β防御素2融合VE-Cadherin重组质粒的抗血管生成免疫作用

目的构建β防御素2（BD2）融合血管内皮钙粘附素（VE—Cadherin）胞外段重组质粒,以期探讨其免疫后抗肿瘤血管生成作用。方法PCR扩增成熟BD2片段和VE—Cadherin胞外段。以连接肽连接成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段,通过重叠PCR构建融合分子。将所得三种片段插入到pSecTag2B真核表达质粒。转染CT26肿瘤细胞,RT—PCR检测其表达。取转染COS细胞后的上清液做趋化实验,检测融合分子对树突状细胞（DC）的趋化作用。所得质粒经肌肉注射免疫小鼠后,皮下植入包裹CT26肿瘤细胞的藻酸盐微球。检测血管生成情况。结果测序证实三种质粒构建正确。能在真核细胞中顺利表达。BD2融合重组质粒和未融合的BD2质粒转染细胞后的上清液趋化DC的能力相近（P〉0．05）。与其余各组质粒免疫相比,融合重组质粒免疫后能够显著抑制藻酸盐微球中肿瘤细胞诱导的血管生成（P〈0．01）。结论BD2融合血管生成相关分子后的重组质粒免疫动物后能在体内有效地打破机体对肿瘤新生血管的免疫耐受。     

血管生成素2与肿瘤血管生成

肿瘤血管是为肿瘤细胞输送氧气及营养物质的通道,也是实现肿瘤转移的重要通道之一。新近发现血管生成素(Angiopoietin,Ang)在血管新生中作用显著,尤其是血管生成素2(Angiopoietin-2,Ang-2),特异表达于肿瘤边缘的血管重建区,参与肿瘤血管新     

血管生成素4的研究进展

血管生成素家族及其受体Tie-2对内皮细胞功能及血管发生、重塑有重要作用。以往的研究多集中在血管生成素1和2上,而对血管生成素4的研究较少。在此主要对血管生成素4的来源、结构、分布和生物学特征予以综述,探讨其对血管内皮细胞的影响以及在血管生成或血管渗漏中的作用。同时对血管生成素4/Tie-2在临床应用及未来的应用前景予以分析。     

血管生成素-1和2在肿瘤血管生成中的作用

早在1971年,美国学者Folkman[1]就曾提出肿瘤的生长与转移依赖于血管的生成,在随后的几十年中越来越多的研究证实了这一点。血管生成素(angio-poietin,Ang)是第一个被确定的来源于人肿瘤组织具有促血管生成作用的细胞因子[2]。目前已知该家族包括Ang-1,2,3,4四个成员,其中Ang-1     

促血管生成素2表达在胃癌血管生成中的作用

目的　检测胃癌促血管生成素 2 (Ang- 2 ) m RNA的表达水平 ,探讨 Ang- 2在胃癌发生、发展及血管生成中的调节作用。　方法　运用 RT- PCR技术 ,检测 36例胃癌组织及癌旁组织 Ang- 2 m RNA的表达水平 ,SP免疫组织化学技术检测血管平滑肌生长因子 (VEGF)和 CD34 的表达情况 ,并根据CD34 的表达计算胃癌及癌旁组织的微血管密度 (MVD)。　结果　 (1)原发性胃癌组织及癌旁组织均见有 Ang- 2的表达。 (2 )低分化癌的 Ang- 2 m RNA的表达水平高于中高分化癌 ,有淋巴结转移者的 Ang- 2 m RNA的表达水平高于无淋巴结转移者。 (3) 36例中有 2 7例癌组织 Ang- 2 m RNA的表达水平低于癌旁组织 ,并与 MVD呈正相关 ,9例癌组织Ang- 2 m RNA的表达高于癌旁组织 ,并与 MVD呈负相关。(4 )胃癌组织中 VEGF阳性表达者 (2 2例 ) Ang- 2 m RNA的表达高于 VEGF阴性表达者 (14例 )。　结论　 (1)原发性胃癌及其癌旁组织均表达有 Ang- 2 ;(2 ) Ang- 2的表达与胃癌的进展有关 ;(3) Ang- 2的表达对胃癌血管的生成呈双向调节作用 ;(4 ) Ang- 2的表达水平与 VEGF关系密切 ,两者共同参与胃癌的血管生成调节。     

