蒿鳖养阴软坚方抗CCl4复合因素所致大鼠肝纤维化的作用

目的 观察蒿鳖养阴软坚方抗CCl₄复合因素致大鼠肝纤维化的作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,蒿鳖养阴软坚方低、中、高剂量组,复方鳖甲软肝片及秋水仙碱阳性对照组。CCl₄复合因素法建立肝纤维化模型,比色法测定血清丙二醛（MDA）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）的量及肝组织羟脯氨酸（Hyp）水平,明胶酶谱法检测肝组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的活性,免疫组化法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 与模型组相比,随着剂量的增加,蒿鳖养阴软坚方组大鼠血清MDA水平逐渐下降,血清TP、ALB的量逐渐增加,肝组织Hyp的量和MMP-2活性逐渐下降,MMP-9活性变化不明显,肝组织α-SMA的表达下降。结论 蒿鳖养阴软坚方能够对抗CCl₄复合因素诱发的大鼠肝纤维化。     

蒿鳖养阴软坚方对刀豆球蛋白A诱导的肝纤维化Nrf2/HO-1信号通路影响

目的:探讨蒿鳖养阴软坚方对刀豆球蛋白A（ConA）诱导的肝纤维化Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法:Balb/c小鼠随机分为正常、模型、秋水仙碱和蒿鳖养阴软坚方低、中、高剂量(1.16 g/kg、3.36 g/kg、11.58 g/kg)组。除正常组外,剩余各组均尾静脉注射1.5 mg/mL ConA,每周1次,持续10周。取小鼠肝脏作病理切片,观察肝脏的病理变化,检测肝组织羟脯氨酸浓度,免疫组化法检测肝组织Nrf2、HO-1蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,蒿鳖养阴软坚方各剂量组能不同程度地减轻肝组织的炎症反应和降低肝组织羟脯氨酸的浓度,显著减轻肝纤维化程度（P＜0.05）;随着蒿鳖养阴软坚方浓度增加,Nrf2和HO-1的阳性表达逐渐增强。结论:蒿鳖养阴软坚方对Nrf2/HO-1信号通路具有激活作用,且该作用可能为其抗肝纤维化机制之一。     

蒿鳖养阴软坚方通过Nrf2/γ-GCS信号转导通路抑制酒精性肝纤维化作用及其机制

目的:研究不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对肝纤维化大鼠肝组织中Nrf2/γ-GCS信号转导通路的影响,探讨不同提取方案的蒿鳖养阴软坚方对大鼠肝纤维化的治疗作用。方法:健康Wistar 大鼠随机分为8组:正常组、模型对照组、先水后醇60%提取方案组(0.09 mg.kg^-1.d^-1)、先水后醇95%提取方案中、高剂量组(2.59 g.kg^-1.d^-1、8.2 g.kg^-1.d^-1)、水提醇沉中、高剂量组(2.59 g.kg^-1.d^-1、8.2 g.kg^-1.d^-1)及复方鳖甲软肝片组(0.09 mg.kg^-1.d^-1),每组10只大鼠。酒精性肝纤维化大鼠模型制备成功后,各组按相应药物剂量分别开始治疗,正常组和模型组给予同体积蒸馏水,每日1 次,造模10周后处死大鼠,留取标本。酸水解法测定肝组织中胶原蛋白含量; Western blotting 检测肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白的表达;光镜观察肝组织免疫组化染色结果。结果:(1) 肝组织中羟脯氨酸含量:与正常组比较,模型组大鼠肝组织胶原蛋白含量增高 (P<0.01);与模型组比较,先水后醇60%提取方案组、先水后醇中、高剂量组以及复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织胶原含量均降低 (P<0.05)。(2) 肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白的表达:与正常组比较,模型组大鼠肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白表达增高 (P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肝组织Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白表达增高 (P<0.01)。(3) 肝组织免疫组化染色结果: 模型组的Nrf2和γ-GCS蛋白主要在细胞浆中表达,各用药组Nrf2和γ-GCS蛋白均多数在细胞浆和细胞核中表达,汇管区附近也有所表达,但表达量不及胞浆和胞核。结论:提取工艺优化后的蒿鳖养阴软坚方可能通过上调肝组织Nrf2/γ-GCS信号转导通路,增加Nrf2蛋白和γ-GCS蛋白的表达,降低大鼠肝组织肝纤维化程度从而发挥抗肝纤维化的作用。     

