骨骼肌整块染色法的改良

骨骼肌整块染色法的改良组胚教研室姜蓉中图分类号Ｒ３２９．３制作骨骼肌切片，通常采用Ｈ·Ｅ或铁苏木素染色，前者往往横纹不够清晰，后者肌细胞不易被伊红复染，细胞结构显示不良。本室采用常规的Ｈ·Ｅ整块染色法，加用铁明矾媒染，使肌细胞和横级都得到良好的显示。...     

雄性F344大鼠睾丸肿瘤的早期诊断及其临床意义

用99~TC-FDX淋巴管显像剂,对雄性F_(344)大鼠睾丸进行显像观察与病理分析。F_(344)大鼠尾静脉注射0.1ml显像剂,放射强度为18.5MBq,用单光子发射计算机断层仪(SPECT)分别观察不同时相睾丸显像情况。然后手术摘除大鼠睾丸,巨检取材作铁-苏木素染色和HE染色,与显像情况进行对此分析。结果发现有1例大鼠左侧睾丸呈阳性显像,病理结果证实此睾丸有肿瘤,肿瘤类型为间质细胞瘤。铁-苏木素染色可显示肿瘤细胞及早期增生间质细胞胞浆内有Reinke结晶。结果提示99~mTC—FDX具有活体诊断睾丸肿瘤的临床价值,铁-苏木素染色可用于睾丸间质细胞瘤肿瘤前期病变的早期诊断。     

小鼠组织相容性抗原的提取与纯化

用９９＾ｍＴＣ－ＦＤＸ淋巴管显像剂，对雄性Ｆ３４４大鼠睾丸进行显民病理分析，Ｆ３４４大鼠尾静脉注射０．１ｍｌ显像剂，放射强度为１８．５ＭＢｑ，用单光子发射计算机断层仪（ＳＰＥＣＴ）分别观察不同时相睾丸显像情况。然后手术摘除大鼠睾丸，巨检取材作铁－－苏木素染色和ＨＥ染色，与显像情况对比分析。结果有１例大鼠左侧睾丸呈阳性显像病理学观察证实此睾丸有肿瘤，肿瘤类型为间质细胞瘤。铁－苏木素染色显示肿瘤细胞     

两种染色方法在甲状腺穿刺细胞涂片的观察比较

目的:探讨苏木素单染色法在甲状腺细针穿刺细胞涂片的应用效果。方法:回顾性分析2016年1月-2017年12月本院206例甲状腺乳头状癌患者术前用两种染色制作的细针穿刺细胞图片,分析细胞学特征及诊断结果。结果:与常规HE染色涂片比较,苏木素单染色涂片细胞背景干净,细胞核形态显示得更加清晰。苏木素单染色涂片和常规HE染色涂片穿刺细胞学诊断的阳性符合率分别为96.8%、93.8%。结论:观察甲状腺穿刺细胞涂片时苏木素单染色效果优于常规HE染色,有利于诊断。     

抗酸-免疫组化双重染色在结核病组织病理学研究中的应用

目的:研究抗酸和免疫组织化学双重染色法在同一张切片上清晰显示结核分支杆菌与巨噬细胞的分布状态.方法:组织切片常规脱蜡、入水,其染色分别按抗酸-免疫组化-苏木素;免疫组化-抗酸-苏木素和免疫组化-苏木素-抗酸顺序进行.结果:组织切片按免疫组化-抗酸-苏木素顺序染色,背景清晰,反差明显,较另两种染色顺序显色效果好.结论:组织切片按首先免疫组织化学染色,在抗酸染色,最后苏木素染色的步骤染色效果最好.能在同一切片中清晰显示结核分枝杆菌与巨噬细胞的分布情况.     

整块组织HE染色改良法

应用整块组织ＨＥ染色法显示组织结构,结果表明：（１）整块组织染色优于传统的片染;（２）无论是细胞核密集的免疫器官还是一般的组织器官,整个组织块的表层及深部细胞核着色均匀一致;（３）染色技术的掌握关键在于苏木精的浓度及染色时间的长短。     

大鼠软脑膜间皮细胞的原代培养与鉴定

目的建立一种有效的大鼠软脑膜间皮细胞体外培养方法。方法用机械吹打法和2.5 g.L-1胰蛋白酶轻消化法剥离SD乳鼠软脑膜组织后培养。采用倒置相差显微镜、苏木素-伊红染色、扫描电子显微镜、细胞免疫荧光及免疫细胞化学法鉴定细胞。结果倒置显微镜示细胞融合后呈多边形;苏木素-伊红染色显示细胞呈多角形,胞浆薄染为淡红色;扫描电子显微镜下见细胞有丰富的微绒毛;细胞免疫荧光显示大鼠软脑膜间皮细胞可表达细胞角蛋白;免疫细胞化学法鉴定显示细胞角蛋白、波形蛋白抗原阳性表达,第Ⅷ因子相关抗原及磷酸盐缓冲液空白对照呈阴性。结论机械吹打法和胰蛋白酶轻消化法培养软脑膜间皮细胞的方法切实可行,可为脑膜纤维化及脑积水的形成机制研究提供实验模型。     

苏木精—伊红整块组织染色的改进

<正> 近年来已有不少关于苏木精-伊红整块组织染色制片的报导,但其操作程序仍较烦琐.笔者对曾小鲁教授所介绍的苏木精-伊红整块组织染色制片法中的染液配制和块染时间等进行了改进.现介绍如下.     

