肺炎克雷伯菌新生儿医院感染分离株耐药性及β-内酰胺酶CTX-M基因检测

目的了解新生儿医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌分离株的耐药性及β-内酰胺酶CTX-M耐药基因的存在状况. 方法对表型确认证实产ESBLs肺炎克雷伯菌进行药敏试验并用PCR扩增检测CTX-M基因. 结果 14株产ESBLs肺炎克雷伯菌药敏结果一致,耐三代头孢和耐酶抑制剂,均检出CTX-M基因. 结论随着CTX-M酶分布日渐广泛,有必要对其进行深入研究,了解不同的产CTX-M酶菌株耐药水平之差异.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性及基因分型

目的了解老年患者分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法药敏试验采用微量肉汤稀释法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性,聚合酶链反应(PCR)法检测β-内酰胺酶耐药基因型并测序。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗菌药物较敏感;产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群等5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为95.0%、30.0%、50.0%、5.0%、10.0%,同时携带2、3种以上耐药基因的菌株分别占40.0%和25.0%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性严重,基因型以blaTEM、blaCTX-M-1为主。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌多重β-内酰胺酶基因型研究

目的:研究医院感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒介导的AmpC酶基因型的分布。方法:筛选出产KPC酶肺炎克雷伯菌,采用改良的Hodge试验、接合试验、聚合酶链反应(PCR)等方法确定多重β-内酰胺酶基因型。结果:收集并证实产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌26株,其中CTX-M型ESBL检出率最高;3株细菌同时编码ESBL和AmpC基因,其中2株细菌同时携带blaCTX-M-3、blaSHV-12和blaDHA-1三种β-内酰胺酶基因。结论:产KPC酶肺炎克雷伯菌同时携带有其他β-内酰胺酶耐药基因,CTX-M型ESBL最为常见,使细菌耐药性更为严重。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌相关耐药基因监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌中常见的β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测了77株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中TEM、SHV和CTX-M等三种β-内酰胺酶基因,并进行了DNA测序。结果 50株产ESBLs的大肠埃希菌中,41株TEM基因阳性(82.0%),7株SHV基因阳性(14.0%),16株CTX-M基因阳性(32.0%),21株菌两种以上基因型同时阳性。27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,21株TEM基因阳性(77.8%),24株SHV基因阳性(88.9%),3株CTX-M基因阳性(11.1%),16株菌两种以上基因型同时阳性。结论产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带多种β-内酰胺酶基因,且以TEM和SHV型较为流行。     

产超广谱β-内酰胺酶临床分离株的耐药性及基因分型研究

目的了解深圳地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法采用纸片扩散法及E-test法检测产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性;多重聚合酶链反应(Multiple-PCR)检测ESBLs基因并进行初步分型。结果大肠埃希菌产ESBLs阳性率为24.14%,肺炎克雷伯菌为34.55%;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药的多重耐药率高达70%以上,未发现亚胺培南耐药株,对头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物多数敏感。ESBLs基因型以CTX-M型最为常见,占84.62%;30.77%检出了TEM或SHV型基因;未定型菌占3.85%。结论深圳地区产ESBLs菌对亚胺培南、头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物较敏感;ESBLs基因以CTX-M型为主。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因检测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌临床分离株中β-内酰胺酶(bla)基因流行状况。方法采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的的表型筛选与确证试验检测ESBLs,应用PCR扩增产ESBLs菌株bla(TEM)、bla(SHV)、bla(CTX-M)基因,并对PCR阳性产物进行克隆后测序确定其基因亚型。结果 46株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,基因检出率分别为bla(TEM)11株,占23.9%;bla(SHV)13株,占28.3%;bla(CTX-M)43株,占93.5%;携带1种bla基因菌株21株,占45.7%;携带2种20株,占43.5%;携带3种3株,占6.5%;全部菌株bla(TEM)基因测序结果均为TEM-1亚型,bla(SHV)基因为SHV-11、12、28亚型;部分菌株bla(CTX-M)基因测序结果为CTX-M-15、24、38亚型。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌中ESBLs基因型以CTX-M型为主,其次为SHV型,部分菌株同时携带广谱β-内酰胺酶基因TEM-1或SHV-11;监测产ESBLs细菌β-内酰胺酶基因流行状况,有助于指导临床合理应用抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶菌的耐药性与基因型分析

