5-HT及其2A受体在大鼠丘脑前核的表达

目的研究5-羟色胺(5-HT)及其5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)在大鼠丘脑前核的表达,探讨两者参与学习记忆的形态学依据。方法免疫组织化学ABC法观察5-HT及5-HT2AR在丘脑前核内的表达情况。包埋前免疫电镜技术观察丘脑前核群的5-HT能投射纤维终末。结果免疫组化结果显示:在大鼠丘脑前核群的前、中、后部均可见阳性的5-HT能神经元及大量串珠状的投射纤维终末,其中背侧核(AD)的神经元着色较深,胞体较大,纤维密集,平均光密度值(A值)与腹侧核(AV)的比较差异显著(P0.05);5-HT阳性反应产物主要定位于胞浆内,胞核不着色。包埋前免疫电镜显示:阳性5-HT能轴突终末与树突形成非对称性的轴-树突触。在AD、AV内可见黄色的5-HT2AR阳性神经元,其中AD的神经元胞体较大,着色较AV深,阳性产物灰度值二者比较差异显著(P0.05);阳性产物主要定位于神经元胞膜,胞核不着色。结论 5-HT和5-HT2AR在大鼠丘脑前核表达,在AD、AV的表达强度不同。     

GAD_(67)-GFP基因敲入小鼠脊髓背角GABA能神经元与不同5-HT受体亚型的共存研究

为初步探讨5-HT受体亚型对脊髓背角内抑制性GABA能神经元的介导作用,本研究以GAD67-GFP基因敲入小鼠为工具,利用免疫荧光双标记方法,检测了5-HT受体亚型与脊髓背角GABA能阳性神经元的共存情况。结果显示,GABA能阳性细胞与5-HT1A,5-HT2A和5-HT3等受体亚型共存,且共存率存在明显不同。以上结果提示5-HT受体各亚型在脊髓水平发挥不同的作用,从而参与完成5-HT复杂的生理效应。     

约束应激对大鼠5-HT1A和5-HT2A受体表达的影响

慢性应激如长期压抑 ,环境不适等易导致身心健康损害 ,出现学习记忆、情绪行为等多方面的改变[1,2 ] ,目前对其发生机制的研究多集中在下丘脑 -垂体 -肾上腺 (HPA)轴、自主神经系统和免疫系统等 ,而对 5 -羟色胺 (5 -HT)的研究较少。 5 -HT是一种重要的中枢神经递质 ,参与多种行为、情绪活动的调节 ,迄今已发现了 5 -HT受体的 7种类型 13个亚型。近来的研究报道认为 5 -HT1A 和 5 -HT2A 可能与精神机能和学习记忆有关[3 ,4] 。为探讨慢性应激与 5 -HT1A、5 -HT2A 受体的关系 ,我们采用PCR观察大鼠经 30天慢性约束应激后不同脑区 5…     

大鼠前扣带回皮质5-HT_(1A,1B,2A,2C)受体亚型蛋白表达的细胞定位

目的:观察5-HT_(1A、1B)和5HT_(2A、2C)等受体在大鼠前扣带回皮质(anterior cingulated cortex,ACC)的分布及细胞定位。方法:将20只成年雄性Sprague-Dawley大鼠平均分成四组,每组5只分别进行四种亚型5-HT的免疫组织化学反应。动物经过灌注固定、脑冠状切片(25μm)后,以卵白素-生物素复合物法(ABC法)对切片进行染色、显微镜观察。结果:四种5-HT受体亚型在ACC都有分布。ACC内II-VI层均有5-HT_(1A)免疫阳性反应神经元的胞体和树突。5-HT_(1B)受体亚型定位在神经元胞体上,表达较弱。I-III层5-HT_(2A)免疫阳性反应较强,主要为标记的锥体神经元树突(Cg1区III层观察到部分阳性反应的神经元胞体);而V-VI层可见到明显的免疫阳性神经元胞体。5-HT2C受体定位于ACC之II-VI层神经元胞体上。结论:5-HT_(1A)、5-HT_(1B)、5-HT_(2A)和5-HT_(2C)等不同受体亚型在ACC内细胞上的定位有一定差异,提示它们介导5-HT对ACC神经元发生调节反应的细胞作用部位有选择性,因之它们介导的5-HT对ACC神经元的作用效果也可能不同。     

