中医药靶向调节线粒体动力学及相关蛋白SUMO化修饰防治脑缺血/再灌注损伤的研究进展

线粒体稳态失衡在脑缺血/再灌注损伤（cerebral ischemia/reperfusion injury,CI/RI）病理过程中扮演重要角色。线粒体分裂/融合的动态调节（线粒体动力学）作为线粒体质量控制（mitochondrial quality control,MQC）的关键环节，在CI/RI中维持线粒体稳态发挥重要作用。小泛素相关修饰物（small ubiquitin-related modifier,SUMO）修饰是一类存在于细胞内动态可逆的蛋白质翻译后修饰形式，通过对底物蛋白进行多步酶促反应以完成对靶蛋白的SUMO修饰和去SUMO修饰过程，进而影响底物蛋白的亚细胞定位、蛋白互作和稳定性，其普遍参与了蛋白转运、信号传导、DNA修复、炎症反应及氧化应激等病理生理过程。线粒体动力学及相关蛋白通过SUMO化修饰调控线粒体融合和分裂，进而调节线粒体稳态，在CI/RI进展与转归中发挥着关键作用。中药在防治缺血性脑病方面具有明显优势，综述了线粒体分裂/融合过程中相关蛋白的SUMO化修饰的调节机制，以及靶向调节线粒体动力学及相关蛋白SUMO化修饰防治CI/RI的中医药研究进展，以期为缺血性...     

从保护线粒体角度谈心肌缺血再灌注损伤

近年研究表明,线粒体在心肌缺血再灌注损伤的多个环节发挥作用,其主要作用机制与活性氧、细胞凋亡、膜通透性转换孔开放等方面有关,以线粒体为靶点中药的研究近几年来备受关注,文章从保护线粒体角度出发,对中药防治心肌缺血再灌注损伤的作用机制进行综述。     

四逆汤抗心肌缺血-再灌注线粒体氧化损伤作用及机制的研究

目的:阐明四逆汤抗心肌缺血再灌注的线粒体氧化损伤作用及机制。方法:将昆明种小鼠分为对照组、缺血再灌注模型组、四逆汤治疗组,采用腹腔注射Pit(垂体后叶素)制造小鼠心肌缺血再灌注模型。结果:四逆汤可以明显提高心肌组织及线粒体内SOD活性(P<0.01),明显降低心肌组织及线粒体内MDA含量(P<0.01),减少心肌组织内乳酸含量(P<0.05),四逆汤还可以明显减轻心肌缺血-再灌注损伤时线粒体肿胀程度(P<0.01),明显增强线粒体MnSODmRNA的转录(P<0.01)结论:四逆汤可以明显减轻心肌缺血-再灌注过程中的线粒体氧化损伤,其机制为增强线粒体MnSODmRNA的表达。     

塞络通胶囊对局灶型脑缺血/再灌注大鼠线粒体动力学的影响

观察塞络通胶囊对局灶性脑缺血再灌注的保护作用机制。采用大鼠90 min中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。蛋白免疫印迹法检测线粒体分裂融合基因Drp1,Opa1表达。透射电镜观察线粒体超微结构变化。HE染色观察病理学形态变化,免疫组织化学法检测Drp1,Opa1表达。结果显示,塞络通胶囊(33,16.5 mg·kg^-1,ig)可抑制缺血侧皮层区线粒体分裂融合异常,抑制线粒体分裂基因Drp1表达,促进线粒体融合基因Opa1表达,最终减轻缺血再灌注带来的能量代谢紊乱。塞络通胶囊可抑制缺血周边区线粒体动力学异常、维持线粒体正常形态,说明维持线粒体动力学正常可能是中药塞络通胶囊促进缺血脑区自修复功能的作用机制。     

