维吾尔族慢性HBV感染者HBV RT区准种研究

目的 初步探讨新疆维吾尔族慢性HBV感染者HBV准种特性.方法 选择5例维吾尔族慢性HBV感染者(抗乙型肝炎病毒治疗与未治疗)为主要研究对象,选择HBV RT区为研究靶区.采用克隆-测序方法进行准种研究.使用BioEdit 和NCBI-BLAST工具进行生物信息学分析,并探讨其与临床的关系.结果 治疗的患者(拉米夫定)...     

慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因突变与临床的关系

目的：探讨慢性乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区基因变异与临床的关系。方法：应用３′－碱基特异性ＰＣＲ法（３′－ＢＳ－ＰＣＲ）。结果：５５例ＨＢＶＤＮＡ阳性慢性乙型肝炎患者中检出突变株２５例。突变株的检出主要集中在抗－ＨＢｅ阳性患者中，并随肝损害加重而增加，重型肝炎患者突变株检出率最高。ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染者高于ＨＢＶ单纯感染者。结论：突变株感染者病情较重，预后差；抗－ＨＢｅ的出现并不完全意味着病情的缓解；ＨＣＶ的重叠感染可能是导致ＨＢＶ前Ｃ区基因突变的原因之一。     

HBV前C区1896位点变异与HBV感染者肝功能损害程度的关系

了解ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点变异与乙型肝炎病毒感染者肝功能损害程度的关系。方法：用ＰＣＲ技术，通过改变引物３’端的方法，检测ＨＢＶ感染者的前Ｃ区第１８９６位点变异株。结果：１０５例ＨＥＶ感染者中的ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点变异株总检出率为５６．２％；男性与女性患者的检出率分别为５７．０％与５００％；≤３０岁组，３１－５９岁组，≥６０岁年龄组的检率分别为６０．０％，５６．６％，２８．６％；无黄疸组，轻～中度黄疸组，重度黄疸组的检出率分别为５３．２％，６５．１％，４０．０％；在ＨＢＶ携带者、慢性肝炎（包括轻、中、重庆），重症肝炎及肝硬化患者中的检出率分别为６０．０％，５７．４％，３３．３％，７０．０％。结论：ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点突变株广泛存在于ＨＢＶ感染者中，而且其检出率与患者性别、年龄、ＨＢＶ感染时间长短及肝功能损害程度并无明显联系。     

HBV YMDD变异与HBV-DNA水平的关系

目的 观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的产生与血清HBV-DVA水平的关系.方法 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者106例,平均疗程32月(12～48月),治疗前及治疗中每4～6月采血,用荧光实时PCR定量检测HBV-DNA,采用错配聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析的方法检测HBVYMDD变异.分析出现YMDD变异组与非变异组治疗前HBV DNA水平差异.结果 YMDD变异组治疗前血清HBV DNA定量水平显著高于未产生YMDD变异(P＜0.01).结论 慢性乙型肝炎患者治疗前血清病毒载量水平越高,应用拉米夫定治疗越容易产生YMDD变异,且产生时间越早.血清病毒载量可作为应用拉米夫定治疗YMDD变异产生的早期预测指标.     

乙肝病毒基因型及病毒变异对慢性肝病进展的影响

目的 进一步研究HBV基因型及病毒变异与慢性肝病进展的关系.方法 用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)以及部分PCR产物测序的方法对401例慢性HBV感染者.包括112例HCC患者(HCC组),129例无症状携带者(ASC组),70例肝硬化患者(LC组)和90例慢性肝炎患者(CH组)进行HBV基因分型以及BCP和PC变异检测.结果 401例慢性HBV感染者中181例发生B基因型感染,220例发生C型感染.HCC组中C型分布高于其他3个疾病组;C基因型感染者BCP变异多于B基因型;B基因型感染者PC变异多于C基因型;同时BCP变异发生率随着病程进展而递增:在ASC组、CH组、LC组和HCC组里的BCP变异阳性率分别为22.4%、35.0%、50.0%、74.1%.C1与C2亚型相比,C1有较高BCP变异阳性率,而C2有较高PC变异发生率.结论 BCP变异与肝病进程存在依从关系,因此BCP变异的检测对慢性HBV感染的疾病进展和临床结局的评估有重要意义.     

