邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾丸支持细胞的影响

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对睾丸支持细胞超微结构和功能的影响。方法将6周龄雄性SD大鼠随机分成0、250、500和1000mg/kg组,每组16只。给予DBP灌胃,分别于染毒2周和4周后各处死8只动物。采用放射免疫法测定血清卵泡刺激素,逆转录聚合酶链反应测定雄激素结合蛋白mRNA和抑制素αmRNA的相对表达量,用透射电镜观察支持细胞的超微结构。结果DBP染毒4周后,卵泡刺激素表现出明显的上升趋势,250和1000mg/kg组与对照组比较差异有统计学意义;精子头计数和每日精子生成量呈现出单一的下降趋势,500和1000mg/kg组与对照组比较差异有统计学意义。雄激素结合蛋白mRNA和抑制素αmRNA表达水平随着DBP染毒剂量的增加呈现出明显的下降趋势,无论是染毒2周还是4周,500和1000mg/kg组与对照组比较差异均有统计学意义。0、250、500和1000mg/kg组的雄激素结合蛋白mRNA相对表达量在染毒2周后分别为0.89±0.15、0.85±0.23、0.54±0.17和0.52±0.16,染毒4周后分别为0.76±0.16、0.73±0.17、0.47±0.14和0.38±0.14;抑制素αmRNA的相对表达量在染毒2周后分别为0.88±0.16、0.61±0.12、0.48±0.15和0.47±0.11,染毒4周后分别为0.75±0.19、0.56±0.16、0.53±0.08和0.45±0.10。电镜观察结果显示,1000mg/kg组支持细胞胞浆中初     

乌头碱对大鼠卵巢颗粒细胞毒性研究

[目的]研究乌头碱对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞的毒性。[方法]对25～29日龄雌性SD大鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG),无菌制备卵巢颗粒细胞悬液,采用透射电镜观察管嵴状线粒体进行细胞鉴定。试验设4个乌头碱浓度组(0、5×101、5×102、5×103、5×104μg·L-1)和1个溶剂对照组(二甲亚砜)。选用MTT法(四唑盐比色法)测定乌头碱对大鼠卵巢颗粒细胞活力的影响,用雌二醇和孕酮的放免分析药盒测定乌头碱对颗粒细胞激素分泌功能的影响,用丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒测定乌头碱对大鼠颗粒细胞的氧化损伤作用。[结果]与溶剂对照组相比,乌头碱作用24h后,高浓度和次高浓度组(5×103、5×104μg·L-1)可明显抑制大鼠颗粒细胞的增殖,差异有统计学意义(P﹤0.01);高剂量组(5×104μg·L-1)丙二醛含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]在本实验室条件下,乌头碱浓度高于5×103μg·L-1时,对雌性大鼠卵巢颗粒细胞有毒性作用,主要表现为抑制颗粒细胞的增殖及对细胞的氧化损伤作用。     

用睾丸细胞共培养探讨吡哆醇对大鼠睾丸细胞的毒性

目的探讨吡哆醇（ＰＮ）对大鼠睾丸的体外毒性。方法采用在Ｗｉｌｉａｍｓ方法的基础上改进的Ｓｅｒｔｏｌｉｇｅｒｍ细胞共培养系统,观察ＰＮ在不同剂量和接触时间对培养细胞的作用。结果脱落生精细胞数随ＰＮ浓度的增高和接触时间的延长而增加,并有明显的剂量—效应和时间—效应关系。同时,还观察到Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞骨架出现松弛、回缩等效应。结论ＰＮ对大鼠生精细胞的体外效应反映了其对Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞的损害。睾丸细胞共培养方法对探讨ＰＮ对大鼠睾丸的毒性作用具有实用价值。     

双酚A对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白影响的体外实验研究

目的：进一步探索环境雌激素双酚A（BPA）影响大鼠睾丸支持细胞波形蛋白（Vimentin)的机理。方法：采用支持细胞体外原代培养，免疫组织化学以及mRNA原位杂交技术分析了BPA对支持细胞Vimentin及其基转转录，参与Vimentin降解的蛋白激酶C（PKC）表达的影响。结果：BPA使支持细胞拉长，支持细胞在体外系统中良好地表达Vimentin，BPA使其基因转录抑制，PKC在支持细胞中不表达。结论：环境雌激素BPA通过抑制基因转录而干扰Vimentin合成，从而影响支持细胞骨架的正常形成，导致细胞形态改变，PKC不直接干扰支持细胞Vimentin代谢。     