参芍软肝汤抗大鼠肝纤维化的作用机制研究

目的 研究参芍软肝汤抗大鼠肝纤维化的作用及其机制.方法 选取Wistar雄性大鼠72只,正常喂养1周后分为对照组(n=12)和造模组(n=60),造模组采用40％四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液腹腔皮下注射构建大鼠肝纤维化模型,造模成功后分为模型组(等量生理盐水灌胃)、阳性对照组(秋水仙碱0.154 mg·kg-1·d-1)、低剂量组(每100 g体质量2 mL,含参芍软肝汤生药0.23 g/mL)、中剂量组(每100 g体质量2 mL,含参芍软肝汤生药0.46 g/mL)及高剂量组(每100 g体质量2 mL,含参芍软肝汤生药0.69 g/mL)各12只,均治疗8周后观察大鼠的肝纤维化相关指标的差异.结果 对照组大鼠全部为0期标准,阳性对照组大鼠的肝组织纤维化程度显著优于模型组(P＜0.05),低剂量组、中剂量组、高剂量组的大鼠肝组织纤维化程度逐渐减轻,高剂量组大鼠肝组织纤维化程度显著轻于模型组和低剂量组(P＜0.05).模型组大鼠的Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ-C型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)检测值均显著高于对照组大鼠(P＜0.05),阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的PC-Ⅲ、LN、Ⅳ-C、HA检测值均显著低于模型组大鼠(P＜0.05).模型组大鼠的血清超氧化物歧化酶(SOD)检测值均显著低于对照组大鼠(P＜0.05),模型组大鼠的血清丙二醛(MDA)水平显著高于对照组大鼠(P＜0.05);阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的血清SOD检测值均显著高于模型组大鼠(P＜0.05),血清MDA水平显著低于模型组大鼠(P＜0.05).结论 参芍软肝汤能有效减轻大鼠肝纤维化程度,其作用机制为降低血清肝纤维化指标的水平,抑制过氧化物产生,减轻自由基对肝细胞的损伤作用.     

蒿鳖养阴软坚方对TGF-β1诱导的肝纤维化的作用

目的:研究蒿鳖养阴软坚方在体外对LX-2细胞的影响,从而探讨蒿鳖养阴软坚方对TGF-β1诱导的肝纤维化的作用。方法:体外培养人肝星状细胞LX-2,实验分为正常对照组、TGF-β1刺激组和蒿鳖养阴软坚方低、中、高浓度给药组。MTT法检测LX-2细胞增殖情况;比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性;酶消化法检测细胞上清羟脯氨酸（Hyp）的含量;Western blot法检测collagen Ι以及α-SMA蛋白表达量。结果:TGF-β1作用于LX-2能够明显促进细胞的增殖,collagen I、α-SMA的表达量显著升高。蒿鳖养阴软坚方能抑制LX-2细胞增殖并且能够降低collagen Ι和α-SMA的表达。结论:蒿鳖养阴软坚方能够显著抑制LX-2增殖,下调collagen Ι和α-SMA的表达,降低Hyp生成,从而发挥抗肝纤维化的作用。     

参赤提取物对BSA致大鼠实验性肝纤维化的作用研究

目的：观察参赤提取物对牛血清白蛋白（BSA）致大鼠肝纤维化的治疗作用，为临床应用参赤提取物提供理论依据。方法：采用静脉注射BSA免疫性诱导大鼠肝纤维化模型。造模后，给予大鼠胃饲参赤提取物。检测大鼠血清肝功能及与肝纤维化相关的部分指标、肝组织羟脯氨酸含量（HYP），并对肝组织进行病理学观察。结果：参赤提取物可使BSA免疫性诱导的肝组织纤维增生、变性和坏死明显减轻。参赤提取物各组大鼠血清ALT、AST、HA、LN、PC—Ⅲ Ⅳ-C及肝组织羟脯氨酸含量与模型组比较均显著降低：除低剂量组外．其余各给药组大鼠血清ALB较模型组显著升高。结论：参赤提取物具有保护肝细胞，维护肝功能．抗肝纤维化的作用．其作用机理与胶原代谢有直接的关系。     

丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的防治作用

目的:探讨中药复方制剂丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的防治作用.方法: Wistar 雄性大鼠52只,分正常组、病理模型组、丹芍化纤胶囊低剂量组(0.3g/kg)、中剂量组(0.6g/kg)、高剂量组(0.9g/kg)及秋水仙碱组(0.15mg/kg).除正常组外,各组均腹腔内注射猪血清(0.5ml/只,2次/周,持续12周)诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,并同时给予相应药物灌胃,持续12周.实验第8、10周检测尿羟脯氨酸排出情况.实验结束后分别检测血清透明质酸(HA)及Ⅳ-型胶原(Ⅳ-C).肝脏常规病理切片行Masson三色法观察纤维化程度.结果:丹芍化纤胶囊中、高剂量给药能增加大鼠尿羟脯氨酸的排出量(P<0.01),降低血清HA和Ⅳ-C浓度 (P<0.01),减轻肝纤维化程度.结论:丹芍化纤胶囊能减轻肝脏损伤,增加胶原降解,具有预防大鼠肝纤维化的作用.     

芪蚣抗纤方拆方对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝功能的影响及量效比较

目的:探讨芪蚣抗纤方拆方对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝功能的影响及量效比较。方法:猪血清腹腔注射法复制肝纤维化大鼠模型,分为正常对照组、模型组、活血小剂量组、活血大剂量组、软坚小剂量组、软坚大剂量组。用药4周后,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)含量。结果:活血组ALT、球蛋白明显下降,白/球比正常;软坚组小剂量基本同活血组,而大剂量组ALT显著升高,高于模型组,白/球比降低。结论:芪蚣抗纤方拆方活血组及软坚小剂量组能降低ALT、球蛋白。具有保护肝细胞,减轻肝组织免疫性损伤,改善肝纤维化作用;软坚大剂量组药物毒性显现,在选用此药物时应慎用剂量。     

蒿鳖养阴软坚方通过激活Nrf2/NQO1信号通路抑制肝纤维化发生

目的:探讨蒿鳖养阴软坚方通过激活Nrf2/NQO1信号通路对四氯化碳复合因素所致大鼠肝纤维化的抑制作用。方法:选用健康Wistar大鼠作为研究对象,将大鼠随机分为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和秋水仙碱组。除正常组大鼠外,其余大鼠均给予自制高脂饲料饲养,每周两次皮下注射40%CCl₄花生油混合溶液,隔日灌胃给予30%乙醇,各给药组每日灌胃给药的同时给予正常组和模型组以等容积的蒸馏水,直至造模时间（共6周）结束后,乌拉坦麻醉大鼠并收集肝组织标本,比色法检测肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的含量,免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织中Nrf2和NQO1的分布情况,Western blot法检测各组大鼠肝组织中Nrf2和NQO1的表达水平。结果:与正常组相比,模型组Hyp含量明显升高（P<0.05）;各给药组的Hyp含量显著低于模型组,且肝组织中Nrf2和NQO1的表达水平显著升高（P<0.05）。结论:蒿鳖养阴软坚方可以通过激活Nrf2/NQO1通路,上调Nrf2和NQO1的表达,降低肝组织中Hyp的含量,从而发挥抑制由四氯化碳复合因素所致大鼠肝纤维化的作用。     

田基黄水煎液下调羟脯氨酸和丙二醛对大鼠实验性肝纤维化的保护作用

目的:为提高肝病患者对手术术中肝脏缺氧的耐受及术后肝功能的恢复,观察田基黄水煎液对四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝纤维化的保护作用。方法:将SD大鼠分成正常对照组、模型组、田基黄水煎液低剂量给药组(4 g/kg)和高剂量给药组(8 g/kg),采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,造模同时给予田基黄水煎液干预,在实验第8周,测定血清肝功相关酶指标[谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)]及肝纤维化血清标志物透明质酸(HA),层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的含量,测定肝组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)和丙二醛(MDA)含量。结果:田基黄水煎液不同剂量均能降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST、HA、LN和Ⅳ-C含量,同时能减少肝组织中HYP和MDA含量(P<0.05)。结论:田基黄对CCl4诱导的实验性肝纤维化具有防护作用。     

