仙鹿健骨汤对膝骨性关节炎大鼠关节软骨损伤的修复作用及机制研究

目的观察仙鹿健骨汤对膝骨性关节炎(KOA)大鼠关节软骨损伤的修复作用并探讨其机制。方法 SD大鼠100只,根据体质量随机分成5组:对照组、模型组、仙鹿健骨汤各剂量组;模型组、仙鹿健骨汤各剂量组构建KOA大鼠关节软骨损伤模型,并于造模成功第1天开始给予相应药物灌胃,持续给予3个月,对照组和模型组给予等体积0.9%氯化钠注射液。试验结束后,测定大鼠膝骨性骨关节炎软骨Mankin′s评分、p38m RNA、NF-κB mRNA、p38、NF-κB、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白水平。结果与对照组比较,模型组、仙鹿健骨汤各剂量组KOA软骨Mankin′s评分、p38、NF-кB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平明显升高(P 0.05);与模型组比较,仙鹿健骨汤各剂量组KOA软骨Mankin′s评分、p38、NF-κB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P 0.05),且随着仙鹿健骨汤给药剂量的增加,KOA软骨Mankin′s评分、p384、NF-κB mRNA、蛋白表达水平、MMP-9、MMP-13、IL-1β蛋白表达水平逐渐降低,剂量-效应关系明显(P 0.05)。结论仙鹿健骨汤能明显减轻软骨细胞损伤程度,对KOA关节软骨损伤具有一定程度的修复作用,其机制与仙鹿健骨汤组能通过抑制炎症信号通路p38、NF-κB m RNA、蛋白表达水平的表达进而抑制细胞因子MMP-9、MMP-13、IL-1β的表达有关。     

益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤及骨微结构的影响

目的 探讨益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤和骨微结构的作用及机制。方法 通过剪断大鼠右后膝关节前交叉韧带建立膝骨关节炎大鼠模型,假手术组只切开皮肤不剪断前交叉韧带,将造模成功的大鼠分为模型组、塞来昔布组及益肾活络逐痛汤低、中、高剂量组,各给药组灌胃给予相应剂量药液,假手术组和模型组灌胃给予生理盐水。给药前后测定大鼠行为学变化。给药结束后,检测大鼠血清IL-6、TNF-α水平,HE染色、甲苯胺蓝染色、番红固绿染色及Mankin评分评价关节软骨损伤情况,免疫组化染色分析关节软骨COL-Ⅱ、MMP-13、p-p38和NF-κB p65蛋白表达,Micro-CT分析骨微结构。结果 益肾活络逐痛汤可改善膝骨关节炎大鼠行为学变化(P<0.05,P<0.01);降低血清IL-6、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01);降低软骨组织MMP-13、p-p38和NF-κB p65蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高COL-Ⅱ蛋白表达(P<0.01);升高软骨下骨BMD、Tb.Th、Tb.N、BV/TV值(P<0.05,P<0.01)...     

补骨脂对骨关节炎软骨细胞模型基质金属蛋白酶及核因子-κB表达的影响

目的?探索补骨脂对骨关节炎（OA）软骨细胞模型基质金属蛋白酶（MMPs）与核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法?通过细胞增殖实验确定补骨脂干预细胞的高、中、低剂量分别为3 600、1 800、9 00mg/L。将细胞分为正常组、模型组（10 ng/mL IL-1β）、补骨脂低剂量组（10 ng/mL IL-1β+ 900 mg/L补骨脂）、补骨脂中剂量组（10 ng/mL IL-1β+ 1 800 mg/L补骨脂）、补骨脂高剂量组（10 ng/mL IL-1β+ 3 600 mg/L补骨脂 ）。采用10 ng/mL IL-1β诱导人软骨肉瘤细胞（SW1353）炎症反应，构建OA软骨细胞模型。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA表达，蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测MMP-1、MMP-3、MMP-13、NF-κB p65、NF-κB 抑制蛋白 α （IκB-α）蛋白表达，及免疫荧光观察NF-κB p65蛋白表达。结果?与正常组比较，模型组细胞内MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达增加，胞核内NF-κB p65蛋白表达增加，胞浆中IκB-α蛋白表达减少（P<0.01）。与模型组比较，补骨脂高剂量组细胞内MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达明显减少，胞核内NF-κB p65蛋白表达明显减少，胞浆中IκB-α蛋白表达显著增加（P<0.01）。免疫荧光显示，高剂量补骨脂能部分抑制胞浆中NF-κB p65蛋白转移至胞核内。结论?补骨脂可通过抑制NF-κB通路，下调MMP-3、MMP-13表达，起到保护软骨的作用。     

