RP-HPLC法同时测定白头翁汤中8种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定白头翁汤(白头翁、黄连、黄柏、秦皮)中8种成分的含有量。方法白头翁汤水提液的分析采用Agilent ZOBAX XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以0.1%磷酸(p H=3.7)-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;检测波长315 nm(秦皮甲素、秦皮乙素)、284 nm(黄柏碱)、345 nm(表小檗碱、盐酸小檗碱、巴马汀、黄连碱)、210 nm(白头翁皂苷B_4)。结果秦皮甲素、黄柏碱、秦皮乙素、表小檗碱、巴马汀、黄连碱、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B_4分别在0.5~160、64~640、0.75~150、0.5~100、1.35~550、0.12~140、0.7~140、0.5~170 ng/m L范围内线性关系良好,平均回收率均大于96%,RSD均在2.5%以下。结论该方法准确灵敏,可用于白头翁汤的质量控制。     

秦皮薄层鉴别方法的改进

目的:对秦皮薄层鉴别的展开系统进行改进。方法:改进了原标准的展开系统,采用硅胶G板,以二氯甲烷-甲醇-甲酸(7∶0.5∶0.5)为展开剂,置紫外光灯(365 nm)下检视秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素。结果:在供试品色谱中,秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素斑点清晰,分离度好,重现性好。结论:该方法的展开系统减少了对环境的污染和对人体的伤害,可替代原标准用于秦皮的鉴别。     

基于多指标权重分析和正交设计法优选白黄泄热止痢片复方提取工艺

目的确定指标权重,优选白黄泄热止痢片复方提取工艺,为其工业化生产提供参考。方法以白头翁皂苷B4、盐酸小檗碱、秦皮甲素、秦皮乙素、东莨菪内酯溶出量和出膏率为评价指标,采用层次分析法(AHP)、CRITIC法及AHP-CRITIC混合加权法确定各指标权重系数,结合正交试验结果优化复方醇提工艺参数。结果白头翁皂苷B4、盐酸小檗碱、秦皮甲素、秦皮乙素和东莨菪内酯分别在121.1~1211.0、82.2~822.0、22.3~223.0、15.42~154.2、1.6~16.0μg/m L内呈良好的线性关系(r为0.999 7~0.999 9),加样回收率为99.23%~100.63%,RSD均小于3.0%;AHP-CRITIC混合加权法较AHP法和CRITIC法科学、合理、稳定,按照其确定的权重系数进行综合评价确定的复方最佳提取工艺条件为处方药材加8倍量60%乙醇,提取3次,每次2.0 h。结论 AHP-CRITIC混合加权法确定的权重系数客观、真实,可以反映处方配伍信息;优选得到的工艺稳定可行,重复性好,可用于工业化生产。     

UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分

目的:建立UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分(秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯)的方法,比较不同厂家及批次秦皮配方颗粒中7种成分含量的差异,为秦皮配方颗粒的科学质量控制提供依据。方法:采用Waters超高效液相色谱仪,Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~1 min,5%~10%A;1~10 min,10%~12%A),流速0.4 m L·min~(-1),进样量2μL,柱温38℃,检测波长220 nm。结果:色谱峰纯度结果表明方法专属性良好。秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯分别在各自范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.0%(RSD 2.0%),99.5%(RSD2.1%),99.9%(RSD 1.5%),99.7%(RSD 2.2%),99.4%(RSD 1.4%),100.8%(RSD 1.8%),99.4%(RSD 2.6%)。结论:该方法简便、准确,适用于秦皮配方颗粒中7种成分的同时定量测定,分析时间明显缩短,并对秦皮配方颗粒中除秦皮甲素和秦皮乙素之外的多种成分首次进行了定量测定,不同厂家及批次的秦皮配方颗粒主要成分含量存在一定的差异。     

秦皮提取物中香豆素类成分含量测定方法研究

目的分别建立秦皮提取物总香豆素和4种主要香豆素成分紫外分光光度法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法。方法采用UV,以秦皮甲素为对照品,在334 nm测定秦皮提取物总香豆素的含量;采用HPLC,用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.01%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,在334 nm测定秦皮提取物中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素4种主要香豆素成分的含量。结果秦皮甲素的质量浓度在5.76~23.04μg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.6%(RSD=1.8%);4种香豆素成分秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的质量分别在0.055 0~3.850 0μg(r=0.999 7)、0.053 9~3.773 0μg(r=0.999 8)、0.060 0~0.660 0μg(r=0.999 9)、0.056 2~0.618 2μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.97%(RSD=1.26%)、100.80%(RSD=2.22%)、99.04%(RSD=2.47%)、98.77%(RSD=1.94%)。结论 2种含量测定方法简便、准确、可靠,可用于秦皮提取物总香豆素和主要香豆素成分的质量控制。     

