荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用血清药理学方法制备荔枝核、环磷酰胺含药血清以及对照血清,作用于HepG2细胞,MTT法检测各种血清对HepG2细胞增殖的影响,Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:荔枝核含药血清处理HepG2细胞后,呈剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖活性;并出现细胞核浓染与核碎裂;流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率明显高于对照组。结论:荔枝核含药血清能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其机制可能与诱导HepG2细胞凋亡有关。     

棘豆生物碱部位含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期与凋亡的影响

目的 研究棘豆生物碱部位药物血清对人肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用.方法 采用血清药理学方法,选择10％不同剂量组药物血清作为实验组,10％空白血清为对照组,与HepG2细胞共同孵育不同时间,MTT检测细胞活力,Hoechst33342荧光染色观察细胞核变化,流式细胞仪检测细胞周期的分布,荧光比色法测定Caspase -3的活性表达.结果 棘豆生物碱部位药物血清能抑制细胞增殖,细胞增殖活性呈时间剂量依赖关系,以高剂量组药物血清作用最强,与阴性对照组比较有统计学意义(P＜0.05).荧光镜观察10％含药血清组细胞出现染色质凝集、核膜破裂等凋亡特征,流式细胞仪检测高剂量药物血清组作用48 h后G1期细胞比例增多,而其他实验组S期细胞比例增多,与阴性对照组比较有统计学意义(P＜0.05).荧光比色法测定显示Caspase -3活性随时间延长而升高,以48 h活性达到最高,与对照组比较有统计学意义(P＜0.05).结论 棘豆生物碱部位药物血清体外能通过抑制HepG2细胞增殖、阻滞细胞周期及上调caspase -3表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡.     

芪术抗癌方对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨芪术抗癌方对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的调控作用。方法：体外培养HepG2细胞，加入不同浓度芪术抗癌方（0,250,500,1 000 mg/L）处理48 h。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞活力，采用免疫印记法检测凋亡相关蛋白c-Caspase-3和c-Caspase-9表达变化。结果：CCK-8结果显示芪术抗癌方可呈浓度依赖性抑制HepG2细胞增殖，与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05),1 000 mg/L组抑制效果最好，芪术抗癌方刺激HepG2细胞后，凋亡相关蛋白c-Caspase3及c-Caspase9表达增加，呈浓度依赖性，在1 000 mg/L组达到最高且差异有统计学意义（c-Caspase3增加1.83倍，P<0.05；c-Caspase9增加1.06倍，P<0.05）。结论：芪术抗癌方可抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

藤茶总黄酮和二氢杨梅素含药血清对肝癌 HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨藤茶总黄酮和二氢杨梅素含药血清对人肝癌细胞株HepG2增殖的抑制及凋亡的影响.方法:采用血清药理学方法制备藤茶总黄酮、二氢杨梅素、环磷酰胺(CTX)含药血清以及对照血清,作用于肝癌HepG2细胞,MTT法检测各种血清对HepG2细胞增殖的影响;倒置相差显微镜观察各种含药血清作用后肝癌HepG2细胞的形态学变化;AnnexinV/7AAD双标记法流式细胞术检测早期细胞凋亡的情况.结果:MTT法和显微镜观察显示藤茶总黄酮和二氢杨梅素20%含药血清能不同程度抑制HepG2细胞增殖,可致细胞形态学改变;AnnexinV/7AAD双标记法检测显示藤茶总黄酮20%含药血清可促肝癌HepG2细胞早期凋亡,但二氢杨梅素20%含药血清对肝癌HepG2细胞早期凋亡没有影响.结论:藤茶总黄酮能抑制肝癌HepG2细胞的增殖,诱导其产生早期凋亡.     