电针对膝骨关节炎兔NF-κB信号通路及滑膜炎症的影响

目的观察电针对膝骨关节炎兔滑膜组织核因子-κB(NF-κB)信号通路中Toll样受体2(TLR2)、NF-κB、髓样分化因子88(MyD88)以及关节液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响,探讨电针治疗膝骨关节炎的作用机制。方法将24只实验用新西兰大白兔随机分为空白组、模型组和电针组,每组8只。模型组及电针组采用改良Hulth法制备膝骨关节炎模型,造模成功后,电针组给予电针治疗2周,模型组与空白组正常饲养。记录各组兔造模结束及术后2周改良膝骨关节炎严重程度指数(Lequesne MG);术后2周采用酶联免疫吸附法检测各组兔关节冲洗液中TNF-α、MMP-13水平,HE染色观察各组兔滑膜组织形态学变化,Western blot法检测各组兔滑膜组织中TLR2、NF-κB、MyD88蛋白表达量。结果模型组兔行为学Lequesne MG指数,关节液中TNF-α、MMP-13水平,滑膜krenn评分及滑膜组织中TLR2、NF-κB、MyD88蛋白表达量均显著高于空白组(P均0.05),电针组兔上述指标均显著低于模型组(P均0.05)。结论电针能够通过抑制膝骨关节炎滑膜NF-κB信号通路降低关节液中TNF-α、MMP-13表达,减轻滑膜组织的炎症反应,从而达到治疗膝骨关节炎的目的。     

龙胆苦苷对创伤性骨关节炎大鼠关节软骨的保护作用机制研究

目的探讨龙胆苦苷通过核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对创伤性骨关节炎大鼠关节软骨的保护作用机制。方法将30只雄性SD大鼠根据随机数字表法分为对照组、模型组和龙胆苦苷治疗组。模型组和龙胆苦苷治疗组制作大鼠创伤性骨关节炎模型,对照组只切开关节腔,在造模1周后对龙胆苦苷治疗组大鼠灌胃给予龙胆苦苷溶液,对照组和模型组给予等量蒸馏水,连续8周,进行病理学检测和Mankin评分,检测软骨组织中一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量以及NF-κB和NF-κB抑制蛋白(I-κB)蛋白的水平。结果龙胆苦苷治疗组膝关节软骨组织在变性、坏死方面均较模型组轻;与对照组比较,模型组和龙胆苦苷治疗组Mankin评分、大鼠膝关节软骨组织中NO和TNF-α含量、大鼠膝关节软骨组织中NF-κB蛋白水平增加,大鼠膝关节软骨组织中I-κB蛋白水平降低(P 0.05);与模型组比较,龙胆苦苷治疗组Mankin评分、大鼠膝关节软骨组织中NO和TNF-α含量、大鼠膝关节软骨组织中NF-κB蛋白水平降低,大鼠膝关节软骨组织中I-κB蛋白水平增高(P 0.05)。结论龙胆苦苷能够改善创伤性骨关节炎大鼠关节软骨的形态、降低软骨组织中NO和TNF-α含量,减轻软骨退变,其机制可能与降低了NF-κB蛋白水平,增加了I-κB蛋白水平有关。     