HPLC法同时测定秦皮中四种成分含量的研究

目的:建立同时测定秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷的HPLC法,为秦皮的质量评价提供定量方法基础。方法:色谱柱:Betasil-C18(250mm×4.6mm,5μm,LOT:13697),流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(13∶87),检测波长:334nm,柱温:30℃,流速:1ml/min。结果:秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷分别在0.3090~3.0900μg、0.1275~1.2750μg、0.0276~0.2760μg、0.0540~0.5400μg(r=0.999)呈线性关系。结论:本法简单、快速,重现性好,准确度高,色谱峰分离度好。     

综合评分法优化白头翁汤提取工艺

目的:优化白头翁汤的提取工艺.方法:在初试的基础上,采取正交实验设计,以白头翁皂苷含量、小檗碱含量、秦皮甲素含量和得膏率为评定指标,用综合评分法进行数据处理,考察加水量、提取时间、提取次数对白头翁汤皂苷、小檗碱和秦皮甲素含量的影响.结果:白头翁汤优化提取工艺为10倍量的水,提取1.0小时,提取3次.结论:该提取工艺合理,有效成分提取效率高.     

白头翁汤有效成分检查和测定

应用定性反应及薄层层析法检出白头翁汤中小檗碱、七叶甙、七叶内酯、白头翁皂甙A_3皂甙B_4的存在;另用分光光度法测定白头翁汤中小檗碱和七叶甙的含量,发现皆比黄连和秦皮中的含量降低,尤以小檗碱显著。     

秦皮总香豆素不同提取工艺对比研究

目的考察不同提取工艺对秦皮总香豆素提取率及主要香豆素活性成分含量的影响,以确定其适宜的提取工艺。方法采用正交设计法,以综合指标秦皮总香豆素提取率为考察指标,分别以水和醇作为溶剂,对秦皮提取工艺进行优选。结果秦皮水提取最佳工艺:秦皮饮片加9倍量水,煎煮3次,每次煎煮1.5 h。水提取秦皮出膏率为28.87%,总香豆素含量为19.26%、提取率为5.56%,秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素总含量为13.47%。秦皮醇提取最佳工艺:秦皮饮片用8倍量75%乙醇回流2次,每次2 h。醇提取秦皮出膏率为30.47%,总香豆素含量为21.72%、提取率为6.62%,秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素总含量为15.29%。2种工艺对比,醇提取比水提取出膏率提高了5.54%,总香豆素含量提高了12.77%、提取率提高了19.06%,4种香豆素成分总含量提高了13.51%,差异均有统计学意义(P0.05)。结论醇提取工艺各考察指标均优于水提取工艺,故应采用75%乙醇提取秦皮总香豆素,且工艺稳定。     

白头翁汤中药物配伍对化学成分的影响

<正> 白头翁汤由白头翁、黄连、黄柏和秦皮四味中药配伍组成,具有清热解毒、凉血止痢之功效,为中医临床用于治疗热痢的常用方剂。有关白头翁汤中化学成分的研究未见报道。本文采用萃取分光光度法和薄层层析-分光光度法分别测定白头翁汤中小檗碱和     

秦皮甲素和秦皮乙素在大鼠体内的药物动力学研究

目的测定秦皮甲素和秦皮乙素在大鼠体内的血药浓度及药代动力学参数。方法大鼠口服给予秦皮甲素和秦皮乙素各60 mg·kg~(-1),于给药后不同时间点采血,UPLC法测定血浆秦皮甲素和秦皮乙素含量,3P87计算药代动力学参数。结果秦皮甲素和秦皮乙素的主要药动学参数:T_(max)分别为0.164,0.0643 h;C_(max)分别为4.778,3.576μg·m L~(-1);AUC_(0-4)分别为5.360,5.682μg·m L~(-1)·h;AUC_(0-∞)分别为7.449,11.691μg·m L~(-1)·h;CL/F(s)分别为7.938,11.055 mg·kg~(-1)·h·μg~(-1)·m L;二者均符合二室模型。结论建立了大鼠血浆中秦皮甲素和秦皮乙素的UPLC检测方法,方法灵敏准确,适用于药代动力学研究。     

