脐血干细胞移植治疗糖尿病足11例

2006-11/2008-10青岛市城阳人民医院行脐血间充质干细胞移植的糖尿病足患者11例,病程6～18年,经药物治疗6个月以上及(或)支架置入治疗,血管搭桥效果均不佳.本组患者均有足部和(或)下肢发凉、疼痛、间歇性跛行,静息痛7例,足部皮肤色泽异常7例,足部溃疡6例,坏疽4例,合并感染2例.脐血间充质干细胞来自健康分娩孕妇的脐带血,由深圳市北科细胞工程研究所提供.患者硬膜外麻醉或腰庥后,将脐血间充质干细胞悬液分多点注射到病变下肢,细胞数(1～6)×1011L-1,每点0.3～0.5 mL,各点间距约3cm×3 cm,肌肉组织丰富的部位可分层注射.移植后1～4周,9例足部疼痛缓解或减轻,10例冷感明显改善;移植后4～16周,4例溃疡面有不同程度的缩小、愈合,2例足部坏疽创面缩小并基本愈合,且下肢得以保留,1例患肢截肢,但降低了截肢平面;移植后12～24周,6例间歇性跛行有明显改善,3例患肢的踝肱指数有所增加,3例血管造影示有不同程度的侧支血管形成.脐血间充质干细胞移植方法简单,创伤小,能有效地增加患者下肢血流,促进溃疡愈合,使一部分患者避免截肢或降低截肢平面.     

脐血间充质干细胞移植治疗帕金森病30例

目的:观察脐血间充质干细胞移植治疗帕金森病患者神经功能的效果.方法:选择2008-01/12北京和众华信治疗中心收治的帕金森病患者30例,均经过英国皇家医师学会帕金森病诊断与管理指南的帕金森病诊断标准确诊,男19例,女11例,年龄45～66岁,平均年龄58岁,Hoehn-Yahr分级为Ⅱ～Ⅳ级,患者对治疗均签署知情同意书,治疗方案经医院医学伦理委员会批准.所有患者均住院治疗,第1周进行常规检查,30例患者血、尿、便常规、肝肾功能、多项肿瘤标记物、胸片等均正常.自第2周起患者应用脐带血间充质干细胞进行鞘内注射移植治疗,以第3,4腰椎间隙为穿刺点,缓慢注入地塞米松2 mg,取脐血间充质干细胞注射液5 mL(干细胞数500万),在10 min内缓慢注入蛛网膜下腔,1次/周,4次为1个疗程,共治疗1个疗程.采用帕金森病统一评分量表对患者移植前后神经功能进行评定,分值越高表示神经功能缺损越严重.结果:30例患者均进入结果分析,中途无脱落.与移植前比较,30例患者移植后3个月帕金森病统一评分量表分值均明显降低(P<0.01),患者震颤、强直、运动迟缓、姿势不稳等临床症状均得到明显改善,均未出现移植物抗宿主病.结论:脐血间充质干细胞移植可以一定程度地改善帕金森病患者的临床症状,提高患者生活质量.     

脐血间充质干细胞移植治疗多系统萎缩20例

目的:观察脐血间充质干细胞移植治疗帕金森病患者神经功能的效果.方法:选择2008-01/12北京和众华信治疗中心收治的帕金森病患者30例,均经过英国皇家医师学会帕金森病诊断与管理指南的帕金森病诊断标准确诊,男19例,女11例,年龄45～66岁,平均年龄58岁,Hoehn-Yahr分级为Ⅱ～Ⅳ级,患者对治疗均签署知情同意书,治疗方案经医院医学伦理委员会批准.所有患者均住院治疗,第1周进行常规检查,30例患者血、尿、便常规、肝肾功能、多项肿瘤标记物、胸片等均正常.自第2周起患者应用脐带血间充质干细胞进行鞘内注射移植治疗,以第3,4腰椎间隙为穿刺点,缓慢注入地塞米松2 mg,取脐血间充质干细胞注射液5 mL(干细胞数500万),在10 min内缓慢注入蛛网膜下腔,1次/周,4次为1个疗程,共治疗1个疗程.采用帕金森病统一评分量表对患者移植前后神经功能进行评定,分值越高表示神经功能缺损越严重.结果:30例患者均进入结果分析,中途无脱落.与移植前比较,30例患者移植后3个月帕金森病统一评分量表分值均明显降低(P＜0.01),患者震颤、强直、运动迟缓、姿势不稳等临床症状均得到明显改善,均未出现移植物抗宿主病.结论:脐血间充质干细胞移植可以一定程度地改善帕金森病患者的临床症状,提高患者生活质量.     

