黄精多糖对高脂血症小鼠脂代谢相关基因mRNA及蛋白表达的影响

该文旨在研究黄精多糖对高脂血症小鼠脂代谢相关基因mRNA及蛋白表达的影响,将小鼠随机分为空白对照组,高脂血症模型组,辛伐他汀组,黄精多糖低、中、高剂量组(200,400,800 mg·kg^-1·d^-1),连续给药14 d后,腹腔注射75%新鲜蛋黄乳剂建立高脂血症小鼠模型。给药结束后测定血清中TC,TG,LDL-C,HDL-C的含量;采用Real-time PCR法测定肝脏组织中PPAR-α,PPAR-β,PPAR-γ,SREBP-1c,IL-6,TNF-αmRNA的表达水平;通过Western blot法分析检测黄精多糖对脂代谢相关基因(PPAR-α,PPAR-β,PPAR-γ,SREBP-1c,IL-6,TNF-α)蛋白表达的影响,以探讨黄精多糖的降血脂机制。实验结果表明,黄精多糖低、中、高剂量组均能降低血清中TC,TG,LDL-C的含量,以中、高剂量组多糖效果最为显著(P<0.01),同时,黄精多糖低、中、高剂量组均能升高血清中HDL-C的含量,以中、高剂量组多糖效果最为显著(P<0.01);此外,黄精多糖中、高剂量组可显著上调肝脏中PPAR-α,PPAR-βmRNA和蛋白表达量(P<0.05),下调肝脏中PPAR-γ,SREBP-1c,IL-6,TNF-αmRNA和蛋白表达量(P<0.05)。以上研究表明黄精多糖具有抑制肝脏脂质氧化,调节与脂类代谢相关基因和蛋白表达的作用,进而起到防治高脂血症的功效。     

黄精粗多糖抗疲劳抗氧化作用的研究

目的 研究黄精粗多糖的抗疲劳和抗氧化作用.方法 抗疲劳实验:考察黄精粗多糖对小鼠负重游泳时间、血清尿素氮和肝糖原含量的影响;抗氧化实验:考察黄精粗多糖对溴苯诱导的小鼠肝损伤后MDA含量和GSH-Px活性的影响.将雄性SD小鼠随机分为黄精粗多糖高剂量组(0.72 g·kg-1)、中剂量组(0.36 g·kg<'-1)、低剂量组(0.18 g·kg<'-1)和空白对照组(蒸馏水),抗氧化实验加模型组,每组10只,连续灌胃14 d.结果 黄精粗多糖可显著延长小鼠负重游泳时间、降低运动后小鼠血清尿素氮含量及增加小鼠肝糖原含量,并呈剂量依赖关系;黄精粗多糖可显著降低溴苯所致小鼠肝损伤的脂质过氧化产物MDA含量、增加小鼠肝组织的过氧化物歧化酶GSH-Px含量,并呈剂量依赖关系.结论 黄精粗多糖具有明显的抗疲劳和抗氧化作用.     

滇黄精多糖的提取分离及含量测定

目的:为开发云南大理的药用植物资源,评价滇黄精的品质.方法:采用苯酚-硫酸显色,分光光度法测定滇黄精多糖的含量.结果:滇黄精多糖含量为12.98%,实验提取分离所得的粗多糖中总糖含量为88.89%.结论:滇黄精品质优良,是道地的中药材品种.     

黄精粗多糖提取及蒽酮-硫酸分光光度法含量测定

目的:优选黄精粗多糖的提取纯化工艺并建立蒽酮-硫酸分光光度含量测定法。方法:以黄精提取物中多糖得率为提取工艺评价指标,采用正交实验方法优选黄精的水煎煮提取工艺;采用多级醇沉-Sevage法脱蛋白-活性炭脱色的组合工艺纯化黄精提取物以获得黄精粗多糖;采用蒽酮-硫酸分光光度法测定黄精粗多糖含量。结果:黄精提取物的最佳水煎煮提取工艺为:以8倍量水煎煮,提取3次,每次1小时;黄精提取物经组合工艺纯化得黄精粗多糖,黄精粗多糖相对于黄精提取物、黄精药材计算其得率分别为42.30%和13.35%,粗多糖含量以无水葡糖糖计为98.60%;葡萄糖浓度在5.29~21.16μg·ml-1范围内线性关系良好(r=0.9995,n=7),平均加样回收率为99.42%,RSD为1.99%(n=9)。结论:本实验优选的黄精粗多糖的提取、纯化工艺稳定、可行、合理;建立的蒽酮-硫酸分光光度法测定黄精粗多糖的方法准确度高、重复性好、操作简单。     