结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用

目的研究贵州罗甸地区南方大斑蝥(Mylabris phalerata Pallas)和黄黑小斑蝥(Mylabris cichorii Linnaeus)体内的结合斑蝥素(conjugated cantharidin)对人肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响。方法采用两种斑蝥三氯甲烷提取物的水浸液获取结合斑蝥素。运用磺酰罗丹明染色法(SRB)检测结合斑蝥素对Hep G2细胞增殖的作用。利用Annexin V-FITC/PI双染法检测结合斑蝥素对Hep G2细胞凋亡的影响。应用倒置相差显微镜、透射电子显微镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果两种结合斑蝥素对Hep G2细胞的增殖均有显著的抑制作用,呈剂量依赖性,其半数抑制浓度(IC50)分别为0.90、0.85 mg/L。流式细胞术结果显示,以0.90 mg/L的南方大斑蝥结合斑蝥素和0.85 mg/L黄黑小斑蝥结合斑蝥素作用Hep G2细胞24 h后,细胞呈典型的凋亡形态特征,凋亡率分别为(10.5±1.45)%和(12.8±1.53)%;结论两种来源斑蝥体内结合斑蝥素均可抑制肝癌Hep G2细胞的增殖并促进其凋亡。     

不同浓度石斛合剂含药血清对β-Tc-6细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨不同浓度石斛合剂Ⅰ方和Ⅱ方含药血清对小鼠胰岛素瘤细胞株β-Tc-6增殖及凋亡的影响。方法将长满80%培养瓶的β-Tc-6消化后,接种于96孔板,1×104个细胞/孔,采用MTT法测吸光值A490,连续10d,绘制生长曲线;分别用20%、10%和5%的石斛合剂Ⅰ方或Ⅱ方含药血清作用于对数生长期细胞,48h后采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果β-Tc-6在第5前缓慢增殖,到第6天进入对数生长期,第9天后进入平台期。与对照组相比,10%石斛合剂Ⅰ方组可显著促进细胞增殖(P0.05);与对照组相比,三种不同浓度的石斛合剂Ⅰ方组及10%Ⅱ方组显著抑制细胞凋亡(P0.05,P0.01),与10%Ⅰ方组相比,20%Ⅰ方组和5%Ⅰ方组抑制凋亡更为显著,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。与对照组相比,20%Ⅱ方组显著促进细胞凋亡(P0.05)。结论石斛合剂Ⅰ方具有促进增殖及抑制凋亡的作用,其最佳作用浓度为10%;石斛合剂Ⅱ方对细胞增殖无显著性促进作用,但对细胞凋亡则依据不同浓度有显著性促进或抑制作用。     

鲜茵陈提取物对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用

目的:观察鲜茵陈提取物对人肝癌HepG2细胞株增殖的抑制和凋亡的诱导作用。方法:采用MTT法观察鲜茵陈提取物对HepG2增殖的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测鲜茵陈提取物对细胞凋亡的诱导。结果:不同浓度的提取物在不同时间内对HepG2的增殖有抑制作用,随着提取物浓度的增加和作用时间的延长,抑制增殖的作用越来越明显,凋亡逐渐增加。结论:鲜茵陈提取物对HepG2有明显的增殖抑制的作用,能够促进细胞的凋亡。     

迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响及分子机制研究

目的研究迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响,并探究相关机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度迷迭香酸作用不同时间后HCT-8细胞的增殖情况;根据CCK-8法结果确定迷迭香酸15、45、75μmol/L作用72 h,考察HCT-8细胞的凋亡和相关基因及蛋白的表达;通过流式细胞术检测HCT-8细胞的凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测p53、Bax和Puma基因的m RNA表达;通过Western blotting法检测p53、Bax、Puma和active Caspase-9的蛋白表达水平。结果迷迭香酸能够抑制HCT-8细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性。15、45μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞早期凋亡(P0.01),75μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞晚期凋亡(P0.01)。迷迭香酸可以使Puma的m RNA表达上调,并呈浓度依赖性;45、75μmol/L的迷迭香酸可以使p53和Bax的m RNA表达升高(P0.05)。迷迭香酸可以上调Puma、Bax和active Caspase-9的蛋白表达水平,并呈浓度依赖性;75μmol/L的迷迭香酸可以使p53的蛋白表达明显升高(P0.05)。结论迷迭香酸对HCT-8细胞具有明显的增殖抑制作用,并且是通过诱导凋亡实现的,促凋亡蛋白p53、Puma、Bax和active Caspase-9诱导了凋亡的发生。     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

