硫酸软骨素酶处理的异体去细胞神经修复周围神经缺损的实验研究

目的 评价应用硫酸软骨素酶ABC降解硫酸软骨素蛋白多糖的去细胞异体神经修复神经缺损的效果.方法 经硫酸软骨素酶ABC处理后化学去细胞异体神经修复大鼠15 mm坐骨神经缺损为实验组(A组),对照组为未经酶处理的化学去细胞异体神经移植组(B组)和自体神经移植组(C组).术后8、12周进行痛觉刺激试验.术后12周进行肌电图检查,检测小腿三头肌湿重和有髓神经纤维密度,评价其修复周围神经缺损的效果.结果 术后8周,A组痛觉恢复率高于B、C组.术后12周A、C组痛觉均恢复,B组部分大鼠痛觉恢复.术后12周,A、C组小腿三头肌湿重差异无统计学意义,移植段神经5mm处有髓神经纤维密度A组高于C组,移植段神经10 mm处有髓神经纤维密度差异无统计学意义,移植段神经以远5 mm处胫神经平面有髓神经纤维密度A组略低于C组.肌电图动作电位波幅A组和C组无明显差别.神经传导速度A组低于C组.A、C组上述指标均优于B组.结论 经硫酸软骨素酶ABC处理的去细胞神经,有利于轴突进人生长,缩短靶器官神经重新支配时间,提高修复效果.     

聚集蛋白聚糖与椎间盘退变的研究进展

椎间盘退行性变是椎间盘突出症、椎体滑脱、椎管狭窄等脊柱退行性病变的首要诱因。椎间盘组织具有以基质为主要结构，细胞散在分布于基质内的结构特点。蛋白聚糖和胶原是椎间盘基质内最主要的蛋白质，对于基质结构和功能的完整性不可或缺，因而它们的损耗是椎间盘退变中的重要环节。聚集蛋白聚糖(Aggrecan)是椎间盘蛋白聚糖中最主要的一种；基质内Aggrecan的损耗(质、     

聚集蛋白聚糖基因串联重复多态性与腰椎间盘突出症相关性研究

目的 探讨人类聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因的表达及Aggrecan基因串联重复多态性(VNTR)与腰椎问盘突出症(LDH)的相关性.方法 收集2004年1月至2014年1月在中国医科大学附属第一医院骨科接受手术治疗且符合纳入和排除标准的89例患者及1 13名健康人的临床资料.病变组为患有LDH的患者74例,对照组为未患有LDH的脊柱创伤患者15例及健康人113名.收集每例手术患者切除的椎间盘和血液标本及健康人的血液标本.应用Western blot法检测两组患者椎间盘中Aggrecan蛋白的表达情况;应用RT-PCR技术检测两组患者血液中Aggrecan VNTR多态性分布情况.检测结果的比较采用x2检验.结果 Western blot检测结果显示,对照组椎间盘中Aggrecan蛋白的相对表达量高于病变组(对照组Aggrecan表达阳性率为86.67％,病例组Aggrecan表达阳性率为13.51％;x2=34.83,P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,病变组中等位基因25及等位基因21的基因频率高于对照组(A25病变组=22.97％,A25对照组=12.11％,x2A25=8.20,PA25=0.004;A21病变组=6.76％,A21对照组=0.39％,x2A21=14.35,PA21=0.000).病变组不表达Aggrecan人群中有1个或2个≤等位基因25的个体,多于有2个＞等位基因25等位基因的个体(x2=5.69,P =0.017);对照组二者分布无差异(x2 =0.29,P =0.590).结论 LDH患者中Aggrecan等位基因25及21串联重复序列片段出现频率较高,Aggrecan与LDH有相关性;LDH患者中Aggrecan VNTR与Aggrecan的表达有相关性.     