脐血间充质干细胞移植与免疫调节

背景：近年研究显示,脐血间充质干细胞的自我更新和多向分化潜能为细胞移植治疗提供了基础条件,而其免疫调节功能也极大地拓展了细胞治疗的方向和范围。目的：就近期脐血间充质干细胞的免疫调节和细胞移植研究进行回顾分析。方法：应用计算机以＂umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells＂为关键词检索Pubmed数据库,以＂脐血间充质干细胞＂为关键词检索知网数据库,时间限定为2008-01/2011-06,语言种类为＂English＂和汉语。通过阅读标题和摘要进行初筛,排除研究内容与此文无关的文献、重复性研究及Meta分析,选择近期发表或发表在权威杂志的30篇文献进行综述。结果与结论：脐血间充质干细胞具有与骨髓间充质干细胞相似的自我更新和多向分化潜能。通过细胞移植技术,脐血间充质干细胞在糖尿病、神经退化性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病等以及神经损伤后的修复治疗方面显示出很强的潜力。同时,脐血间充质干细胞又具有免疫调节作用,其可通过下调T细胞的增殖,降低免疫反应。利用该特点,脐血间充质干细胞在一些免疫性疾病,如移植物抗宿主病和狼疮性肾炎等疾病的细胞治疗方面也取得了积极的进展。     

脐血间充质干细胞在造血干细胞移植中的临床应用

目的研究联合间充质干细胞和造血干细胞移植后的临床效果。方法实验组为联合移植的病例7例,对照组为外周造血干细胞移植的病例8例,通过分别观察每名患者的血小板重建时间、白细胞重建时间、住层流病房时间以及移植前后症状的改善情况、感染情况、GVHD发生率以及1年存活率来进行统计分析,判断2组的移植效果。结果实验组与对照组病例血小板重建平均时间分别为8.714、19.500 d,P<0.01;粒系重建平均时间分别为12.143、19.500 d,P<0.05;住层流病房平均时间分别为23.857、36.750 d,P<0.01;感染发生率分别分别为28.57%、62.50%;GVHD发生率为0、37.50%;一年内死亡率分别为0、12.5%。结论联合脐血间充质干细胞移植对造血干细胞移植后的归巢、发育、分化、成熟以及移植后的造血重建都有促进的作用,有助于减少移植后患者的感染率、GVHD发生率及死亡率,是造血干细胞移植技术的一步大跨越。     

脐血间充质干细胞移植治疗多系统萎缩1例的临床分析

2008-09北京和众华信治疗中心收治的1例多系统萎缩患者,给予控制血压、扩张血管、抗自由基、营养神经、稳定细胞膜等治疗的同时,进行脐血间充质干细胞鞘内注射移植,患者取左侧卧位,屈髋屈膝屈颈,以第3,4腰椎间隙为穿刺点,局部麻醉后以9号穿刺针垂直刺入蛛网膜下腔,缓慢注入地塞米松2 mg,取脐血间充质干细胞注射液5 mL(干细胞数目500万),在10 min内缓慢注入蛛网膜下腔,1次/周,4次为1个疗程,共治疗1个疗程.采用UMSARS多系统萎缩量表中的轮替、对指和踏步指标进行评分,分值越高表示病情越重.与移植前比较,脐血间充质干细胞移植4周后,UMSARS多系统萎缩量表评分由91分降到60分,卧立位血压无明显变化,肌张力明显下降,患者头部可自主抬高、低头并向两侧转动,四肢运动功能明显提高,双上肢肌力5,可以自主运动,抬高可触及头顶;左侧下肢肌力恢复至4级,右侧下肢肌力3+级;说话语言清晰,语速较慢,进食的连贯性接近正常.脐血间充质干细胞移植后随访3个月,患者未出现明显的副反应.提示应用脐血间充质干细胞移植治疗此例多系统萎缩患者是有效的,其神经功能明显恢复.     