乌头注射液关节腔注射对膝骨关节炎模型兔关节液IL-1β、IL-18、NF-κB p65的影响

目的:观察关节腔注射乌头注射液对膝骨关节炎模型兔关节液IL-1β、IL-18、NF-κB p65等指标的影响,初步探讨乌头注射液治疗骨性关节炎的可能作用机理。方法:50只兔随机分为正常组、模型组、玻璃酸钠组、正清风痛宁组和乌头注射液组,除正常组外其余各组兔经关节腔注射木瓜蛋白酶诱导骨关节炎模型,2周后各组分别于第1、4、7、10d共4次关节腔注射给药,1周后处死兔子取膝关节软骨组织,光镜下观察组织形态学改变并进行Mankin评分,采用Elisa法检测关节液IL-1β、IL-18、NF-κB p65含量。结果:乌头注射液组关节软骨病理改变Mankin评分总积分较模型组和玻璃酸钠组明显降低,乌头注射液组关节液中IL-1β、IL-18、NF-κB p65含量较模型组和玻璃酸钠组均明显降低,IL-18含量较正清风痛宁组明显减低,组间比较均有统计学意义(P0.05)。结论:乌头注射液对膝关节骨性关节炎模型兔的关节软骨病理改变有一定作用,可能与其抑制关节液中炎症因子IL-1β、IL-18、NF-κB p65的表达有关,其作用可能与激活NF-κB信号通路有关。     

氧化苦参碱对感染性休克大鼠心肌组织细胞因子的影响

目的 探讨氧化苦参碱对感染性休克大鼠心肌组织核因子-κB (NF-κB)等细胞因子的影响.方法 采用大鼠盲肠结扎穿孔法制备大鼠感染性休克模型.造模后56只SD大鼠随机分为假手术组,氧化苦参碱对照组,模型组,氧化苦参碱高、中、低剂量(52、26、13 mg/kg)组、地塞米松阳性对照(10 mg/kg)组,各组给药1次.采用RT-PCR法测定心肌组织NF-κB (p65) mRNA的表达;Western blotting法测定心肌组织NF-κB (p65)及IκB-α的表达;放射免疫分析法测定心肌组织匀浆中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)量的改变.结果 氧化苦参碱能显著抑制大鼠心肌组织NF-κB(p65) mRNA的表达及NF-κB (p65)和IκB-α的活性(P＜0.05),降低心肌组织匀浆中TNF-α及IL-1β的量(P＜0.05).结论 氧化苦参碱能通过抑制NF-κB (p65) mRNA的表达及诱导NF-κB激酶(NF-κB-inducing kinase,NIK)的活化,抑制细菌、病毒等对NF-κB的激活作用,减少TNF-α、IL-1β等促炎因子的表达,进而对感染性休克大鼠心肌损伤性病变发挥治疗作用.     

基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响

目的基于NF-κB信号通路探讨散寒化痰方外敷对兔模型膝骨关节炎的影响。方法以改良Hulth法制备兔KOA模型。将36只新西兰兔随机分为正常组、模型组、阳性对照组(扶他林软膏)及散寒化痰方低、中、高剂量组,每组6只,外敷给药6周。HE染色、MASSON染色法及电镜分别观察家兔膝关节软骨组织形态学及软骨细胞超微结构变化;ELISA法测兔血清IL-1β、TNF-α水平;Western blot及RT-PCR检测MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5、CollagenⅡ蛋白及mRNA表达;免疫组化法检测NF-κB p65入核表达。结果与正常组比较,模型组兔膝关节软骨细胞结构破坏严重;血清IL-1β、TNF-α水平上升(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达上调(P0.05,P0.01),CollagenⅡ蛋白及mRNA表达下调(P0.01),NF-κB p65入核表达升高(P0.05)。与模型组比较,散寒化痰方各剂量组兔膝关节软骨细胞结构仅轻度损伤,血清IL-1β、TNF-α水平降低(P0.01),MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5蛋白及mRNA表达下调(P0.05,P0.01),NF-κB p65入核表达降低(P0.05,P0.01);散寒化痰方低、高剂量组兔膝关节软骨组织中CollagenⅡ蛋白及mRNA表达均上调(P0.05,P0.01)。结论散寒化痰方可能通过抑制膝关节软骨细胞NF-κB p65入核表达,阻止NF-κB信号通路激活,下调MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5及上调CollagenⅡ表达,抑制兔血清IL-1β、TNF-α水平升高,进而保护膝骨关节软组织,延缓KOA发生与发展。     

