单克隆抗体夹心ELISA测定人纤维蛋白（原）降解物碎片技术用于冠心病的诊断

应用单克隆抗体测定人纤维蛋白（原）降解物。发现其特异性强、敏感性好，能单独作用于ＦＤＰ中的Ｅ碎片。且无放射性损伤。为临床上协助诊断冠心病、高血压病增添了一种方法。     

纤维蛋白(原)降解产物定量检测方法的建立与评价

目的:建立定量检测血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)含量的实验方法,评价该方法实验性能与临床应用价值。方法:采用ACLTOP全自动血凝仪,通过免疫比浊法定量检测血浆FDP含量。分析其重复性、稳定性、线性、抗生物性干扰等,评价和比较实验方法对弥散性血管内凝血(DIC)的诊断效能,并初步建立本地区FDP定量检测结果的参考区间。结果:高、低值FDP批内变异系数均小于3.2%,日间变异系数均小于10.0%;轻至中度黄疸、脂血、溶血对FDP检测的影响度均低于5%;FDP在0～120μg/ml内线性相关系数为0.9974;实验方法对DIC诊断的敏感度为96.6%,特异度为52.1%,优于对照方法;本地区FDP成人参考区间为0.67～3.18μg/ml。结论:FDP免疫比浊定量检测方法具有良好的实验性能,可用于临床纤溶状态的判断和监测。     

妊娠期妇女血浆纤维蛋白原生成和降解水平变化

目的:分析正常妊娠期妇女凝血以及纤维蛋白原生成和降解指标的变化特征,初步探讨孕妇妊娠期间的出凝血动态变化.方法:正常妊娠并顺利分娩的孕妇96例,序贯观察她们整个孕期和产后4-9周的活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白(Fg)含量、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)含量以及F...     

PGLA降解产物对材料降解性能影响的体外研究

为了探讨PGLA材料的降解产物对材料本体降解性能的影响，本研究设计了体外两种浸泡体系——磷酸缓冲液（PBS）和人工血浆，分别在替换和不替换浸泡介质两组不同条件下，分析材料的质量损耗情况，并将不替换组的各时间段降解液进行pH值的测定，以判断环境的酸碱度对材料本体降解的作用。实验降解周期分别为2、3、4、6、8、10周。结果显示：在浸泡初期，人工血浆和PBS降解液中的质量损耗两者间无显著性差异（P〉0．05）；大约从2周到6周，不替液组中材料在两种介质内的降解速度显著快于相对应的同期换液组（P〈0．01）；不替换液组材料在PBS液中的降解快于在人工血浆中的降解，而且在整个降解周期内PBS降解液的pH值基本保持稳定（pH≈7．0～7．4），而人工血浆降解液中的pH值随着降解过程的不断进行，其pH值由7．5逐渐降到5．7左右，两种降解液pH值变化之间的差异具有显著的统计学意义（P〈0．01）。由此提示：在不替换浸泡介质的条件下，降解液中持续存在的降解产物显然影响材料本体的降解速度，PGLA材料的降解产物具有加速材料质量损耗的作用；环境的酸碱度对材料的降解会产生一定的影响，pH值越低，材料的降解速度越缓慢。     

聚乙烯醇体内植入和降解产物生物相容性研究

作者对国产医用级聚乙烯醇（ＰＶＡ）降解材料的降解产物进行系统的生物学评价。结果表明：ＰＶＡ材料降解产物的ＬＤ５０为３．８ｇ／ｋｇ，无溶血、对皮肤和眼粘膜无刺激，不引起致敏反应。细胞增减可促进细胞的生长和细胞集落的形成；同时，将ＰＶＡ材料动物体内植入２８０天，与周转组织相容性良好。该研究进一步证实，ＰＶＡ材料有良好的生物相容性。     

检测体液内纤维蛋白原降解产物的胶乳凝集试验

<正> 血管内弥散性凝血(DIC)是常见的临床现象,如不及时确诊和处理将造成严重后果。血清纤维蛋白原降解产物(FDP)升高是DIC的重要诊断指标。此外尿液FDP测定对泌尿系统疾病,如膀胱癌、移植肾排异性、肾癌及其它肾病的辅助诊断也有重要价值。FDP的检测一般均采用免疫测定法,因胶乳凝集试验具有简便和快速的特点,因     

