四物汤及其提取物对辐射致血虚证小鼠造血作用的研究

【目的】探讨四物汤及其提取物治疗辐射致血虚证小鼠的作用机制和有效物质基础。【方法】γ射线全身照射小鼠制成血虚证模型,观察四物汤对其外周血和造血祖细胞集落的影响,基因芯片检测有效单体芍药苷的分子作用机制。【结果】四物汤、正丁醇提取物、水溶提取物对血虚证小鼠外周的白细胞的恢复有明显促进作用;四物汤和芍药苷增强血虚证小鼠骨髓造血干祖细胞的集落形成能力;芍药苷可促进骨髓基质细胞分泌造血因子(G—CSF,GM—CSF,PDGF—α)等,抑制造血抑制因子(M—CIP)的分泌。【结论】四物汤补血的物质基础可能是芍药苷,促进骨髓基质细胞分泌G—CSF,GM—CSF,PDGF-α等造血因子可能是四物汤补血的作用机制之一。     

四物汤及其单药对血虚证小鼠造血的改善作用及其机制初探

目的 :研究四物汤及各单药对γ射线照射致血虚小鼠造血系统的影响 ,探讨四物汤补血作用的机理及配伍机制。方法 :采用 3 5Gy60 Coγ射线全身一次照射制作小鼠血虚证模型 ,进行外周血象检测及造血祖细胞集落培养 ;MTT法检测四物汤及各单药诱生Peyer’sPatch细胞、NIH3T3细胞上清的活性。结果 :①血虚小鼠骨髓中的CFU GM、BFU E、CFU E、CFU mix较正常组明显减少 ,四物汤及各单药对模型组造血祖细胞集落增殖的作用强度不同 ,四物汤最为明显。②四物汤及各单药能够诱导Peyer’sPatch产生细胞因子刺激骨髓细胞的增殖。③四物汤、当归、白芍诱生NIH3T3细胞上清能显著促进NFS 6 0细胞的增殖。结论 :四物汤及各单药对血虚小鼠造血系统的作用机制 ,可能通过刺激Peyer’sPatch细胞、成纤维细胞或产生造血生长因子 ,或与造血因子协同作用 ,促进骨髓干祖细胞增殖分化来实现的 ;四物汤及各单药作用的靶点和强度不同 ,符合中药复方组方的规律。     

四物汤刺激Peyer's Patch促进骨髓造血的研究

研究了四物汤煎剂刺激Peyer's Patch产生细胞因子促进骨髓造血的作用。小鼠灌服给药后取Peyer's Patch诱生得上清,MTT法检测上清对骨髓细胞的刺激增殖作用;另以体外直接给药诱生Peyer's Patch得上清,检测Peyer's Patch诱导的细胞因子活性。结果：四物汤体内、外给药均可刺激Peyer's Patch产生细胞因子刺激骨髓细胞增殖,此可能是四物汤补血作用的途径之一。     

四物汤补血机制研究进展

通过对四物汤补血机制的临床与实验研究的梳理,总结四物汤的内在活性成分及补血机制,发现熟地黄、当归、白芍、川芎在一定程度上都能促进血液的生成,其作用机制主要包括升高外周血象、改善造血微环境、促进骨髓造血细胞的增殖等。     

四物汤刺激Peyer′s Patch促进骨髓造血的研究

研究了四物汤煎剂刺激Peyer′s Patch产生细胞因子促进骨髓造血的作用。小鼠灌服给药后取Peyer′s Patch诱生得上清,MTT法检测上清对骨髓细胞的刺激增殖作用;另以体外直接给药诱生Peyer′s Patch得上清,检测Peyer′s Patch诱导的细胞因子活性。结果：四物汤体内、外给药均可刺激Peyer′s Patch产生细胞因子刺激骨髓细胞增殖,此可能是四物汤补血作用的途径之一。     

四物汤中糖类物质对辐射小鼠造血功能的影响

目的初步探讨四物汤中糖类物质与四物汤补血作用的关系。方法四物汤部位分离采用醇沉法、萃取法和大孔吸附树脂法。用辐射小鼠血虚证模型考察活性。结果将前期发现的具有提高辐射血虚模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖作用的四物汤部位C 2(正丁醇部位),用吸附树脂法分离为C 2-1(糖部分)和C 2-2(非糖部分)两个部位。活性研究表明部位C 2-1具有提高模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖的作用,部位C 2-2仅显示促进骨髓造血祖细胞增殖的作用。按照部位C 2中糖类的组成和质量分数,将D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖混合,活性研究表明混合糖具有促进模型小鼠骨髓造血祖细胞增殖的作用,但对外周血白细胞的作用不显著。结论单、双糖类物质对四物汤促进辐射小鼠造血功能的作用有一定贡献。     

四物汤及其三味药组方对γ射线照射致血虚证小鼠造血系统的影响

本研究用γ射线照射制备小鼠血虚证模型,通过四物汤及其三味药组方对血虚证小鼠造血系统的影响探讨了四物汤补血作用的配伍机制。实验结果表明：四物汤全方治疗血虚证效果最好;作用靶点不同,四药的君、臣、佐、使含义各一。     

四物汤改善小鼠造血系统损害的实验研究

目的:观察四物汤(白芍、川芎、当归、熟地)对于环磷酰胺和放疗后所致造血系统损害小鼠的造血功能改善作用.方法:四物汤连续给药8～13d,测定给药组与模型组小鼠血常规,CFU-GM,CFU-S,骨髓有核细胞及骨髓DNA量.结果:四物汤升高白细胞,血小板数,升高CFU-GM,CFU-S数,升高骨髓有核细胞数及骨髓DNA量,对网织红细胞影响不大.结论:四物汤对改善造血系统损害小鼠的造血功能有一定作用.     

