川芎嗪对环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

实验利用Ca~(2+)依赖性环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)测定方法,观察川芎嗪拮抗钙调素(CaM)的作用。当川芎嗪浓度大于0.3mM时,能明显抑制CaM激活的PDE活性,其半抑制浓度(IC_(50))为6.5mM。在浓度大于4mM时,川芎嗪开始抑制PDE的基础活性。咪唑能减弱川芎嗪对PDE的抑制作用。     

哌唑嗪对原发性高血压病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶和钙调素的影响

本实验观察了原发性高血压(EH)病人红细胞Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶活性,红细胞和血浆钙调素(CaM)的变化及哌唑嗪对其影响。结果表明:EH病人红细胞基础和最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性显著下降,并与血压呈显著负相关;红细胞CaM活性也显著降低并与最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性呈显著正相关;经哌唑嗪治疗后,EH病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性和CaM变化不显著,但血浆CaM有所降低。提示EH病人红细胞钙代谢异常与外周阻力增高有密切关系,哌唑嗪对细胞和体液CaM有不同影响。     

钙调蛋白在免疫应答反应中的生物学效应及其表现

Ca~(2+)参与免疫应答反应的诱导和调节。从淋巴细胞活化到抗体合成以及非特异性炎症反应,各个阶段都少不了Ca~(2+)的作用。人们认为Ca~(2+)是环核苷酸诱导控制免疫应答反应的重要一环,但是对于二者之间的关系仍无定见。钙调蛋白(Calmodulin,CaM)的发现使我们对Ca~(2+)和环核苷酸调节免疫应答反应有了较为完整的概念。CaM是细胞内Ca~(2+)的重要受体,它与Ca~(2+)结合后发生构象改变而激活。同时又     

CaMKⅡ调控Na_V1.1与CaM的结合

目的探讨钙调蛋白激酶CaMKⅡ对电压门控性钠通道Na_V1.1结合钙调蛋白CaM的调节功能,分析CaMKⅡ在不同Ca~(2+)浓度下对二者结合的影响,进一步探讨CaMKⅡ、Ca~(2+)对CaM结合Na_V1.1的共同调节作用。方法应用pull-down技术检测不同Ca~(2+)浓度下经过CaMKⅡ磷酸化处理后Na_V1.1 IQ与CaM的结合情况。结果无钙条件下,CaMKⅡ不影响CaM与Na_V1.1 IQ的结合;有钙条件下,CaMKⅡ使CaM与Na_V1.1结合增加。结论钙离子存在时,CaMKⅡ磷酸化作用使Na_V1.1与CaM结合增加。     

钙调蛋白对电压门控性钠通道Na_V 1.1的调节作用

目的探讨钙调蛋白对通道的调节功能,分析钙调蛋白与Na_V1.1 IQ在不同Ca~(2+)离子浓度下的结合情况,进一步探讨钙调蛋白和Na_V1.1结合的Ca~(2+)依赖性。方法应用pull-down技术检测不同Ca~(2+)离子浓度下Na_V1.1 IQ与钙调蛋白及其突变体的结合情况。结果 CaM野生型与Nav1.1 IQ基序的结合随着钙浓度和CaM浓度的增加而增高,而CaM 1234与Nav1.1 IQ的结合也随着CaM_(1234)浓度的增加而增高,但在不同钙浓度下的结合无变化。结论 CaM野生型和CaM_(1234)对电压门控性钠通道Nav1.1具有调节作用。     

创伤后应激障碍大鼠海马Ca~(2+)/钙调蛋白的改变

目的 观察创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马神经元Ca~(2+)信号及钙调蛋白(CaM)的表达变化,探讨PTSD行为异常的神经生物学机制. 方法 采用国际认定的无连续单一应激(SPS)方法刺激建立大鼠PTSD模型.成年健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为SPS模型的12h、1d、4d、7d组及正常对照组,采用荧光探针标记法、免疫组织化学、免疫印迹和RT-PCR法检测Ca~(2+)含量和CaM的表达变化.结果 SPS刺激后大鼠海马神经元内游离Ca~(2+)浓度(nmol/L)于12h内升高,24h增至顶峰,7d恢复正常.CaM的表达于SPS刺激后1d表达最多,之后渐趋下降. 结论 海马Ca~(2+)信号调控与CaM的表达变化可能是PTSD大鼠情感行为异常的重要病理生理基础之一.     