PGLA降解产物对机体主要生理功能的影响

降解产物的生物安全性是生物降解类材料生物学评价的重要内容。本文采用自体对照的方法,通过测定聚乙交酯丙交酯(PGLA)材料植入前后动物体内某些生化指标的变化,研究降解产物对机体主要脏器——肝肾功能的影响,探讨降解产物的在体生物可接受性。实验分别将不同大小的PGLA材料植入Wistar大白鼠和新西兰兔的背部皮下组织内,在动物的相同部位进行同样的手术切口和缝合作为对照,植入前和植入后2~10周的各不同时段,分别采集兔血和大鼠的尿液,测定尿素氮和尿肌酐、血清谷丙转氨酶、尿素和肌酐等生化指标。结果显示:植入后2~3周实验组尿样中的尿素氮和尿肌酐浓度出现明显的增高,与植入前比较,统计学上具有显著性差异(P<0.01);植入后第2周血清谷丙转氨酶略有所下降(P<0.05),而血尿素和血肌酐有较明显的增高(P<0.01),但自第4周起所有变化均恢复到了植入前的水平,且基本维持在一个相对恒定的范围。对照组手术前后的所有指标均未见明显的变化(P>0.05)。由此提示:(1)PGLA降解产物对肾脏和肝脏组织无永久性的损伤;(2)选用自体对照法,通过检测动物血液和尿液中主要生化指标的变化来评价PGLA降解产物对生物体全身生物学的影响作用被初步证明是一种有效而可行的研究方法;(3)在活体上评价降解产物的生物可接受性具有客观、灵敏、减少动物使用数量、可直接观察体内动态变化、能评估产物对生理功能影响等优点,为生物可降解材料的生物学评价提供新的检测途径。     

抗骨形成蛋白（BMP）单链抗体的构建

从一株鼠抗ＢＭＰ单克隆抗体杂交瘤中扩增出其可变区基因片段，并将其分别克隆入ＰＵＣ１８、１９载体，利用双脱氧链终止法进行序列测定和计算机分析后，应用一段人工合成的含１５个氨基酸的连接肽，将重链基因的Ｃ端和轻链基因的Ｎ端连接起来，构建成单链抗体。将其克隆入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１，在大肠杆菌ＪＭ１０９中获得初步表达。     

大鼠低纤维连接蛋白血症时循环内皮细胞变化的研究

用静脉注射明胶的方法复制大鼠低纤维连接蛋白血症模型，结果发现，低Ｆｎ血症大鼠循环内皮细胞明显多于对照组，且与血浆Ｆｎ减少呈正相关。低Ｆｎ血症时，ＣＥＣ表面的Ｆｎ免疫荧光明显减弱，主动脉壁管腔面内皮Ｆｎ免疫荧光也明显减弱。作者提出，血浆Ｆｎ减少引起内皮细胞表面Ｆｎ减少，使内皮细胞间的链链作用和伸展作用削弱，从而引起ＣＥＣ在形态上的皱缩、折叠并成为ＣＥＣ增加的一个重要原因。     

维生素A阻抑大鼠实验性肝纤维化的病理研究

利用光镜、电镜、免疫组化和形态学定量技术动态研究维生素A对大鼠四氯化碳肝纤维化的抑制作用。结果表明,维生素A可减少四氯化碳中毒大鼠肝内纤维连接蛋白和Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积,抑制贮脂细胞向成纤维细胞转化,并可明显地减轻肝纤维化程度。本文还对维生素A抑制肝纤维化的机理及意义作了初步探讨。     

大黄酸对受损肠黏膜上皮增殖细胞核抗原及PARP降解产物表达的影响

目的:探讨大黄酸对于受损伤的肠黏膜上皮增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞凋亡的标志蛋白PARP降解产物(cleaved-PARP)表达的影响。方法:SD雌性大鼠随机分成正常对照组、肠黏膜损伤组、大黄酸治疗组和大黄酸预防组。用牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳联合用药构建肠黏膜损伤模型,大黄酸预防组和大黄酸治疗组大鼠分别在建模前后用大黄酸悬浊液灌胃。采用免疫组织化学及图像分析仪显示和分析回肠上皮PCNA及cleaved-PARP表达情况。结果:与正常对照组比较,损伤组PCNA表达减少,cleaved-PARP表达增加。与黏膜损伤组比较,大黄酸预防组和治疗组PCNA表达均增加,cleaved-PARP表达均减少,大黄酸预防组效果更显著。结论:大黄酸能增强受损伤的肠黏膜上皮细胞PCNA的表达,抑制cleaved-PARP的表达,促进肠上皮的生长,抑制上皮细胞凋亡,从而为肠黏膜损伤产生保护和修复作用。     

抗人甲状腺球蛋白抗—抗独特型抗体（Ab3）的诱导和鉴定

用抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体（抗ＴＧ－Ａｂ１）免疫家兔，在诱导产生抗－ＴＧ独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ２）同时，诱导产生了抗－抗独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ３）。其特异性经间接ＥＬＩＳＡ、ＴＧ中和抑制试验和抗ＴＧ－Ａｂ２阻断抑制试验证实。     

