， 咖啡因耗竭其敏感的细胞内Ca^2＋ 池后，NE的效应不变，用NE耗竭Ca^2＋池后，也不影响咖啡因的反应. 结果提示，α_1A肾上腺素受体激动引起大鼠后肢血管床细胞收缩反应主要由细胞外Ca^2＋经硝苯地平敏感的钙通道和其它钙通道内流引起，并且大部分胞外Ca^2＋的内流依赖细胞内Ca^2＋释放的启动.     

甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用

用膜片钳单通道技术,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱(Nef)后K⁺通道特性的改变, 以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K⁺通道的作用. 结果：Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上K⁺通道开放概率（P_O）降低. 10, 20 μmol·L^-1 Nef分别使心肌细胞K⁺通道降低（50±32）%和（96±5）%, 30, 50 μmol·L^-1的Nef分别使猪冠脉平滑肌细胞上K⁺通道P_O降低(51±21)%和(71±14)%. 结果表明,Nef可从通道内口阻断心肌及平滑肌细胞上K⁺通道,但对前者的作用更强.     

异莲心碱对麻醉大鼠血流动力学及平滑肌收缩反应的影响

异莲心碱2.5-10 mg·kg^-1 iv可剂量依赖性地一过性轻度降低麻醉大鼠心率, 收缩动脉压, 平均动脉压, 舒张动脉压, 左室收缩压, 左室压力最大变化速率,而对左室舒张末压无显著影响. 异莲心碱使甲氧明所致兔主动脉环和大鼠肛尾肌收缩的量 效曲线平行右移,最大反应不降低,pA₂分别为6.25和6.15,对高K⁺所致兔主动脉环收缩也有明显抑制作用. 异莲心碱还明显抑制去甲肾上腺素引起的兔主动脉环依内钙和外钙的收缩反应. 结果表明,异莲心碱对α₁受体有较为明显的阻断作用,并可抑制该受体引起的内钙释放和外钙内流,对电压依赖性钙通道也有阻滞作用. 异莲心碱的一过性轻度降压和抗心律失常作用可能与这些均有关.     

左旋千金藤啶碱对外周血管多巴胺DA1和DA2受体亚型的作用

用家兔离体血管环方法,研究左旋千金藤啶碱(l-SPD)对外周血管DA₁和DA₂受体亚型的作用。结果表明,l-SPD使DA₁受体激动剂FODA诱发的肾、肺和肠动脉以及DA₂受体激动剂PBDA诱发的肠和股动脉舒张反应的量效曲线非平行右移,最大反应(Emax)降低,均呈非竞争性拮抗;l-SPD本身还可使肾和肺血管产生轻度的浓度依赖性舒张反应,表现为DA₁受体激动剂的作用特性。提示l-SPD为外周血管DA₁和DA₂受体的混合性阻滞剂并兼有DA₁受体部分激动剂的双重作用特性。     

钩藤碱对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

用膜片钳单通道记录法研究钩藤碱(Rhy)对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(K_Ca)的影响.结果：Rhy 30, 45和60 μmol·L^-1缩短通道的开放时间, 但浓度依赖性增加K_Ca开放概率,Rhy 15, 30, 45和60 μmol·L^-1使开放概率由加药前的0.085±0.005分别增加到0.176±0.011, 0.315±0.009, 0.485±0.016和0.761±0.012(x±s, 均P<0.01).说明Rhy有增加肺动脉平滑肌细胞K_Ca开放作用.     

