焦磷酸测序分析表皮生长因子受体21号外显子基因突变方法的建立

目的建立表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)21号外显子基因突变的焦磷酸测序方法。方法用纯野生和纯突变的EGFR21质粒DNA按比例配制7份不同突变比例的DNA样本和1份正常人血液样本,对焦磷酸测序技术检测EGFR21基因突变方法进行验证,制备175例非小细胞肺癌标本g DNA,应用Qigene Pyro Mark Q24焦磷酸测序仪进行EGFR21基因的焦磷酸测序。结果建立了可同时检测EGFR基因21号外显子L858R和L861Q突变的焦磷酸测序方法,175例非小细胞肺癌标本中共检测出EGFR21突变型样本29例,总突变率为16.57%(29/175),其中L858R突变占14.29%(25/175),L861Q突变占2.28%(4/175)。结论 EGFR21基因突变的焦磷酸测序新方法具有快速、简便、灵敏度和准确度高的优点,特别适合于科研和临床批量检测的需要。     

数字PCR法和探针扩增阻滞突变法检测非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体突变的比较研究

目的比较数字PCR法和ARMS法检测非小细胞肺癌组织EGFR基因突变的差异,验证数字PCR法的检测性能。方法以ARMS法作为对照参考方法,对36例EGFR突变阳性的NSCLC标本,采用数字PCR法进行EGFR基因突变检测,对结果进行比较研究。结果 ARMS法显示的22例21外显子突变阳性标本中,数字PCR检测全为阳性;ARMS法显示的14例19外显子突变阳性标本中,数字PCR共检出13例19外显子突变阳性。且数字PCR法可以定量检测EGFR突变比率,与临床分期具有相关性。结论数字PCR法与ARMS法的检测一致性较高,可以直接实现绝对定量,对指导患者的个体化治疗具有重要价值。     

表皮生长因子受体基因突变与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性研究

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征的相关性.方法 选取2016年1月至2019年12月我院收治的171例NSCLC患者,分析NSCLC患者EGFR基因突变情况及EGFR基因突变与临床病理特征的关系.结果 171例NSCLC患者EGFR基因突变率为40.94％,其中敏感...     

表皮生长因子受体基因突变表达与非小细胞肺癌分化程度关系的研究

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌分化程度(高、中、低分化)的关系。方法收集200例非小细胞肺癌组织蜡块,分为腺癌和鳞癌两组,使用荧光实时定量PCR技术检测EGFR基因突变。结果 EGFR基因突变总检出率为34.5%(69/200),腺癌组为40.7%(66/162),其中高、中、低分化基因突变率分别为35.1%(13/37)、50.6%(44/87)、23.7%(9/38);鳞癌组为7.9%(3/38),其中高、中、低分化基因突变率分别为0(0/3)、14.3%(2/14)、4.8%(1/21);腺癌组中EGFR基因突变检出率明显高于鳞状细胞癌组(P=0.0001),中分化腺癌EGFR突变率高于高分化腺癌或低分化腺癌(P=0.014),腺癌在EGFR基因位点21-858上突变率与鳞癌无统计学差异(P=0.353)。结论本研究显示EGFR基因突变与非小细胞癌组织学类型、组织分化程度相关。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂疗效分子标记物及检测技术研究进展

非小细胞肺癌(NSCLC)是世界上主要恶性肿瘤的最常见类型之一.约75％的肺癌属于NSCLC,其预后情况总体较差,大多数患者手术治疗效果也并不理想,是全球癌症患者死亡的主要原因之一.近年来国内外一些研究表明,肺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态与化疗药物EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)(如吉非替尼)的治疗效果存在明显相关性[1].     

