独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠IL-17/NF-κB通路的影响

目的:探讨独活寄生汤通过调控IL-17/NF-κB信号通路治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、独活寄生汤组和双醋瑞因组,采用关节腔注射碘乙酸钠溶液建立KOA模型。确认造模成功后,分别采用药物干预30 d,观察大鼠膝关节软骨病理形态变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。Real-time PCR和免疫组化法检测软骨核因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、NF-κB激活剂1(ACT1)mRNA和蛋白表达水平。结果:独活寄生汤组大鼠膝关节软骨表面稍不平整,软骨细胞数量减少,排列较规则,软骨基质轻染。与正常组比较,模型组大鼠血清IL-17、TNF-α表达水平升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组大鼠血清IL-17、TNF-α表达下降(均P<0.05)。与正常组比较,模型组TRAF6 mRNA表达升高,NF-κB p65、ACT1 mRNA表达升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组NF-κB p65、ACT1、TRAF6 mRNA表达降低(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠软骨NF-κB p65、TRAF6和ACT1蛋白表达水平升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组大鼠软骨NF-κB p65、TRAF6、ACT1的蛋白表达降低(均P<0.01)。结论:独活寄生汤通过调节IL-17/NF-κB信号通路,降低IL-17、TNF-α促炎因子表达,有效缓解KOA模型大鼠症状。     

温经通络汤对膝骨关节炎模型小鼠膝关节软骨组织HMGB1/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨温经通络汤治疗膝骨关节炎的可能作用机制。方法 将32只小鼠随机分为假手术组，模型组及温经通络汤低剂量组、高剂量组，每组8只。除假手术组外，其余各组采用前交叉韧带横断术（ACLT）法建立膝骨关节炎模型。术后4周，温经通络汤低剂量、高剂量组分别以温经通络汤20、80 g/（kg·d）灌胃，假手术组及模型组给予0.2 ml/10 g生理盐水灌胃，均每天1次，持续4周。采用HE染色及番红O-固绿（S-O）染色法观察各组小鼠软骨组织病理形态，并根据改良Mankin’s评分标准对病理变化进行评分；Western blot法检测各组小鼠关节软骨组织中基质金属蛋白酶13 (MMP13)、Ⅱ型胶原（COLⅡ）及高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)、核因子κB (NF-κB)通路的蛋白表达情况；qPCR法检测COLⅡ、MMP13及NF-κB mRNA表达；免疫组化法观察软骨中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达；ELISA法检测血清炎症因子前列腺素E2 (PGE2)、白细胞介素6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)表达。结果 与假手术组比较，模型组关节软骨表面破坏明显，软骨层有明显缺损，改...     

地仙煎对膝骨关节炎大鼠软骨组织的保护作用

目的:探究药食同源食疗方剂地仙煎对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织的保护作用。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地仙煎低剂量组(2.2 g/kg)、地仙煎高剂量组(8.8 g/kg)和硫酸氨基葡萄糖组(0.135 g/kg),每组10只。采用前交叉韧带离断法(ACLT)复制大鼠KOA模型,造模后每天灌胃给药1次,连续6周。末次给药12 h后摘取大鼠膝关节,采用苏木精-伊红染色(HE)、番红O固绿染色、Masson染色观察大鼠软骨组织病理变化情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清中蛋白聚糖(PG)、Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达情况。结果:与模型组相比,地仙煎显著缓解大鼠膝骨关节软骨表面损伤,减轻大鼠软骨表面褶皱、破损和潮线缺损;改善软骨上层和下层失染、染色不均;提高大鼠软骨组织中蛋白聚糖和胶原纤维含量;显著上调大鼠血清中PG和Col-Ⅱ(P<0.01);显著下调大鼠血清中TNF-α(P<0.01)、IL-1β(P<0.05)和MMP-13(P<...     