黄芪当归药对配伍的药理作用研究

以当归补血汤、黄芪当归等量配伍及黄芪、当归单味对血细胞生成的影响进行比较,其实验方法是以小鼠造成失血性贫血及对环磷酰胺致小鼠白细胞和血小板减少、环磷酰胺作用下小鼠造血系统、溶血性贫血、钴60照射后造血干细胞的影响,结果均表明,黄芪当归药对单用或配伍应用均有明显补血作用,证明两药作为药对配伍的合理性,当归补血汤的作用明显优于两药均等量配伍及单味黄芪、当归,说明就促进造血而言,黄芪当归5:1配伍出现明显的协同作     

当归补血汤含药血清对血虚小鼠骨髓造血功能的影响

目的:观察当归补血汤含药血清对血虚模型小鼠骨髓造血功能的影响,阐述当归补血汤补气生血作用机理。方法:连续4天腹腔注射环磷酰胺30mg/kg复制化学性血虚小鼠模型;灌胃给予15g/kg、7.5g/kg、3.75g/kg当归补血汤水煎液,一日两次,第4天腹主动脉取血,分离含药血清;将各剂量当归补血汤含药血清加入到血虚模型小鼠骨髓细胞的培养体系中,观察各组含药血清对骨髓造血祖细胞CFU-GM、CFU-E、CFU-B及骨髓有核细胞DNA合成的影响。结果:当归补血汤15g/kg含药血清5%组、10%组,当归补血汤7.5g/kg含药血清10%组、15%组,以及当归补血汤3.75g/kg含药血清15%组对血虚小鼠骨髓CFU-GM的集落生成均具有促进作用;当归补血汤15g/kg含药血清10%组、20%组,当归补血汤7.5g/kg含药血清20%组、30%组可明显升高骨髓CFUE和BFU-E集落个数;当归补血汤15g/kg含药血清0.5%组,7.5g/kg含药血清1%组、2%组及3.75g/kg含药血清1%组、2%组对血虚小鼠骨髓有核细胞DNA的合成具有促进作用。结论:当归补血汤含药血清能够促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖与分化,促进骨髓有核细胞DNA的增殖,达到其补气生血的功效。     

四物汤对人骨髓基质细胞蛋白质表达的作用

目的：考察四物汤对骨髓基质细胞HFCL增殖及蛋白质表达的影响,探讨四物汤补血作用的分子机制。方法：分别用MTT法、流式细胞术和蛋白质组学方法测定四物汤对HFCL增殖、细胞周期及蛋白质表达的影响。结果：四物汤能促进HFCL的增殖,提高其增殖指数,并使HFCL的12种蛋白质表达上调,5种下调。结论：四物汤能促进HFCL增殖,作用于多个蛋白质靶点,间接发挥补血作用。     

填精补血方和活血生血方对马利兰造血损伤小鼠骨髓、脾和胸腺的影响

马利兰小剂量持续给药4至5周导致小鼠慢性造血损伤,用中医填精补血方和活血生血方治疗4周后,比较观察各组小鼠骨髓、脾和胸腺光镜下结构。结果表明填精补血方能显著促进损伤小鼠骨髓、脾和胸腺的修复,揭示中医填精补血方不仅能改善骨髓造血,而且对免疫机能也有调节作用。实验中未见到活血生血方有此作用。     

四物汤促进造血功能成分的初步研究

目的 :初步探讨四物汤补血作用的物质基础。方法 :四物汤部位分离采用醇沉和萃取法。用辐射小鼠血虚证模型考察活性。结果 :首先将四物汤分离为A ,B ,C 3个部位 ,活性研究表明部位B和部位C具有提高模型小鼠外周血白细胞数的作用。进而将部位B和部位C分别分离为部位B1,B2 ,B3和部位C1,C2 ,C3,活性研究表明部位C2 ,C3和B3具有提高模型小鼠外周血白细胞数的作用。进一步考察部位C1,C2 ,C3,B和芍药苷对模型小鼠骨髓造血祖细胞的影响 ,结果表明部位C2 ,C3,B和芍药苷具有促进模型小鼠骨髓造血祖细胞增殖的作用。结论 :四物汤部位C2 ,C3,B和芍药苷与其促进造血功能的作用有关。     