表皮生长因子受体基因突变检测方法及质量评价

表皮生长因子受体(EGFR)属于酪氨酸激酶受体,它介导的信号转导途径调节细胞的生长、增殖和分化。EGFR基因突变的检测能为肿瘤靶向治疗提供依据。EGFR突变有多种检测方法,如何评价这些方法,规范产品,提升产品质量,保障临床检测质量,更好地为临床服务,是检测机构对试剂质量检测和考核的目标。本文就EGFR基因突变检测方法以及质量评价要点进行简要阐述。     

二代测序法用于非小细胞肺癌突变基因检测的经济学评价

目的：分析与传统基因检测技术相比,二代测序法用于非小细胞肺癌突变基因检测的经济性。方法：对国际二代测序法用于非小细胞肺癌的经济学评价进行系统综述。从卫生体系视角出发,构建决策树模型,测算二代测序法 （8基因突变联合检测） 对比荧光实时定量PCR法 （3基因突变联合检测） 的成本-效果,并进行敏感性分析。结果：纳入4篇研究,其中2篇研究认为与传统基因检测技术相比,二代测序法用于非小细胞肺癌的突变基因检测具有一定的经济性,但仍需要结合具体情况进一步研究。模型研究结果表明,对比荧光实时定量PCR法 （3基因突变联合检测）,采用二代测序法 （8基因突变联合检测）,非小细胞肺癌患者多存活1年所需要增加的诊断成本为97 501.18元,以3倍人均GDP为阈值时,具有成本-效果。结论：二代测序法用于非小细胞肺癌突变基因检测具有一定经济性,但未来仍需要更新数据和结果。     

武汉地区非小细胞肺癌EGFR基因突变相关性研究

目的调查武汉地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因型分布特点,探究肺癌组织EGFR基因突变与患者吸烟习惯、肿瘤病理学类型、肿瘤分化程度以及淋巴结转移与否的相关性。方法收集185例NSCLC患者石蜡组织切片,采用常规聚合酶链反应(PCR)方法检测EGFR基因18、19、20、21四个外显子,DNA测序分析确定EGFR基因突变类型。结果 185例NSCLC患者中,男性EGFR突变率为7.3%,明显低于女性的17.8%,差异有统计学意义(P0.05);吸烟患者FGFR基因突变率为7.7%,明显低于不吸烟者的20.0%,差异有统计学意义(P0.01),其中腺癌EGFR突变率为15.3%(18/118),腺鳞癌突变率为10.0%(3/30),鳞癌突变率为5.4%(2/37);共检测出7种类型突变,分别为Gln787Gln、Leu858Arg、E746-A750del、S752-I759del、A750-I759del、Gly719Ser、Ser768Ile。结论武汉地区NSCLC EGFR基因的突变形式主要为点突变及缺失突变。EGFR基因突变与患者性别有关,与肿瘤病理学类型、肿瘤分化程度和淋巴结转移与否无明显关系。     

人非小细胞肺癌中FHIT基因突变的研究

目的探讨FHIT基因突变在非小细胞肺癌发生发展中的作用。方法应用PCR-SSCP和DNA序列分析方法对29例人非小细胞肺癌中FHIT基因外显子5及其相邻内含子进行研究,以癌旁组织和7例肺良性病变组织做对照。结果29例肺癌患者中有7例出现FHIT基因变异,阳性率24.1%其中鳞癌28.6%(6/21)腺癌(1/6);而癌旁组织及肺良性病变组中均无变异,肺癌组、癌旁组及肺良性病变组比较差异具有统计学意义(p<0.05)。FHIT基因异常与非小细胞肺癌P-TNM分期、肿瘤组织学类型无明显关系。异常FHIT基因经DNA序列分析显示为内含子两个位点的碱基发生突变:188位插入G,227位T—C。外显子及其与内含子接头位点未发现变异。结论FHIT基因变异与非小细胞肺癌发生发展有关,基因异常发生在内含子,该变异可能是引起FHIT基因RNA异常剪接的主要原因之一。     