目的 分析医院急诊科3年内产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型,以指导临床用药.方法 采用ESBLs表型确证试验筛选产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌,提取产ESBLs菌的质粒DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增产ESBLs株质粒TEM、SHV、CTX-M1、CTX-M9和OXA5种基因,并对其扩增物进行DNA序列分析,测定大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对17种抗菌药物的耐药性.结果 共检出143株大肠埃希菌与77株肺炎克雷伯菌,其中84株为产ESBLs菌,占38.2％;ESBLs研究菌株全部携带TEM型、77.4％携带CTX-M9型基因;同一菌株携带2、3、4个基因的菌株比例分别为44.8％、33.3％和7.1％;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌为多药耐药菌,其中对青霉素类、第一、二、三代头孢菌素类、磺胺类和氟喹诺酮类耐药率高达80.0％～100.0％;碳青霉烯类对产ESBLs细菌仍保持较高的抗菌效果.结论 产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药基因,以TEM型和CTX-M9型为主,携带＞2个耐药基因的产ESBLs菌株比例较高;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂的抗菌药物、碳青霉烯类抗菌药物仍保持较高的敏感性,研究中发现美罗培南耐药菌株,应引起临床重视.     

肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性

目的 探究肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性,为临床治疗ESBLs肺炎克雷伯菌用药提供指导。方法 收集2019年1月-2021年7月于武汉市肺科医院行胸腔镜肺段切除术后感染患者肺炎克雷伯菌分离株100株,分析菌株对常用抗菌药物的耐药率,双纸片扩散法进行ESBLs表型筛选及确证,聚合酶链式反应(PCR)检测产ESBLs菌株的耐药基因,将PCR阳性产物进行测序并确定基因型别。结果 100株肺炎克雷伯菌中检出35株产ESBLs菌株,占35.00%,主要来源于痰液;产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨苄青霉素、头孢菌素的耐药率高于90%; 35株产ESBLs肺炎克雷伯菌主要耐药基因型为TEM、CTX-M和SHV,其中CTX-M型中,CTX-M-1有10株,CTX-M-9有12株,未检测出CTX-M-2、CTX-M-8及CTX-M-25型,所有TEM型均为TEM-1,SHV型均为SHV-12。结论 胸腔镜肺段切除术后感染肺炎克雷伯菌菌株产ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌对替加环素、美罗培南及亚胺培南较敏感,且携带的基因型以CTX-M型、TEM...     

产CTX-M酶肠杆菌科细菌耐药性及其相关耐药基因研究

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用纸片扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的耐药性,用聚合酶链反应(PCR)技术检测相关耐药基因并用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%;检测菌株对亚胺培南全部敏感,质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;产ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX-M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多;碳青霉烯类抗菌药物是目前治疗产ESBLs细菌最有效药物。     

医院感染肺炎克雷伯菌的表型及基因型研究

目的 调查研究天津南开医院医院感染肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株的比率、耐药表型和ESBLs基因型.方法 纸片法ESBLs初筛及表型确证,K-B法检测耐药谱,聚合酶链反应(PCR)法检测ESBLs SHV、TEM、CTX-M-I、CTX-M-94类基因.结果 表型产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为54.0%,ESBLs阳性菌对抗菌药物耐药的种类和程度明显高于ESBLs阴性菌,多数临床常用抗菌药物的耐药率达到80.0%～100.0%,仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂和碳青酶烯类保持敏感;56株ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌中SHV、CTX-M-1、TEM组基因的检出率分别为64.3%、46.4%和32.1%;同时携带2种和3种耐药基因的菌株占35.7%和8.9%.结论 在研究所涉及的肺炎克雷伯菌中·ESBLs表型阳性菌检出率高,耐药范围广,所携带的ESBLs基因以SHV和CTX-M-1组为主.     