大鼠中缝背核向缰核投射的5-羟色胺能神经元对躯体伤害性刺激的fos表达

用WGA-HRP逆行追踪与抗FOS和抗5-羟色胺免疫组化的三重标记方法,观察向大鼠一侧有前跖部皮下注射8%福尔马林50μl后,中缝背核至缰核5-羟色胺能神经元的FOS表达.光镜下发现中缝背核内有七种阳性神经元.即HRP、FOS、5-HT单标细胞;FOS/HRP、FOS/5-HT、HRP/5-HT双标细胞;FOS/HRP/5-HT三标细胞.结果表明中缝背核至缰核的5-HT能投射神经元对躯体伤害性刺激起反应.     

大鼠臂旁核内5-羟色胺阳性纤维和终末的来源

本研究采用荧光金(FG)逆行追踪与5-羟色胺(5-HT)免疫荧光组化染色相结合的双重技术观察了臂旁核(PBN)内5-HT阳性神经纤维和终末的来源。将FG注入PBN后,FG逆标神经元主要分布在三叉神经核簇、脑干网状结构外侧小细胞部、中缝核簇和中脑导水管周围灰质(PAG);免疫荧光组化染色的结果显示5-HT阳性神经元主要位于中缝核簇和PAG;在中缝核簇和PAG内可见FG逆标并呈5-HT阳性的双重标记神经元。上述结果表明,中缝核簇和PAG内的5-HT能神经元向PBN发出投射,它们在躯体和内脏感觉信息的传递和调控方面发挥重要作用。     

5-羟色胺在大鼠腰骶髓后连合核和中间带外侧核参与盆腔内脏炎性痛调控的形态学研究

本研究运用荧光金(FG)逆行束路追踪与5-HT1A受体免疫荧光组织化学染色技术相结合,观察了大鼠腰骶髓后连合核(DCN)和中间带外侧核(IML)内感受盆腔内脏伤害性信息并向外侧臂旁核(LPB)发出投射的神经元呈5-HT1A受体免疫反应阳性。将FG注入一侧LPB后,可在腰骶节段(L6-S2)观察到大量的FG逆标神经元,这些FG逆标神经元主要集中于DCN和IML内,以同侧为主;5%福尔马林注入大鼠结肠后,Fos蛋白阳性神经元主要分布于腰骶髓DCN和IML,以同侧为主,在同侧脊髓背角I层、II层和深层也有少量的分布。另外,在腰骶髓DCN和IML内,还可观察到大量5-HT1A受体阳性的神经元胞体、纤维和终末,同时有部分Fos蛋白阳性的FG逆标神经元呈5-HT1A受体阳性。上述结果提示,大鼠腰骶髓DCN和IML内的5-HT能终末可能对盆腔内脏伤害性信息的传递发挥调控作用。     

大鼠前庭神经核复合体内5-HT能终末与表达5-HT1A受体的前庭-臂旁核投射神经元之间的联系

目的 观察大鼠前庭神经核复合体(VNC)内5-羟色胺(5-HT)样阳性终末与表达5-HT1A受体(5-HT1A R)的前庭-臂旁核投射神经元之间的联系.方法 运用逆行束路追踪和免疫荧光组织化学染色相结合的双重标记技术,在激光共焦显微镜下观察.结果 将四甲基罗达明(TMR)注入臂旁核后,在双侧VNC的各个核团内均可观察到许多TMR逆标神经元,但以同侧为主.免疫荧光组织化学染色结果显示,在前庭内侧核(MVe)、前庭下核(SpVe)、前庭上核(SuVe)、前庭外侧核(LVe)、X核以及Y核的一些区域内,许多神经元表达5-HT1A R样免疫阳性,并可观察到大量5-HT样阳性纤维和终末.激光共焦显微镜下可进一步观察到一些TMR逆标神经元同时呈5-HT1A R样免疫阳性,且有部分5-HT样阳性终末与TMR/5-HT1A R双标神经元的胞体或树突形成密切接触.结论 提示5-HT可能通过5-HT1A R对前庭神经核复合体-臂旁核间的信息传递发挥调控作用.     