6-［4-(4′-吡啶)氨基苯］-4，5-二氢-3(2H)哒嗪酮对大鼠胸主动脉环收缩功能的影响

目的 研究新型钙增敏强心剂6-［4-(4′-吡啶)氨基苯］-4，5-二氢-3(2H)哒嗪酮(MCI-154)的扩血管作用机制。方法 采用生物张力换能器及生理记录仪测定大鼠离体胸主动脉环和蜕膜胸主动脉环的收缩张力。结果 MCI-154可浓度依赖性抑制1 nmol·L^-1~10 μmol·L^-1去甲肾上腺素（pD₂′为4.21±0.23）和80 mmol·L^-1 KCl（IC₅₀为7 μmol·L^-1）引起的血管环收缩，提示其可通过抑制血管平滑肌细胞膜上受体操纵性和电压依赖性钙通道而减少胞外钙内流。在无Ca²⁺ K-H液中，MCI-154预处理可浓度依赖性降低3 μmol·L^-1苯肾上腺素（IC₅₀为5 μmol·L^-1）及20 mmol·L^-1 咖啡因（IC₅₀为16 μmol·L^-1）引起的血管环收缩张力，提示其可抑制血管平滑肌细胞胞内钙释放。在1 μmol·L^-1 Ca²⁺溶液中，MCI-154可显著降低蜕膜血管环收缩张力（IC₅₀为10 μmol·L^-1)，提示其可降低血管平滑肌对Ca²⁺的敏感性。结论 MCI-154可通过抑制血管平滑肌胞外钙内流、胞内钙释放和降低其对Ca²⁺敏感性来降低血管平滑肌收缩张力，体外具有扩血管效应。     

川芎嗪舒血管作用的部位差异性及其对钙释放的抑制

川芎嗪(TMP, 0.01-2.0 mmol·L^-1)呈浓度依赖性地舒张犬的多种离体血管条， 其中舒张股动脉的强度是冠状动脉的3.3倍；在肠系膜动脉, TMP对前列腺素F_2α及高浓度KCl预收缩的动脉条均有舒张作用，但对前者的作用强度约为后者的5.6倍；在无Ca²⁺液中，TMP呈浓度依赖性地抑制苯福林的缩血管作用而不影响咖啡因的效应. 结果表明：(1)TMP的扩血管作用具有部位差异性; (2)TMP不具备典型钙拮抗剂的特点; (3)TMP可能对受体中介的钙释放有一定的选择性抑制.     

丙泊酚抑制去甲肾上腺素诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度升高作用的机理

用荧光分光光度法及同位素放射免疫分析法检测丙泊酚(30-300 μmol·L^-1)影响大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)内游离钙离子浓度(［Ca²⁺］_i)与肌醇-1,4,5-三磷酸(IP₃)合成作用,以探讨丙泊酚舒张肺动脉平滑肌的作用机理.结果表明,与丙泊酚共同培养72 h,对PASMC ［Ca²⁺］_i 基础水平无明显影响,但可浓度依赖性抑制去甲肾上腺素(NE 3 μmol·L^-1)引起的［Ca²⁺］_i升高作用;当细胞外液无钙或存在钙通道阻滞剂维拉帕米(30 μmol·L^-1)时,丙泊酚抑制NE升高［Ca²⁺］_i作用被增强;丙泊酚还可浓度依赖性抑制NE促进 IP₃合成作用. 结果提示丙泊酚舒张血管平滑肌作用与抑制IP₃介导的细胞内钙释放密切相关.     

钩藤碱对大鼠膀胱逼尿肌舒缩作用的影响

目的观察钩藤碱(rhynchophylline,Rhy)对离体大鼠逼尿肌的作用并探讨其作用机制。方法采用逼尿肌体外张力实验法检测Rhy对大鼠逼尿肌L-型钙通道(ICa-L)及大电导钙离子激活钾离子通道(BKCa)作用。以维拉帕米为对照观察膀胱逼尿肌肌条的收缩及对乙酰胆碱(ACh)依赖细胞内、外钙所致肌条收缩程度的拮抗作用。结果 Rhy和BKCa激动剂NS1619作用相似,亲和力指数(pD2)分别为4.78±0.17、4.53±0.22;BKCa拮抗剂iberiotoxin能竞争性拮抗Rhy,使Rhy累积量效曲线平行右移,拮抗参数(pA2)为7.27±0.16;当Rhy浓度为1~20μmo.lL-1时,使CaCl2累积量效曲线非平行右移,最大反应降低,呈非竞争性拮抗。结论 Rhy通过离子通道(阻滞ICa-L、激活BKCa)抑制膀胱逼尿肌收缩。低浓度(10μmol.L-1)Rhy仅对细胞内钙引起的肌条收缩有抑制作用,而对细胞外钙所致的肌条收缩无影响;随着浓度的增高,Rhy对细胞内、外钙引起的肌条收缩均有抑制作用,且抑制作用逐渐增加。     