氯化饮用水有机提取物对睾丸支持细胞的毒性效应研究

目的：探讨氯化饮用水有机污染物对人类生殖健康的潜在危害。方法：采用固相萃取技术富集水中有机物,应用大鼠睾丸支持细胞与生精细胞共培养系统对某市氯化饮用水有机提取物的生殖毒性进行了研究。结果：有机提取物对生精细胞脱落率未产生明显影响,但可刺激支持细胞分泌乳酸,结论：氯化饮用水有机提取物具有潜在的生殖毒性效应。     

化学物质对睾丸支持细胞某些功能影响的研究进展

本文简要介绍了化学物质对丸支持细胞与生精过程能量代谢有关的乳酸分泌，以及参与运送雄激素和调节精子成熟过程有关的雄激素结合蛋白和转铁蛋白分泌影响的研究进展。     

丙烯腈对原代双室培养的大鼠睾丸支持细胞的毒性

[目的]研究丙烯腈(ACN)对原代双室培养的大鼠睾丸支持细胞(Sertolicell,Sc)的毒性,以探讨ACN诱导雄性生殖毒性机制。[方法]用已分离纯化的大鼠睾丸SC为材料,用原代双室培养方法,加和不加S9,以浓度为0、0.5、5.0、25.0μg/mlACN染毒,于4、12、24、48h后检测跨细胞上皮电阻(TER);染毒24、48h后检测转铁蛋白(Trf)浓度,评价ACN体外染毒对大鼠睾丸SC的损伤。[结果]ACN浓度≥5.0μg/ml时,对TER的形成有明显抑制作用;5.0μg/ml培养48h、25.0μg/ml培养12h后对已形成的TER引起下降;加S9( S9)与不加S9(-S9),TER值接近(如25.0μg/ml组培养12h后 S9组为480.3,-S9组为486.3),无明显差异。浓度为25.0μg/ml时,ACN染毒引起外室Trf浓度升高,明显高于对照及其他组(P<0.05),内室Trf浓度变化不明显,因此内室与外室之间Trf浓度差值缩小。[结论]结果表明ACN对双室培养的SCTER的形成有抑制作用,对已形成的TER有降低作用;提示ACN可能对SC形成的紧密连接和“血睾屏障”有影响。     

睾丸支持细胞功能及调节

支持细胞与生精细胞构成睾丸曲细精管。支持细胞为生精细胞的分化成熟提供高浓度的睾酮和激素，脂类、维生素等多种营养物质，其所形成的血睾屏障使生精细胞受到良好的保护。支持细胞的功能受下丘脑－垂体－性腺轴的内分泌调节。其分泌的多种物质对其周围细胞及自身均有影响。睾丸内各种细胞间的局部调节－旁分泌及自分泌机制日益受到重视。     

氯化三丁基锡对大鼠睾丸支持细胞的影响

[目的]探讨氯化三丁基锡对雄性sD大鼠睾丸支持细胞活力和增殖的影响。[方法]无菌制备20-23天龄sD大鼠的睾丸支持细胞,用HE染色、FAS—L免疫组化染色进行细胞鉴定。设空白对照组、溶剂对照组和20×10^-9、40×10^-9、80×10^—9、120×10^—9mol／L氯化三丁基锡染毒组,用四唑盐比色法（MTT）、免疫细胞化学法观察细胞增殖及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况,流式细胞仪分析细胞周期分布。[结果]各染毒组睾丸支持细胞的存活率明显低于对照组（P〈0．05）,G0／G1期细胞构成比增加,细胞增殖指数下降,80×10^-9、120×10^-9mol／L染毒组PCNA表达量下降。[结论]氯化三丁基锡可通过抑制睾丸支持细胞增殖,影响细胞周期分布和PCNA表达而表现出对雄性大鼠的生殖毒性。     