异基因脐血间充质干细胞移植治疗Emery-Dreifuss型肌营养不良1例

2008-02南京医科大学附属无锡第二医院神经内科收治的男性患者1例,32岁,体质量38 kg,四肢无力、肌萎缩18年,突发头晕、呕吐3 d后入院,经基因分析和肌肉活检确诊为Emery-Dreifus型肌营养不良并发小脑梗死.经HLA配型在上海市脐血库中寻找到一个与受者非血源相关、HIA全相合、Rh血型相合、ABO血型主侧不合的脐血供体,于入院后第9天采用白消安+环磷酰胺+兔抗胸腺淋巴细胞球蛋白预处理后,通过外周静脉移植异基因脐血间充质干细胞悬液40 mL,10滴/min,实际输入的有核细胞数为31.98×106.细胞移植5周后,患者头晕消失,吞咽困难、饮水呛咳症状明显好转,可连续饮水,双手协调动作较移植前好转,可操作电脑,体质量约增长4 kg;移植后半年,血清肌酸磷酸激酶由移植前35.79 μkat/L降至9.55 μkat/L,血清肌酸磷酸激酶同工酶由移植前18.20 μkat/L降至4.78 μkat/L,肌红蛋白由移植前413.50 μg/L降至213.20 μg/L,功能独立性评分由71分提高至101分,未见免疫排斥反应及致痛趋性.提示脐血间充质干细胞移植后能在短期内使血清肌酸磷酸激酶水平下降,改善运动功能,有助于Emery-Dreifuss型肌营养不良的治疗,近期安全性可靠.     

脐血间充质干细胞移植治疗小儿痉挛性脑瘫的临床研究

目的观察脐血间充质干细胞(UCMSCs)移植治疗痉挛性脑性瘫痪的临床疗效。方法采用随机数字表法将痉挛性脑性瘫痪患儿20例分为对照组(12例,Vojta运动疗法)和治疗组(8例,UCMSCs移植疗法)。脐血采集前经产妇知情同意并签订知情同意书,各项检测指标均为阴性。分离后的细胞经过培养、传代,流式细胞仪鉴定细胞免疫表型,治疗组患儿经静脉途径分次注射UCMSCs,7 d注射1次,4次为1疗程。分别对2组治疗前、后对患者肌张力、运动功能进行评价,对2种治疗结果进行对比。结果组内比较,治疗组经UCMSCs移植疗法14 d后MAS评分较治疗前显著下降(2.07±0.45 vs 2.96±0.79),对照组经Vojta运动疗法治疗60 d后MAS评分较治疗前显著下降(1.95±0.43 vs 2.92±0.64);组间比较,治疗14 d后对照组MAS评分显著低于对照组(2.07±0.45 vs 2.83±0.68)(P<0.05)。治疗3个月后,2组患者脑性瘫痪综合功能评分(18.87±8.22vs 32.42±5.36,26.25±6.39 vs 33.62±5.96)和GMFM评分(37.45±8.14 vs 55.79±10.13,45.33±8.34vs 56.05±9.17)与治疗前组内比较P<0.05;组间比较,治疗组脑性瘫痪综合功能评分和GMFM评分(18.87±8.22 vs 26.25±6.39,37.45±8.14 vs 45.33±8.34)显著低于对照组(P<0.05)。治疗组1例患者UCMSCs移植后为出现发热(体温为38.6℃);Vojta运动疗法不良反应暂未发现。结论 UCMSCs移植治疗痉挛性脑瘫与Vojta比较,疗效快,可显著降低患儿肌张力,提高运动能力。     