腰椎间盘退变动物模型的建立

目的 制备椎问盘退变动物模型.方法 将48只新西兰大白兔随机分为骨性手术组和软组织手术组.骨性手术组L4L5、L5L6为实验组椎间盘,L3L4、L6L7为自身对照组;软组织手术组L4L5、L5L6为实验对照组椎问盘.术后1、2,4及8个月行MRI及分子生物学检查.结果 (1)MRI:兔髓核位于椎间盘中央,占椎间盘横截面积50%左右.术后1、2、4及8个月,3组椎间盘横断面T2高信号区域面积分数均逐渐减小(F=96.2～1544.4,P<0.01);术后相同时间段,实验组面积分数最小,自身对照组次之,实验对照组最高,差异有统计学意义(F=125.7～1850.6,P<0.01).(2)分子生物学:蛋白多糖、胶原为椎间盘主要细胞外基质,术后1、2、4及8个月,3组椎间盘蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量进行性下降(F=148.2～1544.4,P<0.01),Ⅰ型胶原表达量进行性上升(F=94.3～579.6,P<0.01).术后相同时间段,实验组蛋白多糖、Ⅱ型胶原最小,自身对照组次之,实验对照组最高(F=135.5～3520.6,P<0.01);Ⅰ型胶原表达量实验组高于实验对照组、自身对照组(F=7.8～143.1,P<0.01).结论 破坏关节突关节成功制备出椎间盘退变动物模型.     

氨基葡萄糖和硫酸软骨素预防治疗骨质疏松的协同作用

目的评价氨基葡萄糖和硫酸软骨素在预防和治疗骨质疏松方面的协同作用。方法通过测定Wistar大鼠的体重、股骨重量、骨密度以及骨钙含量,并与单独饲喂碳酸钙组(阳性对照组)进行对照。饲喂的剂量分别相当于人体推荐剂量的5倍(GHC-5组,每日250 mg/kg·BW),10倍(GHC-10组剂量,每日500 mg/kg·BW)和30倍(GHC-30组,每日1500 mg/kg·BW)。然后分别测定并比较给药组、阳性对照和阴性对照的股骨重,骨矿物质密度(BMD)和钙的含量(钙%)。各组均喂低钙基础饲料(0.15%),自由饮用去离子水。碳酸钙对照组的每日食用钙含量与高剂量组相同,即203mg/kg·BW,低钙对照组以等体积的去离子水代替受试物溶液灌胃。结果实验12周后,GHC-10组的股骨重量、骨密度和骨钙含量与阴性对照组相比有显著提高,而GHC-30组的3个测试指标比阳性对照组显著增加。结论实验结果以及文献报道均表明盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素对人类的骨质疏松症治疗具有协同效益。     

鲨鱼硫酸软骨素的研制

∶探索了用稀碱－酶解法从鲨鱼软骨中提取硫酸软骨素的生产工艺,通过实验确定了酶解的温度、酸度和加酶量的范围,并对提取液温度、盐解液温度等重要参数作了研究,最后确定了稀碱－酶解法的工艺路线,为工业化生产提供了依据．     

硫酸软骨素滴眼液对青光眼白内障联合手术后泪膜变化的分析

目的:观察硫酸软骨素滴眼液对青光眼白内障联合手术后泪膜变化的影响.方法:选取青光眼白内障联合手术45例(45眼),随机分成对照组和干预组.对照组术后用妥布霉素地塞米松眼药水(沈阳兴奇制药生产)滴眼,5次/d,干预组用妥布霉素地塞米松眼药水(沈阳兴奇制药生产)滴眼,5次/d硫酸软骨素滴眼液滴眼,6次/d,分别于手术前1d、手术后1wk、1mo、3m0对所有患者行基础泪液分泌(Sehirmer I)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(FL)检查.结果:对照组与干预组术前SehimerI、BUT、FL差异无统计学意义(P＞0.05).对照组术前与术后1wk、lmo、3mo、SehirmerI、BUT、FL差异具有统计学意义(P＜0.05).干预组术前与术后1wk在SehimerI、BUT、FL差异具有统计学意义(P＜0.05),但术后1mo、3mo后差异无统计学意义(P＞0.05).结论:青光眼白内障联合手术早期泪膜会发生变化,使用硫酸软骨素滴眼液点眼可以加快术后泪膜功能的早日恢复.     

硫酸软骨素酶ABC促进大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的实验研究

目的 探讨硫酸软骨素酶ABC(ChABC)对神经脊髓损伤后运动功能恢复的影响.方法 SD大鼠72只,雌雄不限,随机分为假手术组、生理盐水对照组和ChABC治疗组,采用Allen法打击大鼠胸10脊髓损伤模型,分别在伤后即刻和随后每天一次连续一周蛛网膜下注射生理盐水和ChABC.HE染色和尼氏染色观察各时间点脊髓损伤组织形态和尼氏体及神经元的变化,采用BBB功能评分和运动诱发电位(MEP)观察大鼠的运动功能恢复情况.结果 大鼠脊髓损伤后1周时BBB评分和对照组无显著差别,在2、4周,治疗组评分结果明显优于对照组(P＜0.05;P＜0.01);MEP在1、4周的N1波潜伏期与对照组差异显著(P＜0.05;P＜0.01).HE和Nissl染色显示治疗组的形态和神经元数量要优于对照组.结论 ChABC能促进大鼠脊髓损伤后神经运动功能恢复,并对脊髓组织损伤具有保护作用.     