肿节风复方含药血清对肝癌HepG2细胞增殖、端粒酶及凋亡的影响

目的： 观察肿节风复方含药血清对人肝癌细胞HepG2细胞增殖及凋亡的影响。 方法： 实验设阴性对照组（NS）、5-氟尿嘧啶（5-FU）组（0.025 g·kg^-1）和肿节风复方低、中、高剂量组（2.5,5,10 g·kg^-1）,灌服于大鼠后,提取含药血清。取上述含药血清分别作用于HepG2细胞24,48,72 h;MTT法测定细胞增殖抑制率;ELISA法测定端粒酶活性;荧光显微法及流式细胞术（Annexin V-FITC/PI法）检测肿节风复方含药血清对HepG2细胞凋亡的影响。 结果： 与对照组比较,肿节风复方含药血清低、中、高剂量组均能抑制HepG2细胞的增殖（高剂量组抑制率最高达42.5%）,呈现与时间-剂量依赖趋势;肿节风中、高剂量组能有效抑制HepG2细胞端粒酶活性,与对照组比较P < 0.05;肿节风复方含药血清具有诱导HepG2细胞凋亡的作用,与对照组比较P < 0.05,其中中剂量组作用24,48,72 h细胞凋亡率分别为（14.2±0.9）%,（30.6±1.0）%,（61.6±1.5）%。 结论： 肿节风复方含药血清能抑制HepG2细胞增殖、端粒酶活性,诱导HepG2细胞凋亡。     

去甲斑蝥素对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的：探讨去甲斑蝥素对HepG2细胞凋亡的影响。方法：采用形态学观察和流式细胞分析技术。结果：去甲斑蝥素作用HepG2细胞后,凋亡小体形成,凋亡率增加。结论：去甲斑蝥素诱导HepG2细胞凋亡。     

红景天苷对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响简

 目的 观察红景天苷(salidroside)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响, 探讨其抗肿瘤的可能机制。方法 以体外培养的人肝癌HepG2细胞作为研究对象, 倒置显微镜观察红景天苷对肝癌细胞形态的影响;采用MTS法检测红景天苷对细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-8的表达。结果 红景天苷能显著抑制肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡, 下调细胞Bcl-2 表达, 上调Bax、caspase-3及caspase-8的蛋白表达量。结论 红景天苷在体外对人肝癌HepG2细胞具有显著的抑制增殖和促进凋亡作用, 其机制可能与其调节凋亡基因Bcl-2、Bax、caspase-3与caspase-8的蛋白表达有关。     

中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察中肺合剂以Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法：取C57BL/6小鼠50只,接种Lewis肺癌瘤株后,随机分阴性对照组（0.9%生理盐水）,中肺合剂低、中、高剂量组（12.7g&#183;kg-1、25.4g&#183;kg-1、50.8g&#183;kg-1）,阳性对照组（CTX组,30mg&#183;kg-1）,每组10只。观察12天停药。无菌条件下取肿瘤组织,采用EnVision免疫组化染色法测定肿瘤组织中Ki-67增殖抗原的表达,采用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡指数并对凋亡指数等级评分。结果：中肺合剂低、中、高给药组能不同程度降低Lewis肺癌小鼠肿瘤组织Ki-67抗原的表达,以中剂量组最显著,与生理盐水组相比统计学上有明显差异（P〈0.05）。低、中、高给药组凋亡指数等级评分都大于等于＂＋＋＂。与生理盐水组相比,有显著的统计学差异（P〈0.01）。肿瘤组织Ki-67抗原的表达抑制与肿瘤细胞凋亡呈正相关。结论：中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞增殖有明显抑制作用,并诱导其凋亡,以中剂量组最显著。肿瘤组织Ki-67抗原的表达抑制与肿瘤细胞凋亡指数呈正相关。     

中药芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞增殖的影响

目的观察中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血内皮祖细胞（EPCs）增殖的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为中药芪红合剂组（低剂量组、中剂量组、高剂量组）和对照组,制备含药血清和空白血清。采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为EPCs。加入各实验血清组培养液培养EPCs,分别作用不同时间（24h、48h、72h）后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,噻唑蓝比色试验（MTT法）测定EPCs的吸光度值。结果与对照组比较,中药芪红合剂合药血清低、中、高剂量组EPCs增殖明显（P〈0．05）,且呈一定的量效、时效关系。在同一作用时间,低剂量芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖明显（P〈0．05）。在同一剂量组中,芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖随时间推移逐渐增强,于72h达到高峰（P〈0．05）。结论中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血EPCs的增殖具有一定的促进作用,可能是其防治血管内皮损伤及内皮功能障碍相关性疾病的作用机制之一。     