通过基因转染在癌细胞内表达钙调素以提高对长春花属生物碱的敏感性

Ca~(2+)和钙调素(CaM)的含量与癌细胞的药物敏感性一直是个悬而未决的问题。为了明确CaM的含量的改变是否能影响对药物的敏感性,作者采用基因转染技术将鸡的CaM基因转染入小鼠乳腺癌细胞株(C127),并获得了两株高度表达CaM的细胞克隆(C2,C3)。克隆C2和C3分别40和80倍地表     

钙调蛋白与递质释放的关系——Ⅰ、三氟啦嗪对递质释放的作用(摘要)

如所周知,去极化型递质释放需要Ca~(2+),但Ca~(2+)必须通过钙调蛋白(Calmoduline, CaM),并使蛋白磷酸化等一系列过程才能引起递质释放.如用三氟啦嗪(Trifluoperazine, TFP)抑制CaM的活性,或用安定和苯妥英抑制Ca~(2+)-CaM激酶系统,则可抑制递质的释放(Fed、Proc、1982; 41:2265～72).     

膜钙泵分子结构、功能及其调控

Ca~(2+)在胞内的生物功能,主要是作为第二信使,通过各种钙结合蛋白,特别是钙调蛋白(CaM)调节胞内许多酶及有关的功能。Ca~(2+)的生物功能依赖于其跨膜的不均衡分布。一般讲,细胞浆内Ca~(2+)浓度大约为10~(-7)M,而胞外及胞内某些细胞器内(如线粒体、ER、SR体系)Ca~(2+)浓度高达10~(-3)M,正常情况下,细胞必需保持这样高的浓度梯度(图1)。不同的刺激如神经递质、激素、抗原、光、电等可引起Ca~(2+)一阵性流入胞内或触发胞内Ca~(2+)储库释放Ca~(2+)到胞     

羟基氨酮强心作用机制的进一步研究

前巳报道羟苯氨酮(BAK_3)及其衍生物具有较强的强心和扩血管作用,且有不增加心率的优点, BAK_3在有效浓度范围内不抑制Na~+K~+-ATP和磷酸二酯酶(PDE),显著提高心肌收缩蛋白对Ca~(2+)的敏感性,提示增强收缩蛋白对Ca~(2+)的敏感性,可能是其强心作用的主要机制,可能为一种非甙和非PDE抑制剂的新型强心药物——钙增敏剂(Calcium Sensitiger).     

钙调素的研究

<正> 四十年来,Ca~(++)和环核苷酸(cAMP,cGMP)作为细胞内的第二信使,其重要性已逐渐被公认。但有关Ca~(++)作用的分子机理一直不明瞭。近来对钙结合蛋白(calciumbinding protein,CaBP)的研究表明,许多依赖Ca~(++)的细胞过程,都是通过CaBP而实现的。目前已发现的CaBP多达200多种,而钙调素(Calmodulin,CaM)是其中最重要的一种。现已证明,CaM广泛存在于各类真核细胞内,是细胞内主要的钙受体,Ca~(++)的许多功能如物质代谢、肌肉收缩、突触传递、神经递质的合成与释放、激素分泌、细胞生长和基因表达等都是通过CaM完成的。Ca~(++)可通过电压依赖性钙通道或受三磷酸肌醇(IP_3)激发从内质网释放而进入胞浆。当胞浆Ca~(++)浓度升高时,Ca~(++)即和CaM结合,并使CaM构象发生改变,形成活性CaM(CaM*)。CaM*和靶蛋白或靶酶结合后,引     

TLSFJM对活化T细胞内IP3,Ca^2＋水平和Fos蛋白表达的调节作用

本文应用ABC组化染色、Fura-2/AM标记细胞Ca~(2+)测定法以及阴离子交换树指层析柱分离磷酸肌醇等技术,研究了TLSF_(JM)对活化T细胞内IP3、Ca~(2+)水平以及Fos蛋白表达的调节作用。结果表明,TLSF_(JM)明显抑制PHA活化的PBMC Fos蛋白表达,并对T细胞内IP3、Ca~(2+)水平也有很强的抑制作用。     

川芎嗪对自发性高血压大鼠红细胞膜外翻囊泡钙摄取的影响

细胞膜Ca~(2+)转运功能异常在自发性高血压大鼠(SHR)发病过程中有重要作用。川芎嗪作为临床上广泛使用的活血化瘀药,其扩血管效应是否通过影响细胞膜Ca~(2+)转运机制,目前所知甚少。本文观察了川芎嗪对SHR和WKY大鼠红细胞膜外翻囊泡(IOV)Ca~(2+)摄取的影响,拟探讨在正常血压和高血压状态下其作用的差异和意义。     