脐血单个核细胞移植治疗糖尿病足23例

背景：以自体骨髓、外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病足,对缺血性病变及周围神经损伤所致临床症状有改善作用。目的：观察脐血单个核细胞移植治疗糖尿病足病缺血及神经损伤的疗效。对象：选取2006/2010住院行脐血单个核细胞移植治疗的糖尿病足病患者23例,脐血单个核细胞稀释后双下肢肌肉内注射,每点1~3mL,间隔约3cm。单个肢体移植1.23×108~1.06×109个,共计38条肢体。结果与结论：移植后踝肱指数升降不一,移植后6个月疼痛评分及冷感评分明显改善,间歇性跛行及皮肤温度、经皮氧分压治疗后3,6个月比较差异均有显著性意义;对神经病变损伤自觉症状评分、临床检查评分、振动觉阀值移植后6个月与移植前比较差异有显著性意义。腓浅神经、胫神经感觉神经传导速度,腓总神经、胫神经运动神经传导速度,在移植后3个月与移植前比较,差异无显著性意义（P〉0.05）,移植6个月与移植前相比较有升高,差异有显著性意义（P〈0.05）。可见脐血单个核细胞可以改善糖尿病缺血性病变及周围神经病变的临床症状及客观指标。     

脐血单个核细胞移植治疗糖尿病足23例

背景:以自体骨髓、外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病足,对缺血性病变及周围神经损伤所致临床症状有改善作用。目的:观察脐血单个核细胞移植治疗糖尿病足病缺血及神经损伤的疗效。对象:选取2006/2010住院行脐血单个核细胞移植治疗的糖尿病足病患者23例,脐血单个核细胞稀释后双下肢肌肉内注射,每点1~3mL,间隔约3cm。单个肢体移植1.23×108~1.06×109个,共计38条肢体。结果与结论:移植后踝肱指数升降不一,移植后6个月疼痛评分及冷感评分明显改善,间歇性跛行及皮肤温度、经皮氧分压治疗后3,6个月比较差异均有显著性意义;对神经病变损伤自觉症状评分、临床检查评分、振动觉阀值移植后6个月与移植前比较差异有显著性意义。腓浅神经、胫神经感觉神经传导速度,腓总神经、胫神经运动神经传导速度,在移植后3个月与移植前比较,差异无显著性意义(P>0.05),移植6个月与移植前相比较有升高,差异有显著性意义(P<0.05)。可见脐血单个核细胞可以改善糖尿病缺血性病变及周围神经病变的临床症状及客观指标。     

脐血干细胞移植治疗糖尿病足的临床观察

目的观察脐血干细胞移植治疗糖尿病足的临床疗效。方法回顾分析2009年3月至2010年5月本院应用脐血干细胞移植治疗10例糖尿病足患者的临床资料。首先获取脐血200～300ml,从中分离出单个核细胞悬浊液约40ml,行下肢缺血肌肉内局部注射。观察干细胞移植后临床表现及实验室检查指标改善情况,评价疗效。结果移植后大部分患者下肢疼痛、麻木、冷感、间歇性跛行均有不同程度缓解,足部皮温、踝臂指数、经皮氧分压较前明显升高,足部溃疡创面愈合6例,缩小1例。7例动脉造影随访患者均显示有新生侧支血管形成,2肢截小趾,1肢因疼痛、湿性坏疽、合并严重感染而行膝下截肢。结论对于经内科保守治疗无效,不能行血管搭桥术及介入治疗的糖尿病足患者,脐血干细胞移植治疗糖尿病足是一种有效的方法。     

人脐带血间充质干细胞治疗膝关节骨关节炎疗效研究

目的探讨人脐带血间充质干细胞(UC-MSCs)治疗膝关节骨关节炎的临床疗效和安全性。方法选取自2018年1月至2019年5月收治的48例膝关节骨关节炎患者为研究对象。根据随机数字表法将患者分为UC-MSCs组和安慰剂组,每组各24例。UC-MSCs组患者给予膝关节腔内注射UC-MSCs治疗,安慰剂组患者膝关节腔内注射生理盐水。随访12个月,比较两组患者的WOMAC、Lysholm评分;观察两组患者注射UC-MSCs后的软骨缺损变化情况以及安全性等。结果治疗6、12个月,UC-MSCs组患者的WOMAC评分均较治疗前明显下降,Lysholm评分均较治疗前明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);安慰剂组患者的WOMAC、Lysholm评分与治疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗6、12个月,UC-MSCs组患者的WOMAC评分均明显低于安慰剂组,Lysholm评分均明显高于安慰剂组,差异有统计学意义(P<0.05)。随访12个月,两组患者均未发现严重不良事件。结论膝关节腔内注射UC-MSCs治疗膝关节骨关节炎疗效较佳,且安全性较高。     