吉非替尼治疗表皮生长因子受体突变型非小细胞肺癌患者的效果及影响因素

目的 分析吉非替尼治疗表皮生长因子受体突变型非小细胞肺癌患者的效果及影响因素。方法 选取湘南学院附属医院2020年1月-2021年6月收治的78例表皮生长因子受体突变型非小细胞肺癌患者作为观察对象。78例患者的临床治疗药物均为吉非替尼,均治疗六个疗程。观察78例患者治疗后的治疗效果以及不良反应发生情况,比较其治疗前后的生活质量(Karnofsky功能状态评分)变化,并对可能会影响其治疗效果的相关因素进行单因素分析和多因素Logistic分析。结果 78例患者中,治疗效果为CR的例数为15例、PR的例数为10例、SD的例数为35例、PD的例数为18例,治疗效果良好率为32.05%(25/78)。78例患者治疗后,共计15例患者发生消化道反应,占比19.23%,8例患者发生皮疹,占比10.26%,2例患者发生肝功能异常,占比2.56%,及时经过对症处理后不良反应均明显改善,未对患者治疗及生活质量带来明显影响。和治疗前相比,78例患者治疗后的Karnofsky功能状态评分明显提升,差异有统计学意义(P<0.05)。相较于治疗效果良好的患者,治疗效果差的患者其在性别、肿瘤分期、病理...     

非小细胞肺癌患者外周血EGFR基因突变检测的系统评价

目的采用Meta分析法综合评价利用非小细胞肺癌患者外周血标本进行EGFR基因突变检测的诊断价值。方法检索多个数据库,收集相关研究文献并进行信息统计、科学评估及质量分级;数据是由Meta-disc1.4软件分析;以汇总敏感度、特异度、似然比、诊断价值比以及受试者工作特征曲线等统计指标来评估试验的总体诊断特性。结果本研究共纳入12篇文献,其中英文5篇,中文7篇,样本总量为445例,汇总灵敏度为0.83(95%CI 0.78~0.88),汇总特异度为0.96(95%CI 0.94~0.98),汇总阳性似然比15.77(95%CI 10.77~23.07),汇总阴性似然比0.19(95%CI 0.10~0.36),汇总诊断优势比为87.50(95%CI 50.25~152.36),SROC曲线下面积0.9735,Q*指数为0.9256。结论采用非小细胞肺癌患者外周血进行EGFR基因突变检测具有较高的诊断价值。     

P53、CD44及表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨P53、CD44及表皮生长因子受体（EGFR）在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法收集某医院2007年1月-2009年6月经手术切除及穿刺活检病理确诊,且随访资料完整的非小细胞肺癌患者87例,利用免疫组织化学技术检测其标本中P53、CD44及EGFR的表达。结果P53、CD44及EGFR在87例NSCLC中的表达阳性率分别为49．4％,60．9％及67．8％。Ⅲ-Ⅳ期P53表达低于Ⅰ～Ⅱ期（40．3％US．66．7％,P=0．036）;鳞癌患者CD44表达较腺癌高（82．8％vs.49．1％,P=0．003）;淋巴结转移的患者EGFR表达较无淋巴结转移高（74．6％vs53．6％,P=0．023）。P53与CD44正相关（P=0．035）。结论联合检测P53、CD44及EGFR在非小细胞肺癌中的表达对于判断预后和指导治疗可能具有实用价值。     

非小细胞肺癌分子靶点基因突变的研究进展

非小细胞肺癌（Non—small cell lungcancer,NSCLC）是一典型的恶性进展性疾病,多种信号转导通路的紊乱促进了NSCLC的发生发展,包括生长调节关键蛋白如K—Ras、EGFR、B—RAF、MEK一1等的突变,以及生长抑制通路的失活如TP53、PTEN、LKB-1突变。深入分析这些基因改变可为NSCLC的治疗提供重要的分子靶点。     