塞来昔布对大鼠骨关节炎模型关节软骨中NF-κB表达的影响

目的研究塞来昔布对大鼠骨关节炎模型关节软骨中核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法选择健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、骨关节炎组(OA组)和塞来昔布治疗组,每组10只。利用膝关节注射4%的木瓜蛋白酶溶液的方法制作骨关节炎模型。术后8周,采用关节炎评分法评定各组大鼠平均关节炎指数(MAI),Western blot方法检测关节软骨中NF-κB蛋白的表达情况,RT-PCR方法检测关节软骨中NF-κB mRNA的表达情况。结果对照组关节无任何异常变化;OA组随着造模时间的延长,关节出现了重度红肿现象;与OA组比较,塞来昔布治疗组的关节炎症反应呈现消退现象。术后8周,NF-κB蛋白及mRNA在对照组大鼠关节软骨仅有微量表达,而在OA组大鼠关节软骨表达则显著升高(P0.01);与OA组相比,塞来昔布治疗组大鼠关节软骨中NF-κB蛋白及mRNA表达均显著降低(P均0.01)。结论塞来昔布可通过下调NF-κB的表达来减轻骨关节炎的炎症反应。     

蠲痹胶囊对膝骨关节炎豚鼠关节软骨组织形态及滑膜中Toll样受体4、NF-κB p65及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察蠲痹胶囊对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)豚鼠关节软骨组织形态及滑膜中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、NF-κB p65及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响,探讨其治疗KOA的可能作用机制。方法:将40只1月龄豚鼠随机分为正常组、3月龄组、5月龄组、氨基葡萄糖组和蠲痹胶囊组,每组8只。分组后正常组豚鼠直接进行标本采集,其余4组饲养至3月龄建立自发性KOA模型。造模结束后,3月龄组豚鼠进行标本采集;5月龄组、氨基葡萄糖组和蠲痹胶囊组分别以纯水、盐酸氨基葡萄糖胶囊和蠲痹胶囊灌胃,每天1次,连续干预2个月后进行标本采集。采集标本为豚鼠左后下肢膝关节髌下韧带表面的滑膜和胫骨内侧平台软骨,制成石蜡切片。软骨组织切片以番红固绿染色后光镜下观察软骨组织形态,采用Mankin’s病理评分标准进行评分;滑膜组织切片进行免疫组织化学染色(SP法),用Image-pro Plus 6.0图像分析软件对阳性染色的平均光密度值进行半定量分析,测定指标包括TLR4、NF-κB p65及TNF-α的表达水平。结果:5组豚鼠关节软骨Mankin’s评分比较,差异有统计学意义[(0.132±0.125)分,(5.011±0.180)分,(7.324±0.293)分,(4.250±0.250)分,(2.500±0.327)分,F=108.400,P=0.000];3月龄组评分高于正常组(P=0.000),5月龄组评分高于3月龄组(P=0.000),氨基葡萄糖组评分低于5月龄组(P=0.000),蠲痹胶囊组评分低于氨基葡萄糖组(P=0.000)。5组豚鼠关节滑膜中TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量比较,组间差异均有统计学意义(0.000±0.000,0.268±0.021,0.454±0.043,1.879±0.013,0.116±0.015,F=97.000,P=0.000;0.023±0.019,0.251±0.142,0.525±0.103,0.217±0.087,0.211±0.019,F=40.293,P=0.000;0.047±0.023,0.386±0.142,0.812±0.174,0.289±0.151,0.204±0.108,F=78.242,P=0.000);3月龄组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均高于正常组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),5月龄组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均高于3月龄组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),氨基葡萄糖组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均低于5月龄组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),蠲痹胶囊组TLR4、NF-κB p65及TNF-α表达量均低于氨基葡萄糖组(P=0.011,P=0.019,P=0.008)。结论:蠲痹胶囊和盐酸氨基葡萄糖均可延缓KOA豚鼠关节软骨退变,蠲痹胶囊的作用更加明显;其作用机制可能是通过激活TLR4/NF-κB信号转导通路来抑制炎性因子TNF-α表达,从而减轻组织炎症反应。     