人脐血间充质干细胞体外向神经元样细胞分化的实验研究

目的:探讨来源于人脐带血的间充质干细胞体外诱导分化成神经元样细胞的可行性。方法:采用密度梯度离心方法分离人脐带血单个核细胞,用MesenCult培养液体外扩增生长传代培养,于倒置显微镜下观察其生长特性。取第3代的脐血间充质干细胞,用10μg／L成纤维细胞生长因子和30μmol／L全反式维甲酸诱导培养的细胞向神经细胞分化。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,于诱导前、诱导后5 d和10 d分别进行神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色。结果:培养3代的脐血间充质干细胞经全反式维甲酸和成纤维细胞生长因子诱导后发生形态改变,呈双极或多极的神经元样形态,诱导5 d时神经元特异性烯醇化酶表达率为(30.3±5.2)％,而诱导10 d时达到(53．9±6.5)％,二者差异有统计学意义(P<0．05),不表达胶质纤维酸性蛋白。结论:脐血间充质干细胞经成纤维细胞生长因子和全反式维甲酸体外诱导,能够分化为神经元样细胞。     

人脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞移植用于大鼠脊髓损伤的实验研究

目的:探讨人脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞(MSCs)移植对脊髓损伤功能恢复的影响,寻找一种更适合治疗脊髓损伤的细胞源。方法:采集新鲜人脐带血和脐带,分离培养单个核细胞和MSCs。将脊髓损伤模型随机分成3组:单个核细胞移植组、MSCs移植组和低糖必需培养基(L-DMEM)培养组。采用免疫组化和免疫荧光检测细胞移植后1—4周细胞在脊髓内的存活情况和迁移情况,使用BBB行为学评分评估大鼠脊髓功能恢复情况。结果:L-DMEM培养液组在术后各时间点观察评分无明显差异,而细胞移植组脊髓功能处于逐渐恢复过程,与L-DMEM培养液比较,差异有显著性意义。单个核细胞移植组对损伤脊髓功能的修复作用较MSCs移植组显著,且差异有显著性意义。结论:与MSCs相比较,人脐血单个核细胞更适合作为治疗脊髓损伤的细胞源。     

HLA不全相合无关脐血移植治疗急性淋巴细胞白血病

目的 研究HLA不全相合无关脐血移植治疗血液系统恶性肿瘤的疗效、造血重建、免疫重建情况及移植相关并发症。方法 对1例急性淋巴细胞白血病首次缓解的5岁女性患儿行HLA一个位点不合无关男性供体的脐血移植。预处理方案采用BU/CY(BU 16mg·kg~(-1),CY 120mg·kg~(-2),移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用CSA 骁悉(MMF)方案:CSA 3mg·kg~(-1)·d~(-1),MMF 250mg·d~(-1)。移植有核细胞数14.6×10~7/kg(受者体重),CD34~ 细胞7.24×10~5/kg(受者体重)。结果 移植后 6天～ 8天外周血白细胞(WBC)降至0, 27天WBC为1.2×10~9/L,中性粒细胞绝对计数(ANC)>0.5×10~9/L, 39天血小板计数(Plt)>20×10~9/L, 53天Plt>50×10~9/L, 60天Plt>100×10~9/L、Hb>100g·L~(-1)。 12天多聚酶链反应(PCR)检测Y染色体基因阳性; 39天受者外周血VNTR法检测DNA指纹图显示为供者型; 44天受者HLA-DRB1为:0701、0901,为供者白细胞抗原表达; 49天外周血及骨髓染色体核型结果为:46,XY,100％嵌合。 26天出现皮疹及肝肿大,诊断为Ⅱ°GVHD,使用甲基强的松龙2mg·kg~(-1)·d~(-1),症状控制。 98天康复出院。结论 开展HLA不全相合无关供体脐血移植在中国是可行的、有效的、较安全的,脐血的免疫学特性值得深入探讨。     