南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点

目的探讨南京地区HBV基因型分布及其前C区1896变异的特点.方法随机选择2004年3月～2005年3月南京地区HBV-DNA阳性（荧光PCR）的HBV感染者220例.采用多对型特异性引物PCR法检测HBV基因型,采用特异性引物PCR法检测HBV前C区1896变异株和野生株.结果 HBV感染者中基因型B 71例,基因型C 146例,基因型D 1例,B/C混合型1例,A/B混合型1例,未发现基因型A、E、F存在.有163例HBV感染者发生了前C区1896变异,变异株检出率（单纯变异株/混合变异株）为74.1%.基因型B 78.9%发生了前C区1896变异,基因型C有66.4%发生了C区1896变异,两组比较,差别有显著性意义 （χ2=4.56,P＜0.05）.结论南京地区存在HBV基因B、C、D及B＋C和 A＋B混合型,以B、C型为优势基因型,未发现A、F、E基因型;HBV基因型B前C区1896的变异率较HBV基因型C高.     

慢性乙型肝炎HBV BCP变异157例的临床分析

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因组基本核心区启动子 (basiccorepromoter ,BCP)变异的临床意义。方法　用微板杂交法和酶联免疫吸附试验联合检测HBVBCP变异 ,根据检测结果将HBV病毒血症患者分成变异阳性组(positive ,P)和变异阴性组 (negative ,N) ,比较分析两组患者的临床资料以评定BCP变异的意义。结果　 15 7例血清HBV DNA阳性的患者中检出BCP变异 67例 ,检出率 42 68% ,其中HBeAg(+ )者变异率略低于HBeAg(-)者 ,但无统计学意义。P、N组间性别、年龄、病程比较无显著差异 (P >0 0 5 )。肝功方面 ,HBeAg(+ )者 ,P、N组患者无差别 ,HBeAg(-)者P组ALT、AST水平显著高于N组 ,亦显著高于P组 ,HBeAg(+ )者 (P <0 0 1或 <0 0 5 )。结论　HBVBCP变异较普遍存在 ,但更多见于HBeAg(-)患者。变异对病情的影响与HBeAg有关 ,HBeAg( )者肝损害程度重于HBeAg(+ )患者     

自然发生和拉米夫定诱导的乙型肝炎病毒逆转录酶区序列变异的特征

目的 研究慢性乙型肝炎（CHB）患者在自然状态或在拉米夫定（LVD）长期治疗过程中乙型肝炎病毒（HBV）逆转录酶区（RT）序列变异出现的时机和特点。方法 120例CHB患者按测序时机分3组：Ⅰ组初治患者25例，Ⅱ组病毒学突破患者74例，Ⅲ组病毒学部分应答患者21例。所有患者留血清标本，提取血清HBV—DNA，应用PCR扩增，直接测序HBV RT区，Chromas2．0软件分析HBVP基因RT区变异，同时使用Clustalxl．81．msw进行基因型分析。结果 120例CHB患者中，B型34例（28.3％），C型85例（70．8％），B／C型1例（0．8％）。Ⅰ组患者中，2例（8．0％）出现rt变异原发性LVD耐药（LVDr），其中1例为rtM204V＋rtL180M变异，另1例为rtL180M变异与野毒株并存；Ⅱ组患者中，67例（90．5％）出现继发性LVDr变异，rt变异位点为rtM204V／I、rtL180M、rtV173L／M、rtV207M/L/I、rtA181T,rtM250L；Ⅲ组患者中，出现rtV1911、rtF221Y变异各1例，没有出现LVDr相关的变异。结论 CHB患者在自然状态下和病毒学突破时HBV可出现LVDr变异，治疗前后对HBV逆转录酶区（RT）序列分析可指导临床抗HBV药物的选择。     