消肿止痛颗粒对大鼠膝骨性关节炎软骨中NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的:探讨消肿止痛颗粒对大鼠膝骨性关节炎软骨中核因子-κB(NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:将80只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、硫酸氨基葡萄糖片组和消肿止痛颗粒组4组,每组20只。除假手术外,其余3组通过改良Hulth法行膝骨关节炎造模。药物干预8周后,取各组大鼠膝关节软骨,用肉眼观察软骨大体形态学改变,光镜下观察各大鼠HE染色的病理变化,采用RT-PCR录际跫觳馊砉侵蠳F-κB、ICAM-1 mRNA的表达情况。结果:消肿止痛颗粒组关节软骨透明度略差于假手术组,软骨关节面欠光滑,个别区域颜色偏暗;消肿止痛颗粒组软骨组织损伤程度好于模型对照组,但比假手术组损伤程度严重,不规则排列的软骨细胞在部分区域仍可见。与模型对照组对比,消肿止痛颗粒组关节软骨组织中NF-κB、ICAM-1mRNA表达明显降低,差别有统计学意义(P0.05)。结论:消肿止痛颗粒可通过降低NF-κB、ICAM-1mRNA含量表达,保护膝关节骨性关节炎大鼠关节软骨的病理改变,从而减轻关节损伤,保护关节软骨,延缓病情进展。     

独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠IL-17/NF-κB通路的影响

目的:探讨独活寄生汤通过调控IL-17/NF-κB信号通路治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、独活寄生汤组和双醋瑞因组,采用关节腔注射碘乙酸钠溶液建立KOA模型。确认造模成功后,分别采用药物干预30 d,观察大鼠膝关节软骨病理形态变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。Real-time PCR和免疫组化法检测软骨核因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、NF-κB激活剂1(ACT1)mRNA和蛋白表达水平。结果:独活寄生汤组大鼠膝关节软骨表面稍不平整,软骨细胞数量减少,排列较规则,软骨基质轻染。与正常组比较,模型组大鼠血清IL-17、TNF-α表达水平升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组大鼠血清IL-17、TNF-α表达下降(均P<0.05)。与正常组比较,模型组TRAF6 mRNA表达升高,NF-κB p65、ACT1 mRNA表达升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组NF-κB p65、ACT1、TRAF6 mRNA表达降低(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠软骨NF-κB p65、TRAF6和ACT1蛋白表达水平升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组大鼠软骨NF-κB p65、TRAF6、ACT1的蛋白表达降低(均P<0.01)。结论:独活寄生汤通过调节IL-17/NF-κB信号通路,降低IL-17、TNF-α促炎因子表达,有效缓解KOA模型大鼠症状。     