鼻咽血管纤维瘤中血管生成素-2的表达及其临床意义

目的初步探讨血管生成素-2(Ang-2)在鼻咽血管纤维瘤中的表达及其与肿瘤的血管生成和肿瘤扩展性生长的关系。方法用免疫组织化学方法检测Ang-2在30例鼻咽血管纤维瘤和20例鼻咽慢性炎症组织中的表达,以CD34标记血管内皮细胞,并计数微血管密度。结果Ang-2蛋白在鼻咽纤维血管瘤的阳性率为76.67%,高于鼻咽部慢性炎症组织30.00%(P<0.05)。临床分期中,Ang-2蛋白在Ⅲ-Ⅳ期的阳性率为90.00%,明显高于Ⅰ-Ⅱ期的阳性率50.00%(P<0.05)。CD34在鼻咽纤维血管瘤的表达低于其在鼻咽部慢性炎症组织中的表达(P<0.05)。结论Ang-2参与鼻咽纤维血管瘤的血管生成,这与其临床分期和肿瘤的扩展性生长有关。     

促血管生成素-2过表达重组腺病毒载体的构建

目的 构建小鼠促血管生成素-2(Ang-2)基因过表达重组腺病毒载体.方法 化学合成小鼠Ang-2编码序列,经PCR扩增、鉴定后连接至穿梭质粒.将含目的基因的重组质粒转化DH5α感受态细胞,所得阳性转化子经电泳分析并测序鉴定.将携带目的基因的穿梭质粒与辅助包装质粒共转染人胚肾细胞系HEK293细胞,反复冻融获取重组腺病毒,终点稀释法测定病毒滴度,重组腺病毒转染HEK293细胞并提取蛋白,采用免疫印迹法分析Ang-2蛋白的表达.结果 PCR产物电泳分析可见大小约1.5 kp的特征性条带,基因序列显示测序结果与GenBank提供的Ang-2序列一致,经 HEK293细胞包装后腺病毒滴度为1×108.8 pfu/ml,免疫印迹法分析可见大小57 kD特征性条带,即重组腺病毒可成功表达Ang-2蛋白.结论 Ang-2基因重组腺病毒载体可成功构建.     

肺癌血管生成以及抗血管生成治疗

肺癌与其它实体瘤一样,其发生、发展和转移均依赖于血管生成,当肿瘤直径达到一定大小时,就会启动"血管生成开关",促进新的血管生成,以保证肿瘤生长的血供需要.肺癌血管生成是一个极其复杂的过程,受多种正性和负性血管生成因子的调控.因此,抑制血管生成过程中关键步骤阻断肿瘤血管生成,从而切断肿瘤的营养来源和迁移通道,已成为近年来癌症治疗的新策略.本文就近年来此领域的最新研究进展做一综述.     

人乳癌组织中血管生成素-2及其受体Tie-2的表达

目的:探讨乳癌组织中血管生成素-2(Ang-2)、血管生成素-2受体Tie-2的表达.方法:应用免疫组化SP法检测28例人乳腺导管内癌、49例浸润性导管癌、25例乳腺纤维腺瘤和51例正常乳腺间质组织中Ang-2及Tie-2、CD34的表达,根据CD34的表达情况计算微血管密度(MVD).结果:正常乳腺间质组织中Ang-2、Tie-2阳性表达率分别为12.0%(6/50)和18.0%(9/50),在乳腺纤维腺瘤组织中的阳性表达率为16.0%(4/25)和20.0%(5/25);而在乳腺导管内癌组织中的阳性表达率分别为53.57%(15/28)和64.28%(18/28),在乳腺浸润性导管癌组织中的表达率分别为93.87%(46/49)和97.96%(48/49),均显著高于正常乳腺间质组织和乳腺纤维腺瘤组织中的表达(P＜0.01).乳癌组织CD34的表达显著高于其在正常乳腺间质组织中的表达.结论:Ang-2及Tie-2的表达与乳癌血管生成关系密切,Ang-2表达与乳癌的浸润有关.     