温化方通过NF-κB信号通路调控大鼠膝骨关节炎实验研究

目的:探究温化方调控转录因子κB(NF-κB)信号通路对大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、温化方组、双氯芬酸钠组、抑制剂组,各10只。除对照组外,其余各组大鼠采用弗氏不完全佐剂乳化的牛Ⅱ型胶原蛋白诱导KOA大鼠模型。造模成功后开始给药,模型组给予0.9%氯化钠灌胃,观察组给予温化方灌胃,双氯芬酸钠组给予双氯芬酸钠灌胃,抑制剂组给予NF-κB抑制剂(吡咯烷二硫代氨基甲酸盐)灌胃,对照组大鼠自由饮水和进食。比较各组HE染色情况,大鼠体重、关节炎指数、关节肿胀度变化情况,酶联免疫吸附试验检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,荧光定量PCR法和Western blot检测大鼠关节滑膜组织中NF-κB信号通路相关基因和蛋白表达水平。结果:与模型组比较,对照组、温化方组、双氯芬酸钠组及抑制剂组的大鼠软骨损伤、纤维增生较低。与模型组比较,对照组、温化方组、双氯芬酸钠组、抑制剂组的大鼠体重较高,关节炎指数、关节肿胀度较低(均P<0.05)。与模型组比较,对照组、温化方组、双氯芬酸钠组、抑制剂组IL-1β、IL-6 和TNF-α水平较低(P<0.05)。与模型组比较,对照组、温化方组、双氯芬酸钠组、抑制剂组的NF-κB基因、蛋白表达水平均较低(P<0.05)。结论:温化方通过抑制NF-κB信号通路缓解大鼠KOA病情。     

积雪草苷对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响及机制研究

目的:探讨积雪草苷(ASS)对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨损伤和骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子(RANK)/RANK配体(RANKL)信号通路的影响。方法:采用前交叉韧带切断术(ACLT)加内侧半月板切除术(MMx)诱导建立膝骨关节炎大鼠模型,建模后分为KOA组、ASS低剂量组(ASS-L组,16 mg/kg)、ASS高剂量组(ASS-H组,32 mg/kg)、ASS+si-NC组(32 mg/kg ASS+100 ng LV-si-NC载体)、ASS+si-OPG组(32 mg/kg ASS+100 ng LV-si-OPG载体),另设假手术(Sham)组,每组12只。给予相应的药物干预2周后,通过机械缩爪阈值(PWT)和热缩爪潜伏期(PWL)评估大鼠疼痛行为,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,苏木精-伊红(HE)和番红O/固绿染色观察关节软骨组织病理学变化,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨组织基质金属蛋白酶(MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白(COL2A1)、聚集蛋白聚糖(Agg...     

千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨的保护作用及相关机制

【目的】 观察千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨蛋白激酶B（Akt）/ 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路表达的影响,探讨千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨的保护作用及相关机制。【方法】 将32只SD大鼠随机分成4组,即正常组、模型组、千草方组和透明质酸组,每组8只。除正常组,其他3组大鼠采用改良Hulth法构建膝骨关节炎模型。制模后,千草方组大鼠给予千草方熏洗,透明质酸组大鼠给予关节腔内注射透明质酸,模型组不给予任何治疗。治疗30 d。给药结束后,采用苏木素-伊红（HE）染色法和Masson染色法观察大鼠膝关节软骨组织,行Mankin’s评分,酶联免疫吸附分析（ELISA）检测血清白细胞介素（IL）-6、IL-10和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量,免疫组织化学法检测软骨组织Ki67的表达,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测软骨组织Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、mTOR、磷酸化mTOR（p-mTOR）、糖原合成酶激酶3β（GS3Kβ）、磷酸化GS3Kβ（p-GS3Kβ）和细胞周期蛋白D1（CyclinD1）的表达。【结果】 与正常组比较,模型组大鼠膝关节软骨细胞排列紊乱,结构不清晰,Mankin’s评分升高（P < 0.05）,血清IL-10含量下降,IL-6和TNF-α含量升高（P < 0.05）,软骨组织Ki67表达量,p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p-GSK3β/GSK3β和CyclinD1的相对表达量均显著减少（P < 0.05）。与模型组比较,千草方组大鼠膝关节软骨表面更加光滑,结构较清晰,软骨基质着色较均匀,Mankin’s评分降低（P < 0.05）,血清IL-10含量升高,IL-6和TNF-α含量降低（P < 0.05）,软骨组织p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p-GSK3β/GSK3β和CyclinD1的相对表达量显著增加（P < 0.05）。【结论】 千草方熏洗能够通过促进Akt/mTOR信号通路活化及软骨细胞增殖来缓解膝骨关节炎。     