当归芍药散活性部位DSS-A-N-30对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响

目的观察当归芍药散提取部位DSS-A-N-30对离体子宫平滑肌收缩的影响,并探讨其可能的作用机制。方法制备离体大鼠子宫肌条,观察DSS-A-N-30对子宫平滑肌自发性收缩,子宫收缩激动剂诱发的子宫平滑肌条剧烈收缩,KCl致子宫平滑肌条强直收缩及缩宫素(催产素)在无钙平衡盐溶液中致子宫平滑肌条持续收缩的影响。结果DSS-A-N-30(141.5,283和566mg.L-1)可以显著抑制子宫平滑肌的自发性收缩;对缩宫素(10IU.L-1)、前列腺素F2α(1mg.L-1)和乙酰胆碱(10μmol.L-1)引起的子宫平滑肌剧烈收缩有抑制作用;对KCl(60mmol.L-1)引起的子宫平滑肌强直收缩无明显作用;对缩宫素(10IU.L-1)在无钙平衡盐溶液中引起的子宫平滑肌条持续收缩有显著抑制作用。结论DSS-A-N-30可能主要通过抑制细胞内钙库释放而松弛子宫平滑肌,对子宫平滑肌收缩产生直接的抑制作用。提示DSS-A-N-30是当归芍药散的活性部位之一,有可能开发为新型痛经治疗药物。     

Evidence that BKCa channel activation contributes to K+ channel opener induced relaxation of the porcine coronary artery

The rank order of potency of a series of benzopyran and cyanoguanidine K⁺ channel openers (KCOs) for causing relaxation of the PGF₂-precontracted porcine coronary artery was determined. Glyburide, an inhibitor of K_ATP channels, showed an apparent competitive inhibition of the vasorelaxant activity of the KCOs. The pA₂ values of glyburide when cromakalim and CGP 14877 (P1060) were used as vasorelaxants were 7.66 and 7.83, respectively. Charybdotoxin (40 nM), an inhibitor of BK_Ca channels, also caused a significant inhibition of the cromakalim mediated relaxation of the porcine coronary artery. In order to clarify the site of action of these KCOs, we identified a K⁺ channel current in single porcine coronary arterial cells and measured channel activity in the presence of these compounds. The prominent K⁺ ion current in these cells had characteristics typical of the conventional large Ca²⁺-activated K⁺ channel BK_Ca present in other smooth muscle cells. Using symmetrical K⁺ concentrations, the channel had a conductance of 214 pS and was found to be sensitive to [Ca²⁺]_i and membrane potential. The KCOs were found to reversibly increase the open probability (P_o) of the channel without changing channel conductance. The potency of the KCOs to increase K⁺ channel opening was similar to the potency of these compounds to cause coronary artery relaxation. These results indicate that the porcine coronary artery contains the BK_Ca channel and that this channel, along with other types of K⁺ channels (K_ATP), mediate the vasorelaxant effects of K⁺ channel openers.     

家犬视网膜动脉舒张的神经源性一氧化氮机理

阐明在尼古丁所引起的家犬视网膜动脉舒张反应中所包含的神经源性一氧化氮（NO）作用机制. 利用离体除去内皮细胞的家犬视网膜动脉标本,观察其张力改变. 尼古丁引起前列腺素F_2α预收缩的家犬视网膜动脉舒张反应,其舒张反应被六甲铵和氧合血红蛋白所消除,但不受吲哚美辛,阿托品及塞吗洛尔的影响. NO合酶抑制剂左旋硝基精氨酸（L-NA）可消除尼古丁所致舒张反应并使其舒张转为收缩反应,而右旋硝基精氨酸无此作用. L-NA所致此抑制作用可被NO合成前体左旋精氨酸所复原,而不受右旋精氨酸的影响. 本研究表明家犬视网膜动脉上存在舒张血管神经,该神经通过释放NO神经递质引起该血管舒张反应.     