补肾活血方对膝骨关节炎大鼠MMP-3、MMP-13及OPG/RANKL轴的影响

目的:检测不同质量分数的补肾活血方对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠模型膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化受体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)轴相关因子mRNA表达的影响,探讨补肾活血方对KOA大鼠模型骨重建及治疗作用的机制。方法:采用随机数字表法将48只Wistar大鼠分为正常对照组,模型对照组,依托考昔片组,补肾活血方中药小、中、大剂量组6组,每组8只。采用木瓜蛋白酶膝关节腔内注射法制备KOA大鼠模型。确认造模成功后,依托考昔片组给予依托考昔3.125μg/g混悬液灌胃,补肾活血方小、中、大剂量组分别给予补肾活血方0.52,1.04,2.08 g/kg混悬液灌胃,正常对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水灌胃,1d1次,连续4周。给药结束后,对KOA模型鼠进行关节软骨退行性改变组织学分级评分(Mankin′s评分),采用实时荧光定量核酸扩增检测系统检测关节软骨内MMP-3、MMP-13、OPG、RANKL的mRNA表达水平。结果:KOA造模后大鼠膝关节软骨Mankin′s评分较正常对照组升高,差异有统计学意义(P0.05);经各治疗组药物治疗后,评分有所下降(P0.05)。模型对照组大鼠MMP-3、MMP-13及RANKL的mRNA表达较正常对照组显著上调,而OPG mRNA有所下降(P0.05);经依托考昔及中药治疗后,MMP-3、MMP-13及RANKL的mRNA表达有不同程度下降,其中大剂量组与依托考昔片组相近;经依托考昔及中、大剂量补肾活血方治疗后,OPG mRNA表达有所上升(P0.05)。结论:补肾活血方能提高模型鼠膝关节软骨内OPG的mRNA表达,降低MMP-3、MMP-13和RANKL的mRNA表达水平,可能是通过调节关节腔内的骨代谢平衡来改善关节软骨损伤、延缓骨关节炎病情进展的。     

木瓜三萜对佐剂性关节炎大鼠关节滑膜组织中Akt,NF-κB和促炎因子的表达影响

目的:观察木瓜三萜对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠关节滑膜组织中Akt,核转录因子-κB(NF-κB)和炎症因子表达影响,在此基础上探讨其可能机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、木瓜总三萜中、高剂量组(50,100 mg·kg~(-1)),除正常组外,其余大鼠右后足跖注射弗氏佐剂造模,木瓜三萜(50,100 mg·kg-1)灌胃(ig)给药,足容积法测量致炎侧足肿胀、进行关节评分;光学显微镜观察关节滑膜病理变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠关节滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)含量,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测关节滑膜组织中蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和人核转录因子-κB p65(NF-κB p65)表达水平。结果:与正常组比较,大鼠致炎后14 d关节肿胀度达峰值,可见模型组关节滑膜组织炎症反应,如滑膜组织增生,炎细胞浸润;关节组织中TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-8含量明显上升,p-Akt和NF-κB p65表达增多(P0.01);与模型组比较,木瓜三萜中、高剂量组能显著抑制AA大鼠足爪肿胀、降低多发性关节评分及改善关节滑膜组织病理变化,降低滑膜组织病理评分,降低关节滑膜组织中TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-8含量及p-Akt和NF-κB p65蛋白表达水平(P0.05,P0.01)。结论:木瓜三萜具有显著的抗炎作用,抑制Akt/NF-κB信号通路激活及促炎因子生成可能是其发挥抗炎作用的重要机制之一。     

壮骨健膝方对兔膝骨关节炎滑膜炎症肝X受体/核因子κB通路的影响

目的：基于肝X受体/核因子κB信号通路观察壮骨健膝方对兔膝骨关节炎滑膜炎症模型的影响,探讨其对滑膜炎症的作用及机制。方法：将24只新西兰大白兔随机分为正常组6只和造模组18只。造模组行膝关节腔内注射木瓜蛋白酶建立兔膝骨关节炎滑膜炎症模型。造模成功后将模型兔随机分为模型组、扶他林组和壮骨健膝方组,每组6只。扶他林组和壮骨健膝方组分别给予扶他林混悬液、壮骨健膝方药液灌胃,模型组和正常组给予等量生理盐水灌胃。观察干预前后各组兔膝关节皮温、周径、Lequesne MG评分;膝关节液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、MMP-13含量;滑膜组织评分;滑膜组织中LXRα、N-CoR、P50、P65 mRNA的表达情况。结果：与正常组比较,模型组兔一般情况差,膝关节皮温、周径、Lequesne MG评分、膝关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量、滑膜组织评分、P50和P65 mRNA表达均升高（均P<0.05）,滑膜组织中LXRα和N-CoR mRNA表达降低（均P<0.05）。与模型组比较,壮骨健膝方组及扶他林组膝关节皮温、周径、Lequesne MG评分、膝关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量、滑膜组织评分、P50和P65 mRNA表达均较低（均P<0.05）,壮骨健膝方组LXRα与N-CoR mRNA表达升高（均P<0.05）,扶他林组LXRα与N-CoR mRNA表达差异无统计学意义（均P>0.05）。与扶他林组比较,壮骨健膝方组LXRα、N-CoR mRNA表达升高（均P<0.05）,关节周径较小（P<0.05）,其余指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论：壮骨健膝方可能通过调控肝X受体/核因子κB信号通路的转导,减少下游炎症介质分泌,达到抑制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。     