胶原-透明质酸-硫酸软骨素复合三维支架体外构建组织工程软骨的实验研究

目的探讨以胶原(collagen,Col)透明质酸(hyaluronic acid,HA)硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)为支架材料构建组织工程软骨的可行性.方法以乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐为交联剂通过冷冻干燥的方法制备Col-HA-CS复合支架及单纯Col支架.通过扫描电镜、HE染色对Col-HA-CS复合支架材料形态进行观察.分离培养幼兔关节软骨细胞,将体外扩增的软骨细胞接种在两种支架上,通过组织学、扫描电镜观察软骨细胞在支架上的生长形态;通过生物化学功能检测细胞-支架复合物中DNA、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量;RTPCR方法检测在Col HA CS复合支架上的软骨细胞ColⅡ的表达情况.结果软骨细胞在Col-HA-CS复合支架材料上增殖分化良好,并保持软骨细胞特异的分化ColⅡ表型,培养21 d后已有软骨样组织形成,出现软骨陷窝.DNA和GAG含量测定显示软骨细胞在复合支架上随时间增加逐渐扩增并分泌大量的GAG,含量明显高于单纯Col支架材料,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Col-HA-CS复合支架材料可为软骨细胞生长分化及组织形成提供一个良好的环境,在软骨组织工程的支架材料领域有较广泛的应用前景.     

胶原-透明质酸-硫酸软骨素构建组织工程软骨纳米支架的实验研究

目的:探讨胶原-透明质酸-硫酸软骨素复合构建软骨组织工程三维纳米支架的可行性。方法:2012年12月至2014年6月,在川北医学院组织工程与干细胞研究所将胶原-透明质酸-硫酸软骨素溶于三氟乙醇和水混合溶剂中制成静电纺丝溶液,制备组织工程软骨纳米支架材料。扫描电镜观察其表面形貌,测定其纳米纤维直径、吸水率、表面接触角和降...     

脊柱旋转手法治疗腰椎间盘突出症的实验研究

采用模拟手法对３具新鲜尸体的脊柱标本，进行了Ｌ４．５、Ｌ５Ｓ１椎间盘后外缘应力变化的测定，和脊柱不同位置变化下腰椎小关节突相互关系改变的观察。结果发现前屈侧弯旋转法对腰椎小关节突的活动幅度最大，直立旋转法次之，向左侧旋转时小关节突作切面的旋转滑动，右侧小关节间隙增大；向右侧旋转时反之。做前屈侧弯旋转法时，当脊柱向左侧旋转时，椎间盘左后外侧压力增高，同时右后外侧压力减低；向右旋时则反之。而当旋转动作结束复原时，出现负压的一侧均出现一个微小的正压，这种正负压力多次反复的变化，可以使突出的髓核变位或变形，从而使受压的神经根减张。     

三维牵引加复方丹参、强的松龙治疗腰椎间盘突出症

自2004—2005年对143例有腰椎间盘突出症症状且有椎间盘突出的患者，进行分组治疗，现将其研究结果总结报告如下。 1资料与方法 1.1纳入标准①符合国家中医药管理局1994年颁布的关于腰椎间盘突出症的诊断标准；②签署知情同意书。     

CT引导下臭氧消融术联合神经根阻滞治疗腰椎间盘突出症

目的 探讨CT引导下臭氧消融术联合神经根阻滞治疗腰椎间盘突出症的穿刺的准确性、治疗的安全性以及疗效.方法 选择200例腰椎问盘突出症患者,随机分为2组:A组100例,单纯行臭氧消融术,B组:100例,臭氧消融术联合神经阻滞治疗,治疗前1d、治疗后3d、3、6个月测定疼痛视觉模拟评分(VAS),治疗总有效率来评估治疗效果(比较常用的是MacNab法评价疗效).结果 两组患者治疗后3d、3、6个月VAS值较治疗前1 d明显降低(P<0.01或P<0.05),B组治疗后3d,3、6个月VAS值较A组明显降低(P<0.05),A组治疗后3d、3、6个月总有效率分别为90%、85%、79%,B组治疗后3d、3个月、6个月总有效率分别为100%、90%、85%,B组治疗后3d、3个月、6个月总有效率较A组提高.结论 CT引导下臭氧消融术联合神经根阻滞治疗腰椎间盘突出症,近期(3 d)总有效率100%,提高中远期(3、6个月)总有效率.     