降解纤维蛋白原可减少创伤性脑损伤后胶质瘢痕与纤维瘢痕的形成

目的 探讨通过降解纤维蛋白原减少创伤性脑损伤后胶质瘢痕与纤维瘢痕的形成的可能性。方法 选用8周龄昆明小鼠按照川野的方法制备小鼠黑质纹状体通路损伤模型。小鼠经腹腔注射麻醉后固定在脑立体定位仪上。在前囟点右后方1.5mm处用牙钻打开一长方形缺口,用自制宽度2.0mm的刀片从大脑表面垂直插入6.0mm。然后缓慢拔出刀片,止血缝合。24只昆明小鼠随机分成对照组与实验组。实验组于手术后1h立即注入巴曲酶注射液,连续3d。术后第4、7、14天取脑行水平位冠状浮游切片。应用胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)及GFAP抗体特异性识别损伤区域纤维瘢痕及星形胶质细胞的表达。应用双标免疫荧光法观察损伤部位的瘢痕组织形成。 结果 在伤后第4天,对照组的损伤部位出现ColⅣ 沉着,周边出现由反应性星形胶质细胞形成的境界膜,第7天后损伤中心形成纤维性瘢痕,第14天后瘢痕更明显,周边同样有星形胶质细胞包围;而实验组在第4天的损伤部位周边不易形成星形胶质细胞的境界膜,第7天及第14天纤维性瘢痕几乎不存在,但周边仍被星形胶质细胞所围绕。双重免疫荧光显示,对照组的损伤中心有纤维连接蛋白（FN）沉着,形成纤维性瘢痕;而实验组在损伤7d后FN沉着明显减少,14d后几乎消失;两组在损伤周边都有GFAP免疫阳性反应阳性细胞围绕。 结论 在脑损伤后,注入巴曲酶可通过降解纤维蛋白原减弱纤维性瘢痕及胶质瘢痕的形成。     

抗人甲状腺球蛋白抗－抗独特型抗体（Ab_3）的诱导和鉴定

用抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体（抗ＴＧ－Ａｂ１）免疫家兔，在诱导产生抗－ＴＧ独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ２）同时，诱导产生了抗－抗独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｈ３）。其特异性经间接ＥＬＩＳＡ、ＴＧ中和抑制试验和抗ＴＧ－Ａｂ２阻断抑制试验证实。     

抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的稳定性及对动物纤维蛋白的识别

目的：探索抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白的应用前景。方法：构建抗人纤维蛋白单链抗体ｓｃＦｖ８Ｅ５基因与链亲和素基因的重组表达载体ｐＳＴＥ２８Ｅ５ ,表达的融合蛋白可特异性识别人纤维蛋白,同时有生物素的结合位点。转化ＪＭ１０９ 后用ＩＰＴＧ 诱导表达,ＥＬＩＳＡ 观察融合蛋白的稳定性。结果：抗人纤维蛋白单链抗体链亲合素融合蛋白稳定性好,可耐受至少２ ｗ ,４ ℃保存、数次反复冻融或一定时间的３７ ℃孵育。它能与大鼠和豚鼠的纤维蛋白结合,而与猪纤维蛋白反应不明显。结论：抗人纤维蛋白单链抗体链亲和素融合蛋白适用于大鼠或豚鼠血栓病模型,是临床前研究的有用材料。     

抗人纤维蛋白单链钪体—链亲和素融合蛋白的稳定性及对动物纤？…

探素抗人纤维蛋白单链抗体亲合素融合蛋白的应用前景。方法：构建抗人纤维蛋白单链抗体ｓｃＦｖ－８Ｅ５基因与链亲和素基因的重组表达载体ｐＳＴＥ２－８Ｅ５,表达的融合蛋白可特异性识别人纤维蛋白,同时有生物素的结合位点。转化ＪＭ１０９后用ＩＰＴＧ诱导表达,ＥＬＩＳＡ观察融合蛋白的稳定性。     

大鼠成骨细胞与壳聚糖/羟基磷灰石复合支架降解产物的生物相容性

背景：人们对壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架在体内的降解过程并非十分清楚,而且有关其降解产物对成骨细胞的影响研究也较少。 目的：分析大鼠成骨细胞与壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架降解产物的生物相容性。 方法：将培养的第2代大鼠成骨细胞分别在壳聚糖/羟基磷灰石复合支架降解产物浸提液和含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液中培养,培养第2,4,6,8,10天分别对两组细胞做MTT细胞计数,采用联合会推荐法测定细胞碱性磷酸酶活性,采用BCA蛋白定量法测定总蛋白。 结果与结论：在壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架降解产物浸提液中培养的大鼠成骨细胞增殖速度、细胞碱性磷酸酶活性、细胞总蛋白合成及碱性磷酸酶与总蛋白的比值明显高于在体积分数为10%胎牛血清DMEM培养液中培养的细胞(P < 0.05)。表明壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架的降解产物不仅可促进大鼠成骨细胞的黏附、生长和增殖,还可增强其骨化功能,具有较好的生物相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：