不同深度温针灸联合平衡火罐治疗膝骨关节炎的临床疗效及对患者Toll样受体4/核因子-κB信号通路的影响

目的 观察不同深度温针灸配合平衡火罐治疗膝骨关节炎患者的临床疗效及对患者Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法 选取2018年11月至2020年10月首都医科大学附属友谊医院中医科门诊膝骨关节炎患者92例作为研究对象,按照随机数字表法分为2组,每组46例,2组均行平衡火罐治疗,治疗组予深温针灸治疗,对照组予浅温针灸治疗,均每次30 min,每日1次,10 d为1个疗程,2个疗程间间隔2 d,治疗3个疗程。统计2组临床疗效,比较2组治疗前及治疗1、3个疗程后症状评分、Lysholm膝关节功能康复量表(LKSS)评分、McGill疼痛问卷(MPQ)评分,以及转化生长因子β(TGF-β)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)水平,TLR4、NF-κB蛋白表达水平。结果 治疗组总有效率89.13%(41/46),高于对照组71.74%(33/46)(P<0.05)。治疗1、3个疗程后,2组症状评分、LKSS评分、MPQ评分均较本组治疗前改善(P<0.05),...     

益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤及骨微结构的影响

目的 探讨益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤和骨微结构的作用及机制。方法 通过剪断大鼠右后膝关节前交叉韧带建立膝骨关节炎大鼠模型,假手术组只切开皮肤不剪断前交叉韧带,将造模成功的大鼠分为模型组、塞来昔布组及益肾活络逐痛汤低、中、高剂量组,各给药组灌胃给予相应剂量药液,假手术组和模型组灌胃给予生理盐水。给药前后测定大鼠行为学变化。给药结束后,检测大鼠血清IL-6、TNF-α水平,HE染色、甲苯胺蓝染色、番红固绿染色及Mankin评分评价关节软骨损伤情况,免疫组化染色分析关节软骨COL-Ⅱ、MMP-13、p-p38和NF-κB p65蛋白表达,Micro-CT分析骨微结构。结果 益肾活络逐痛汤可改善膝骨关节炎大鼠行为学变化(P<0.05,P<0.01);降低血清IL-6、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01);降低软骨组织MMP-13、p-p38和NF-κB p65蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高COL-Ⅱ蛋白表达(P<0.01);升高软骨下骨BMD、Tb.Th、Tb.N、BV/TV值(P<0.05,P<0.01)...     

基于LXRs/NF-κB信号通路对A型滑膜细胞的调控探讨壮骨健膝方的作用机制北大核心CSCD

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体(LXRs)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC-MS/MS)进行质量控制(龙胆苦苷885 ng/mL、阿魏酸185 ng/mL)。将兔A型滑膜细胞随机分为空白组和LPS组,LPS组经LPS诱导后建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后随机分为模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组、核受体辅助抑制因子(N-CoR)抑制剂组,分别予以10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+LXRα抑制剂、10%含药血清+N-CoR抑制剂,空白组予10%空白血清干预。干预24 h后,收集各组细胞及上清液,Western Blot、RT-qPCR检测各组细胞中LXRα、N-CoR、P50、P65蛋白及m RNA的表达,ELISA检测各组上清液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及MMP-13含量。结果与空白组比较,模型组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均升高(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达下降(P<0.01)。与模型组比较,壮骨健膝方组P50和P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达升高(P<0.01);LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01,P<0.05)。与壮骨健膝方组比较,LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组LXRα、N-CoR蛋白及mRNA表达下降(P<0.01),P50、P65蛋白及mRNA表达升高(P<0.01,P<0.05),两组IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论壮骨健膝方可通过上调LXRα和N-CoR蛋白及mRNA表达,下调P50、P65蛋白及mRNA表达,从而抑制LXRs/NF-κB信号通路的传导,减少下游炎症相关指标IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13的分泌,最终达到控制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。     

