河南省健康人群外周血T淋巴细胞14种表型正常参考值的建立及意义

目的 建立中国健康成人血液淋巴细胞14种表型的正常参考值，为机体免疫状态的分析和研究提供参考范围。方法 用Multi TEST四色特异性T淋巴细胞亚群荧光抗体对82例(17～66岁)河南省健康人血液进行荧光标记，FACSCallibur流式细胞仪检测样品，Multiset程序获取数据并分析结果。结果 获得了82例健康正常人外周T淋巴细胞14种表型(CD3，CD4^ CD3^ ，CD8^ CD3^ ，CD45RO^ ／CD4^ ,CIM5RA^ /CD4^ ，CD45RA^ CD45RO^ ／CD4^ ，CD45RO^ ／CD8^ ，CD45RA^ ／CD8^ ，CD45RA^ CD45RO^ ／CD8^ /CD38^ ／CD8^ ，HLA-DR^ ／CD8^ ，CD38^ HLA-DR^ ／CD8^ ，CD62L^ /CD4^ ，CD62L^ CD45RA^ ／CD4^ )绝对计数和百分率的均值和标准差。结论 建立了正常人14种免疫表型的正常值范围，为基础研究和临床研究提供了全面反映细胞免疫状况的参考范围。     

93例传染性非典型肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的　了解传染性非典型肺炎 (世界卫生组织又称严重急性呼吸综合征 ,SARS)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法　采用流式细胞仪对 93例临床确诊的SARS患者、5 0例获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)患者及 6 4例健康体检者外周血T淋巴细胞亚群进行检测。 93例患者中 ,男4 0例、女 5 3例 ;年龄 17～ 88岁 ,平均 4 4岁 ;重型 35例、普通型 5 8例。结果　健康体检者外周血CD+ 3 、CD+ 4 、CD+ 8分别为 (15 2 7± 4 70 )、(787± 2 5 7)、(6 33± 2 80 )个 / μl;93例急性期SARS患者分别为(72 2± 5 33)、(438± 35 3)、(30 7± 2 17)个 / μl,均有不同程度的下降 (P值均 <0 .0 1) ,重症病例下降尤其明显 ,5例死亡患者外周血CD+ 4 均低于 2 0 0个 / μl;SARS患者恢复期CD+ 3 、CD+ 4 、CD+ 8多数恢复正常。而AIDS患者以CD+ 4 降低为主 ,为 (2 96± 2 98)个 / μl;且CD+ 8升高 ,为 (818± 5 6 6 )个 / μl。 结论SARS患者有明显的细胞免疫损伤。     

湖北成人CD4、CD8T淋巴细胞计数正常值调查及CD4与总淋巴细胞数的相关性分析

目的了解中国湖北成人CD4抗原阳性的T淋巴细胞(CD4)、CD8抗原阳性的T淋巴细胞(CD8)、CD3抗原阳性的T淋巴细胞(CD3)及CD4/CD8、CD4/CD3正常值参考范围,以及总淋巴细胞计数(TLC)与CD4之间的关系.方法选取120例15～60岁健康人不同年龄组的血标本,用Becton Dickinson公司生产的FACSCount自动化仪检测CD4、CD8、CD3、CD4/CD8、CD4/CD3,计算相关数据的正常值参考范围,并将其与国外数据作比较.用美国雅培CEILDYN(R)3700血液全自动分析仪作全血总淋巴细胞计数.结果CD4值为681±21/mm3(-x±Sd,以下相同),CD8值为510±26/mm3,CD3值为1 299±38/mm3,CD4/CD8值为1.43±0.06,CD4/CD3值为0.54±0.10,TLC值为1 752±48/mm3.CD4、CD8、CD3计数及CD4/CD8、CD4/CD3在不同性别、年龄组之间差别无显著性.CD4与TLC之间有显著的直线正相关性,r=0.647,回归方程为√CD4=0.422√TLC+8.444.结论CD4、CD3、CD8等正常值在不同性别、年龄间相近.中国湖北成人CD4值与中国上海成人之间无差别,但显著低于国外值.在无条件检测CD4计数的情况下,可用TLC推测CD4的值.中国现有的治疗标准需要进一步探讨.     

