脐血造血干细胞低温保存方法探讨

为使脐血有更广阔的应用前景及建立脐血造血干细胞(CBSC)库,笔者探讨了脐血低温保存的有效方法。结果显示:CBSC 4℃低温保存以2～3d为宜;液氮低温保存是一种有效的CBSC保存方法,回收率高,较长时间保存,回收率不受影响;-80℃冰箱保存法具有与液氮相同的低温保存效果;且简单、经济、方便和实用,无需程序降温仪,便于大规模开展应用和建立CBSC库;脐全血保存可以避免分离过程CBSC的丢失,保存效果不受影响。     

特发性血小板减少性紫癜骨髓造血干细胞的功能及与疗效的关系

目的：探讨特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者骨髓造血干细胞的增殖分化功能，并从巨核细胞集落形成单位和数量和血小板上升的幅度探讨两者之间的疗效关系。方法：用甲基纤维半固体培养ITP患者粒－巨噬细胞集落形成单位、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位，观察巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值的关系。结果：ITP患 者骨髓粒－巨噬细胞集落、红系集落形成单位，巨核细胞集落形成单位集落数低于正常对照组，粒－巨噬细胞集落及丛落数高于政党对照组，巨核细胞数大于5／高倍视野的ITP患者其巨核细胞数与血小板上升无关，巨噬细胞集落形成单位与血小板上升平均值有。结论：ITP患者骨髓造血干细胞增殖分化功能异常，提示ITP可能是造血干细胞异常的疾病。ITP的巨噬细胞集落形成单位与血小板上升幅度有关，巨噬细胞集落形成单位可以预测ITP的治疗效果。     

外周血造血干细胞移植研究进展

外周血造血干细胞移植研究进展董陆佳综述近５年的研究结果证实乳癌（ＢＣ）患者外周血造血细胞（ＰＢＰＣ）中肿瘤细胞污染较预想的要严重得多［１］，免疫组化方法检测提示，非霍奇金淋巴瘤以及神经母细胞瘤患者的ＰＢＰＣ中，１０％～７０％可检出肿瘤细胞污染，采用各...     

4℃保存外周血造血干细胞动态观察

本文对4℃条件下不同时间保存后的外周血造血干细胞(peripheral bloodhematopoietic stem cells,PBHSC)数进行了动态观察。在本实验中以定向造血祖细胞(CFU-GM)作为观察PBHSC的指标。结果表明:随着保存时间的延长,PBHSC集落数逐渐下降;0小时与24小时保存后的干细胞数无显著差异;24小时与48、72、96、120小时保存后的干细胞数有高度显著差异;48小时与72、96、120小时保存后的干细胞数无显著差异。同时发现,红细胞的存在有利于PBHSC的4℃保存。     

脐血造血干细胞低温保存方法的探讨

目的 探讨脐血造血细胞的低温保存方法。方法 分别用程控降温液氮保存法、非程控降温液氮保存法和-80℃非程控降温保存法保存脐血有核细胞。结果 3种方法保存脐血有核细胞均获得较满意的结果。结论 用羟乙基淀(HES)自然沉淀法和低速离心法分离脐血有核细胞，获得较满意的回收率；用-80℃非程控降温保存法保存脐血有核细胞，可降低二甲基亚砜(DMSO)对细胞的毒性作用，适用于短期保存造血细胞。     

外周血造血干细胞采集的护理

对1998年7月～2002年4月90例次外周血造血干细胞(PBSC)的采集护理进行总结、分析,认为建立理想的血管通路是PBSC采集成功的关键,而扎实、丰富的专业知识是实施PBSC采集各项护理的基础。     

骨髓和外周血造血干细胞的比较研究

造血干细胞移植已成为血液恶性疾病的重要治疗手段，经有效动员的外周血造血干细胞移植已经广泛开展，临床实践证实这一方法可迅速恢复造血功能，原因与外周血造血干细胞富含造血祖细胞，以及其独特的生物学特征有关。     