大鼠前庭神经核复合体内5-羟色胺1A受体的分布

为了研究5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)亚型在大鼠前庭神经核复合体(VNC)内的分布情况,本文采用免疫组织化学方法,在光学显微镜下对5-HT1AR亚型免疫阳性结构进行了观察。结果显示:5-HT1AR免疫阳性产物在VNC各个核团全长均有分布,主要定位于VNC神经元的胞体和近侧端树突,呈弥散分布,但在胞浆中也观察到许多染色深浅不同、分布不均匀的点状阳性结构。其中5-HT1AR样阳性神经元在前庭内侧核的全长呈密集分布,在前庭下核的尾段呈中等密度分布,在前庭上核、前庭外侧核和X核的全长、前庭下核的吻段和中段以及Y核的中、尾段均呈低密度分布,Y核的吻侧呈稀疏分布。本文结果提示,5-HT1AR阳性结构广泛地分布于大鼠VNC内,它们可能在介导5-HT对神经元活动的调节,参与前庭信息的整合与加工方面发挥重要作用。     

5-羟色胺与自杀的研究进展

5-羟色胺（5-HT）在所有可能与自杀相关的神经递质中被研究得最多,主要集中在5-HT功能、5-HT受体和转运体、与自杀相关的5-HT系统候选基因等方面。本文对5-羟色胺与自杀的研究进展做一综述。     

5-羟色胺3A受体在成年小鼠海马中间神经元中的分布

目的:利用成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠,研究5-羟色胺3A受体(5-HT3AR)在海马中间神经元中的分布情况。方法:成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠经心脏灌注固定后,利用免疫荧光双标记方法,并结合激光共焦显微镜扫描技术,观察5-HT3AR在成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠海马中不同中间神经元内的表达和分布情况。结果:5-HT3AR在成年小鼠整个海马中都有分布,且主要在CA1区、CA2/CA3区和齿状回有大量5-HT3AR免疫阳性细胞;激光共聚焦显微镜下观察到5-HT3AR阳性产物在细胞核、细胞浆和树突上均有表达;免疫荧光双标实验结果表明5-HT3AR阳性产物在CB(calbindin),CR(calretinin),Reelin,Som(somatostatin),NPY(neuropeptide Y)和VIP(vasoactive intestinal peptide)免疫阳性神经元中表达,但在PV(parvalbumin)免疫阳性神经元中不表达。定量结果显示:几乎所有的VIP阳性神经元均表达5-HT3AR阳性,约3/4的CR阳性神经元表达5-HT3AR,约1/2的CB、Reelin、NPY和Som阳性神经元表达5-HT3AR阳性;约1/4的5-HT3AR阳性神经元中表达Reelin,1/5的表达Som,5-HT3AR/CB和5-HT3AR/CR双标神经元各占5-HT3AR阳性神经元的1/10左右。结论:5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠能够作为研究海马中5-HT3AR功能及其在中间神经元中的作用机制研究的工具鼠。     

5一羟色胺能神经对横断损伤脊髓的再支配-脊髓内移植研究

用成年SD大鼠20只在脊髓的低位胸髓完全横断损伤,分别在1周和1月后,用富含5一羟色胺(5—HT)神经元的胚鼠脑干中缝组织悬液植人损伤尾侧的脊髓内,动物存活2个月,脊髓作5—HT免疫组化观察.结果:(1)胚5-HT能神经元能在成年大鼠脊髓内存活,5-HT纤维大多在灰质中延伸并向靶区分布,(2)损伤后1周移植组的5-HT能神经元存活量,5-HT纤维在宿主脊髓内延伸距离,以及5-HT末梢再分布的密度都优于损伤后1月移植组.     