黄精粗多糖对温热药致阴虚模型小鼠抗氧化作用的实验研究

目的:研究黄精活性部位粗多糖的滋阴作用及其对阴虚模型小鼠的抗氧化作用的影响。方法:用黄精粗多糖对温热药致阴虚模型小鼠进行实验,用药共30 d,设空白对照组,模型组,黄精粗多糖大、中、小剂量组,并用六味地黄丸作阳性对照。结果:黄精粗多糖能明显提高阴虚模型小鼠的体重增长率及痛阈(P<0.05),能显著升高其血浆中SOD活力、肝匀浆中GSH-PX活力,并降低其肝匀浆中MDA含量(P<0.01)。结论:黄精粗多糖有明显的滋阴作用,通过对阴虚模型小鼠抗氧化作用的改善而延缓衰老。     

滇黄精对急性肺损伤模型大鼠的炎症因子及体内氧自由基的影响

[目的]探讨滇黄精对急性肺损伤模型大鼠的炎性因子及体内氧自由基的影响。[方法] 50只雄性SD大鼠随机分为5组,包括正常对照组(NCG)、模型组(NMG)和滇黄精低(LLG)、中(MLG)、高剂量(HLG)实验组(5、10、15 mg/kg),每组10只。气管内滴灌脂多糖(LPS,5 mg/kg)方法建立急性肺损伤(ALI)模型大鼠,造模成功4 h后给模型大鼠腹腔注射不同浓度的滇黄精水提液,24 h后采集动脉血,检测大鼠的动脉血氧分压(PaO_2)、肺泡灌洗液中炎性细胞的数量、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)浓度以及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的含量。取肺部组织检测肺生理相关指标肺系数(LI)、肺含水率[(W-D)/W]以及左肺湿/干质量比(W/D),以期探讨滇黄精对急性肺损伤模型大鼠的炎性因子和氧自由基影响。[结果]与空白对照相比,模型组大鼠的LI、W/D、(W-D)/W指数低,而注射了滇黄精的实验组比模型组高(P0.01),PaO_2结果相反,这种趋势有剂量依赖性;模型组大鼠的各种炎性细胞数量比空白对照组高(P0.01),而各实验组大鼠炎性细胞数量低于模型组(P0.05),高剂量组数量明显低于中剂量组(P0.05)。炎性因子检测结果表明,模型鼠的IL-1β、IL-6、TGF-α水平高于空白对照组,IL-10比空白组低(P0.05),而实验组大鼠的IL-1β、IL-6、TGF-α水平比模型组高(P0.05),IL-10水平低于模型组,高剂量组与中剂量组相比,差异有统计学意义(P0.01)。模型组大鼠肺泡灌洗液中MDA和MPO水平明显高于空白对照组,SOD和GSH-Px活性低(P0.05),实验组大鼠MDA、MPO水平低于模型组,SOD、GSH-Px活性明显高于模型组(P0.05),高剂量组和中剂量组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]中药滇黄精可以有效缓解LPS诱导急性肺损伤性大鼠的肺部损伤症状,改善炎症反应水平,减轻ALI大鼠肺组织的氧自由基损伤,而且这种效应有剂量依赖性。     

黄精多糖对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的改善作用

目的观察黄精多糖对小鼠学习、记忆能力的影响。方法采用跳台法测定正常小鼠和东莨菪碱诱导的记忆获得障碍模型小鼠的学习、记忆能力;采用分光光度法测定记忆获得障碍模型小鼠脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;采用急性脑缺血模型法观察小鼠断头后张口呼吸的次数和持续时间。结果①黄精多糖使正常小鼠在安全区(跳台)停留时间延长,并显著降低了记忆获得障碍小鼠受电击后的错误反应次数;②黄精多糖显著抑制小鼠脑组织MDA的生成,提高小鼠脑组织GSH-PX和SOD的酶活力;③黄精多糖显著延长急性脑缺血小鼠的张口呼吸次数和持续时间。结论黄精多糖对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍具有改善作用,可能与其改善脑缺血及抗氧化作用有关。     