过量锌对鼠胶质瘤细胞体外生长的影响

目的：研究过量锌对神经细胞生存能力的影响,以期为锌生理功能的进一步研究提供资料。方法：采用体外细胞培养,台盼兰排斥和平板克隆形成法研究不同剂量锌对鼠胶质瘤细胞生长的作用。结果：不同剂量的锌（0．3025、0．4025、0．5025、0．6025和0．7025mmol）对鼠胶质瘤细胞有明显抑制作用,各组24h细胞存活率分别为62．7％、59．3％、56．5％、53％和47．3％,克隆形成率分别是64．8％、60．3％、58．3％、50．3％和44．8％,24小时MTT法检测细胞活力分别为77．9％、63．3％、56．2％、49．6％和47．3％并呈量效关系。结论：高锌可抑制鼠胶质瘤细胞生长。     

茶多酚对草甘膦致小鼠睾丸支持细胞损伤的拮抗作用

目的探讨茶多酚(TP)对草甘膦致小鼠睾丸支持细胞(SC)损伤的拮抗作用。方法原代培养小鼠睾丸支持细胞,采用FasL免疫细胞化学法鉴定支持细胞。建立草甘膦诱导支持细胞损伤模型,将细胞随机分为正常对照组、草甘膦损伤组(90 g/ml)、TP拮抗组(经10、20、40、80、160 g/ml TP预处理12h后,再用草甘膦作用细胞24h)。四噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,倒置相差显微镜观察细胞形态学改变,原位末端标记(TUNEL)法原位检测细胞凋亡,Hoechst33342荧光染色法观察细胞核形态改变,并检测细胞氧化损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的变化。结果 10~80 g/ml TP可拮抗草甘膦诱导的支持细胞损伤,提高支持细胞活力及SOD、GSH-Px活性,降低细胞凋亡指数及MDA含量,改善细胞萎缩变形、染色质浓集现象;160 g/ml时不能减轻草甘膦造成的细胞损伤。结论 TP在一定浓度范围内对草甘膦诱导的支持细胞损伤具有拮抗作用。     

棕榈叶黄酮对HepG2细胞增殖抑制作用的研究

[目的]观察棕榈叶黄酮对体外培养的肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用. [方法]用不同剂量的棕榈叶黄酮对体外培养的HepG2细胞干预48 h、72 h,用MTT法来观察棕榈叶黄酮对HepG2细胞增殖的抑制作用. [结果]棕榈叶黄酮对HepG2细胞增殖具有一定的抑制作用.且这种作用呈剂量依赖性,随着剂量的增加,抑制率增高. [结论]棕榈叶黄酮具有抑制肝癌细胞增殖的作用,可为临床抗肝癌治疗提供实验依据.     

硒对大鼠胃癌的作用及对其内分泌细胞的影响

目的　探讨硒在机体自然抗肿瘤发生过程中的作用。方法　给断乳雄性 Wistar大鼠 MNNG(N甲基 - N -硝基 - N亚硝胍 2 0 mg/kg)灌胃 ,每天一次 ,连续 1 0 d,以诱导大鼠胃粘膜异倍体形成 (大鼠胃癌模型形成 )。第 2 5wk时 ,用流式细胞仪测定硒对大鼠胃幽门粘膜异倍体形成的影响 ,用免疫组织化学 ABC法观察大鼠胃粘膜异倍体形成过程中 ,其胃的胃泌素细胞 (G细胞 )、生长抑素细胞 (SS细胞 )、5-羟色胺细胞 (5- HT细胞 )的免疫组织化学变化 ,并对以上结果进行定性、定位、定量分析以及统计学处理。结果　 1 .硒能抑制 MNNG所致大鼠胃粘膜细胞异倍体的形成。 2 .实验对照组与正常对照组比较 ,大鼠胃粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学反应明显增强 (P<0 .0 1 ) ,SS细胞、5- HT细胞也有增强的趋势 (P>0 .0 5)。 3.加硒各组与实验对照组比较 ,大鼠胃粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学反应明显减弱 (P<0 .0 1 ) ,SS细胞、5- HT细胞也有减弱的趋势 (P>0 .0 5)。结论　内分泌细胞可能与 MNNG所致大鼠胃粘膜细胞异倍体的形成和发展有关 ;硒可能对大鼠胃内分泌细胞的功能有一定影响     