银杏酮酯EGb50对缺氧/复氧损伤后SH-SY5Y细胞线粒体功能的影响

缺血性脑血管病,尤其是脑缺血后的再灌注损伤会严重危害人类生命健康,探讨银杏酮酯(Ginkgo biloba extract 50,EGb50)对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤后人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞线粒体功能的影响及可能机制,将为缺血性脑血管病的治疗提供新的思路。该研究以SH-SY5Y细胞建立H/R损伤模型,给予EGb50,流式细胞仪测定线粒体膜电位和胞内钙离子浓度,并以免疫荧光、Western blot法检测线粒体融合、分裂相关蛋白即视神经萎缩相关蛋白1(optic atrophy1,Opa1)和类动力蛋白1(dynamin-like protein 1,Drp1)的表达水平。结果表明,H/R损伤后,细胞线粒体膜电位明显降低,胞内钙离子浓度升高,线粒体融合相关蛋白Opa1表达水平降低,线粒体分裂相关蛋白Drp1表达水平升高;EGb50干预后,线粒体膜电位显著升高,胞内钙离子浓度显著降低,Opa1表达水平显著升高,Drp1表达水平显著降低。研究提示,EGb50对H/R损伤的SH-SY5Y细胞线粒体功能有明显的保护作用,可减轻细胞能量代谢紊乱,改善线粒体功能,其作用机制可能与调节线粒体的融合、分裂有关,从而为EGb50治疗缺血性脑血管病提供数据支持。     

羟基红花黄色素A改善心肌缺血再灌注损伤研究进展

急性心肌梗死(AMI)可引起心源性休克甚至猝死,及时、有效的冠状动脉再灌注治疗可减缓病情发展,但无效的心肌缺血再灌注(I/R)可诱导心肌二次损伤,引起心肌内出血及其他并发症增加致死率,严重影响人们的生活质量。心肌缺血再灌注会引起氧自由基的堆积、细胞内Ca 2+超载、线粒体膜通透性转换孔开放等。羟基红花黄色素A(HSYA)是红花中有效化学成分之一,多项研究表明其可通过抗氧化应激损伤、抗细胞凋亡、保护线粒体及扩张血管等有效减缓心肌缺血再灌注损伤。近年来国内外对HSYA心血管系统药理作用的研究逐步深入,本文对国内外心肌缺血再灌注损伤相关文献进行了整理,并对HSYA在临床上的进一步应用进行了展望。     

防治心肌缺血/再灌注损伤心肌mPTP开放情况的研究进展

本文对最近5-8年来国内外防治心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的机制研究进行了总结和归纳,试图使在防治心肌缺血/再灌注损伤中调控线粒体通透性转换孔(mPTP)开放机制的研究方面有所发现,为防治心肌缺血再灌注损伤提供更多更有力的理论依据。     

针灸防治心肌缺血再灌注损伤的线粒体通路研究进展

目的：探讨针灸防治心肌缺血再灌注损伤的线粒体细胞信号转导机制,为后续研究提供思路。方法:通过对近年来国内外有关线粒体心脏损伤的研究入手,分析针灸防治心肌缺血再灌注损伤的线粒体通路的研究进展。结果：研究多以大鼠为观察对象,主要从针刺改善线粒体功能,减少线粒体活性氧类（ROS）产生过量引起氧化应激,防止细胞内Ca2+超载和阻止线粒体通透性转换孔（mPTP）的开放等角度切入研究。结论：微小RNA(microRNA,miRNA)是基因网络、蛋白网络、代谢网络等的上游网络的调控环节。鉴于针灸作用的整体性特点,将miRNA引入针灸作用机制研究领域,可在基因或其他水平层面更好地揭示针灸作用机制。     

针刺麻醉复合丹参对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :观察针刺麻醉复合丹参对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及维持心肌线粒体的功能。方法 :1 8只中国大耳白兔随机等分为对照组、针刺麻醉组、针刺麻醉复合丹参组 ,在急性心肌缺血再灌注模型上观察冠状动脉左前降支结扎前即刻、灌注前即刻、灌注 2hr三个时间点MAP、HR、ECG ,测定血浆IL 8、乳酸浓度 ,测定心肌缺血再灌注区、非缺血再灌注区线粒体的99mTc MIBI摄取率。结果 :血IL 8、乳酸浓度对照组、针刺组、针刺麻醉复合丹参组逐步减少 ,心肌缺血再灌注区线粒体99mTc MIBI摄取率逐步增高 ,血乳酸值和线粒体99mTc MIBI摄取率有强负相关关系。结论 :IL 8参与中性粒细胞介导的心肌再灌注损伤 ,针刺麻醉、针刺麻醉复合丹参能减少IL 8的产生及减弱其作用效应。针刺麻醉能减轻心肌再灌注损伤 ,维持心肌线粒体的功能 ,丹参对针刺麻醉的心肌保护效应有增强作用     