泌尿系感染产ESBLs株耐药基因分型及药敏试验

目的了解泌尿系感染产超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)菌株的主要基因型分布特点及其耐药性. 方法用表型确证试验确定临床尿液标本中,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌54株,分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR),用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC),并对结果进行分析. 结果 PCR扩增结果显示:CTX-M、TEM和SHV的检出率分别为85.2%、37.0%和9.3%,42.6%的菌株同时携带≥2个基因;MIC测定结果显示:产ESBLs株对亚胺培南的敏感率为100%;对阿米卡星的敏感率高达98.1%;对哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁的敏感率也较高,分别为88.9%和70.4%;其对环丙沙星和氨苄西林/舒巴坦的敏感率则低,分别为25.9%和1.9%. 结论我院泌尿系感染产ESBLs株对亚胺培南的敏感性最高,接近半数菌株同时携带≥2个基因,产ESBLs菌株的主要基因型为CTX-M.     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析

目的 了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法 用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株，用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR)，并对结果进行分析。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100％)；其次为头孢吡肟(84．4％)，哌拉西林／他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71．9％和70．3％。PCR扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81．3％、65．6％和18．8％；53．1％的菌株同时携带多个基因。结论 该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高；最常见的基因型是SHV，其次为CTX-M。     

某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因检测及分型

目的了解某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）基因型。方法采用表型确证试验测定并收集该院产ESBLs大肠埃希菌（40株）和肺炎克雷伯菌（20株）,提取质粒DNA。采用特异性引物扩增TEM、SHV和 CTX M系列基因,测序后进行序列分析。结果60株表型确证试验阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,聚合酶链反应（PCR）扩增均阳性,包括TEM、SHV、CTX M 3组和CTX M 9组4种基因型。大肠埃希菌中上述4种基因型阳性率分别为37.50%（15株）、2.50%（1株）、62.50%（25株）、50.00%（20株）;肺炎克雷伯菌上述4种基因型阳性率分别为40.00%（8株）、90.00%（18株）、65.00%（13株）、40.00%（8株）。100.00%的大肠埃希菌和80.00%的肺炎克雷伯菌产生blaCTX M,12.50%(5/40)的大肠埃希菌和25.00%(5/20)的肺炎克雷伯菌携带2种CTX M酶基因。23例TEM基因皆为TEM 1型;19例SHV型基因包括SHV 1型6株、SHV 11型6株、SHV 12型5株及SHV 25型2株,仅SHV 12为ESBLs基因,且均来源于肺炎克雷伯菌;66例CTX M型基因,其中CTX M 14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为45.00%和35.00%,CTX M 55检出率均为35.00%,CTX M 15检出率分别为20.00%和15.00%,检出少量CTX M 3、CTX M 65、CTX M 101及CTX M 123基因型。结论该院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX M 为主,其次为SHV 12。CTX M基因型中以CTX M 14最为常见,CTX M 101及CTX M 123型ESBLs为山东省首次检出。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因检测及对双黄连敏感性的试验研究

目的 检测肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型别流行情况,并探讨不同基因型别对双黄连冻干粉敏感性的差异.方法 选择2006年9月-2007年3月自哈尔滨地区连续收集的临床分离肺炎克雷伯菌231株,按照NCCLS表型确证试验检测产ESBLs菌株的发生情况;PCR检测ESBLs的基因型别;肉汤稀释法检测肺炎克雷伯菌对双黄连的敏感性,并对结果进行分析.结果 231株菌检测出产ESBLs菌株121株,阳性率52.4％;携带TEM型基因的有60株,占49.6％,携带SHV的46株占38.0％、CTX-M-1 32株占26.4％、CTX-M-9 36株占29.8％;双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌临床株的MIC90为50 mg/ml,MIC50为25mg/ml;产ESBLs肺炎克雷伯菌与非产ESBLs菌MIC差异无统计学意义;双黄连对产ESBLs各型别之间的MIC差异无统计学意义.结论 哈尔滨地区肺炎克雷伯菌ESBLs发生率为52.4％,以携带TEM型基因菌株最多;双黄连冻干粉对肺炎克雷伯菌的生长具有抑制作用,抑制作用不受菌株是否产ESBLs及产ESBLs基因型别的影响.     