健康傣族人CD3+ CD4+和CD8+ T淋巴细胞绝对数正常值调查

目的了解德宏州健康傣族人群外周静脉血CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞绝对数和CD4 /CD8 比值的正常值范围。方法应用流式细胞仪(FACSCount)检测253例健康傣族人的CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞绝对数和CD4 /CD8 比值,并观察以上数值在性别和年龄上的差异。结果CD3 、CD4 、CD8 和CD4 /CD8 的正常值参考范围分别为(1 543±443)个/μl(、849±261)个/μl(、567±225)个/μl和1.63±0.55。CD3 、CD4 在性别和年龄组别间的差异均无统计学意义,而CD8 和CD4 /CD8 在年龄组别间的差异有统计学意义。结论初步建立了健康傣族人群CD3 、CD4 、CD8 和CD4 /CD8 的正常值参考范围,对于指导德宏州艾滋病的诊断及治疗工作有重要意义。     

健康傣族人CD3+ CD4+和CD8+ T淋巴细胞绝对数正常值调查

目的 了解德宏州健康傣族人群外周静脉血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞绝对数和CD4^＋／CD8^＋比值的正常值范围。方法应用流式细胞仪（FAcscount）检测253例健康傣族人的CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞绝对数和CD4^＋／CD8^＋比值，并观察以上数值在性别和年龄上的差异。结果 CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋／CD8^＋的正常值参考范围分别为（1543±443）个/μl、（849±261）个/μl、（567±225）个/μl和1．63±0．55。CD3^＋、CD4^＋在性别和年龄组别间的差异均无统计学意义，而CD8^＋和CD4^＋／CD8^＋在年龄组别间的差异有统计学意义。结论 初步建立了健康傣族人群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋／CD8^＋的正常值参考范围，对于指导德宏州艾滋病的诊断及治疗工作有重要意义。     

病毒性心肌炎患者外周血T淋巴细胞亚群及B淋巴细胞的研究

目的: 测定不同时期病毒性心肌炎(VMC)患者T淋巴细胞亚群及B淋巴细胞的数量,并同时检测患者血清心肌损害标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)的水平,探讨其在VMC发病机制中的作用。方法: 采用流式细胞术检测不同时期VMC患者(n=126)外周血CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+以及CD19+的表达,并设正常人群作为对照组(n=50)。结果: 急性期（<3个月）患者CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+以及CD19+与对照组相比差异显著。<1个月以CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+为著（P<0.01;P<0.01）。病程<7 d的患者与对照组相比,CD4+CD45RA+值的降低具有显著性(P<0.01);CD4+CD45RO+值下降明显(P<0.01)。而病程7~14 d、14~21 d及21~30 d的患者CD4+CD45RA+值、CD4+CD45RO+值及CD19+值与对照组相比差异均有统计学意义,CD4+CD45RO+值恢复较快。CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+在发病14 d内的患者与对照组差异无统计学意义;而14~30 d的患者与对照组相比差异有显著性。发病1~3个月患者以CD19+为著（P<0.01）。急性期CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+细胞的比例失衡。恢复期（3~12个月）患者CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+以及CD19+、CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+细胞的比例与对照组相比差异无显著性。结论: VMC患者感染初期（<1个月）以T淋巴细胞亚群异常为主,感染后期（1~3个月）以B淋巴细胞异常较为显著,以上两时期均存在CD4+CD45RA+/ CD4+CD45RO+细胞比例失衡。恢复期（3~12个月）T淋巴细胞及B淋巴细胞逐渐恢复至正常。     

湖北地区城镇与农村健康人群CD4^＋T淋巴细胞计数调查

目的了解湖北地区城镇与农村健康人群CD4＋T淋巴细胞计数。方法取健康人群的全血标本,用流式细胞仪检测CD4＋T淋巴细胞计数,用SPSS 13.0对不同地区、性别、年龄组健康人群CD4＋T淋巴细胞计数进行比较。结果湖北地区城镇与农村498名健康人群CD4＋T淋巴细胞计数均值为632.35个/μl,其中农村健康人群CD4＋T淋巴细胞计数为564.13个/μl,低于城镇健康人群的696.05个/μl（P〈0.05）。另外,719岁、2029岁、3039岁、4049岁、5059岁及60岁以上年龄组健康人群CD4＋T淋巴细胞计数均值,分别为711.36个/μl、640.40个/μl、625.73个/μl、638.38个/μl、593.22个/μl和524.96个/μl。结论湖北地区农村健康人群CD4＋T淋巴细胞计数低于城镇健康人群,而且随着年龄增长,CD4＋T淋巴细胞计数呈下降趋势。     

慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞功能变化的机制研究

采用流式细胞仪检测慢性乙型肝炎（CHB）患者T淋巴细胞表面CD27和CD45RA表达情况,并选健康体检者作为对照。结果发现CHB患者外周血单个核细胞中CD45RA-CD27T细胞较对照组明显减少,而外周血中CD45RA-CD27T细胞明显增多。提示T淋巴细胞分化不完全可能是CHB患者T细胞功能低下的机制之一。     

慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞激活诱导的细胞死亡

目的　研究慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞 (PBL T)激活诱导细胞死亡 (AICD)的发生情况 ,探讨AICD在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法　采用免疫磁珠技术负性分离 14例慢性乙型肝炎患者和 9例正常人PBL T ,应用抗CD3单克隆抗体、佛波醇 (PMA)及离子霉素 (iono mycin)体外诱导细胞活化 ;采用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记 (TUNEL)染色观察凋亡情况并用流式细胞仪检测凋亡率。结果　慢性乙型肝炎患者诱导组PBL T凋亡率为 (16.73±0 .99) % ,明显高于未诱导组 (9.74± 1.14 ) % ,P <0 .0 1。无论是否诱导 ,患者PBL T的凋亡率均高于健康人。培养上清液中IFN γ浓度与T细胞凋亡率成负相关 (P <0 .0 1) ,而各组IL 10的浓度差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　慢性乙型肝炎患者PBL T存在AICD现象 ,并且可能是造成HBV持续感染的重要原因     

应用流式细胞术和原位杂交技术检测HIV-1感染者T淋巴细胞内病毒的初步研究

目的 建立检测艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血单核细胞内HIV-1的方法，并初步探讨其临床应用价值。方法 应用流式细胞仪和荧光原位杂交半定量检测记忆性T细胞(CD4^ CD45RO^ )内的HIV-1，同时测定HIV-1感染者外周血CD4^ T淋巴细胞绝对数和血浆病毒载量。结果 7例病人中6例有阳性结果，波动范围0～6．29％。细胞内病毒含量的结果与血浆病毒载量完全一致。结论 荧光原位杂交检测细胞内HIV-1的方法敏感性高，重复性好，检测速度快，可以成为评价艾滋病病程进展和抗病毒治疗的重要方法。     

广西壮族自治区健康成年人T淋巴细胞亚群分类绝对计数及CD4/CD8比值调查

目的初步建立广西壮族自治区健康人群外周静脉血CD3、CD4、CD8T淋巴细胞绝对数值和CD4/CD8比值的参考范围.方法用流式细胞仪(FACSCalibur,FCS)、三色免疫荧光试剂和绝对计数管(TnTEST/TruCOUNT),检测110名广西健康成年人(16～56岁)静脉全血CD3、CD4、CD8T淋巴细胞绝对数值和CD4/CD8比值,并观察T淋巴细胞亚群分类计数在性别、年龄和民族上的差别.结果 110名健康成年人检测结果平均值CD3为524±541,CD4为823±305,CD8为601±248,CD4/CD8为1.49±0.53.进一步分析发现,CD4和CD4/CD8在民族分布上(汉族79名、壮族31名)的差异有显著的统计学意义(P＜0.05).结论这次初步建立CD3、CD4、CD8T细胞绝对数值和CD4/CD8比值正常参考范围,对于指导广西的艾滋病诊断及治疗工作有重要意义.     

肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的研究肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群的变化及意义。方法流式细胞仪测定31例肝炎后肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群，同时检测15例正常人的外周血T淋巴细胞亚群。结果肝硬化患者外周血T淋巴细胞（CD3^＋）、T辅助／诱导细胞亚群（CD4^＋）、T辅助淋巴细胞／T抑制淋巴细胞亚群（CD4^＋／CD8^＋）较正常对照明显降低（p＜0．01），腹水CD3^＋、CIM^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋较外周血显著降低（P＜0．001）。结论肝硬化患者外周血及腹水T淋巴细胞亚群存在明显异常，表现为全身及腹膜腔局部的免疫力低下。     