脐血间充质干细胞支持下脐血单个核细胞扩增的研究

目的 探讨脐血源间充质干细胞联合外源性细胞因子对脐血单个核细胞体外扩增的支持作用.方法 从脐血中分离、培养出间充质干细胞并检测其细胞表面抗原;以此间充质干细胞作为细胞滋养层.将脐血单个核细胞接种于无血清培养体系中培养18天,在第0、7、10、14及18天检测有核细胞总数、CD34+、CDl33+细胞数、集落形成单位数和(G2+M+S)期细胞含量变化.结果 ①从脐血中分离、培养出的间充质干细胞能稳定表达CD29、CD105和CD44,但不表达CD34和CD133;②外源性细胞因子及脐血源间充质下细胞均支持脐血间充质干细胞扩增,但以细胞因子联合脐血源间充质干细胞组效果最好,在第10天上述榆测指标达到峰值,分别为第0天的(6.91±1.91)、(7.75±1.24)、(6.49±1.33)、(15.62±1.29)和(28.26±6.58)倍,且维持造血至少18天.结论 ①从脐血巾能成功分离、培养出间充质下细胞,并完成细胞表型的初步鉴定;②外源性细胞因子联合脐血源间允质干细胞可有效扩增脐血单个核细胞.     

The effect of hypoxia preconditioning on the neural and stemness genes expression profiling in human umbilical cord blood mesenchymal stem cells

In recent years, human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cell (hUB-MSCs) has been regarded as an alternative source for stem cell therapy. In this study, we evaluated the effect of hypoxia preconditioning (HPC) on the expression of Nt-3, GFAP, Nestin, Oct-4 and Nanog genes and proliferative capacity of hUB-MSCs in comparison with normoxic conditions. HPC + Hypoxia protocol includes cultured hUB-MSCs for 15 min at 2.5% O₂ and after that reoxygenation for 30 min at 21% O₂ (HPC), and then hypoxia preconditioned hUB-MSCs subjected to 2.5% O₂ for 72 h (Hypoxia). Conclusively, the results showed that hypoxic preconditioning is an effective strategy for enhancing proliferation capacity of hUB-MSCs, and also can trigger expression of some of the neural genes. In addition, the concept of involvement of oxygen tension in the expression of some of the neural genes of hUB-MSCs would be a good sign of enhanced neural differentiation potential in vitro.     

人脐血间充质干细胞尾静脉移植治疗扩张型心肌病

背景：体外研究表明人脐血间充质干细胞可分化为自律性跳动的心肌细胞,而经静脉移植人脐血间充质干细胞治疗扩张型心肌病心力衰竭的报道较少。目的：探讨经尾静脉移植人脐血间充质干细胞对扩张型心肌病大鼠心肌结构、心功能的影响。方法：Wistar大鼠通过腹腔注射阿霉素诱导扩张型心肌病模型,扩张型心肌病实验组于造模后8周经尾静脉移植人脐血间充质干细胞,扩张型心肌病对照组注射等量DMEM培养基。健康对照组不造模,于相同时间点注射等体积的生理盐水。结果与结论：与健康对照组相比,扩张型心肌病组心功能明显受损,且扩张型心肌病实验组受损较扩张型心肌病对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T的表达。结果提示人脐血间充质干细胞移植能促进扩张型心肌病大鼠心功能恢复,使心肌组织病变减轻。     

脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变

背景：与骨髓和自体外周血干细胞相比,脐带间充质干细胞更原始,扩增能力更强,且免疫原性弱,无伦理问题,对于年老体弱的糖尿病患者更具有重要意义。目的：分析脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变的有效性和安全性。方法：56例中老年2型糖尿病下肢血管病变患者,随机分为对照组和观察组,对照组采用常规药物治疗,观察组采用脐带间充质干细胞移植治疗。结果与结论：观察组临床显效率高于对照组的临床显效率,差异有显著性意义（P〈0.05）;两组治疗后皮温、经皮氧、踝肱指数值均有好转表现,观察组踝肱指数值好转更明显（P〈0.05）;两组均未发现明显的不良反应。结果可见脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变是一种简便、安全、有效的治疗方法,近期疗效显著。