去氢吴茱萸碱对实验性胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用及机制研究

目的探讨去氢吴茱萸碱对实验性胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用及机制,为临床应用提供数据。方法选取雄性健康SD大鼠,采用乙酸烧灼法建立胃溃疡模型。将40只模型大鼠随机分为模型组,去氢吴茱萸碱低、高(6.25、12.5 mg/kg)剂量组和阳性对照(奥美拉唑10 mg/kg)组,另取10只健康大鼠设为假手术组。各组大鼠ig相应剂量药物,假手术组与模型组大鼠则给予等量生理盐水。14 d后,比较各组大鼠的胃溃疡面积、胃溃疡抑制率、胃黏膜修复因子、血清氧化应激因子、血清炎症因子、胃组织相关蛋白水平。结果与模型组比较,去氢吴茱萸碱可显著降低胃黏膜溃疡面积(P0.05、0.01),显著升高胃溃疡抑制率;可有效促进胃组织中三叶因子1(TFF1)和胃组织表皮生长因子(EGF)水平的增加(P0.05、0.01);可明显降低大鼠血清中丙二醛(MDA)、环氧酶2(COX-2)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)水平;明显提高血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性(P0.05、0.01);同时大幅下调胃组织中Rho、ROCK1、ROCK2和NF-κB的表达水平(P0.05、0.01)。结论去氢吴茱萸碱可通过抗氧化应激、抗炎症因子对大鼠胃溃疡产生明显改善作用,其潜在作用机制可能与调控Rho/NF-κB信号通路有关。     

右归丸经IL-6/STAT3信号通路对膝骨关节炎模型大鼠软骨组织退变的调控机制

目的:观察右归丸对膝骨关节炎(KOA)模型鼠软骨组织信号转导和转录激活因子3(STAT3)和白细胞介素-6(IL-6)表达水平的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组、右归丸高、中、低剂量组,每组10只。采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,右归丸高、中、低剂量组分别给予右归丸4.8,2.4,1.2 g·kg^-1灌胃,硫酸氨基葡萄糖组给予硫酸氨基葡萄糖0.17 g·kg^-1灌胃,连续给药8周。干预结束24 h后股动脉采血处死各组大鼠,取鼠膝关节软骨,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组软骨的病理改变,并进行Mankin评分;免疫组化法检测各组关节软骨组织中STAT3,超氧化物歧化酶3(SOD3)和Wnt抑制因子1(WIF1)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测软骨组织中IL-6 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组关节软骨组中WIF1蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织Makin评分明显升高,软骨组织STAT3在蛋白水平上的表达明显增加和IL-6 mRNA水平上的表达显著增加,WIF1在蛋白水平上的表达显著降低(P<0.01);模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱。与模型组比较,右归丸高剂量干预组大鼠软骨组织Makin评分,STAT3的在蛋白水平上的表达明显降低,右归丸各干预组IL-6 mRNA水平上的表达显著降低,WIF1在蛋白水平上的表达显著增加(P<0.05,P<0.01),软骨结构趋于正常,软骨细胞分布仅偶见不均,关节软骨表面欠光滑。结论:右归丸能显著改善KOA大鼠的关节软骨退变,抑制KOA中软骨组织的炎症反应,这可能与其抑制STAT3和IL-6的表达有关。     

骨炎定对兔实验性膝骨关节炎关节软骨的组织病理学影响

目的 :探讨骨炎定对兔实验性膝骨关节炎关节软骨的组织病理学影响。方法 :新西兰兔 36只 ,建立Hulth膝骨关节炎模型 ,术后随机分成 3组 :骨炎定组、醋氨酚组和模型组。各组采取相应的处理方法 ,术后 4、 8和 12周取材 ,进行组织病理学评估。结果 :骨炎定组的关节软骨病理变化总积分、软骨细胞病理改变积分和软骨表层病理改变积分均明显低于醋氨酚组和模型组 (P <0 0 5和P <0 0 1)。结论 :骨炎定能延缓膝骨关节炎的病理过程 ,达到防治膝骨关节炎的作用     