血管紧张素Ⅱ2型受体拮抗剂EMA401对神经性疼痛模型大鼠的镇痛效应及机制研究

目的:观察血管紧张素Ⅱ2型受体拮抗剂EMA401对坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury-CCI)模型大鼠的镇痛效应及背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)生长相关蛋白43(growth-associated protein-43,GAP-43)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和钙调素(calmodulin,CaM)表达的影响。方法:采用SD大鼠建立CCI模型,随机分为4组:模型组(model组),给予等体积生理盐水灌胃;低剂量组,按照EMA4015 mg/kg剂量灌胃;中剂量组,按照EMA401 10 mg/kg剂量灌胃;高剂量组,按照EMA401 20mg/kg剂量灌胃。另设假手术组给予等体积生理盐水灌胃。各组于术前、术后7d、14d和28d同一时间测定热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)和机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)行为学指标。行为学检测完毕后,各组大鼠取腰段DRG,采用邻甲酚酞络合铜微板法检测DRG内Ca~(2+)浓度,采用Westem blotting和RT-PCR分析检测DRG内GAP-43、PKC和CaM蛋白和mRNA的相对表达量。结果:与model组比较,EMA401显著升高CCI大鼠TWL和MWT(P0.05);与model组比较,EMA401显著降低DRG内Ca~(2+)浓度及GAP-43、PKC、CaM蛋白和mRNA的相对表达量(P0.05)。结论:EMA401对CCI大鼠具有明显的镇痛效应,其机制可能与抑制DRG内Ca~(2+)浓度及GAP-43、PKC、CaM表达有关。     

钙调素与递质释放关系研究的近况

钙调素(Calmodulin,CaM)与递质释放关系的研究,是递质释放机制研究的一个重要方面。 Yale大学De-Lorenzo学派以突触体为实验材料,证明Ca~(2+)进入突触体后,首先与CaM形成复合体,激活蛋白激酶系统,使特异的突触蛋白磷酸化和变构,从而提供囊泡膜相互作用及囊泡膜-突触膜相互作用的启动力而发生胞裂外排。     

细胞钠／钙交换可能参与高血压的发病机制

当前不论从组织水平,细胞水平还是亚细胞水平均证实血管平滑肌(VSM)细胞膜上存在着Na/Ca交换这一胞内Ca~(2+)调节机制。它可以利用Na~+的跨膜电化学梯度(g_(Na~+)来逆向转运Ca~(2+)。视Na~(2+)与Ca~(2+)电化学梯度的不同,它既可以介导Ca~(2+)进入细胞也可以将Ca~(2+)转运出细胞。 VSM细胞Ca~(2+)代谢的异常是高血压发病的一个重要原因。那么这一异常是否与Na/Ca交换有关呢?答案似乎是肯定的。在高血压病人的红细胞,自发性高血压大鼠(SHR)的红细胞或VSM细胞中Na~+与Ca~(2+)的含量均比正常对照明显增高。后者看来与Na~+,K~+-ATPase的抑制有关,因为不少证据显示高血压病人或动物血液中一种可以抑制Na~+,K~+-ATPase的内源性洋地黄类物质(endogenous digitalis)的水平升高。用高血压患者去蛋白     

抗高血压因子对大鼠血管平滑肌钙内流的影响

实验观察了从原发性高血压病患者红细胞中提取的抗高血压因子(AHF)对自发性高血压大鼠(SHR)、肾性高血压大鼠(RHR)和正常血压的WKY大鼠和Wistar大鼠主动脉和肠系膜动咏平滑肌Ca~(2+)内流的影响。结果表明,SHR和RHR的肠系膜动脉Ca~(2+)内流显著高于主动脉;AHF可显著抑制SHR和RHR主动脉和肠系膜动脉Ca~(2+)内流,抑制作用呈剂量依赖性,且对肠系腆动脉Ca~(2+)内流抑制作用更明显;AHF也可抑制正常动物血管平滑肌Ca~(2+)内流。本工作提示,AHF的降压机制可能与其抑制血管平滑肌特别是小动脉血管平滑肌Ca~(2+)内流有关。     

细胞膜上钙转运分子机制的研究进展

Ca~(2+)浓度与细胞的代谢和细胞的功能具有密切的关系。在通常情况下,细胞外游离的Ca~(2+)浓度为10~(-3)M,细胞内游离的Ca~(2+)则为10~(-8)～10~(-7)M。为了维持细胞内如此之低的Ca~(2+)浓度,质膜上Ca~(2+)转运以及细胞内Ca~(2+)转运系统具有重要的作用。在10~3～10~4化学梯度(Ca_0~(2+)/Ca_i~(2+))范围和     

钙调蛋白与细胞功能的调节

大量事实证明钙离子(Ca~(2+))几乎与生物体的一切生命现象和细胞功能有关,它参与真核细胞的分裂、运动和分泌,在神经细胞活动中也有重要作用。一种离子在体内有如此广泛的作用,是与钙调蛋白(calmod-ulin,CaM)分不开的。     

高血压大鼠红细胞钙转运功能障碍机理的初步分析

目前对高血压时质膜上Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶(钙泵)功能降低的机制一直不清楚。我们最近的实验表明,胞内高钙浓度本身可进一步抑制钙泵活性,即钙泵活性下降既是高血压的结果,又是其发生,发展和持续的一个重要原因;另一方面可能是钙泵对其内源性特异激动剂(例钙调素,CaM)的亲和力下降及/或对某些抑制剂(例三氟拉嗪,TFP)的敏感性增