不同浓度七氟醚对大鼠海马去甲肾上腺素、5-羟色胺水平 及P2X3表达的影响

目的：探讨不同浓度七氟醚对大鼠海马去甲肾上腺素（NE）、5- 羟色胺（5-HT）水平及嘌呤能受体P2X3 表达的影响。方法：选取健康大鼠,分为对照组（ 不吸入七氟醚气体）,低、中、高七氟醚组。干预后,对大鼠 记忆行为进行周期性测定;采用高效液相检测NE、5-HT 含量;免疫印迹及免疫荧光检测P2X3 表达;用H-E 染 色观察海马神经元形态;用TUNEL 法检测海马神经元凋亡。结果：对照组大鼠在苏醒1 d 逃避潜伏期明显低于中、 低七氟醚组;与对照组大鼠比较,七氟醚3 组NE水平及5-HT 水平明显降低;对照组P2X3 蛋白表达显著高于七 氟醚高、中、低组,与低七氟醚组比较,中、高七氟醚组P2X3 蛋白表达逐渐降低;对照组、七氟醚低、中、高 组大鼠海马神经元细胞凋亡率分别为36.22%±3.62%、24.10%±2.66%、18.42%±2.21% 及12.55%±1.69%,差 异具有统计学意义。结论：七氟醚随着其浓度的增加会降低海马NE、5-HT 水平,增强对P2X3 表达的抑制作用, 并增加海马区细胞凋亡,降低大鼠记忆行为能力。     

昆虫色氨酸羟化酶的研究进展

色氨酸羟化酶（tryptophan hydroxylase、TPH）为5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）合成的限速酶,具有专一性,在组织中含量较低,且具有不稳定性。TPH的活性是5-HT合成的唯一前提,因此它可以作为5-HT能神经元的特异标志,也可以作为5-HT能神经元的一个分化特征。它的存在,住区分神经细胞特征方面比5-HT本身的含苗更有价值。因而近年来TPH迅速成为国际研究的热点和难点之一。本文主要就TPH在昆虫中的存在形式、调节机制及进化地位等方面已取得的研究进展作一简述。     

成年大鼠Pre-Bǒtzinger复合体5-羟色胺样阳性神经纤维与神经激肽1受体样阳性神经元的关系

位于新生和成年哺乳动物延髓腹外侧区的Pre-Bǒtzinger复合体（pre-Bǒtzingercomplex，PBC）被认为是呼吸节律产生中枢，神经激肽1受体（neurokinin-1 receptor，NKlR）是PBC神经元的主要标记物。5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT或serotonin）作为一种重要的神经递质，可通过其受体调节呼吸中枢的节律性变化。本研究采用免疫荧光组织化学和免疫电镜双重标记技术，在激光共聚焦显微镜和电子显微镜下观察了大鼠PBC内5-HT样免疫阳性神经纤维与NKlR样免疫阳性神经元或NKlR免疫阴性神经元之间的关系，旨在为5-HT参与PBC神经元呼吸节律的产生和调控提供形态学依据。共聚焦显微镜结果显示：正常大鼠PBC内可观察到一定数量的5-HT样阳性纤维和终末，且有少量的阳性纤维和终末与PBC内NKlR样阳性神经元的胞体或树突形成密切接触。在电镜下可进一步观察到：5-HT样阳性纤维终末可与NKlR样阳性神经元的树突形成直接接触，但未观察到典型的突触联系。5-HT样阳性纤维终末可与NK1R免疫阴性的树突形成非对称性突触。本实验结果提示：5-HT可能通过旁分泌的方式或通过中间神经元间接调节PBC内NKlR样阳性神经元的活动，以实现对中枢呼吸节律的调控。     

大鼠脑干至脊髓5-羟色胺投射纤维的起源——免疫细胞化学和酶组织化学双重标记法

本文应用 HRP 逆行追踪与免疫细胞化学相结合的双重标记技术,研究了大鼠脑干至脊髓5-羟色胺(5-HT)投射纤维的起源,并对中缝核群和网状结构内5-HT 阳性细胞、HRP 标记细胞和5-HT-HRP 双重标记细胞进行了数量分析。结果表明,1.在延髓、脑桥尾侧部,5-HT-HRP双重标记细胞约占5-HT 阳性细胞的55%;占 HRP 标记细胞的45%。中脑仅有极少数5-HT-HRP双重标记细胞。2.脑干至脊髓5-HT 下行投射,主要起源于中缝苍白核、中缝隐核、中缝大核和延髓浅表弓状纤维区,所含双重标记细胞约占双重标记细胞总数的68%。3.浅表弓状纤维区、舌下神经根间核、中缝苍白核和中缝隐核主要为5-HT 下行投射;中缝大核及周围网状结构主要为非5-HT 下行投射。     