大豆异黄酮类对体外培养大鼠成骨细胞的影响

目的 :　探讨大豆异黄酮类提取物预防骨质疏松症在细胞水平的作用机制。方法 :　以经口给予大鼠大豆异黄酮类提取物后分离的血清作为干预物 ,加入新生 SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞 (OB)中。以噻唑蓝 (MTT)比色法检测细胞增殖情况 ;用对硝基酚磷酸盐法测定 OB碱性磷酸酶 (ALP)活性、用放免法测定 OB骨钙素 (BGP)含量 ,以反映 OB的分化状况 ;酶联免疫(ELISA)法检测 OB分泌细胞因子 IL-6的水平。。结果 :　以大豆异黄酮类提取物灌胃的大鼠血清可使体外培养大鼠成骨细胞 MTT吸光值明显增加 ,成骨细胞 ALP活性显著升高 ,成骨细胞BGP分泌显著增加 ,而其对 IL-6的分泌无明显影响。结论 :　大豆异黄酮类提取物可明显促进体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化 ;对骨吸收似无明显影响。推测大豆异黄酮类对骨质疏松的预防作用机制是促进骨细胞的增殖和分化     

EFFECTS OF LIPIDS ON RAT HEART CELLS IN TISSUE CULTURE

Beating stops in heart cells cultured in a medium deficient in lipids. Addition of serum lipids will maintain and restore beating.     

二羟基乙二肟对生殖系统的毒性研究

报道了二羟基乙二肟（ＤＨＧ）高剂量时可诱发小鼠初级精母细胞染色体畸变，小鼠精子畸形率升高，对孕鼠和胚胎有毒作用，可引起孕鼠体重减轻、流产、胚胎死亡，活胎生长发育迟缓，腭裂，胎鼠畸形，下颌缺失等，致畸指数为１２；病理组织检查显示；雄鼠睾丸曲细精管生精细胞层次紊乱，生精细胞减少并可见多核巨精细胞；电镜可见，雄鼠卵巢黄体细胞浆内线粒体肿大，峭减少，基质空泡变，出现髓鞘样结构，这些结果表明高剂量的ＤＨＧ对     

强肌健力口服液含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞成肌分化的影响

目的观察强肌健力口服液含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成肌分化的影响。方法用密度梯度离心法分离大鼠MSCs,5-溴脱氧嘧啶(Brdu)和CD44双重免疫组化鉴定,传3代后的MSCs分为强肌健力口服液含药血清组和空白对照组,免疫组化染色鉴定肌凝蛋白(Myosin)、结蛋白(Desmin)的表达。结果诱导后第3d,部分细胞出现Desmin和Myosin。结论强肌健力口服液含药血清诱导MSCs向成肌细胞定向分化。     

微囊藻毒素-LR对睾丸支持细胞活性及凋亡基因表达的影响

[目的]研究微囊藻毒素-LR对睾丸支持细胞活性的影响及其对细胞凋亡相关基因表达的影响. [方法]分离纯化大鼠睾丸支持细胞,用低剂量(0～500×10-3 μg/ml)和高剂量(1～20 μg/ml)微囊藻度素-LR染毒细胞,细胞培养24 h、48 h和72 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和中性红吸收(NR)实验检测微囊藻毒素-LR对支持细胞活性的影响;将纯化后的部分睾丸支持细胞接种于6孔板中,给予不同剂量的微囊藻毒素-LR (0,1,10μg/ml),于24h和48 h后提取细胞总RNA,RT-PCR方法检测细胞中凋亡相关基因P53、bax和bcl-2表达水平.[结果]低剂量(0～500×10-3 μg/ml)微囊藻毒素-LR作用于支持细胞24、48、72 h,细胞活性增强.高剂量微囊藻毒素-LR(10和20μg/ml)作用24、48 h,细胞活性显著降低.时闻效应实验结果显示随着暴露时间的延长细胞活性降低.细胞暴露于1 μg/ml微囊藻毒素-LR后与对照组细胞相比较P53和bcl-2 mRNA水平相对表达量增加,bax表达量降低.暴露予10 μg/ml微囊藻毒素-LR后P53和bax mRNA水平相对表达增加,bcl-2表达降低.[结论]低剂量的微囊藻毒素-LR对 细胞具有兴奋效应,随着剂量的增高及暴露时间的延长微囊藻毒素-LR能够明显抑制细胞活性.同时微囊藻毒素-LR可通过P53、bax和bcl-2基因的表达影响睾丸支持细胞的凋亡.