秦皮配方颗粒UPLC指纹图谱研究

目的:建立秦皮配方颗粒的超高效液相(UPLC)指纹图谱,为秦皮配方颗粒的鉴别及其质量控制提供实验依据。方法:采用UPLC法,以Zorbzx Eclipse XDB C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱;甲醇-0.4%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1;检测波长为245 nm;柱温25℃。结果:建立了秦皮配方颗粒的UPLC指纹图谱,以秦皮甲素为参照,确定了15个共有峰为特征峰,并指认出1号峰为秦皮甲素、2号峰为秦皮乙素、3号峰为秦皮苷、4号峰为秦皮素,对照指纹图谱色谱峰丰富,相似性好。结论:该方法稳定、可靠,可用于秦皮配方颗粒的快速鉴别、质量评价与控制。     

HPLC法测定秦皮配方颗粒中秦皮甲素、秦皮乙素的含量

目的　建立秦皮配方颗粒中清热、抗炎有效成分秦皮甲素、秦皮乙素 (以下简称甲素、乙素 )的HPL C定量测定方法。方法　以 C1 8化学键合硅胶柱为固定相 ,甲醇 -水 -冰醋酸 (31∶ 6 9∶ 0 .4 )为流动相 ,UV检测波长为 335 nm。结果　甲素、乙素保留时间分别为 2 .92 min和 5 .32 min,经鉴定甲素、乙素均为单一物质色谱峰 ;甲素、乙素的标准曲线分别在 1.12 8～ 5 .6 4 0 μg(r=0 .9999)和 0 .0 814 4～ 0 .4 0 72 μg(r=0 .9998)之间有良好线性关系 ,甲素、乙素的加样回收率分别为 (95 .2 1± 3.31) %和 (96 .84± 2 .77) %。结论　方法准确 ,快速 ,简便 ,重现性好 ,可用于秦皮配方颗粒中秦皮甲素、秦皮乙素的含量测定。     

苦枥白蜡树化学成分的研究

作者从苦枥白蜡树树皮中分离到5种香豆素类成分:秦皮甲素(aesculin)、秦皮乙素(aesculetion)、秦皮苷(fraxoside)、秦皮素(fraxetol)、8-羟基-6,7-二甲氧基香豆素[1,2],现又从该树皮中分离到1个化合物(Ⅵ),该化合物为首次从苦枥白蜡树树皮中获得,经结构鉴定为6-羟基-7,8-二甲氧基香豆素.     

复方白头翁汤结肠缓释片质量标准研究

目的:建立复方白头翁汤结肠缓释片的质量标准。方法:采用TLC对制剂中的白头翁、黄连和黄柏、秦皮进行定性鉴别;采用HPLC测定制剂中白头翁皂苷B4和盐酸小檗碱的含量。结果:白头翁、黄连和黄柏、秦皮薄层图谱斑点清晰,分离效果好,专属性强,限性对照无干扰;白头翁皂苷B4在0.60～6.00μg呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均加样回收率100.08%,RSD 0.19%;盐酸小檗碱在0.135～1.350μg呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为99.25%,RSD0.58%。结论:建立的定性、定量方法简单、重复性好,结果准确可靠,可作为复方白头翁汤结肠缓释片的质量控制方法。     

基于指纹图谱和网络药理学的秦皮质量标志物（Q-Marker）预测分析

目的 在中药质量标志物（qualitymarker,Q-Marker）“五原则”指导下，基于指纹图谱和网络药理学方法，从可测性和有效性角度分析预测秦皮潜在的Q-Marker。方法 建立15批秦皮饮片指纹图谱，进行聚类分析（hierarchicalcluster analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）和偏最小二乘判别分析（partial least-squares discrimination analysis,PLS-DA），运用网络药理学方法构建“成分-靶点-通路”网络图，并预测秦皮饮片的Q-Marker，同时进行定量分析。结果 建立了15批秦皮饮片指纹图谱，在21个共有峰中指认出4号峰为秦皮苷、6号峰秦皮乙素、7号峰秦皮素、9号峰秦皮甲素，HCA、PCA和PLS-DA结果大体相符，网络药理学筛选出潜在的21个活性成分、129个核心靶点、159条关键通路，整合指纹图谱、模式识别及网络药理学方法，共同辨识出可测性、有效性、特有性原则的潜在Q-Marker为秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素、秦皮甲素，四者含量依次为0.93%～2...     