HBV慢性感染者前C/BCP区变异特点及与疾病发展关系分析

目的:探讨慢性HBV感染者前C/BCP区突变与血清HBeAg、HBs Ag、DNA、甲胎蛋白(AFP)及肝硬度值(LSM)的关系及对疾病进展的预测性。方法:收集101例未经抗病毒治疗的慢性HBV感染者和47例乙型肝炎肝硬化(LC)患者清晨空腹血清。以免疫化学发光法检测血清HBeAg、HBs Ag、AFP含量,采用磁珠法检测HBV-DNA,应用半巢式聚合酶链反应检测前C/BCP区基因突变,采用无创实时检测设备检测LSM。结果:101例慢性HBV感染者中,HBeAg阴性组的前C、BCP、前C+BCP区的变异率显著高于HBeAg阳性组(P<0.01)。而LC组总变异率显著高于慢性HBV感染者HBeAg阴性组和HBeAg阳性组(P<0.01)。148例HBV感染者中前C区、BCP区和前C+BCP变异株共87例,野生株61例,变异型组与野生型组比较,HBeAg含量减少(P<0.05),HBs Ag含量增加(P<0.01),AFP水平和LSM值增高(P<0.05),DNA水平无统计学意义(P>0.05)。结论:HBeAg阴性的慢性HBV感染患者中前C/BCP区变异率较高,变异可能导致更易发展为肝硬化,病情加重。监测HBeAg阴转的慢性HBV感染患者的DNA、HBs Ag、AFP、LSM指标,对了解病情及体内病毒是否确实已被免疫清除有参考价值。     

乙型肝炎患者血清HBV前C区A1896变异的检测分析

目的了解HBsAg（＋）/HBcAb（＋）/HBeAb（＋）的慢性乙肝病人血清乙肝病毒（HBV）DNA前C区A1896的变异情况及其与临床关系。方法对所有试验对象检测肝功能指标,根据检测结果分为丙氨酸氨基转移酶（ALT）升高组和ALT正常组。用聚合酶链反应杂交（PCR-ELISA）定量检测HBV-DNA并进一步检测HBV前C区A1896位点的变异情况。结果 38例患者中有18例HBV-DNA阳性,其中15例发生A1896位点变异,变异率为83.3%（15/18）。ALT升高组的18例中,血清HBV-DNA阳性13例,阳性率72.2%,平均浓度为9.62×106（1.10×103～1.09×108）拷贝/ml,A1896变异13例,变异率为100%（13/13）。ALT正常组的20例中,HBV-DNA阳性5例,阳性率25.00%,平均浓度2.55×104（3.28×103～4.61×104）拷贝/ml。A1896变异2例,变异率为40%（2/5）。两组比较无论在HBV-DNA阳性率,还是A1896位变异率都具有统计学差异（P〈0.05）。结论 HBsAg（＋）/HBcAb（＋）/HBeAb（＋）的慢性乙肝患者存在较高的A1896变异率,ALT升高组HBV-DNA阳性率和变异率均高于ALT正常组（P〈0.05）,提示HBV A1896位点变异与肝脏病变活动加重和ALT升高有关。     

中国西部、北部地区410例汉族病例乙型肝炎病毒基因型与肝病转归的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型与肝病转归的关系.方法 随机选取中国西部、北部地区汉族HBV感染者DNA含量104以上者410例,煮沸法提取HBV基因组模板,PCR扩增S区基因,应用自动测序仪测定目的基因序列,进行基因分型,应用SPSS10.0软件统计分析.结果 C型占91.95%,B型占6.83%,B、C混合型占0.24%,D型占0.98%.疾病进展研究分4种情形对基因型C、基因型B进行单因素方差分析:慢性病毒携带者(ASC),慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB),肝硬化(liver cirrhosis,LC),原发性肝细胞性肝癌(primary hepatocellular carcinoma,HCC).统计显示,感染基因型C后CHB更易发展为LC和(或)HCC,有统计学意义,但两基因型之间LC发展为HCC差别无统计学意义.LC vs.(CHB+HCC)统计显示:两组在基因型方面虽无统计学差异,但从Means Plots可以看出感染基因型C向肝硬化或肝细胞癌方向发展的趋势更明显.结论 中国西部、北部汉族HBV感染者中以感染基因型C为主,且感染基因型C较基因型B更容易发展为严重的肝病.     

乙型肝炎病毒感染临床结局与HLA-DR基因的相关性研究

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染临床结局与人类白细胞抗原DR（HLA-DR）基因间的相关性。方法：选择急性乙型肝炎（AHB）76例,慢性乙型肝炎（CHB）102例,乙肝后肝硬化（LC）38例,肝细胞癌（HCC）34例,用聚合酶链反应-序列特异性引物法（PCR-SSP）检测HLA-DR基因型。结果：HLA-DR1基因型频率在LC和HCC组显著高于AHB组（χ^2=8.495,P=0.004）,较CHB组也显著升高（χ^2=5.667,P=0.017）;HLA-DR8基因型发生频率在CHB、LC和HCC三个HBV慢性感染组间无显著差异（P=0.034）,而在AHB组显著低于HBV慢性感染组（χ^2=8.830,P=0.003）;HLA-DR13基因型频率在AHB组显著高于CHB组（χ^2=26.876,P=0.000）及LC和HCC组（χ^2=6.413,P=0.011）,而LC和HCC组又高于CHB组（χc^2=6.479,Pc=0.011）。结论：HLA-DR1基因型可能与HBV相关的肝硬化和肝细胞癌的发生有关,而HLA-DR8基因型则对HBV感染的慢性化有促进作用,HLA-DR13基因型可有助于HBV的清除,但在HLA-DR13阳性的HBV慢性感染者发生肝硬化和肝细胞癌的风险增加。     