118例非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测和临床病理特征分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因外显子突变和临床病理特征的关系。方法利用AMRS-PCR方法检测解放军总医院海南分院送检NSCLC标本EGFR基因18、19、20、21外显子突变情况,回顾性分析其临床病理特征。结果受检118例标本中,EGFR基因总突变率为41.5%(49/118)。其中外显子18突变率占8.0%,外显子19突变占52.0%,外显子20突变率占4%,外显子21突变率占36%,1例患者为EGFR基因外显子18和21双重突变。肺腺癌患者突变率为50.3%,明显高于非腺癌非小细胞癌突变率14.2%;女性患者中的突变率53.3%,高于男性患者35.6%;无吸烟史患者突变率52.7%,高于有吸烟史患者突变率25.0%,差异有统计学意义(P 0.05)。年龄大小和标本取样类型与EGFR突变率无明显相关性。人群分布中海南本地人49例,其中EGFR的阳性率42.8%,定居海南时间大于5年的外地人群EGFG的突变阳性率65.2%,定居时间小于五年外地人群EGFG的突变阳性率18.2%。居住时间少于5年外地人群中EGFR突变率与大于5年人群和本地人群EGFR突变率比较差异具有统计学意义(P 0.05),但居住时间大于5年人群与本地人群EGFR突变率没有统计学差异。结论非小细胞肺癌中EGFR突变常见于女性,肺腺癌,无吸烟史患者;以19号外显子缺失突变和21号外显子L858R突变为主。患者年龄和手术方式以及标本取样与突变率无明显相关性。海南地区可能是非小细胞肺癌患者中导致EGFR突变的一个影响因素,更多的海南地区患者可能会从肺癌EGFR靶向治疗中受益。     

吉非替尼联合同步放疗治疗表皮生长因子受体突变型晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的探讨吉非替尼联合同步放疗治疗表皮生长因子受体突变型晚期非小细肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的疗效、不良反应及生存情况。方法将2008年1月—2014年2月收治的表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)突变型晚期非小细肺癌患者分为同步组60例和序贯组38例,同步组采用吉非替尼联合同步放疗治疗(吉非替尼250 mg/d),而序贯组采用先服用吉非替尼直至疾病进展,再进行放疗。统计两组的疗效、不良反应、无进展生存时间(progression-free survival,PFS)、总生存期(overall survival,OS)、1年生存率和2年生存率,利用R×C表的χ2检验和2×2表的χ2检验分析相关数据。结果在同步组中出现缓解(partial response,PR)、进展(progress of disease,PD)、有效(response rate,RR)和疾病控制(disease control rate,DCR)的比例分别为76.67%、1.67%、86.67%和98.33%,而在序贯组出现PR、PD、RR和DCR的比例分别55.26%、15.79%、65.79%和84.21%。有消化道反应的患者在同步组和序贯组的比例分别为68.33%和47.37%,而有转氨酶升高的患者则分别为23.33%和5.26%。患者出现PR、PD、RR、DCR、消化道反应、转氨酶升高和2年生存率在同步组与序贯组之间的差异有统计学意义(P0.05)。完全缓解、部分缓解、稳定和进展的构成比在两组间的差异有统计学意义(P0.05)。结论治疗EGFR突变型晚期非小细肺癌采取吉非替尼联合同步放疗的方案是可取的。     

贝伐珠单抗联合化学疗法治疗表皮生长因子受体突变晚期非小细胞肺癌的临床效果

目的 探讨表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor,EGFR）突变晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）采用贝伐珠单抗联合化学疗法治疗的临床效果。方法 选取2021年1月至2023年6月在巨野县人民医院收治的60例EGFR突变晚期NSCLC患者,以随机数字表法分成研究组（n=30）与对照组（n=30）,对照组给予化学疗法治疗,研究组给予贝伐珠单抗联合化学疗法治疗,比较两组的近期疗效、血清肿瘤标记物水平、生活质量及不良反应。结果 研究组的疾病控制率（disease control rate,DCR）(83.33%)较对照组（60.00%）更高（P<0.05）;治疗后两组的癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）、细胞角蛋白19片段（cytokeratin 19fragment, CYFRA21-1）水平下降（P<0.05）,研究组较对照组更低（P<0.05）;治疗后两组的卡氏功能状态（Karnofsky performance status,KPS）评分...     