严重肝病患者并发感染性休克外周血T淋巴细胞亚群的分析

目的探讨并发感染性休克的肝病患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法在42例并发感染性休克的慢性乙型肝炎患者,取外周血,采用特异性荧光抗体标记、BD流式细胞仪检测其T淋巴细胞亚群。结果慢性乙型肝炎并发感染性休克患者T淋巴细胞亚群表现为CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞及CD4 /CD8 T比值明显下降(P<0.01),与无并发症组比较,CD3 、CD4 T淋巴细胞均明显下降(P<0.05),但CD8 T淋巴细胞无明显变化(P>0.05),导致CD4 /CD8 比值明显降低(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎并发感染性休克患者T淋巴细胞亚群比无并发症组更紊乱,免疫功能更低下。     

原发性胆汁性肝硬化外周血T细胞亚群及细胞因子的检测

目的　探讨中国人原发性胆汁性肝硬化患者的T细胞亚群及细胞因子存在状况及意义。方法　选未经特殊治疗的原发性胆汁性肝硬化 (PBC) 2 5例 ,性别、年龄匹配的健康人 2 0例作为对照组。以双抗体夹心ELISA法检测外周血细胞因子IL_2、IFN_γ、IL_4、IL_10、TNF_α水平。以S_P法检测外周血T淋巴细胞亚群。结果　与对照组比较 ,PBC患者CD+ 4 T细胞升高 ,CD+ 8T细胞下降 ,CD+ 4 /CD+ 8比值上升 (P <0 0 1)。PBC组IL_2、IFN_γ、TNF_α明显升高 (P <0 0 1) ,IL_10轻度上升 (P <0 0 5 ) ,IL_4水平与对照组比较无差异 (P >0 0 5 )。结论　PBC外周血CD+ 4 T细胞和Th1细胞因子占优势 ,提示其在PBC发病机制中发挥重要作     

Aging of immune system: Immune signature from peripheral blood lymphocyte subsets in 1068 healthy adults

Aging is a major risk factor for several conditions including neurodegenerative, cardiovascular diseases and cancer. Functional impairments in cellular pathways controlling genomic stability, and immune control have been identified. Biomarker of immune senescence is needed to improve vaccine response and to develop therapy to improve immune control. To identify phenotypic signature of circulating immune cells with aging, we enrolled 1068 Chinese healthy volunteers ranging from 18 to 80 years old. The decreased naïve CD4+ and CD8+ T cells, increased memory CD4+ or CD8+ T cells, loss of CD28 expression on T cells and reverse trend of CD38 and HLA-DR, were significant for aging of immune system. Conversely, the absolute counts and percentage of NK cells and CD19+B cells maintained stable in aging individuals. The Chinese reference ranges of absolute counts and percentage of peripheral lymphocyte in this study might be useful for future clinical evaluation.     

激素抵抗型肾病综合征患者T淋巴细胞亚群及调节性T细胞的变化及意义

目的探讨激素抵抗型原发性肾病综合征（ SRNS）患者T细胞亚群（ CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4/CD8）及Treg（CD4＋CD25＋highCD127low）的动态变化趋势及临床意义。方法选取初治原发性肾病综合征（PNS）患者65例,标准剂量泼尼松治疗（1 mg·183; kg-1·183; d-1）8周后,根据病情缓解与否筛选出SRNS组患者24例。正常对照组30例。患者于治疗前（W0）、治疗4周（W4）、治疗8周（W8）采用流式细胞术检测T细胞亚群及Treg。结果①SRNS组激素治疗8周后,除Alb较治疗前有所升高外（ P＜0.05）,尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、胆固醇（Cho）、甘油三酯（TG）治疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）。②SRNS组患者W0与正常对照组比较,CD4％、CD4/CD8升高,而Treg/CD4下降（ P＜0.05）。 SRNS组治疗8周后与治疗前比较,CD4％、CD8％、CD4/CD8、Treg、Treg/CD4差异均无统计学意义（ P＞0.05）。结论 SRNS患者存在T细胞数量异常,T细胞亚群及Treg/CD4比值失调情况。糖皮质激素治疗8周未能有效改善其临床表现及免疫异常状态。     