急性戊肝与慢性乙肝重叠感染的临床研究

目的了解急性戊肝与慢性乙肝重叠感染的临床特点及影响散发性戊肝发病的危险因素,探讨选择合理治疗方案减少重叠感染重型肝炎的发生率和病死率。方法2004年1月至2010年12月住院诊断为急性戊肝患者115例,将慢性乙肝重叠HEV感染（简称戊乙肝）与单纯HEV感染进行对照研究。结果115例戊型肝炎均为急性起病,平均年龄（42±15）岁,其中戊乙肝44例,单纯戊肝71例;男女比例2．83：1。戊乙肝组入院时重度黄疸（总胆红素〉200μmol／L）、重度凝血功能异常（凝血酶原活动度〈40％）、低蛋白血症的发生率明显高于单纯戊肝组（P〈0．05）;戊乙肝组肝性脑病发生率为15．90％,明显高于单纯戊肝组（P〈0．05）;戊乙肝组重型肝炎发生率为38．64％,病死率为35．29％,明显高于单纯戊肝组（P〈0．05）;人工肝支持系统（ALSS）＋内科综合治疗可提高重型肝炎存活率（P〈0．05）。结论海鲜食用史是戊肝发病的主要危险因素;慢性乙肝重叠HEV急性感染易导致慢性乙型肝炎病情加重,易发生重型肝炎,病死率高;在内科综合治疗基础上,早期使用ALSS可明显降低重型肝炎的病死率。     

乙型肝炎患者治疗后血清中e抗原与病毒DNA水平的关系

目的 通过对乙型肝炎病毒血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBcIgG)的检测及内标、外标两种聚合酶链反应(PCR)方法 检测乙型肝炎病毒载量的比对,更好地了解人体内乙型肝炎病毒携带情况,指导临床诊治.方法对经治疗后丙氨酸氨基转移酶(ALT)/天冬氨酸氨基转移酶(AST)正常、COBAS AMPLICOR定量PCR(内标法)检测不到乙肝病毒DNA(HBV-DNA)、用Abbott AxSYM微粒子酶免分析法(MEIA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性、表面抗体(抗-HBs)阴性、e抗原(HBeAg)阳性(HBeAg＞4 S/CO)、抗-HBe阴性、抗-HBcIgG阳性的42例血清,再用上海复星长征医学科学有限公司提供的HBV-PCR外标法荧光定量检测试剂盒,Light Cycler实时荧光定量PCR仪检测.结果 42例ALT/AST正常,HBeAg阳性(HBeAg＞4 S/CO以上),HBeAg的平均值42.26 S/CO.COBAS AMPLICOR定量PCR(内标法)未检测到HBV-DNA(＜300拷贝/ml)的血清;用Light Cycler定量PCR仪(外标法)检测HBV-DNA,有7例为阳性,7例HBV-DNA的平均含量3.1×105拷贝/ml,,阳性率17%.结论 乙型肝炎病毒e抗原阳性并不说明体内病毒复制一定活跃.经治疗后,病毒复制下降,部分患者e抗原仍阳性,e抗原何时消失有待进一步研究.血清学标志与HBV复制状态存在不一致性,兼顾内、外标两种PCR方法检测HBV-DNA更客观.     