非小细胞肺癌表皮生长因子及间变性淋巴瘤激酶基因检测及临床病理特征

目的研究汉族人群中表皮生长因子(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变和间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)基因融合在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者中的阳性率及其与临床病理特征的关系。方法收集本院非小细胞肺癌临床手术患者522例,通过ARMS-PCR方法检测NSCLC标本中EGFR基因突变和ALK基因的常见基因融合变异,分析其与患者的病理学分型、性别和年龄等临床指标的相关性。结果对共522例NSCLC手术标本检测了EGFR基因突变,并同时对其中149例标本检测了ALK基因的常见基因融合变异。EGFR基因与ALK融合基因突变阳性率分别为42.91%(224/522)与7.38%(11/149)。EGFR基因突变多发生于女性和腺癌中。另外在149例同时检测了EGFR基因突变和ALK基因融合的标本中,有1例(0.67%,1/149)检测到了EGFR基因突变合并ALK基因融合的罕见驱动基因双突变。结论在汉族人群非小细胞肺癌患者中,EGFR基因突变与患者的性别及病理学分型等临床指标存在明显相关性。ALK基因融合及EGFR、ALK双突变共存型基因突变率虽然较低,但其意义不容忽视,临床医生应给予充分重视。     

经皮肺穿刺活检在检测表皮生长因子受体基因突变的临床应用

目的:探讨在实施表皮生长因子受体基因突变检测期间经皮肺穿刺活检应用可行性.方法:选取2017年1月1日～2020年12月31日收治的60例晚期肺癌患者进行检测研究;所有患者均无法手术治疗;通过CT引导利用同轴技术对患者合理展开肺穿刺活检操作,对肿瘤组织标本进行获取,针对患者合理开展表皮生长因子受体基因检测以及组织学诊断...     

衢州地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨衢州地区非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变特点的相关性。方法选取2017年1月至2018年2月衢州市人民医院收治的106例NSCLC患者的石蜡包埋组织,采用PCR-荧光探针法检测EGFR基因第18～21号外显子基因突变情况。结果 106例NSCLC患者总突变率为43.40%,第18、19、20、21号外显子突变率分别占突变总数的2.17%,41.31%,4.34%,52.18%,女性EGFR基因的突变率高于男性,差异有统计学意义(χ~2=5.52,P=0.02),无吸烟史患者高于有吸烟史患者,差异有统计学意义(χ~2=4.76,P=0.03),腺癌患者高于鳞癌患者,差异有统计学意义(χ~2=10.59,P=0.01),EGFR基因的突变率与NSCLC患者的年龄无相关性(χ~2=0.65,P=0.42)。结论衢州地区NSCLC患者EGFR基因突变以19号外显子的缺失和21号外显子的点突变为主,女性、无吸烟史及腺癌的NSCLC患者EGFR基因突变率较高,可接受以EGFR为靶点的小分子酪氨酸激酶抑制剂治疗。     

焦磷酸测序与PCR产物直接测序在乙型肝炎病毒耐药基因检测中的敏感性比较

目的 通过与PCR产物直接测序比较,评价焦磷酸测序法在乙型肝炎病毒耐药基因检测中的应用价值.方法 选取临床使用拉米夫定抗病毒治疗慢性乙型肝炎患者,分别采用巢式PCR焦磷酸测序法与巢式PCR产物直接测序法检测拉米夫定相关耐药位点rtl80变异情况,比较两种方法的敏感性与特异性.结果 焦磷酸测序与PCR产物直接测序均能准确的检测出优势病毒株(占总群＞90％),焦磷酸测序中rt180M所占比例在90％～50％时,PCR产物直接测序法检出率下降至76.92％及50.00％;焦磷酸测序样本中rtl80M所占比例为50％～10％,PCR产物直接测序法对耐药基因的检出率降至15.38％～10.00％;准种(占总群＜10％)焦磷酸测序可以测出,但PCR产物直接测序法无法检测出.结论 焦磷酸测序的方法监测乙型肝炎病毒变异同PCR产物直接测序法相比,有更好的灵敏性,在抗病毒治疗过程中能够检测HBV准种及种群漂移,对于研究抗病毒疗效及耐药预测具有重要意义.