多巴胺对骨关节炎的治疗作用及相关分子机制研究

目的:探讨多巴胺(DA)对骨关节炎的治疗作用及相关分子机制。方法:SPF级别雄性SD大鼠60只,随机分为模型组、多巴胺5μg/kg组、多巴胺10μg/kg组、多巴胺15μg/kg组、假手术组、阳性对照组。采用右膝关节前韧带交叉切断术建立骨关节炎(OA)大鼠模型,检测大鼠的机械性痛阈值和膝关节直径;采用ELISA法检测大鼠外周血液中白细胞介素(IL)-1β,IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;采用RT-PCR法检测大鼠关节组织中IL-1β,IL-6,TNF-α,金属基质蛋白酶(MMP)-3,MMP-9和MMP-13 mRNA表达水平;采用HE染色和番红固绿染色检测大鼠关节组织的病理学变化;采用Western Blot法检测大鼠关节组织中MMP-3,MMP-9,MMP-13,Akt,p-Akt,p-Iκ-Bα,Iκ-Bα,p-p65和p65蛋白表达水平。结果:多巴胺显著增加OA大鼠的机械性痛阈值,并减小OA大鼠的膝关节直径,差异有统计学意义(P0.05);同时下调OA大鼠外周血液中IL-1β,IL-6及TNF-α的表达水平,差异有统计学意义(P0.05);多巴胺显著下调OA大鼠关节组织中IL-1β,IL-6,TNF-α,MMP-3,MMP-9及MMP-13 mRNA表达水平,并缓解OA大鼠关节组织中炎性细胞浸润和软骨基质降解,差异有统计学意义(P0.05);除此之外,多巴胺显著下调OA大鼠关节组织中MMP-3,MMP-9,MMP-13,p-Akt/Akt,p-Iκ-Bα/Iκ-Bα及p-p65/p65蛋白表达水平,差异有统计学意义(P0.05)。结论:多巴胺对骨关节炎治疗具有潜在的价值,且这种作用可能与抑制Akt/NF-κb信号通路活化有关。     

降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织IκB-α和NF-κBp65的影响

目的:探讨降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织κB抑制蛋白α(IκB-α)、核转录因子肽p65(NF-κBp65)的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸二甲双胍组、降糖方低、高剂量组,采用高脂饮食喂养4周,链脲佐菌素(STZ)腹膜内注射建立糖耐量异常大鼠模型,治疗8周后,观察骨骼肌组织病理变化,测定空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、骨骼肌组织IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA水平、骨骼肌组织白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白水平。结果:正常组大鼠骨骼肌组织结构正常,模型组骨骼肌排列紊乱、肌纤维断裂、可见明显炎症细胞浸润;盐酸二甲双胍及降糖方干预后,骨骼肌炎症细胞浸润减少,肌纤维排列趋于整齐。模型组大鼠FPG、FINS、HOMA-IR水平、血清TG、TC、LDL-C水平、骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白水平、骨骼肌组织IL-4、IL-12、TNF-α蛋白水平高于对...     