腰椎间盘突出症单元的模式与建立

腰椎间盘突出症单元是腰椎间盘突出症医疗管理的新模式,包括对腰椎间盘突出症患者进行手术治疗与非手术治疗(针灸、中药、牵引、推拿手法、支具、运动疗法、心理辅导和健康教育等)。该模式是目前腰椎间盘突出症临床治疗最为有效的方式。     

双极射频髓核成形术联合臭氧减压术治疗腰椎间盘突出症的临床应用

目的探讨双极射频椎间盘髓核成形术联合臭氧减压术治疗腰椎间盘突出症的临床疗效及安全性。方法选择2013年1～12月腰椎间盘突出症患者95例,随机分为双极组(n=47)和联合组(n=48),分别在CT引导下行双极射频椎间盘髓核成形术、双极射频椎间盘髓核成形术联合臭氧减压术。观察两组患者术后7、30、90、180d的疗效以及是否出现椎间盘感染、神经损伤等并发症。结果按改良的Macnab疗效评定标准,联合组在治疗后各时点的优良率及有效率均明显高于射频组(P0.05)。结论双极射频椎间盘髓核成形术联合臭氧减压术是一种安全、有效的治疗椎间盘突出症的微创手术方法。     

草木犀流浸液片治疗腰椎间盘突出症的临床应用观察

目的 观察草木犀流浸液片(消脱止-M)对腰椎间盘突出症在门诊保守治疗中的临床应用疗效.方法 采用单纯几服草木犀流浸液片治疗腰椎间盘突出症90例,观察临床疗效,并与甘露醇结合地塞米松治疗进行对照.结果 一个疗程后,总有效率达88.89%(80/90),效果显著52.22%(47/90),见效快,服药期间未发现不良反应,治...     

腰椎间盘内破裂的诊断和治疗

目的　研究腰椎间盘内破裂的诊断和治疗方法。　方法　 36例慢性失能性下腰痛病人 ,经腰椎间盘造影术证实为腰椎间盘内破裂 ,选择腰椎体间融合术 ,其中 8例行后路椎体间植骨融合椎弓根螺钉系统内固定术 (PLIF) ,2 8例行前路髓核摘除植骨融合术 (ALIF)。分别于术前、术后对病人的腰痛情况进行视觉疼痛自我评定尺 (VAS)评分 ,同时评估术后腰椎融合率。　结果　术后随访时间 6～ 2 6个月 ,平均 18个月。 8例行PLIF者 ,6例术后腰腿痛症状基本消失 ,2例仍有轻度腰痛 ,术前、术后VAS腰痛评分 ,差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。 2 8例行ALIF者 ,2 7例腰腿痛症状基本消失 ,术前、术后VAS腰痛评分 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。行PLIF患者 ,融合率为 88% ,行ALIF者 ,融合率达 97%。　结论　腰椎椎体间融合术是治疗腰椎间盘内破裂的有效方法 ,但应严掌握手术适应证     

Relationship between neovascularization and degenerative changes in herniated lumbar intervertebral discs

Purpose

Lumbar disc degeneration may be associated with intensity of neovascularization in disc herniations. Our study was designed to evaluate how much the severity of histodegeneration is related to the development of neovascularization and to the level of pleiotrophin in the herniated lumbar discs.

Methods

Surgically excised lumbar disc specimens were obtained from 29 patients with noncontained (i.e., extruding through the posterior longitudinal ligament) and 21 patients with contained disc herniations. The histodegeneration scores and levels of neovascularization were estimated according to semiquantitative analysis in lumbar disc and endplate samples. Immunohistochemical staining were performed to identify the newly formed blood vessels and to detect the presence of pleiotrophin in the specimens.

Results

Higher levels of disc and endplate neovascularity were registered in noncontained herniations. The level of neovascularization was significantly related to the score of histodegeneration in the herniated disc tissues but not in the endplate specimens. Both contained and noncontained herniations had the highest values of histodegeneration in conjunction with the highest level of neovascularization but the relations between neovascularity and degenerative changes remained to be significant only in the group of noncontained herniations. Registration or frequency of pleiotrophin positive cells did not correlate significantly with histodegeneration or level of neovascularization in the disc samples.