广州地区革兰阴性杆菌CTX-M和OXA型广谱β-内酰胺酶基因分型研究

目的调查广州地区临床分离的革兰阴性杆菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和OXA型广谱β-内酰胺酶(beta-lactamase,Bla)的主要基因型别及其流行情况.方法按照NCCLS 2001年标准筛选广州地区临床分离菌株的ESBLs表型;用聚合酶链反应(PCR)扩增法和DNA测序法进行ESBLs基因序列分析.结果PCR扩增结果显示,CTX-M1、CTX-M2、CTX-M9群和OXA的总阳性率在本地区临床分离的临床检测ESBLs阳性的革兰阴性杆菌中分别为9.96%、0、35.5%和1.6%,同时检出≥两种ESBLs基因的菌株数64株,阳性率为5.9%;序列分析进一步证实了CTX-M型ESBLs的具体型别,包括CTX-M-3、CTX-M-22、CTX-M-9、CTX-M-14、CTX-M-17、CTX-M-18、CTX-M-21、CTX-M-24、TOHO-2和TOHO-3,其比例分别为3.23%、3.7%、4.99%、3.32%、2.21%、3.69%、2.95%、4.43%、1.85%和1.48%;其中以CTX-M-9和CTX-M-24阳性率较高;在本地区只检出1种OXA型Bla-OXA-2/PSE-2(1.38%,15/1084);另外,还检出了8株无法具体归类的CTX-M-9型ESBLs,占0.74%;CTX-M型基因主要分布于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,分别占42.8%和36.3%,而OXA基因则主要分布于铜绿假单胞菌中,占80%.结论本地区CTX-M类ESBLs也较为常见,其中尤以CTX-M-9和CTX-M-24为主,暂无CTX-M2群ESBLs,可能存在1种或多种新的CTX-M型ESBLs.     

革兰阴性杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶调查研究（首次发现产blaCTX-M-14的斯氏普罗威登斯菌）

目的调查某院临床分离的革兰阴性（G^-）杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）株的流行情况，并确定其基因型。方法收集2004年10月--2005年7月临床标本分离的多重耐药G^-杆菌233株，按美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的方法进行ESBLs表型确证试验，聚合酶链反应（PCR）法对表型阳性株进一步进行CTX-M酶基因型的扩增，对PCR产物测序并确定其基因型。结果从大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌和斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M型ESBLs，首次从斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M-14型ESBLs。结论该地区多种G肠杆菌科细菌携带CTX-M型ESBLs，斯氏普罗威登斯菌也能产生CTX-M型ESBLs。     

VITEK-2 Compact高级专家系统对CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的检测分析

目的 评估VITEK-2 Compact(V2C)高级专家系统(AES)对CTX-M型ESBLs的检测分析能力.方法 随机抽取2010年1-8月AES所提示的产ESBLs菌株194株,进行CTX-M表型分析,并与聚合酶链反应(PCR)方法加以比较.结果 194株产ESBLs菌株经AES提示CTX-M型94株,检出率为48.5％,PCR证实携带CTX-M基因型164株,检出率为84.5％,差异有统计学意义(P＜0.05);AES报告的94株CTX-M型产ESBLs,经PCR确认为89株,头孢他啶MIC值≤1μg/ml占95.5％,其耐药表型以CTX-M型为主,而漏检的75株中,头孢他啶MIC值≤1 μg/ml只占2.7％,其耐药表型大肠埃希菌以产ESBLs为主,肺炎克雷伯菌以产ESBLs或ESBLs+膜渗透障碍为主;AES与PCR漏检株对氨曲南、头孢他啶、头孢吡肟耐药率要高于符合株.结论 AES对混合型耐药机制的CTX-M型产ESBLs检测有一定的漏检;如需进一步进行产ESBLs的亚型研究或相关流行病学调查,仍需要以分子生物学方法进行验证.     

肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中ESBLs和AmpC酶基因的研究

目的研究肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌中ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶的存在形式及其基因类型和转移方式。方法利用CLSI纸片法确认实验和APB纸片增强试验分别检测ESBLs和AmpC酶,基因芯片技术和序列分析测定两种酶基因的类型,接合转移实验了解肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌耐药基因转移方式。结果在对头孢西丁不敏感的72株肺炎克雷伯菌和20株产酸克雷伯菌中,以同时产生ESBLs和AmpC酶为主要形式,分别占54.2%和75.0%;单产ESBLs分别为22.2%和25.0%,肺炎克雷伯菌中单产AmpC酶占12.5%;肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中的AmpC酶基因绝大多数为DHA型(测得DHA-1型基因),ESBLs则以SHV型为主(测得SHV-12型),它们均能通过接合转移方式将其质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论同时存在的ESBLs和AmpC酶是肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌耐药的主要原因,耐药基因的转移可导致耐药性的传播扩散。