丽春红法显示肾的组织结构

目的　显示肾的组织学结构。方法　用丽春红 -苏木素法染色。结果　细胞核呈兰色或紫兰色 ;肾小管基膜呈鲜红色 ;肾小球内部分细胞浆呈紫红色 ;动脉壁平滑肌细胞呈亮红色 ;结缔组织呈淡兰色。结论　丽春红法染色可充分显示肾脏的各种组织结构     

巴西苏木素对舌癌Tca8113 细胞凋亡和自噬的影响及分子机制

目的探讨巴西苏木素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其分子机制,为临床用药提供理论依 据。方法用MTT法检测巴西苏木素对Tca8113细胞的增殖作用;Hoechst33342染色法观察细胞形态变化;Annexin V/PI双染 色检测巴西苏木素对Tca8113细胞凋亡程度的影响;Western blot法检测凋亡相关蛋白bax、bcl-2、cleaved caspase3及自噬相关 蛋白p-AMPK、p-mTOR、LC3B、p62 的表达;使用AMPK通路抑制剂与巴西苏木素共同作用于Tca8113 细胞,并检测通路相 关蛋白p-AMPK、p-mTOR、LC3B的表达。结果MTT结果表明,巴西苏木素能明显抑制Tca8113 细胞的增殖,24 h 时IC50为 31.17 μmol/L;Hoechst33342染色结果显示,巴西苏木素能使Tca8113细胞发生凋亡形态学改变,且与浓度正相关;Annexin V/PI 染色结果显示,不同浓度巴西苏木素作用24 h后,细胞凋亡数和凋亡率均高于空白对照组;Western blot检测相关蛋白表达结果 表明,巴西苏木素可抑制抗凋亡蛋白bcl-2,促进凋亡关键蛋白bax和cleaved-caspase3的表达,同时增加LC3B和p-AMPK的表 达,降低p62和p-mTOR表达。在与抑制剂合用后,p-AMPK与LC3B表达量虽仍略高于空白对照组,但与单纯使用巴西苏木素 相比均明显降低,而p-mTOR的表达较巴西苏木素组则明显升高（P<0.05）。结论巴西苏木素能抑制Tca8113细胞增殖并促进 其凋亡,同时可通过AMPK/mTOR通路诱导细胞发生自噬。     

Harris苏木素配方的改进及配制中的注意事项

目的：探讨Harris苏木素染色液改良配方的染色效果，方法：改变苏木素、一氧化汞和钾明矾三者的配方比例，合理匹配一氧化汞和钾明矾的剂量，严格实验操作步骤，结果：经4年来的病理制片，每年染片近3万张，均显示改良配方染液染色效果优良，结论：配制的改良Harris苏木素染色中的苏木素，一氧化汞和钾明矾搭配合理，染液的染色效果优于原常规配方。     

用改良的Mayer氏苏木素染色法显示胃颈粘液细胞

PAS和爱先兰染色方法,能显示多种组织的中性和酸性粘液成份,但对含弱酸性的粘液细胞和组织,则染色不佳。本文用改良的Mayer氏苏木素染色方法,对含弱酸性的胃颈粘液细胞染色,获得满意效果,弥补了PAS、爱先兰方法的不足。     

精子铁苏木素染色法

从精子形态学检查,了解生理或病理情况下精液中正常与畸形精子所占的比例,是判断男性生育能力的一项重要指标。现有的精子染色一般用Giemsa,Wright及H·E等方法,对精子头部染色比较满意,但尾部往往显示不够清楚,亦易褪色。我们在实践中改用铁苏木素加温染色,需时较短,而且不易褪色,对精子全貌显示十分清楚,现将方法介绍如下: 1.染液配制:Ⅰ.1%苏木素原液:纯酒精100ml,苏木精1g。Ⅱ.苏木素稀释液:苏木素原液lml,甘油1ml,蒸馏水8ml。2.方法:(1)取新鲜精液放入试管内,加入少量     

一种显示胰岛细胞的新染色法

胰岛细胞的特殊染色方法很多［１］，但多为显示乙细胞较好，而甲细胞的染色往往浅，不稳定。我们在工作实践中，采用了一种新的改良方法，即将Ｇｏｍｏｒｉ铬明矾苏木素荧光桃红法与 Ｈｃｉｄｅｎｈａｎ ＡＺＡＮ染结缔组织的三色法各取其长，略加改良，组成“Ｇｏｍｏｒｉ－ ｈｅｉｄｅｎｈａｉｎ四色法”，用以显示胰岛甲、乙、丁细胞，且色彩鲜艳，核、浆分明，能长期保存，故特将此方法介绍如下。１试剂配制 主要有： １）Ｇｏｍｏｒｉ铬明矾苏木素： １．％苏木素水溶液， ３％铬明矾水溶液．５％重铬酸钾溶液 ２ ｍｌ及 Ｎ／２硫酸水…     