-80℃直接冷冻保存造血干细胞的技术及其临床应用

目的:根据近年来自体外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病和多种实体瘤的现状,认识移植过程中-80℃直接冷冻保存造血干细胞的临床应用及研究进展。资料来源:应用计算机检索中国期刊全文数据库CNKI和PubMed1999-01/2006-04相关-80℃直接冷冻保存自体外周血干细胞的文献,检索词分别为“造血干细胞,冻存”和“hematopoieticstemcells,cryopreservation”。资料选择:对资料进行初审,选取包括自体外周血干细胞和冻存的文章,查找并阅读全文。纳入标准:①需为非综述、非个案报道类的文献。②自体外周血干细胞移植。③-80℃直接冷冻保存。排除标准:重复研究、个案报告、综述、Meta分析类的文献。资料提炼:共收集到28篇关于-80℃直接冷冻保存自体外周血干细胞的文献,纳入17篇符合标准的文献进行探讨。资料综合:自体外周血干细胞移植是治疗恶性血液病和多种实体瘤的有效方法,而造血干细胞的冻存是自体外周血干细胞移植成功的关键技术之一。冻存的条件和方法可直接影响造血干细胞的活力和数量,也会影响干细胞回输体内后的增殖能力和治疗效果。许多学者对不同的冻存条件和/或技术进行实验研究。研究发现,不同的冻存条件和/或技术各有其优缺点。-80℃直接冷冻保存造血干细胞法,不需要特殊的仪器,费用相对较低,且能有效地保存造血干细胞,满足移植要求,有利于其在临床上得到广泛开展。结论:-80℃直接冷冻保存法能够有效地保存造血干细胞,满足移植要求,且具有操作简单、经济等优点,应受到广泛的重视和推广。     

-80℃直接冷冻保存造血干细胞的技术及其临床应用

目的：根据近年来自体外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病和多种实体瘤的现状，认识移植过程中-80℃直接冷冻保存造血于细胞的临床应用及研究进展。 资料来源：应用计算机检索中国期刊全文数据库CNKI和PubMed1999-01／2006—04相关-80℃直接冷冻保存自体外周血干细胞的文献，检索词分别为“造血干细胞，冻存”和“hematopoietic stem cells，cryopreservation”。 资料选择：对资料进行初审，选取包括自体外周血干细胞和冻存的文章，查找并阅读全文。纳入标准：①需为非综述、非个案报道类的文献。②自体外周血干细胞移植。③-80℃直接冷冻保存。排除标准：重复研究、个案报告、综述、Meta分析类的文献。 资料提炼：共收集到28篇关于-80℃直接冷冻保存自体外周血干细胞的文献，纳入17篇符合标准的文献进行探讨。 资料综合：自体外周血干细胞移植是治疗恶性血液病和多种实体瘤的有效方法，而造血干细胞的冻存是自体外周血干细胞移植成功的关键技术之一。冻存的条件和方法可直接影响造血干细胞的活力和数量，也会影响干细胞回输体内后的增殖能力和治疗效果。许多学者对不同的冻存条件和／或技术进行实验研究。研究发现，不同的冻存条件和／或技术各有其优缺点。-80℃直接冷冻保存造血干细胞法，不需要特殊的仪器，费用相对较低，且能有效地保存造血干细胞，满足移植要求，有利于其在临床上得到广泛开展。 结论：-80℃直接冷冻保存法能够有效地保存造血于细胞，满足移植要求，且具有操作简单、经济等优点，应受到广泛的重视和推广。     

Collection of peripheral blood stem cells on spectra

The collection of peripheral blood stem cells by apheresis is a procedure used with increasing frequency in bone marrow transplant. The Spectra Apheresis System is an automated machine allowing the procedure to be tailored to every patient for optimal safety and comfort. The ability to constantly view the products allows the operator flexibility to control the results for an optimal result. © 1994 Wiley-Liss, Inc.     