针刺联合非甾体抗炎药对膝骨关节炎急性期患者关节积液炎症因子水平的影响研究

目的：探究针刺联合非甾体抗炎药（NSAIDs）降低膝骨关节炎（KOA）急性期患者关节积液炎症因子水平的效果。方法：选取在台州市中医院诊断为KOA急性期并符合纳入标准的60例患者，随机分为观察组和对照组各30例，对照组予塞来昔布胶囊治疗，观察组在对照组基础上给予针刺治疗，治疗前后行疼痛评分（VAS）、西安大略和麦克马斯特大学关节炎（WOMAC）评分；并抽取关节液进行炎症因子水平分析。结果：治疗后两组均有改善，观察组VAS评分、WOMAC评分、炎症因子显著降低（P<0.05），观察组总有效率较对照组显著提升（P<0.05）。结论：针刺联合NSAIDs药物治疗急性期KOA效果显著，能够显著缓解疼痛和提高患者生活质量，同时可以显著降低KOA急性患者关节液的炎症因子水平。     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨川膝散对肾虚血瘀型膝骨性关节炎的作用机制

目的:探讨川膝散通过TLR4/NF-κB信号通路对肾虚血瘀型膝骨性关节炎的作用机制。方法:纳入2021年1月—2022年12月至杭州市富阳中医骨伤医院就诊的膝骨性关节炎患者90例,随机分为对照组和观察组,每组各45例。对照组接受股四头肌锻炼、外用消炎止痛膏及口服硫酸氨基葡萄糖治疗,观察组接受对照组治疗的同时增加川膝散治疗。治疗前和治疗1个月后对两组患者进行膝关节疼痛VAS评分、JOA评分、WOMAC骨关节炎指数评分并检测血清Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、白介素1b(IL-1b)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)变化。结果:两组患者膝关节疼痛VAS评分、JOA评分及WOMAC评分治疗前比较无明显统计学差异(P>0.05);治疗1个月后,两组患者VAS评分、JOA评分及WOMAC评分均较治疗前有改善,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,观察组VAS评分及WOMAC评分更低,而JOA评分更高,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前血清TLR4、NF-κB p65、IL-1b、TNF-α水平比较无明显统计学差异(...     

石氏温经宣痹通络汤对小鼠膝骨关节炎软骨组织的保护作用

目的：观察石氏温经宣痹通络汤对膝骨关节炎小鼠软骨组织的影响。方法：将40只无特定病原体级C57BL雄性小鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西乐葆组,每组10只,采用内侧半月板失稳法建立膝骨关节炎模型。每组分别给予相应的药物。治疗周期结束后,取小鼠膝关节软骨进行苏木素-伊红染色剂和番红固绿染色剂染色,光镜下观察软骨组织学变化和类胰岛素生长因子1(Insulin-like Growth Factor 1,IGF-1)分布情况,进行染色强度的积分吸光度图像分析。结果：光镜下显示,中药组小鼠软骨结构基本完整,透明软骨无明显纤维化,关节软骨病理积分低于模型组,差异有统计学意义（P <0.05）,而中药组与西乐葆组的差异无统计学意义（P> 0.05）;免疫组化分析：中药组IGF-1染色强度的积分吸光度高于模型组,差异有统计学意义（P <0.05）;中药组IGF-1染色强度的积分吸光度与西乐葆组比较,差异无统计学意义（P> 0.05）。结论：石氏温经宣痹通络汤具有修复软骨损伤、阻止透明软骨纤维化、保持与恢复软骨细胞结构完整性的作用,可用于治疗小鼠膝骨性关节炎,但作用并不优于塞...     