人参二醇组皂甙对家兔缺血再灌注损伤心肌线粒体的影响

目的：研究人参二醇组皂式(Panaxodiol Saponins,PDS)对缺血再灌注损伤心肌超微结构线粒体的影响。方法：应用离体作功兔心模型，将不同剂量的PDS加入St．Thomas Ⅱ号心停搏液中，电镜下观察心肌缺血再灌注前后心肌超微结构线粒体的变化，以Flameng线粒体半定量法评价记分。结果：在40—160mg/L的浓度范围内，PDS具有减轻缺血再灌注后心肌线粒体损伤的作用。在其浓度增至320mg／L时，上述作用消失，反有加重心肌线粒体损伤的倾向。结论：PDS有抗心肌缺血再灌注损伤作用，该作用有严格的浓度-效应关系。     

中药调控线粒体自噬抗心肌缺血再灌注的研究概述

缺血性心脏病日益危害着人们的健康,而恢复冠脉血流的首要治疗手段往往带来心肌缺血再灌注损伤(MIRI)。线粒体为心肌细胞提供大量能源,更参与调控细胞凋亡和信号转导等重要环节,在缺血缺氧环境中,受损线粒体会发生选择性、程序性自噬降解,以维持心肌细胞内环境稳态,该过程被称为线粒体自噬,与MIRI的发生发展密切相关。线粒体自噬具有双重性,准确有效地干预该水平对改善MIRI情况有着重要临床意义。近年来中医药在防治心血管疾病方面发挥了多靶点、多途径的治疗优势,逐步受到人们重视,越来越多的研究证实中药单体、组分、复方可通过保护线粒体结构及功能、调节线粒体自噬来挽救缺血心肌。探讨线粒体自噬在MIRI中的影响机制以及近年来中医药在此方面的研究进展,以期寻找以线粒体为治疗靶点的新策略。     

中医药疗法调节miRNA对心肌缺血再灌注损伤影响的研究进展

综述中医药通过调节微小核糖核酸(miRNA)对心肌缺血再灌注损伤影响的研究进展。相关研究结果表明,中药单体(人参皂苷1、芹菜素、丹酚酸B、木犀草素等)、复方(如益气活血复方、通心络)及针灸(如电针预处理、电针内关穴、体内双内关穴电针和体外微电流预处理)可通过调控miRNA治疗心肌缺血再灌注损伤,为中医药治疗心肌缺血再灌注损伤及其相关预后干预提供切入点。     

中医药治疗心肌缺血及缺血后再灌注损伤动物实验研究

近年研究中医药治疗心肌缺血及缺血后再灌注损伤的动物实验有所增多,有利于科学的探讨中医药治疗心肌缺血和再灌注损伤的机理.笔者就近5年来有关研究概况综述如下:     

中医药干预线粒体膜电位治疗心血管疾病的研究进展

线粒体膜电位（MMP）是细胞损伤最敏感的指标之一,也是中医药（TCM）临床干预心脏功能的潜在靶点之一。心血管疾病的发生发展机制十分复杂,常累及心肌和其他各个脏器,且大多呈现慢性发展、死亡率高的特点,严重影响患者生存质量。TCM治疗心血管疾病具有不良反应小、耐药性低、整体论治的独特优势,可有效减轻患者症状,改善预后。近年来,从线粒体功能探究心血管疾病的机制成为了研究热点,而MMP与线粒体作用机制密切联系。大量研究表明,TCM通过MMP对心血管疾病的治疗效果,可能通过调节能量代谢、改善线粒体结构功能、抑制氧化应激、抑制细胞凋亡等途径发挥作用,可以有效干预心血管疾病发展,保护患者心功能,提高治愈率,降低致死率。该文通过查阅近年来国内外有关TCM干预MMP调节心血管疾病机制的研究文献,重点从动脉粥样硬化、心力衰竭、心肌缺血再灌注损伤、糖尿病心肌病、肺动脉高压等疾病角度进行系统梳理,总结了目前TCM通过影响MMP治疗心血管疾病的研究现状。研究发现,大部分中药复方、单味中药、有效部位及中药单体可以通过调控MMP,达到改善线粒体功能发挥保护心肌细胞损伤的作用。而相关临床试验证据及MMP的中医理论研究较为缺乏,有待进一步研究探索,以期后续更好地为TCM在心血管疾病治疗方面提供思路与借鉴。     

心肌缺血再灌注损伤的中医药防治研究进展

目的:探讨中医药对心肌缺血再灌注损伤的防治.方法:对近年来用中医药防治心肌缺血再灌注氧自由基损伤的研究文献进行了分类和总结.结果:心肌梗死在治疗上以溶栓、冠状动脉搭桥以及冠脉介入为主,但在临床中常见改善心肌血供的同时反而加重单纯心肌缺血所造成的损伤,即所谓的再灌注损伤,中医药干预可降低再灌注损伤,增加再灌注成功率,尤其是在清除氧自由基方面更是有明确的疗效.     