丹参酮ⅡA磺酸钠和丹参素对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活机制

目的研究丹参酮ⅡA磺酸钠(DS-201)和丹参素(DS-182)的冠状动脉舒张作用除了已知的机制外,是否还与钙激活钾通道(KCa)有关。方法猪冠脉平滑肌细胞贴附式和内面向外式膜片钳单通道电流记录技术。结果DS-201和DS-182均可激活冠脉平滑肌细胞KCa,但DS-201在内面向外膜片方式下激活KCa;而DS-182在细胞贴附膜片方式下激活KCa。结论DS-201和DS-182激活KCa的作用机制不同。DS-201能直接激活KCa,而DS-182则可能需要一系列胞内过程。这种差异可能与二者的结构和溶解性质不同有关。     

前列腺素F_(2α)增强膜去极化和升高胞内钙促进NIT-1β细胞胰岛素分泌

目的探讨前列腺素F2α(PGF2α)促进NIT-1β细胞葡萄糖刺激性胰岛素分泌的作用机制。方法放射免疫法检测NIT-1β细胞胰岛素分泌量;激光共聚焦显微镜检测细胞[Ca2+]i。结果葡萄糖浓度为16.5mmol·L-1时,PGF2α5μmo·lL-1或钾通道阻断剂四乙胺(TEA)20mmol·L-1均使NIT-1β细胞胰岛素分泌明显增加,而先给予TEA后再加PGF2α或先给PGF2α再加TEA均不能使胰岛素分泌进一步增加。葡萄糖浓度为5.5mmol·L-1时,PGF2α不能使胰岛素分泌增加,预先给予20mmol·L-1TEA再应用PGF2α,胰岛素分泌显著增加。60mmol·L-1KCl和250μmol·L-1二氮嗪使细胞膜处于最大去极化状态时,PGF2α不能促进胰岛素分泌。16.5mmol·L-1葡萄糖浓度下,预先给予氯通道阻断剂4,4′-二异硫氰酸水合茋-2,2′-二磺酸(DIDS),PGF2α不能促进胰岛素分泌。另外,16.5mmol·L-1葡萄糖下,5μmol·L-1PGF2α引起NIT-1β细胞[Ca2+]i升高,而预先给予60mmol·L-1KCl和250μmo·lL-1二氮嗪后再给予PGF2α不能引起细胞[Ca2+]i升高;在DIDS作用下,NIT-1β细胞[Ca2+]i显著降低,恢复静息期后给予PGF2α,细胞[Ca2+]i再次降低。结论促进细胞膜去极化在PGF2α增强胰岛素分泌中起着重要作用。PGF2α可能通过激活氯通道,增强NIT-1β细胞膜去极化,升高细胞[Ca2+]i,促进高浓度葡萄糖刺激下的胰岛素分泌。     

三种血管舒张剂对慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉收缩反应的比较

观察了米力农(Mil), lemakalim (Lem)和维拉帕米(Ver)三种血管舒张剂对前列腺素F_2α (PGF_2α)所致缺氧2和4 wk大鼠肺动脉和主动脉环收缩反应的影响. Lem (0.01～1.0 μmol·L^-1), Mil和Ver(均为0.1～10.0 μmol·L^-1)对主动脉和肺动脉都有明显的抑制作用, 使PGF_2α引起的血管收缩反应曲线压低, EC₅₀显著增高(P<0.001), 呈剂量相关关系. 其抑制强度为Lem>Mil>Ver, 缺氧前后顺序不变. 无论缺氧前后, Lem和Ver对主动脉和肺动脉的抑制强度都较接近, Mil则在缺氧条件?下, 对肺动脉的抑制作用选择性地增强.