Conclusion

Severe histodegeneration of the lumbar disc herniations is associated with enhanced neovascularization and potentially also spontaneous regression of the herniated tissue.     

Multidirectional flexibility analysis of anterior and posterior lumbar artificial disc reconstruction: in vitro human cadaveric spine model

The in vitro multidirectional flexibility analysis was conducted to investigate the initial biomechanical effect of biomimetic artificial intervertebral disc replacement from either anterior or posterior approach in a cadaveric lumbosacral spine model. Two designs of anterior total and posterior subtotal artificial discs were developed using bioactive three-dimensional fabric and bioresorbable hydroxyapatite/poly-l-lactide material (3DF disc). Both models were designed to obtain the stable interface bonding to vertebral endplates with maximum surface area occupation. Using seven cadaveric lumbosacral spines, the following three anterior reconstruction methods were sequentially performed at L4–5 level: anterior 3DF disc replacement; anterior BAK cages (BAK); and posterior pedicle screw fixation and anterior BAK cages combined (BAK + PS). The L2–3 level received two methods of posterior reconstructions: subtotal 3DF disc replacement (two implants), and posterior interbody cages and pedicle screw fixation (PLIF). Six unconstrained pure moments were applied and three-dimensional segmental motions were measured with an optoelectronic motion measurement system. The center of rotation (COR) calculation was conducted radiographically using flexion-extension films. Both anterior and posterior 3DF replacements statistically demonstrated equivalent range of motions (ROMs) in all loading modes compared to intact segment. Anterior BAK, BAK + PS, and PLIF demonstrated significantly lower ROMs when compared to intact and 3DF groups (P<0.05). The 3DF reconstruction tended to realign the COR to the posterior third or surrounding position at the operative disc level. The stand-alone lumbar 3DF disc replacement demonstrated biomechanical characteristics nearly equivalent to the intact spinal segments even through anterior or posterior approach in vitro, suggesting an excellent clinical potential.     

腰椎人工椎间盘置换术治疗腰椎间盘退变性疾病的中长期疗效分析

【摘要】 目的：评定腰椎人工椎间盘置换术（TDR）治疗腰椎间盘退变性疾病的中长期疗效。方法： 1999年12月~2006年12月应用Charite SB Ⅲ假体进行腰椎人工椎间盘置换术治疗腰椎间盘退变性疾病患者65例,其中随访时间≥5年的患者48例,共52个假体。均在术前和末次随访时进行疼痛VAS评分和Oswestry功能障碍指数（ODI）评定,测量术前及末次随访时手术节段的活动度和椎间隙高度。对上述数据进行统计学分析。结果: 随访时间≥5年但＜10年患者（A组）33例,≥10年者（B组）15例。术前、末次随访时疼痛VAS评分,A组分别为94.0±6.3分、23.0±3.1分,B组分别为92.0±5.8分、21.0±2.2分,每组末次随访时与术前比较均有统计学差异（P＜0.05）。术前、末次随访时ODI,A组分别为（66.0±4.2）%、（12.0±2.9）%,B组分别为（65.0±7.8）%、（9.0±2.8）%,每组末次随访时与术前比较均有统计学差异（P＜0.05）。术前、末次随访时手术节段活动度,A组分别为5.0°±2.3°、6.0°±1.1°,B组分别为4.0°±3.8°、6.0°±2.2°,每组末次随访时与术前比较均无统计学差异（P＞0.05）;末次随访时3例患者手术节段基本丧失活动度（平均为1.2°±0.4°,术后5年1例,术后7年2例）,其余患者保留了2°~10°的活动度,平均为6.5°。48例患者中,出现相邻节段退变4例,其中1例患者术后8年出现腰痛,影像学检查发现手术相邻上位节段椎间盘退变并膨出,行手术治疗;1例患者术后7年手术相邻上位节段椎间隙高度较术前降低＞2mm,2例（术后5年、8年各1例）患者手术相邻上位节段椎体前缘骨赘高度＞3mm。2例出现假体移位（分别于术后5年和6.5年）,3例出现异位骨化（分别于术后6年、7年和9年）,均未出现临床症状。结论：腰椎人工椎间盘置换术治疗腰椎间盘退变性疾病的中长期疗效较为满意。