中医手法对兔膝骨关节炎软骨退变及MAPK信号转导通路的影响

目的观察中医手法对实验性兔膝骨关节炎软骨退变的干预作用,并从细胞信号转导角度探讨其作用机制。方法 24只新西兰大白兔随机分为3组,即正常组、模型组和手法组,除正常组外,其余两组动物均采用手术方法建立膝骨关节炎模型。造模4周后对手法组给予髌骨按揉、关节被动屈伸等形式的手法治疗。干预8周后处死动物,暴露膝关节行形态学观察,并取股骨髁部做病理切片,行HE染色,镜下观察其组织病理学特征并进行Mankin’s评分,比较各组关节软骨退变情况。应用RT-PCR方法分别检测滑膜组织中IL-1β、i NOS、MMP-13和软骨组织中P38、ERK1/2的mRNA表达水平。应用Western blot方法检测软骨组织内MMP-13及磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达。比较各组实验数据并进行统计学分析。结果手法组关节软骨退变程度较模型组明显减轻,Mankin’s评分分值显著低于模型组(P0.05)。手法组软骨P38、ERK1/2及滑膜组织IL-1β、i NOS、MMP-13的mRNA表达水平较模型组显著下调(P0.05)。模型组和手法组的MMP-13、p-ERK1/2的蛋白表达较正常关节软骨明显增强,而手法组MMP-13、p-ERK1/2的蛋白活化程度与模型组比较明显受到抑制。结论中医手法能够有效抑制膝骨关节炎的软骨退变程度,影响炎症介质和细胞因子的表达,其机制可能是通过抑制软骨MAPK信号转导通路发挥作用。     

汉黄芩苷对糖尿病大鼠肾组织炎症因子表达及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨汉黄芩苷对糖尿病模型大鼠肾组织炎症因子表达及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法采用腹腔注射STZ(60 mg/kg)法复制糖尿病大鼠模型,分为模型组、汉黄芩苷高(40 mg/kg)、中(20 mg/kg)、低(10 mg/kg)剂量组及正常组,每组10只;灌胃给药,连续8周。检测各组大鼠体质量,肾脏指数,FBG、INS、UmAlb、Scr、BUN水平,肾组织病理形态,TNF-α、IL-1β、IL-18、TLR4、NF-κB p-p65及NF-κB p65等指标变化情况。结果与模型组比较,汉黄芩苷组大鼠体质量升高(P<0.01),而肾脏指数及FBG、INS水平均降低(P<0.01);大鼠UmAlb水平及血清Scr、BUN水平均降低(P<0.01),且病理形态均有一定程度的改善,大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-18水平及肾组织TLR4、NF-κB p-p65蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论汉黄芩苷可以通过抑制炎症因子表达及调控TLR4/NF-κB信号通路的活化,发挥保护糖尿病模型大鼠肾组织损伤作用。     

加味阳和汤对膝骨关节炎大鼠模型基质金属蛋白酶调控及软骨保护作用研究

目的:观察加味阳和汤对软骨细胞MMP-3,9,13及Col2a调控作用及对碘乙酸诱导KOA模型大鼠的软骨保护作用。方法:软骨细胞提取于3周龄SD大鼠关节软骨,第三代软骨细胞加入梯度浓度加味阳和汤干预后使用IL-1β诱导炎症。MTT检测加味阳和汤最佳干预浓度。Western Blot检测MMP-3,9,13及Col2a表达。组织病理学切片KOA大鼠模型软骨退变情况并行Mankin评分。结果:Western Blot结果示加味阳和汤能有效下调异常增高的MMP-3、9、13并上调Col2a表达。Mankin评分结果提示加味阳和汤能有效延缓退变。结论:加味阳和汤可通过抑制MMPs表达从而保护软骨。     

塞来昔布对大鼠骨关节炎模型关节软骨中NF-κB表达的影响

目的研究塞来昔布对大鼠骨关节炎模型关节软骨中核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法选择健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、骨关节炎组(OA组)和塞来昔布治疗组,每组10只。利用膝关节注射4%的木瓜蛋白酶溶液的方法制作骨关节炎模型。术后8周,采用关节炎评分法评定各组大鼠平均关节炎指数(MAI),Western blot方法检测关节软骨中NF-κB蛋白的表达情况,RT-PCR方法检测关节软骨中NF-κB mRNA的表达情况。结果对照组关节无任何异常变化;OA组随着造模时间的延长,关节出现了重度红肿现象;与OA组比较,塞来昔布治疗组的关节炎症反应呈现消退现象。术后8周,NF-κB蛋白及mRNA在对照组大鼠关节软骨仅有微量表达,而在OA组大鼠关节软骨表达则显著升高(P0.01);与OA组相比,塞来昔布治疗组大鼠关节软骨中NF-κB蛋白及mRNA表达均显著降低(P均0.01)。结论塞来昔布可通过下调NF-κB的表达来减轻骨关节炎的炎症反应。