维生素E对老年雌性大鼠血清雌二醇及心肌细胞Bcl-2的影响

目的 以自然衰老的雌性大鼠为模型,探讨维生素E(VE)对心肌细胞保护作用的机制.方法 以注射植物油的老年大鼠为对照,给予低、中、高剂量组(5、15、60mg/kg)模型大鼠经腹腔注射VE注射液,连续注射9周,放免法检测血清雌二醇(E2)水平,免疫组化法观察心肌Bcl-2的表达.结果 各VE实验组E2水平均高于老年对照组,Bcl-2的表达在中、大剂量明显高于对照组.结论 VE可通过增加血清中的E2含量,增加心肌细胞Bcl-2的表达数量,减少心肌细胞的损伤,对心肌细胞起到保护作用.     

MMP-2和TIMP-2在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤的侵袭发展、分级之间的关系。方法 采用免疫组化SP法对61例脑胶质瘤标本进行了MMP-2、TIMP-2表达情况的检测。结果 MMP-2在Ⅰ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅳ级组表达率分别为43．7％和75．9％．TIMP-2在这两组中的表达率分别为28．1％和6．9％，胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅳ级组之间两指标的差异均有统计学意义（P〈0．01），MMP-2与TIMP-2的表达呈显著负相关（P〈0．01）。结论 MMP-2及TIMP-2对胶质瘤恶性程度的评估有重要的意义。     

Ⅱ型糖尿病患者血管并发症与生长激素、性激素水平变化观察

笔者观察了38例Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者血管并发症与生长激素(GH)、性激素(睾丸酮T、雌二醇E_2)的变化关系。结果显示了NIDDM患者GH水平增高,与果糖胺(FM)水平相关。男性NIDDM患者E_2增高,T降低,E_2/T增高,以及血管病变组增高显著;而女性NIDDM患者E_2降低,T变化不显著。提示NIDDM患者血管病变与Gh、性激素的内环境紊乱关系密切。     

塞来昔布抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成

目的研究塞来昔布对实验性大鼠腹主动脉瘤形成的抑制作用。方法Wister大鼠24只,随机分为2组,实验组12只,对照组12只。实验组术后胃灌注塞来昔布,对照组胃灌注生理盐水。观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁组织学改变,并用免疫组织化学技术和分子原位杂交技术检测基质金属蛋白酶2和9的表达。结果 灌注两周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率8.33％,对照组大鼠腹主动脉瘤形成率100％,两组差异有显著意义(P<0.01)实验组大鼠动脉壁组织基质金属蛋白酶2和9的表达为弱阳性或阴性,对照组动脉壁组织中两着表达明显增高。原位杂交检测结果表明两组mRNA表达强度无明显差异。结论塞来昔布能够通过抑制动脉瘤组织中基质金属蛋白酶2和9的表达来阻止动脉壁组织弹力纤维的降解,并抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成。这为人类对小腹主动脉瘤的药物治疗提供了可行性的理论依据。     

克隆T细胞(CTLL_2)适宜培养条件的选择和应用

本文对引进的CTLL_2—IL_2依赖细胞株筛选了适宜生长和增殖条件。在此培养条件下,观察研究了CTLL_2的生长特性,同时用此CTLL_2以MTT比色分析法检测了本室制备的人、大鼠和小鼠等不同来源IL_2的生物活性。实验结果表明,在适宜的条件下,此株CTLL_2对几种来源的IL_2反应都很稳定,用其检测IL_2活性简便、稳定、检测所需时间短、重复性好。为进一步研究IL_2提供稳定的检测系统,并为研究T细胞提供一个良好的培养条件。     