血浆血管生成素2与糖尿病视网膜病变的相关性研究

1对象和方法1.1对象2004年6月至2005年7月我科住院患者116例,其中行眼底检查确诊的增殖期糖尿病视网膜病变(PDR)31例、非增殖期糖尿病视网膜病变30例、糖尿病无视网膜病变30例和非糖尿病性视网膜脱离患者25例。1.2方法1.2.1标本留取于清晨空腹,抽取全血后注入EDTA抗凝管内,30 m     

血管生成、治疗性血管生成和抗血管生成

血管生成 (Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ)是许多生理和病理过程 (如肿瘤、缺血性疾病、慢性炎症、糖尿病性视网膜病、牛皮癣、创伤愈合等 )的基本事件之一[1,2 ] 。血管生成的研究涉及到医学中的多个学科 ,研究疾病状态下的血管生成和消退规律及其机制 ,对认识血管生成在疾病发生、发展中的作用 ,针对血管生成进行有效的治疗 ,以及研究器官移植和含血管的组织工程 ,都具有十分重要的意义。1　血管生成　　血管生成是指从已存在的微血管床上芽生出新的以毛细血管为主的血管系统的过程。此概念有别于血管形成 (Ｖａｓｃｕ ｌｏｇｅｎｅｓｉｓ)。…     

胃癌血管生成与抗血管生成治疗进展

肿瘤血管新生的过程在很大程度上受血管生成因子和血管生成抑制因子的调节。正是由于两种起相反作用的调节因子的平衡状态，从而决定体内血管生成的平衡。肿瘤血管新生取决于局部血管生成的刺激因子和抑制因子间的平衡失控，即血管生成刺激因子增多和（或）血管生成抑制因子减少．从而触发血管生成过程的启动。这种肿瘤新生血管形成的调控被称为血管生成开关。     

不同病原菌感染脓毒症患者血浆血管生成素-2水平变化

目的探讨不同病原菌感染的脓毒症患者血浆血管生成素-2（angiopoietin-2,Ang-2）水平变化及其与病情严重程度的关系。方法将67例脓毒症患者分为深部真菌感染组（11例）、二重感染组（G-菌合并真菌感染,36例）和革兰阴性（G-）菌感染组（20例）,另选取20例健康志愿者（10男10女）为对照组。67例脓毒症患者24h内进行急性生理和慢性健康状况（APACHEⅡ）评分、序贯器官衰竭（SOFA）评分,同时采集血标本,检测血浆Ang-2水平并与对照组比较。结果脓毒症各组患者的APACHEⅡ评分和SOFA评分均明显高于正常对照组（P〈0．01）;与正常对照组相比较,脓毒症各组患者的血浆Ang-2水平均显著升高（P〈0．05）,而脓毒症各组患者之间的血浆Ang-2水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）。各组患者血浆Ang-2水平与APACHEII评分及SOFA评分均呈正相关（r=0．599,P〈0．05;r=0．723,P〈0．05）;多元线性回归分析显示Ang-2与APACHEⅡ评分及SOFA评分均呈显著独立相关（β=0．468,P〈0．05;β=0．626,P〈0．001）。结论脓毒症患者的血浆Ang～2水平显著升高,并与APACHEⅡ评分及SOFA评分均呈正相关,是影响脓毒症患者病情严重程度的独立危险因素。     

五味子乙素抑制肿瘤内血管生成的作用机制

在肿瘤的发生过程中,新生血管的形成是肿瘤生长的必要条件.肿瘤内血管的生成主要是促血管生成因子和血管生成抑制因子之间作用失衡的结果.近年来,对五味子乙素抗肿瘤活性的不断深入研究发现,其可能通过多种途径抑制肿瘤内血管的生成,进而达到抗肿瘤的效果.本文就五味子乙素抑制肿瘤内血管生成的作用机制进行综述.     

人防御素及其作用研究进展

引言防御素（ｄｅｆｅｎｓｉｎｓ）是一族具有抗微生物和细胞毒活性的多肽,广泛存在于各种动物、昆虫和植物体内,是机体天然防卫系统的重要组成部分。防御素一般具有３个共同的特点：小分子量（＜４０００）、带阳离子电荷、活性作用局限于细胞膜［１］。十多年前,Ｌｅ...     