原发性肝癌患者微波消融治疗后外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的：观察原发性肝癌患者微波消融治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法152例原发性肝癌患者在微波消融治疗前1d、治疗后1 w和4 w,以流式细胞术检测患者外周血CD4＋和CD8＋淋巴细胞数量,采用全自动生化免疫分析仪检测甲胎蛋白水平。术后1 m进行肝脏CT增强扫描观察。结果在微波消融治疗后1 w和4 w,患者外周血CD4＋T淋巴细胞上升至（26.5±3.8）%和（32.3±5.1）%,CD4＋/CD8＋比值上升至（1.12±0.43）和（1.51±0.40）,而CD8＋T淋巴细胞下降至（47.2±7.7）%和（28.1±7.3）%,与治疗前1d时基线水平[CD4＋、CD8＋和CD4＋/CD8＋分别为（21.4±4.1）%、（58.6±7.8）%和（0.98±0.45）]比,变化有统计学意义（P均〈0.05）;甲胎蛋白水平由基线水平[（1109±727） ng/ml]下降,术后1w和4w分别为（890±681） ng/ml 和（215±18） ng/ml（P〈0.01）;微波消融后1m行增强CT检查,示病灶完全灭活率为97.4%（148/152）。结论微波消融治疗使原发性肝癌患者外周血T淋巴细胞亚群向CD4＋T淋巴细胞优势转变,可能对治疗效果的取得发挥了作用。     

登革病毒感染者外周血T淋巴细胞亚群数量的变化及其临床意义

目的观察登革热患者外周血T淋巴细胞亚群数量变化的特点并探讨其临床意义。方法用流式细胞仪检测不同发病时间71例登革热患者外周血中总T淋巴细胞(CD3+)、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的数量,并将急性期患者、恢复期患者及正常人T淋巴细胞及其亚群数量进行比较,组间数据比较采用t检验。结果与正常对照组相比,急性期登革热患者T细胞和CD4+T细胞都显著减少(P<0.01)、CD4+T/CD8+T比值显著降低(P<0.01),恢复期登革热患者上述指标没有显著性差异(P>0.05);与急性期相比,恢复期登革热患者CD4+T细胞显著升高(P<0.01);急性期、恢复期登革热患者和正常对照组CD8+T细胞数量没有显著性差异(P>0.05)。登革热患者T淋巴细胞亚群数量和CD4+T/CD8+T比值随着发病时间的增加而逐渐上升。结论登革热患者急性期细胞免疫异常,通过治疗可以逐渐恢复。T淋巴细胞亚群的检测可作为监测登革热患者免疫功能的一个指标,对于病人的治疗和预后有一定的意义。细胞免疫异常可能在登革热的发病中起重要作用。     

激素敏感型原发性肾病综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及调节性T淋巴细胞的变化及意义

目的通过测定激素敏感型原发性肾病综合征（SSNS）患者外周血T细胞亚群（CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4/CD8）及调节性T淋巴细胞（Treg,CD4＋CD25＋highCD127low）,探讨其在病情不同阶段的动态变化趋势及临床意义。方法选取在该科初治的原发性肾病综合征（PNS）患者,经标准剂量激素治疗（1mg·kg-1·d-1）8周后,根据病情缓解与否筛选出SSNS组患者35例,正常对照组30例。患者分别于治疗前（W0）、治疗4周（W4）、治疗8周（W8）常规进行实验室检查[包括尿蛋白定量、血白蛋白（Alb）、血肌酐（Scr）、胆固醇（Cho）、甘油三酯（TG）等],采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群及Treg。结果 （1）实验室指标比较：SSNS组患者W4、W8分别与W0比较,尿蛋白、Cho、TG及Scr均显著下降（P〈0.05）,Alb显著升高（P〈0.05）。W8与W4比较,Alb升高（P〈0.05）,其余指标两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）SSNS组与正常对照组比较：SSNS组患者W0与正常对照组比较,CD4%、CD4/CD8有升高趋势,而Treg及Treg/CD4轻微下降,但差异均无统计学意义（P〉0.05）。W4与正常对照组比较,CD4%、CD4/CD8比值升高（P〈0.05）,Treg/CD4比值降低（P〈0.05）。W8与正常对照组比较,CD4%、CD8%、CD4/CD8比值、Treg、Treg/CD4比值的差异均无统计学意义（P〉0.05）。（3）SSNS组治疗期间动态变化：SSNS组W8与W4比较,CD4%下降,CD8%升高,CD4/CD8比值下降,Treg及Treg/CD4均明显升高（P〈0.05）,以上指标与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 SSNS患者存在T淋巴细胞数量异常,T淋巴细胞亚群及Treg/CD4比值失调,且此异常的免疫状态当糖皮质激素治疗4周时仍然持续存在,治疗8周达临床完全缓解后得以改善。Treg可能在SSNS患者的病情缓解中发挥作用。