小钻木脂素类化合物戈米辛R的体外抗炎机制研究

目的 通过脂多糖(LPS)诱导活化小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7建立炎症模型,探讨小钻木脂素类化合物戈米辛R对炎症细胞增殖及炎症因子分泌的影响,评价其抗炎活性及机制。方法 采用MTT比色法检测经LPS诱导的RAW264.7细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC₅₀);采用ELISA法检测细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子含量;利用RT-PCR法检测细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IκB-α、NF-κB p65的mRNA表达量;Western blot法检测细胞IκB-α及NF-κB p65蛋白表达量。结果 与LPS模型组比较,戈米辛R可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞增殖;降低细胞分泌TNF-α、IL-1β及IL-6的含量;升高LPS所致降低的IκB-α mRNA的表达量同时降低LPS引起升高的TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB p65的mRNA表达量;升高IκB-α并降低NF-κB p65的蛋白表达量,显示出良好的剂量依赖性,具有统计学差异(P<0.05)。结论 戈米辛R可通过抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB p65的mRNA和NF-κB p65蛋白的表达,增加IκB-α mRNA和IκB-α蛋白的表达,减少致炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的释放,从而发挥显著抗炎活性。     

消栓通脉颗粒对深静脉血栓形成大鼠静脉壁NF-κB,ⅠκB表达的影响

目的:探讨中药消栓通脉颗粒治疗深静脉血栓形成的机制.方法:72只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、血栓模型组、复方丹参片组(0.23 g·kg-1,ig)、消栓通脉颗粒组(32g·kg-1,ig).连续给药5d后采用下腔静脉结扎法制备血栓模型,造模后4h连续给药,动态监测各组大鼠术后不同时间点静脉壁核因子κB mRNA(NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA),抑制因子κB mRNA(ⅠκBα mRNA)表达水平.结果:同一时间点,中药治疗组静脉壁NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA表达水平显著低于模型组(P＜0.01),而IκBα mRNA明显增高(P＜0.01);各组静脉壁NF-κB pS0 mRNA,NF-κB p65mRNA表达随手术天数的延长呈现先增强后减弱的趋势,术后3d达到高峰,而IκBα mRNA的表达呈先下降后升高的规律,术后3d降到低谷;与复方丹参片组比较,在同一时间点,消栓通脉颗粒剂组NF-κB p50 mRNA,NF-κB#5 mRNA表达明显降低(P＜0.01),而IκBα mRNA表达显著增高(P＜0.01).结论:消栓通脉颗粒剂可能通过调控NF-κB/IκB信号传导通路,减轻其介导的静脉壁炎症反应,保护血管内皮细胞功能,发挥抗血栓作用.     

基于LXRs/NF-κB信号通路对A型滑膜细胞的调控探讨壮骨健膝方的作用机制北大核心CSCD

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体(LXRs)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC-MS/MS)进行质量控制(龙胆苦苷885 ng/mL、阿魏酸185 ng/mL)。将兔A型滑膜细胞随机分为空白组和LPS组,LPS组经LPS诱导后建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后随机分为模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组、核受体辅助抑制因子(N-CoR)抑制剂组,分别予以10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+LXRα抑制剂、10%含药血清+N-CoR抑制剂,空白组予10%空白血清干预。干预24 h后,收集各组细胞及上清液,Western Blot、RT-qPCR检测各组细胞中LXRα、N-CoR、P50、P65蛋白及m RNA的表达,ELISA检测各组上清液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及MMP-13含量。结果与空白组比较,模型组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均升高(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达下降(P<0.01)。与模型组比较,壮骨健膝方组P50和P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达升高(P<0.01);LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01,P<0.05)。与壮骨健膝方组比较,LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组LXRα、N-CoR蛋白及mRNA表达下降(P<0.01),P50、P65蛋白及mRNA表达升高(P<0.01,P<0.05),两组IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论壮骨健膝方可通过上调LXRα和N-CoR蛋白及mRNA表达,下调P50、P65蛋白及mRNA表达,从而抑制LXRs/NF-κB信号通路的传导,减少下游炎症相关指标IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13的分泌,最终达到控制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。