中药复方博癌丸对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的研究中药复方搏癌丸对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的诱导作用.方法采用细胞药理学和血清药理学方法,对比观察(阴性无药血清对照、阳性药5-氟尿嘧啶血清对照)搏癌丸诱导HepG2细胞的增殖及凋亡.(1)MTT法观察4个搏癌丸药物血清浓度对HepG2细胞增殖的抑制作用,从中筛选出搏癌丸的有效药物浓度.(2)电镜及流式细胞仪观察HepG2细胞凋亡.结果(1)10%、5%、2.5%搏癌丸药物血清3个有效浓度均对HepG2细胞增殖有显著抑制作用(P＜0.01),增殖抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,3个有效浓度组间差异均有显著性(P＜0.01).(2)10%搏癌丸药物血清作用HepG2细胞48小时后,HepG2细胞核明显缩小,浆比减少,核仁减少、浓缩甚至消失,核内异染色质明显增多,核膜完整,可见早、中、晚期细胞凋亡,出现凋亡小体.(3)10%搏癌丸药物血清作用HepG2细胞48小时后,流式细胞仪检测的细胞凋亡率为25.34%,均显著高于相应无药血清对照组的3.54%(P<0.05).结论搏癌丸能在一定程度上抑制HepG2细胞的增殖和诱导HepG2细胞凋亡.     

槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡及其凋亡通路的影响

目的:研究槲皮素体外对人肝癌细胞凋亡及其凋亡通路的影响。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测凋亡率和细胞周期;应用ELISA法检测细胞上清液中Caspase-3、Caspase-9及Survivin的含量。结果:槲皮素(10-320μmol.L-1)体外可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并具有浓度和时间依耐性;在40-160μmol.L-1浓度下,槲皮素可诱导SMMC-7721细胞凋亡;将细胞阻滞在G2-M期;使Caspase-3、Caspase-9蛋白表达量显著增加,而Survivin蛋白表达显著减少。结论:槲皮素抑制人肝癌SMMC-7721细胞的作用机制与诱导细胞凋亡和将细胞周期阻滞在G2-M期有关,其凋亡通路涉及Caspase途径。     

漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2增殖、生长周期和细胞凋亡的影响

目的 观察漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT比色法研究漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布.结果 MTT实验结果表明较高浓度的漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,200 μmol·L-1 的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2细胞72 h后,对细胞生长的抑制率最高可达53.78%,同对照组相比(P<0.01);流式细胞术实验结果表明,不同浓度的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2 12 h后,可使G1期肿瘤细胞增多,引起G1期阻滞,作用时间为24 h、48 h时,则可引起S期阻滞;同时,不同浓度的漆树黄酮在不同的时间点都可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰.结论 漆树黄酮具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,其机制可能与引起细胞周期阻滞和诱导凋亡有关.     

清肝化瘀方药含药血清对肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响

目的:观察用两种方法制备的清肝化瘀方药含药血清对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:中药血清A为正常状态下大鼠的含药血清,中药血清B为病理状态下大鼠的含药血清,应用MTT比色法比较两种中药血清对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用.用流式细胞术检测中药血清B对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:中药血清A对肝癌细胞SMMC-7721增殖有轻微的抑制作用.中药血清B对肝癌细胞有明显的抑制作用,两种血清的抑制效应均呈时间依赖性.中药血清B还能促进肝癌细胞凋亡,使细胞滞留于G0/1期,降低SPF和PI.结论:病理状态下长期给药制备的清肝化瘀方药含药血清能够明显抑制人肝癌细胞增殖,促进其凋亡.     

土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

目的研究土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡和细胞周期的影响,探讨土鳖虫抗肿瘤效应。方法以土鳖虫乳剂给SD大鼠灌胃,采血并制备血清。四氮唑盐法(MTT法)检测含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡。结果土鳖虫含药血清可明显抑制肝癌HepG-2细胞体外增殖,20%土鳖虫含药血清作用72h后抑制率高达56.728%,抑制率呈浓度依赖关系。流式细胞仪检测细胞凋亡发现肝癌HepG-2细胞以坏死居多,细胞周期多阻滞于G0-G1期。结论土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞体外增殖有明显的抑制作用。