黄精多糖对过氧化氢致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 观察黄精多糖对H2O2致血管内皮细胞损伤过程中MDA含量与SOD活力的影响.方法 体外培养内皮细胞ECV304,用100 μmol/L H2O2损伤细胞,随机分成正常对照组,模型对照组,阳性药对照组,黄精多糖大、中、小剂量组.用血清药理学方法给药,继续培养后显微镜下观察细胞生长情况,检测MDA与SOD.结果 100μmoL/L H2O2对ECV304有损伤作用.黄精多糖能显著增加细胞SOD的水平,显著抑制H2O2诱导ECV304 MDA的产生.结论 黄精多糖可减轻H2O2对ECV304的损伤程度,其机理可能与抗氧化作用有关.     

滇黄精及其活性成分群对α-糖苷酶活性抑制作用研究

目的:探讨滇黄精及其活性成分群对α-葡萄糖苷酶活性的抑制。方法:以4-硝基酚α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)为底物,研究滇黄精不同提取成分对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。结果:滇黄精及其不同提取物对α-葡萄糖苷酶都具有一定的抑制作用,其中小剂量的滇黄精总皂苷抑制率最明显,抑制率为34.2%;滇黄精生水提液次之,抑制率为27.7%;而其制水提液及其总多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用不明显。结论:滇黄精总皂苷具有明显的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可能为滇黄精降糖活性的主要物质基础。     

基于多糖含量的滇黄精炮制工艺及抗衰老活性研究

目的：以云南道地药材滇黄精为研究对象,测定不同蒸晒条件下多糖和还原糖含量的变化,确定炮制工艺后,通过秀丽隐杆线虫(以下简称线虫)自然衰老和氧化应激模型,探究其对线虫寿命、体长、应激能力和抗氧化能力的影响。方法：通过苯酚-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法分别测定炮制过程中滇黄精多糖与还原糖含量的变化;建立线虫自然衰老和氧化应激等模型,观察不同给药浓度下秀丽隐杆线虫寿命、脂褐素含量、急性热应激能力、抗氧化应激能力等指标的改变。结果：滇黄精“二蒸二晒”后所含多糖和还原糖质量分数均最高,分别为4.792%和27.040%;相较于对照组,“二蒸二晒”组卵期8 d线虫脂褐素含量降低24.11%(P<0.01);选择“二蒸二晒”为滇黄精炮制工艺并提取多糖,结果显示质量浓度为0.05、1.00、20.00 mg·mL^-1的滇黄精多糖分别使线虫寿命增长14.62%、51.90%(P<0.05)、12.02%(P<0.05);8 h急性热应激条件存活率分别提高17.63%、43.90%(P<0.01),降低9.01%(P<0.05);急性氧化应激条件存活率...     

红豆杉多糖对Beagle犬心肌缺血再灌注损伤模型心肌NADPH氧化酶mRNA及SOD、MDA的影响

目的观察红豆杉多糖对心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)模型心肌损伤及心肌还原型辅酶II(NADPH)氧化酶mRNA、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法将30只Beagle犬随机分为假手术组、模型组、红豆杉多糖低剂量组与高剂量组、卡维地洛对照组,每组6只,给药7 d后,建立MIRI模型。HE染色,光镜观察心肌组织病理改变;原位杂交检测NADPH氧化酶p47phox(NCF-47K)mRNA表达;比色法检测心肌SOD活性和MDA水平。结果光镜下可见,模型组心肌严重紊乱、断裂,核固缩及胞浆嗜酸性变明显,轻至中度充血、水肿,炎细胞浸润;红豆杉多糖高剂量组心肌细胞紊乱、断裂程度较轻,核固缩及胞浆嗜酸性变明显减少,部分组织仍有轻度充血、水肿。模型组、红豆杉多糖低剂量组心肌NCF-47K mRNA表达较假手术组显著升高(P<0.01),红豆杉多糖高剂量组NCF-47K mRNA表达显著低于模型组(P<0.05)。除红豆杉多糖高剂量组心肌SOD活性显著高于模型组(P<0.01)外,模型组及各治疗组心肌组织SOD活性较假手术组显著降低(P<0.01)。模型组及红豆杉多糖低剂量组心肌组织MDA水平较假手术组显著增加(P<0.05),红豆杉多糖高剂量组心肌MDA水平显著低于模型组(P<0.05)。结论红豆杉多糖可能通过降低心肌组织NADPH氧化酶NCF-47K mRNA表达,升高SOD活性,减少O2÷等氧自由基对心肌细胞的损伤,减轻缺血再灌注导致的心肌损伤。     