老年2型糖尿病患者血尿酸浓度与代谢综合征的相关性分析

目的 探讨老年2型糖尿病患者血清尿酸与代谢综合征的关系。方法 回顾分析首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科2018年1月至2020年12月住院的612例老年2型糖尿病患者,其中合并代谢综合征(metabolic syndrome, MS)组439例,不合并MS(non-metabolic syndrome, NMS)组173例。比较两组基本临床资料及血清尿酸浓度;比较不同代谢综合征组分的尿酸浓度;使用Person相关法分析血尿酸与MS各组分因子之间的关系;使用Logistic回归模型,进行血尿酸与MS关系的多因素分析;使用受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线观察血尿酸预测MS的作用,并筛选截断值。结果 MS组血清尿酸浓度显著高于NMS组(P<0.05),随着MS组分数目增加,尿酸浓度升高;Person相关分析结果显示,尿酸与高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)相关(r=-0.233,P=0.000);多因素Logistic回归分析结果显示,尿酸(u...     

siRNA干扰Caco-2细胞鞘磷脂合酶2 (SMS2)基因对药物转运体的影响

 目的  研究鞘磷脂合酶2 (sphingomyelin synthase 2,SMS2)缺损对人结肠癌细胞(colon cancer cell,Caco-2)中药物转运体P 糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药相关蛋白2 (multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的表达与功能的影响。方法  SMS2特异性siRNA转染至Caco-2细胞。采用RT-PCR和real-time PCR检测SMS2-特异性siRNA的干扰效率;采用Western blot法检测siRNA转染后P-gp和 MRP2蛋白表达的变化;采用胞内蓄积试验,通过HPLC检测P-gp及MRP2专一性底物罗丹明123及普伐他汀的蓄积含量,分析下调SMS2水平对Caco-2细胞中P-gp及MRP2功能的影响。结果  应用siRNA下调SMS2水平后,P-gp和MRP2的蛋白质水平均显著下调;胞内蓄积实验结果显示罗丹明123及普伐他汀的蓄积量明显增加,说明P-gp和MRP2的外排功能减弱。结论  SMS2基因表达下调对Caco-2细胞中P-gp和MRP2的表达以及功能均有显著影响。     

舒喘灵对晚孕家兔血浆PGI_2和TXA_2代谢物含量的影响

采用放射免疫测定法观察了舒喘灵对晚孕家兔血浆前列腺环素(PGI_2)和血栓素(TXA_2)含量的影响。实验结果证明,静脉注射舒喘灵(1.0～2.0mg/kg)均可使6-keto-PGF_(1α)的含量明显升高。与给药前相比分别增加29.5±8.2％和47.2±11.3％,经统计处理差异有非常显著性意义(P<0.01)。说明舒喘灵有剂量依赖性增加PGI_2的作用。用同样方法检测用药前后血浆TXB_2的含量未见明显改变。证明在本实验条件下舒喘灵不影响TXB_2的生成。6-keto-PGF_(1α)与TXB_2的比值明显升高(P<0.05),对改善妊娠期母胎血流动力和血液流变特性是非常有益的。     

载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)促进单核细胞源性巨噬细胞产生前列腺素E2 (PGE2)和前列腺素D2 (PGD2)

 目的 探讨人单核细胞THP-1源性巨噬细胞产生的Lipocalin型前列腺素D合酶(lipocalin type prostaglandin D synthase,L-PGDS)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和前列腺素D2 (PGD2)与载脂蛋白A-Ⅰ (apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用之间的关系。 方法 采用MTT法确定合适的给药浓度。用不同浓度(0、12.5、25、50、100和200 μg/mL) apoA-Ⅰ处理体外培养的THP-1细胞源性巨噬细胞24 h后,逆转录 聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测L PGDS mRNA表达的变化,酶联免疫测定法(ELISA)检测PGE2和PGD2 蛋白表达的变化。结果 apoA-Ⅰ处理24 h的巨噬细胞中L-PGDS mRNA、PGE2和PGD2蛋白的表达均显著高于未用apoA-Ⅰ处理的巨噬细胞( P 均< 0.001);apoA-Ⅰ浓度为50 μg/mL时,作用效果最明显。结论 apoA-Ⅰ的抗AS作用可能与上调THP 1细胞源性巨噬细胞中L PGDS mRNA以及PGE2和PGD2蛋白的表达有关。