New agents for mobilizing peripheral blood stem cells

Transplantation with bone marrow (BM) hematopoietic stem cells (HSC) has been used for curative therapy of hematologic diseases and inborn errors of metabolism for decades. More recently, alternative sources of HSC, particularly those induced to exit marrow and traffic to peripheral blood in response to external stimuli, have become the most widely used hematopoietic graft and show significant superiority to marrow HSC. Although a variety of agents can mobilize stem cells with different kinetics and efficiencies and these agents can be additive or synergistic when used in combination, currently G-CSF is the predominant stem cell mobilizer used clinically based upon potency, predictability and safety. Recent studies have demonstrated that the interaction between the chemokine stromal-derived factor 1 (SDF-1/CXCL12) and its receptor CXCR4 serves as a key regulator of HSC trafficking. AMD3100, a novel bicyclam CXCR4 antagonist, induces the rapid mobilization of HSC with both short- and long-term repopulation capacity. Mobilization with G-CSF and AMD3100 in clinical trials resulted in more patients achieving sufficient PBSC for transplantation than with G-CSF alone. Thus, chemokine axis-mobilization could allow rapid PBSC harvests with increased cell yields in difficult-to mobilize patients. Studies of autologous and allogeneic transplantation of AMD3100 mobilized grafts demonstrated prompt and stable engraftment.Enhanced homing properties of chemokine axis-mobilized PBSC suggest that these cells may have greater therapeutic utility in other areas including tissue repair and regeneration.     

COAEP联合粒细胞集落刺激因子动员及采集造血干细胞在自体外周血干细胞移植中的应用

目的：探讨COAEP化疗方案联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）治疗对血液病患者外周血干细胞（PBSC）动员的效果。方法：选择恶性血液病患者24例，其中非霍奇金淋巴瘤（NHL）15例，多发性骨髓瘤（MM）6例，霍奇金病（HD）3例？以COAEP方案动员[dl（第1天）：环磷酰胺（CTX）400mg／m^2，长春地辛（VDS）2mg/m^2；dl-5应用阿糖胞苷（Ara—C）60mg／m^2．依托泊甙（VP-16）60mg／m^2，泼尼松（Pred）30mg／m^2]。将患者随机分为试验组和对照组。试验组取患者化疗后白细胞抑制达最低点开始稳定回升（第二次回升）时为节点．予G-CSF（惠尔血）300μg／d；而对照组以动员方案结束后向细胞跌至低谷首次回升时即使用G—CSF300μg/d。2组患者开始使用G—CSF后每日查血常规，当白细胞计数〉10．0×10^9／L和单个核细胞（MNC）计数〉1．0×10^9/L时使用COBE血细胞分离机，以自动单个核细胞分离程序采集PBSC．结果：使用COAEP方案动员后，24例恶性血液病患者平均获得的CD34＋细胞数达每例17．25×10^6/kg。试验组患者平均使用G—CSF的时间为4．17d，采集PBSC次数为1～2次，采集液CD34＋细胞数为每例11．73×10^6/kg（何均值）：对照组患者平均使用G—CSF的时间为5．92d，采集PBSC次数为1～2次，采集液CD34＋细胞数为每例1．79×10^6/kg（几何均值），2组间差异有统计学意义（P〈0．0028），结论：COAEP联合化疗可作为血液病患者自体PBSC动员的方案，并能获得良好的干细胞产率：患者白细胞开始稳定回升时使用G—CSF，可显著提高PBSC产率：根据患者外同血白细胞计数及单个核细胞数决定PBSC采集时机有效可行，值得临床推广。     