5-羟色胺3A型受体在成年小鼠杏仁体基底外侧核中间神经元内的表达

目的:研究5-羟色胺3A型受体(5-HT3Areceptor;5-HT3AR)在杏仁体基底外侧核中间神经元内的表达。方法:以成年5-HT3AR-BACEGFP转基因小鼠作为材料,利用免疫组织化学技术在激光共聚焦显微镜下观察成年小鼠杏仁体基底外侧核中5-HT3AR在不同类型中间神经元内的表达。结果:杏仁体基底外侧核中分布着大量的5-HT3AR免疫阳性神经元。5-HT3AR在小鼠杏仁体基底外侧核中Calretinin(CR)、血管活性肠肽(Vasoactive in-testinal peptide,VIP)和Reelin免疫阳性的中间神经元中大量表达,而在Calbindin(CB)、Parvalbumin(PV)或Neu-ropeptide Y(NPY)免疫阳性的中间神经元中很少表达。结论:杏仁体基底外侧核中存在5-HT3AR免疫阳性中间神经元,不同类型的中间神经元中5-HT3AR的表达比例不同。     

5-羟色胺及其受体亚型在慢性前列腺炎大鼠脊髓的差异性表达

目的研究5-HT和5-HT2A、5-HT2C、5-HT5A和5-HTR7受体(5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR5A和5-HTR7)在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)大鼠T13~S1脊髓节段的差异性表达。方法将SD大鼠随机分为对照组、45 d、60 d和90 d模型组,用自身免疫法构建CP/CPPS模型。用免疫组织化学及RT-PCR法检测脊髓T13~L2、L3~L4和L5~S1节段5-HT及各受体的表达。结果 CP/CPPS大鼠自发性疼痛行为学评分显著高于对照组(P0.05)。5-HT在各模型组大鼠脊髓3个节段表达均下降。在T13~L2节段,5-HTR2A、5-HTR5A的表达持续上调(P0.05),5-HT2C、5-HTR7先升高后下降(P0.05);在L3~L4节段各受体表达均先升高后下降(P0.05);在L5~S1节段,5-HT2C、5-HTR5A的表达持续上调(P0.05),5-HTR2A、5-HTR7先升高后下降(P0.05)。结论 5-HT及5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR5A和5-HTR7在不同时程CP/CPPS大鼠脊髓出现差异性表达,提示5-HT及其受体参与了CP/CPPS的中枢调控,其具体机制有待进一步的研究。     

大鼠终纹床核5-羟色胺免疫阳性神经纤维和终支的起源

本文用WGA-HRP逆行束路追踪结合免疫酶组织化学双标记法,对大鼠终纹床核5-羟色胺(5-HT)免疫阳性神经纤维和终支(5-HT纤维)的起源进行了研究。结果如下,终纹床核主要区域的5-HT纤维,除主要起源于中缝背核和中央上核外,尚有部分纤维源自B_9组细胞群和尾侧线形核;在这些发出纤维支配终纹床核的中缝核神经元中,约有1/3为5-HT免疫阳性且主要为同侧;除少数区域外,这些核群内所有类型的5-HT免疫阳性神经元均有部分发出纤维投射到终纹床核。     

小鼠中缝背核至丘脑室旁核参与伤害性信息的形态学研究

目的:观察中缝背核(DR)内5-羟色胺(5-HT)能神经元向丘脑室旁核(PVT)内速激肽-1(TAC1)免疫阳性神经元的投射,并观察该通路在伤害性刺激下的激活情况。方法:将逆行示踪剂荧光金(FG)注入小鼠PVT,观察FG逆标神经元在DR内的分布,同时利用免疫组织荧光染色技术观察DR内5-HT能神经元与FG逆标神经元之间的共存情况;继而选用TAC1-ires-Cre小鼠结合RV逆标病毒,在DR观察向PVT内TAC1阳性神经元发出投射的突触前神经元的分布;最后利用TAC1-ires-Cre与Rosa26:CAG-LSL-tdTomato(Ai9)杂交小鼠制备坐骨神经分支损伤(SNI)模型,观察PVT内被激活的TAC1阳性神经元与5-HT能神经终末之间的关系。结果:(1)将FG注入PVT后,在DR的吻、中、尾段均可见FG逆标神经元,其分布以中段为主,吻、尾段数量相对较少,并且在DR内观察到5-HT和FG的双标神经元。(2)向TAC1-ires-Cre小鼠的PVT内注射RV逆行跨突触三联病毒后,在DR内也可见RV标记的突触前神经元,主要分布于DR中段。(3)SNI模型下TAC1-Cre::Ai...