HPLC测定不同品种秦皮药材中香豆素类成分

秦皮为常用中药，《神农本草经》列为上品。药典(2005年版)规定秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance.、白蜡树F. chinensis Roxb.、尖叶白蜡树F. szaboana Lingelsh.、宿柱白蜡树F. stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮。苦、涩、寒。归肝、胆、大肠经。具有清热燥湿，收涩，明目的功能［1］。现代药理实验表明，秦皮具有抗菌、消炎、镇静、利尿、镇咳、祛痰和平喘等作用［2］。本研究从苦枥白蜡树皮中分离到5种香豆素成分，分别为秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷、6,7-二甲氧基-8-羟基香豆素，并对其进行了结构鉴定。以往研究曾采用HPLC对部分品种药材中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷进行含量测定［3］。在此基础上，本研究运用HPLC对药典收载的4个品种秦皮药材中5种香豆素类成分进行了含量测定，用5个成分共同标定秦皮药材的质量，结果表明该方法操作简单，精密度好，准确可靠。为建立秦皮药材科学合理的质量控制方法提供了依据。     

大鼠尿液中秦皮甲素和秦皮乙素代谢物的HPLC-MSn分析

目的:探索秦皮乙素和秦皮甲素在大鼠尿液中的代谢物,以期阐明这2种药物在体内作用的化学基础。方法:单次灌胃给药秦皮乙素和秦皮甲素后收集48 h内大鼠尿液,经固相萃取法处理,采用HPLC-MS~n检测代谢产物,色谱条件为流动相甲醇-0.2%甲酸(12∶88),流速1.0 m L·min~(-1),进样量5μL,柱温35℃,检测波长339 nm;质谱条件为电喷雾离子化方式,正离子扫描模式,喷雾电压3.0 k V,碰撞气流量0.16 m L·min~(-1),洗脱溶剂温度350℃,离子源温度450℃。结果:从大鼠尿液中发现并初步鉴定了5个代谢产物的化学结构,主要为秦皮乙素的水解产物、还原产物、甲基化产物及硫酸化产物。结论:推测秦皮甲素在体内先水解为秦皮乙素,再进行水解、还原、甲基化及硫酸化反应。     

HPLC-ELSD法测定白头翁总皂苷碱水解产物中8种皂苷

目的 建立同时测定白头翁总皂苷碱水解产物中8种皂苷成分的HPLC-ELSD方法.方法 采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2％甲酸水溶液;柱温35℃;梯度洗脱条件:0～30 min,70％～100％甲醇;体积流量1.0 mL/min; ELSD气化室温度40℃;气体压力350 kPa.结果 白头翁皂苷D、常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖、白头翁皂苷A、黑海常春藤苷A1、白头翁皂苷F、齐墩果酸3-D-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、齐墩果酸3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷进样量分别在0.799～4.568、0.563～6.756、0.431～2.683、0.894～7.826、0.643～7.504、1.351～7.822、0.629～2.515、0.698～2.794 μg,峰面积(A)的对数值lgA与相应质量(M,μg)的对数值lgM呈良好的线性关系(n=5),8种成分的平均回收率在99.0％～101.0％,且RSD值均小于1.5％.结论 本检测方法简便、准确,为白头翁总皂苷碱水解产物的质量控制提供了依据.     

基于标准汤剂的秦皮（白蜡树）配方颗粒质量标准分析

目的：建立基于标准汤剂的秦皮(白蜡树)配方颗粒质量标准,为该配方颗粒的质量控制提供依据。方法：利用15批秦皮(白蜡树)标准汤剂和3批秦皮(白蜡树)配方颗粒建立了高效液相色谱法(HPLC)特征图谱,流动相0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～10 min,12%～15%B;10～30 min,15%～32%B),检测波长220 nm,并进行相似度评价、聚类分析及主成分分析(PCA)。针对特征图谱中的共有峰建立HPLC一测多评法(QAMS),测定秦皮(白蜡树)标准汤剂与配方颗粒中主要成分的含量。测定秦皮(白蜡树)饮片中相应成分的含量,计算从饮片到标准汤剂及配方颗粒的转移率。结果：3批秦皮(白蜡树)配方颗粒特征图谱与标准汤剂对照特征图谱的相似度均>0.9,共确定了7个共有峰。聚类分析及PCA结果表明,不同批次标准汤剂成分存在一定差异性,未表现出产地聚集性。15批秦皮(白蜡树)标准汤剂出膏率6.18%～11.62%,秦皮甲素、紫丁香苷、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素、木通苯乙醇苷B质量分数分别为44.92～103.51、1.36～11.87、33.26～90.73、4.63～29....