组织工程小血管支架应用于异种血管移植的可行性

背景:具有α半乳糖基末端的糖蛋白是引起超急性排斥反应的主要异种抗原.目的:观察脱细胞小血管支架与Wistar大鼠和日本大耳白兔两种种属实验动物血管壁内皮细胞和平滑肌细胞内α半乳糖基的分布特点,探讨经脱细胞处理后的小血管支架应用于异种血管移植的可行性.设计、时间及地点:观察对比实验,于2003-03/2004-12在中国医科大学解剖学教研室完成.材料:采集Wistar大鼠正常尾动脉30条,其中选择15条进行脱细胞处理得小血管支架(小血管支架组),剩余15条未进行脱细胞处理(尾动脉组);采集日本大耳白兔耳背面中央动脉,左右耳各1条,共取15条(中央动脉组).方法:采用亲和组织化学法,将16 mg/L植物凝集素加入组织片作DAB显色后,利用MetaMorth/C5050/BX41显微图像分析系统,检测α半乳糖基阳性反应产物.主要观察指标:光镜下血管壁细胞显色变化;α半乳糖基阳性反应产物的吸光度值.结果:中央动脉组α半乳糖基的表达主要集中于内皮细胞膜和细胞核;尾动脉组内皮细胞膜α半乳糖基表达呈极强阳性;小血管支架组呈弱阳性或阴性表达.3组血管细胞α半乳糖基表达的吸光度值中,尾动脉组内膜低于中央动脉组(P＜0.001);小血管支架组内膜低于中央动脉组、尾动脉组(P＜0.001);小血管支架组中膜低于中央动脉组、尾动脉组(P＜0.001).结论:①Wistar大鼠尾动脉内皮细胞膜异种抗原性比日本大耳白兔中央动脉的抗原性强.②Wistar大鼠脱细胞的尾动脉支架可作为异种组织工程血管材料应用于异种血管移植.     

The autotransplantation of hematopoietic stem cells from the peripheral blood

The authors discuss the existence of polypotent hemopoietic stem cells in the peripheral blood as well as a possibility of restoring hemopoiesis by means of the given cells after the lethal myelotoxic exposure. In 5 patients with hemoblastoses, suspension of mononuclear leukocytes in an amount of 0.5 X 10(9) per kg bw was obtained using short-interval leukocytapheresis on blood cell separator. After carrying out different schemes of pretransplantation preparation the defrosted suspension of mononuclear cells was injected without wash out to the patients' central vein. The recovery of the peripheral blood indicators was attained on days 10-30 after the autotransplantation of stem blood cells.     

Defining a therapeutic dose of peripheral blood stem cells.

Peripheral blood stem cells (PBSC) are now used extensively to provide rapid and durable hematopoietic reconstitution following supralethal myeloablative therapies. A major clinical issue is the quantitation of the cells responsible for reconstitution. We review here published reports of transplants using the measurement of mononuclear cells and granulocyte-macrophage colony-forming units (CFU-GM) to quantitate PBSC. In addition, we present data from three institutions where hematopoietic recovery is correlated with doses of CFU-GM or CD34+ cells. These data suggest doses of 20 x 10(4) CFU-GM or 2 x 10(6) CD34+ cells/kg body weight that provide rapid engraftment of neutrophils and platelets.     

大容量白细胞单采术采集外周血干/祖细胞

近年来,外周血干/祖细胞移植因细胞植入率高、造血和免疫功能重建快、移植相关并发症少等优点,临床应用日益广泛.本研究探讨了大量白细胞单采术采集自体外周血干/祖细胞的效率和安全性,现报告如下.     

脐血干细胞作为牙再生种子细胞的可行性

背景:近年来牙再生成为组织工程领域一项重要课题,但目前还没有最合适的种子细胞,迫切需要探索新的种子细胞.目的:综述脐血干细胞作为牙再生种子细胞的可行性.方法:应用计算机检索1998-01/2009-01 PubMed数据库相关文章,检索词为"tooth regeneration, seed cells, tissue engineering, umbilical cord blood,mesenchymal stem cells",并限定文章语言种类为English.同时计算机检索1998-01/2009-01中国期刊网全文数据库、万方数据库、中文科技期刊全文数据库相关文章,检索词为"组织工程,种子细胞,间充质干细胞,脐带血,牙再生",并限定文章语言种类为中文.共检索到文献40篇.结果与结论:各类种子细胞,如牙胚来源的成牙本质细胞,牙髓和乳牙来源的干细胞,以及第一腮弓来源的外胚层间充质干细胞都已经在基础研究中显示出了成牙分化潜能.但是,在临床实验中这些种子细胞很难获取.骨髓间充质干细胞虽然也显示出了成牙潜能,但是它们的分化能力随供体年龄的增长显著下降.脐血干细胞和骨髓间充质干细胞相比,拥有很多优势,并且呈现出典型的间充质干细胞的特点.所以,推测脐血干细胞可能被诱导成成牙细胞系,并且可能成为合适的牙再生的种子细胞来修复牙缺失.