四物汤对环磷酰胺所致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤治疗环磷酰胺所致小鼠血虚证的作用机理。腹腔注射环磷酰胺制成小鼠血虚证模型;测定小鼠外周血象;骨髓细胞集落形成;CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例;小鼠胸腺指数。结果表明四物汤具有明显促进骨髓造血和增强免疫的作用,并可升高血虚证小鼠的外周血象。四物汤增强免疫、促进造血可能是四物汤治疗小鼠血虚证的机理之一。     

四物汤中不同组分对血虚模型小鼠造血功能的影响

目的:探讨四物汤中不同组分对血虚小鼠模型造血功能的作用及其机理.方法:实验各组采用3.5Gy60Coγ射线全身一次照射制作小鼠血虚证模型,造模后连续灌胃7 d,进行外周血象检测及造血祖细胞集落培养.结果:四物汤的多糖部分及非多糖部分均有补血作用.60%～80%醇沉物、80%醇沉上清部位正丁醇萃提物、80%醇沉上清部位乙酸乙酯、正丁醇萃提后剩余物均能升高辐射损伤性血虚证小鼠外周血中白细胞、红细胞数;但20%～40%醇沉物、40%～60%醇沉物及60%～80%醇沉物的补血作用均不及20%～80%醇沉物.芍药苷具有补血作用.结论:四物汤通过多成分、多环节改善血虚证小鼠的造血功能.     

四物汤及其各单药对辐射小鼠骨髓造血的调节作用

目的：研究四物汤及其各单药对射线诱发小鼠血虚证骨髓造血的调节作用,方法：采用3．5或5．5Gy^60Goγ射线全身一次性照射,制成血虚证模型小鼠,在不同时间点观察四物汤及单药对NFS－60细胞,外周血象,造血祖细胞集落培养及骨髓细胞凋亡的影响。结果：四物汤,地黄,当归能升高辐射小鼠外周血中的白细胞,增加造血祖细胞集落数,刺激NFS－60细胞增殖;白芍则降低外周血象,抑制NFS－60细胞增殖;川芎能增加造血细胞集落数,抑制骨髓细胞凋亡,结论：四物汤及各单药作用的靶点和强度不同,。其变化规律符合中医的君臣佐使理论。     

四物汤对环磷酰胺致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响

目的：研究四物汤对环磷酰胺（CTX）损伤致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响,旨在分子水平上探讨四物汤促进骨髓造血的作用机制。方法：采用CTX 250 mg·kg^-1腹腔注射制成化学损伤型血虚证小鼠模型,利用蛋白质组学技术研究四物汤治疗后的差异蛋白质组。结果：研究发现CTX使小鼠骨髓中12个蛋白表达上调、3个蛋白表达下调,四物汤可使CTX造模后这些表达改变的蛋白有不同程度恢复。结论：四物汤可能通过影响与细胞凋亡、造血干祖细胞增殖分化有关的蛋白质而促进骨髓造血。     

四物汤及其单药主要活性成分免疫药理研究进展

中医经典良方四物汤及其单药主要活性成分当归多糖、地黄多糖、川芎嗪、芍药苷、阿魏酸等均具有一定的免疫调节作用,反映在对免疫器官骨髓造血和胸腺脾脏功能的改善,活化免疫细胞以及促进细胞因子分泌等方面。该文主要对近年来与其免疫药理相关的文献进行综述。     

中药复方药理研究和开发思路

1 中药复方自身的特点 中药复方是中医防治疾病的主要武器。中医药理论的最大特色就在于强调人的整体观,发挥药物的整体调节作用,并用辨证施治的思维方法来处方用药。复方药效的发挥并非是简单的单味药相加或毒性的相减,而是方中药物之间发生的协同、制约或改性等作用,使全方发挥治疗作用。同样,复方的有效物质也不一定是复方中单味药有效成分或有效部位的总和。如八珍汤是由四君子汤和四物汤组合而成,四物汤为补血代表方,具有促进红细胞增生的作用。四君子汤为补气代表方,本身并无促进红细胞的增生作用。但两方合用后,八珍汤比四物汤作用更显著,说明二者之间存在协同作用。这些说明中药复方具有西医药某些无可比拟的优越性的一个方面。     

圣愈汤及其拆方对血虚小鼠骨髓细胞凋亡及增殖周期的影响

目的:研究圣愈汤及其拆方对γ射线照射致血虚小鼠造血系统的影响,探讨圣愈汤补血作用及配伍机制。方法:采用3.5Gy60Coγ射线照射制作放射损伤性血虚小鼠模型,取股骨测定骨髓有核细胞数量,流式细胞仪测定骨髓细胞周期,骨髓组织切片观察骨髓损伤修复情况。结果:圣愈汤及其各拆方药组能明显提高血虚小鼠骨髓有核细胞数量,抑制骨髓细胞凋亡,促进骨髓造血细胞由相对静止时相(G0/G1期)进入细胞增殖活跃时相(S期+G2/M期),明显提高细胞增殖指数(PI),促进骨髓造血组织的修复,以全方效果最佳。结论:抑制骨髓细胞凋亡,诱导骨髓细胞由相对静止期进入增殖活跃期,促进骨髓造血干/祖细胞的增殖、分化,刺激血细胞的生成和释放,可能是圣愈汤补血作用的主要机制之一。