益心脉颗粒对缺血再灌注损伤心肌超微结构保护作用的研究

目的：观察益心脉颗粒(YXM)干预对家兔缺血再灌注心肌超微结构的影响．探讨该药对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：25只新西兰家兔随机分为A、B、C、D和E五组，分别饲以益心脉颗粒、VitE、复方丹参片和饲料连续7天，第8天结扎家兔冠状动脉左前降支(LAD)造成心肌缺血再灌注损伤模型．在缺血及再灌注各60分钟之后取心尖部心肌制成超薄切片．利用透射式电子显微镜观察其超微结构。结果：益心脉组心肌细胞内线粒体数量增多、膜完整、嵴排列有序少有断裂、基粒无脱落；维生素E组、复方丹参组则见线粒体数量减少、膜不清晰、不完整、嵴断裂、少数线粒体内部出现空泡等显著改变。结论：益心脉颗粒能显著保护缺血再灌注损伤时心肌细胞超微结构。     

基于microRNA和mtDNA的相关性阐述活血化痰中药防御心肌缺血再灌注损伤的分子机制

大量基础和临床研究显示活血化痰中药通过调节脂质代谢防治心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI),然其机制尚不十分清晰。经研究线粒体DNA,microRNAs以及脂质代谢参与MIRI整个过程且影响预后,线粒体DNA mtDNA突变是引起心肌缺血和再灌注心肌细胞损伤的首要因素,microRNAs通过表达下降或过表达调控相关基因加重或减轻MIRI损伤,而作为胆固醇转运关键调节器的miR-33通过位于线粒体上CROT,PGC-1α,AMPK等相关基因而调控脂质代谢,然同mtDNA和microRNAs的相关性研究却较之为少。因此深入研究miR-33同mtDNA,MIRI的相关性,探析活血化痰中药是否靶标miR-33调节脂质代谢,引起mtDNA突变或缺失对于防治MIRI有着重要意义。     

线粒体质量控制体系介导心肌缺血再灌注损伤的治疗策略

冠状动脉疾病是最常见的心血管疾病,最初的器官血流中断和随后的器官血流恢复所产生的心肌缺血/再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤是急性心肌梗死后伴随各种心脏再灌注治疗策略的重要临床难题。虽然血流量的恢复对于氧气的供应是必要的,但再灌注在促进心肌梗死边缘区血流恢复和心肌细胞挽救的同时,也加重了心肌损伤。线粒体功能障碍已被报道为I/R损伤的原因之一,在介导心肌损伤病理生理过程中起着至关重要的作用。主要综述了I/R损伤中线粒体质量控制系统的分子机制以及确立了以线粒体为潜在治疗靶点的可能性。     

心肌缺血再灌注损伤引发的线粒体功能障碍与黄芪多糖的干预作用

目的:探讨心肌缺血再灌注损伤引发的线粒体损伤机制,以及黄芪多糖对大鼠心肌线粒体的保护作用。方法:健康成年SD雄性大鼠35只,分为假手术组,缺血再灌注组,黄芪多糖预处理组,黄芪多糖后处理组,阳性药物对照组。采用冠状动脉结扎的方法建立大鼠心肌缺血模型。电镜观察线粒体结构变化,测定线粒体内活性氧(ROS)水平,观察心律失常发生情况。结果:与假手术组相比,缺血再灌注组ROS水平显著升高(P0.05),心肌线粒体超微结构发生破坏,表现出明显的空泡变性,线粒体肿胀,线粒体脊膜破裂,而线粒体损伤积分也有显著升高(P0.05),同时心律失常评分升高(P0.05)。黄芪多糖预处理组和后处理组较缺血再灌注组线粒体结构损伤减轻(P0.05),粒体损伤积分降低(P0.05),线粒体内ROS水平降低(P0.05),心律失常显著减少(P0.05)。结论:黄芪多糖通过降低线粒体内ROS水平,减轻线粒体结构损伤,从而逆转线粒体功能障碍,减少缺血再灌注后恶心心律失常发生,减轻MIRI,从而发挥一定的心肌保护效应。     

活血化瘀法防治心肌缺血再灌注损伤的研究思路

分析近5年来中医药防治心肌缺血再灌注损伤的理论和实验研究,总结活血化瘀法防治心肌缺血再灌注损伤的作用机理,根据目前分子生物学的发展和新技术的应用,提出中医药防治心肌缺血再灌注损伤的研究重点和方法。