滇黄精对诱导性高血糖小鼠血糖影响的实验研究

目的 观察滇黄精提取物对正常小鼠血糖及几种物质诱导性小鼠高血糖的影响.方法 用10%葡萄糖和240 μg/kg肾上腺素造成小鼠生理性高血糖模型,80 mg/kg四氧嘧啶造成小鼠糖尿病模型,滇黄精提取物与优降糖进行对照,观察滇黄精提取物对上述模型动物血糖的影响.结果 滇黄精提取物对正常小鼠血糖无明显作用;滇黄精提取物能降低葡萄糖性和肾上腺素性高血糖小鼠的血糖水平(P＜0.05);滇黄精提取物能显著降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平(P＜0.01).结论 滇黄精提取物对多种原因导致的高血糖小鼠有降糖的作用.     

黄精中的多糖组分及其免疫活性

目的研究黄精Polygonatum sibiricum中的多糖组分的结构特征及免疫活性。方法黄精水提粗多糖用DEAE-纤维素柱色谱和凝胶过滤色谱进行分离纯化,用化学及光谱方法分析各多糖组分的结构特征,并进行免疫活性测试。结果黄精水提粗多糖经分离纯化,得到5种多糖。PSW1B-b为中性半乳聚糖,PSW2A-1和PSW3A-1为酸性多糖,PSW4A和PSW5B为糖蛋白,其中PSW3A-1、PSW4A、PSW5B具有一定免疫活性。结论5种多糖为首次从黄精中分得,并都以半乳糖为主要构成单元,其中3种具有免疫活性。     

黄精调节糖代谢的活性及作用机理研究进展

黄精是滋肾润肺和补脾益气的常用中药。近年来发现黄精对糖尿病及其并发症有明显预防和治疗作用。作用机制研究表明,黄精对糖尿病性胰岛素异常、调节葡萄糖转运蛋白的表达、抗炎、肝细胞内c AMP的含量降低、氧化损伤、小肠酶活性降低等方面均有较好的治疗作用,同时一定程度延缓糖尿病并发症的发生和发展。本文按抗糖尿病作用机制对黄精进行分类和归纳,并提出了开发利用黄精的建议:将滇黄精中的主要活性成分群(总皂苷及总多糖)及主要活性单体成分开发成具有辅助调节血糖水平的药品、保健品或健康食品。     

滇黄精对糖尿病皮损大鼠氧化应激及其Nrf2/HO-1信号通路表达的影响

目的 探讨滇黄精对糖尿病皮肤损伤大鼠创面愈合及核因子-E2相关因子(Nuclear factorerythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素氧合酶1(Heme Oxygenase-1,HO-1)信号通路的影响。方法 复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的48只大鼠随机分为模型组、西格列汀组(10 mg·kg^-1)、滇黄精水提物低剂量组(2 g·kg^-1)、滇黄精水提物高剂量组(8 g·kg^-1)、滇黄精醇提物低剂量组(2 g·kg^-1)、滇黄精醇提物高剂量组(8 g·kg^-1),每组8只;另设对照组。灌胃给药4周后,所有大鼠建立背部皮肤创面伤口,术后继续给药14天。实验结束后,处死大鼠,测定各组大鼠血糖值,糖化血红蛋白(GHb)、血浆中H₂O₂、MDA、SOD、GSH水平和创缘皮肤组织中T-AOC、SOD、MDA水平,并用荧光定量法测定大鼠创缘皮肤组织中Nrf2、HO-1 mRNA相对表达量。结果 与模型组相...     