血管生成素2在大鼠内毒性急性肺损伤中的作用与机制研究

目的：探讨血管生成素-2(Ang-2)在脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)时的表达及其机制。方法48只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、1 mg/kg LPS组、5 mg/kg LPS组和10 mg/kg LPS组,每组12只。 LPS组尾静脉注射不同剂量LPS复制ALI模型,对照组注射同等体积生理盐水,留取肺组织标本,观察肺湿/干重( W/D)比值、HE染色光镜观察肺组织标本病理改变并进行肺损伤评分,各组ELISA法检测血浆中Ang-2与血管内皮生长因子( VEGF)的表达,Westernblot方法检测肺组织中Ang-2的蛋白表达情况。结果 LPS注射进入大鼠尾静脉6 h后,光镜下可见肺组织内的炎性细胞浸润,肺泡隔增宽,肺间质水肿和肺结构破坏等病理改变;LPS各组的肺损伤评分与W/D比值明显高于对照组(P<0．05);LPS不同剂量组血浆中Ang-2与VEGF的表达水平较对照组明显增高(P<0．05),血浆中Ang-2的表达与VEGF、肺损伤评分呈正相关(r=0．826,P<0．05;r=0．775,P<0．05);LPS不同剂量组与Ang-2蛋白的表达水平呈现剂量效应关系(P<0．05)。结论 Ang-2参与大鼠ALI的发病过程,且Ang-2水平增高与ALI严重程度有关。     

血管生成素-2及其受体在人口腔鳞癌的表达及意义

目的探讨血管生成素-2(angoipoietin-2,Ang-2)及其受体(Tie-2)在人口腔鳞癌的表达水平及其在口腔鳞癌血管生成中的作用.方法采用免疫组化SABC法,检测34例口腔鳞癌组织及16例正常口腔黏膜组织中Ang-2及其受体Tie-2、CD34的表达.结果Ang-2在口腔鳞癌的表达明显高于正常口腔黏膜(P＜0.05),且Ang-2的表达随口腔鳞癌分级的增加而逐渐增强,Ⅲ级＞Ⅱ级＞Ⅰ级且差异具显著性(P＜0.05).Tie-2及CD34在口腔鳞癌的表达明显高于正常口腔黏膜(P＜0.05).但随口腔鳞癌病理分级的升高,Tie-2、CD34虽呈现递增趋势,但组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论在口腔鳞癌中,血管生成增加,Ang-2/Tie-2可能参与口腔鳞癌血管生成的调节.     

特异性血管生成抑制素的制备及其抑制血管生成作用

目的：从血浆中纯化制备有特异抑制血管生成活性的天然ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ蛋白,为研究和应用要下基础,方法：制备Ｌ－ｌｙｓｉｎｅ偶联的的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱,从血浆中纯化纤溶酶原用弹性蛋白酶在体外进行有限消化,再经Ｌ－ｌｙｓｉｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析纯化获得天然ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ片段,通过体外血管内皮细胞生长抑制分析和体内鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验测定纯化蛋白活性。结果：以     

血管生成素-2在大肠癌中的表达及意义

目的:研究血管生成素-2(Ang-2)蛋白在人大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化法检测40例大肠癌及其癌旁正常组织中Ang-2蛋白表达水平。结果:大肠癌组织中Ang-2蛋白表达阳性率77.5%(31/40),明显高于癌旁正常组织40%(16/40)(P<0.01);Ang-2表达水平与患者性别、年龄及癌组织的部位、大小、分化程度、淋巴结转移无关(P>0.05);隆起型大肠癌Ang-2蛋白表达水平高于溃疡型大肠癌(P<0.01);肠壁浸润越深,Ang-2蛋白表达水平越高(P<0.01);有血道转移的比无血道转移的Ang-2表达水平高(P<0.05);Dukes分期D期Ang-2蛋白表达水平明显高于A期(P<0.01)。结论:Ang-2蛋白表达水平与大肠癌组织大体形态、浸润深度、血道转移及Dukes分期有关,提示Ang-2蛋白可能促进了大肠癌的生长及转移。     

血管生成素2对良恶性腹水的鉴别诊断价值

目的探讨血管生成素-2（Ang-2）对良、恶性腹水的鉴别诊断价值。方法用ELISA法检测82例良性腹水及119例恶性腹水中Ang-2和癌胚抗原（CEA）的含量。结果恶性腹水组Ang-2和CEA含量均高于良性腹水组（均P〈0.01）,Ang-2对恶性腹水诊断的敏感度、特异度、总准确率、阴性预测值分别为89.9%,96.3%,92.5%,86.8%,其中敏感度、阴性预测值、总准确率均高于CEA（均P〈0.05）。结论恶性腹水Ang-2显示一定的组织特异性。Ang-2可作为良、恶性腹水鉴别诊断的高效肿瘤标志物。