慢性乙肝患者血清标志物、基因型与病毒载量关系的研究

目的:采用化学发光的方法对718例患者乙肝血清标志物进行定量检测,并采用序列特异性引物多重PCR。方法:对所有慢性乙肝患者的乙型肝炎病毒进行基因分型,乙型肝炎病毒DNA水平应用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果:56.7%的HBsAg阳性患者HBV-DNA阳性,84.8%的HBeAg阳性患者HBV-DNA阳性。乙型肝炎病毒B型395例,C型229例,BC混合型62例,未分型32例,所占比例分别为55.01%,31.89%,8.64%,4.46%。不同基因型之间乙型肝炎病毒DNA载量无明显差别。结论:HBeAg与HBV-DNA高度相关;慢性乙肝患者中,C型是乙型肝炎病毒基因型的主体,感染的乙型肝炎病毒基因型与血清病毒载量之间没有明显的相关性。     

慢性荨麻疹与乙型肝炎病毒感染的关系

目的了解慢性荨麻疹与乙型肝炎病毒（HBV）感染的关系。方法检测150例慢性荨麻疹患者（病例组）HBV感染状况。并与100名正常人（对照组）进行比较,分析伴有HBV感染慢性荨麻疹的临床表现特点。结果HBsAg阳性率病例组为19．3％、对照组为10．0％,病例组HBsAg阳性率明显高于对照组（PearsonX2=3．970,P〈0．05）;病例组中HBsAg阳性者与阴性者之间病程、风团大小比较有统计学差异（P〈0.05）。结论慢性荨麻疹发病与HBV感染有一定关系。慢性荨麻疹伴有HBV感染者临床上病程较长、风团面积较大。     

乙型肝炎病毒基因型与拉米夫定疗效关系研究

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型与拉米夫定治疗疗效的关系及其机理。方法 收集拉米夫定治疗的51例慢性乙型肝炎患者的临床资料，分析HBV基因型与拉米夫定治疗疗效的关系。结果 HBV基因型B型对拉米夫定的应答率为45．4％（10／22），C基因型的应答率为20．7％（6／29），两组应答率差异有显著性（P〈0．05）；B基因型的HBeAg的血清转换率为31.8％（7／22），C基因型为13．8％（4／29），经统计学处理差异有显著性（P〈0．05）。结论 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者，B基因型疗效较C基因型好，HBV基因型可能是预测拉米夫定治疗效果的因素之一。     

中国慢性乙型肝炎病毒感染者病毒基因型及基因亚型分布

目的了解中国不同地区慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者中HBV基因型及基因亚型分布特点。方法从我国东部(山东、江苏)、西部(新疆)、南部(广东、广西)、北部(吉林、北京)及中部(河南、河北)5个地区的9个省、自治区、直辖市收集735份慢性HBV感染者血清样品,用本实验室建立的型特异性引物巢式聚合酶链反应法(nPCR)检测HBV基因型及基因亚型。结果 735份样品中,71.8%(528/735)为C型,10.3%(76/735)为B型,6.3%(46/735)为D型,11.6%(85/735)为混合型,未检测到其他基因型。528份C型样品中,C2亚型占94.0%(496/528),C1亚型占4.9%(26/528),C1+C2混合亚型占1.1%(6/528);76份B型样品中,B2亚型占90.8%(69/76),B1亚型占5.3%(4/76),B1+B2混合亚型占3.9%(3/76)。除西部新疆地区C型相对较少(31/116,26.7%)外,其他地区均以C型为主。D型主要分布在西部新疆地区,占31.9%(37/116)。混合型在各地区均有发现,但以西部和南部地区相对多见,分别占30.2%(35/116)和20.0...     

HLA-DR基因与乙型肝炎病毒慢性感染结局的相关性

目的探讨HLA-DR基因与乙型肝炎病毒慢性感染临床结局的相关性。方法选择乙型肝炎病毒慢性感染者,包括慢性乙型肝炎患者102例,HBV相关性肝硬化38例,HBV相关性肝癌患者34例,健康对照组为健康骨髓捐献者1383例,HLA-DR基因型用PCR-SSP法进行检测。结果HLA-DR1基因型频率在健康对照组和CHB组间无显著差异(Pc>0.05),LC、HCC组中HLA-DR1基因型频率明显高于CHB组(x2=5.667,P=0.017)及健康对照组(xc2=9.438,Pc=0.002);HLA-DR13基因在健康对照组与LC、HCC组间无显著差异(Pc>0.05),但CHB组中HLA-DR13基因型的频率明显低于与健康对照组(x2=2.764,P=0.096)和LC、HCC组(xc2=6.479,Pc=0.012)。在CHB、LC和HCC三组间HLA-DR12和HLA-DR15基因频率无显著差异(P>0.05),但HBV慢性感染者中HLA-DR12基因型频率高于健康对照组(x2=16.320,P=0.000),而HLA-DR15基因型频率则低于健康对照组(x2=8.452,P=0.004)。结论HLA-DR1...