滇黄精与轮叶黄精多糖的组织化学及含量测定研究

目的对滇黄精及其习用药材轮叶黄精进行多糖组织化学和含量测定研究,明确两种药材多糖的积累和分布特征,比较两者多糖含量的差异,为滇黄精及其习用品资源的挖掘和综合开发利用提供参考依据。方法采用徒手切片法制作两种药材不同器官的横切片,利用组织化学定位方法对多糖进行定位分析。以醇提法提取根茎多糖,采用蒽酮-硫酸为显色剂、紫外-可见分光光度法测定多糖含量。结果在两种药材不同的器官及组织中,多糖主要分布在根、根茎的皮层薄壁细胞、黏液细胞、维管束及其鞘细胞中;茎的维管束和纤维束环中;叶肉细胞及叶脉维管束中。根茎多糖分布最多,其次是叶片,根和茎中分布则较少。两种药材多糖含量差异不大,滇黄精多糖含量略高于轮叶黄精。结论组织化学定位和蒽酮-硫酸显色法适用于研究和分析黄精类药材多糖的分布和含量测定。民间习用轮叶黄精有一定的合理性,应加强对其化学成分、安全性及疗效等方面的研究。     

Box-Behnken响应面法优化滇黄精产地加工炮制一体化工艺对黄精多糖的影响

目的:运用Box-Behnken响应面法优化滇黄精产地加工炮制一体化工艺。方法:采用蒽酮-硫酸紫外分光光度法检测,黄精多糖含量为评价指标。单因素试验确定因素最低水平和最高水平,结合Box-Behnken中心组合设计,对滇黄精蒸制时间、切片厚度、干燥温度3个因素进行优化。结果:滇黄精产地加工炮制一体化优化工艺为蒸制时间22 min、切片厚度3.6 mm、干燥温度61℃。优化工艺检测黄精多糖质量分数为12.12%,与预测值相接近,实验所建模型准确可靠。结论:Box-Behnken响应面优化滇黄精产地加工炮制一体化工艺切实可行,为筛选适宜滇黄精产地加工炮制一体化方法研究提供参考。     

复方中黄精多糖的提取纯化工艺研究

目的优化黄精多糖的提取纯化工艺及建立其薄层鉴别方法。方法以多糖提取率为指标,采用正交实验设计,优选复方中黄精多糖的提取纯化工艺;采用多展开剂系统筛选黄精的薄层鉴别方法。结果黄精多糖最佳水提工艺为:8倍量水,提取2次,每次1h;最佳纯化工艺为药材:浸膏比为1:0.7;用80%乙醇醇沉,醇沉1次。主药黄精的最佳薄层展开剂条件为氯仿:丙酮(4:1)。结论黄精多糖的提取纯化工艺稳定、操作简单、切实可行;主药的薄层色谱条件分离效果、重现性好。     

地骨皮水提液对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用机制

目的:探讨地骨皮水提物对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)保护作用。方法:小鼠LPS(5 mg·kg-1ip)复制ALI动物模型。将小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组(2 mg·kg-1)、地骨皮水提液高、低剂量组(20,10 g·kg-1),腹腔注射给药。观察各组肺组织病理学改变,测量肺湿质量/干质量,支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞百分比、肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及肺组织中SOD与MDA蛋白表达。结果:地骨皮水提液能降低肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞的数目,能显著降低肺湿质量/干质量,与空白组相比,模型组肺组织MDA含量升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.05),MDA蛋白水平显著升高,SOD蛋白水平显著下降(P<0.01);与模型组比较,地骨皮水提液组BALF中SOD活性显著升高(P<0.05),MDA蛋白水平降低(P<0.05),并可有效减轻LPS所致肺组织病理学变化。结论:地骨皮水提液可减轻LPS所致急性肺组织损伤。     

药用黄精化学成分与活性研究进展

通过回顾近年来国内外关于药用黄精(《药典》所收载黄精、滇黄精及多花黄精)化学成分、药理活性与作用方面的研究进展,指出今后科学研究可以更多地集中于多花黄精化学成分以及药用黄精中所含除黄精多糖外化学成分的药理作用。