三种常用苏木素染液的比较

苏木素是组织、病理等形态学实验室最常用的染色剂,主要用于细胞核染色.苏木素染色配方甚多,主要分自然氧化和化学氧化两种.自然型苏木素是借助日光氧化成熟;化学氧化型苏木素是通过向苏木素染液内加入一定量的氧化剂氧化而成的,主要由苏木素、氧化剂、媒染剂三者的不同搭配而成,这三者直接决定染色效果,如何选择这三者使苏木素达到最好的染色效果,笔者对此作了以下探讨.     

氧化苏木素诱导人乳癌MCF-7细胞凋亡及其作用机制

【目的】 探讨氧化苏木素对人乳癌MCF-7细胞的凋亡作用及其相关作用机制。 【方法】 MTT实验检测氧化苏木素对MCF-7细胞和正常乳腺上皮细胞MCF 10A的细胞毒作用;Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生;荧光染料DiOC6染色,流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位的变化;Western blot实验检测细胞浆细胞色素C及细胞内caspase-9和survivin蛋白的变化。 【结果】 氧化苏木素对人乳癌MCF-7细胞具有高效的细胞毒作用,而对正常乳腺上皮MCF 10A细胞毒性较弱,IC50值分别为(7.15 ± 0.43)μmol/L 和(33.56 ± 2.87) μmol/L;0、7.5、15、30 μmol/L的氧化苏木素处理MCF-7细胞48 h后,细胞的凋亡率从(3.37 ± 0.66)%依次升高到(16.8 ± 1.27)%、(31.31 ± 4.22)%、(51.23 ± 5.55)%;DiOC6染色流式细胞仪检测结果显示氧化苏木素可以剂量依赖性地降低线粒体膜电位;Western blot结果显示氧化苏木素诱发了线粒体内细胞色素C的释放和细胞内caspase-9蛋白的剪切激活,同时氧化苏木素也可剂量依赖性地降低survivin蛋白的表达。 【结论】 氧化苏木素可通过线粒体通路诱导MCF-7细胞凋亡,下调survivin蛋白可能是其诱导细胞凋亡的主要机制。     

特染技术在弹力纤维中的运用

目的 探讨醛品红法、地依红法与Verhoeff铁苏木素染色方法在弹力纤维中的运用显示弹力纤维。方法 适当调整染色液显示弹力纤维，缩短染色时间，升高染色温度。结果与结论 醛品红法显示的弹力纤维呈深紫色，地依红法呈深棕红色，Verhoeff铁苏木素法呈黑色或篮紫色。醛品红法与地依红法作用相似，都对显示动脉硬化、梅毒性主动脉炎、老年性肺气肿等疾病的弹力纤维染色效果明显，但醛品红法效果更佳；Verhoeff铁苏木素法除显示心脑血管方面病变外，还对显示瘤性弹力纤维病变效果颇为理想。     

微波技术在肺脏组织整块染色切片技术中的应用

目的：探讨更好地显示肺脏结构的HE整块染色切片方法,提高制片效率。方法：对照组用常规HE整块染色切片法显示肺脏结构,实验组在常规HE整块染色切片过程中,应用微波处理,并与对照组比较。结果：实验组肺脏细胞显示效果良好,微波辐射明显促进了组织块染色,制片时间缩短。结论：使用微波辐射促进肺脏组织HE染色是显示肺脏结构的良好方法,且简便可行。     

孕鼠双酚A染毒对雄性子鼠睾丸结构及MnSOD-SIRT3蛋白表达的影响

目的 探讨孕鼠双酚A(BPA)染毒对雄性子鼠睾丸结构及MnSOD-SIRT3蛋白表达的影响。方法 将ICR孕鼠随机分成4组,自受孕第一天始,用溶剂对照组、BPA低剂量(10 nmol/L)组、BPA中剂量(50 nmol/L)组、BPA高剂量(300 nmol/L)组,饮水染毒,待子鼠出生后第6周,处死雄性子鼠,取睾丸组织,HE染色、电镜观察染毒后子鼠睾丸结构改变,Hoechst染色观察细胞凋亡,Western blot法检测睾丸组织MnSOD、SIRT3蛋白的表达。结果 与溶剂对照组比较,HE染色显示,染毒组睾丸组织的形态有损伤,且中、高剂量组较为严重;电镜显示,中、高剂量组的间质细胞、精原细胞、支持细胞均有损伤;Hoechst 33258染色显示:染毒组较对照组睾丸组织内各细胞凋亡明显;Western blot检测显示:随染毒剂量增加,睾丸组织MnSOD、SIRT3蛋白表达呈下降趋势。结论 BPA可影响睾丸组织学结构,诱导生精细胞和间质细胞的凋亡,其机制可能与降低睾丸组织中MnSOD和SIRT3表达有关。     

苏木素的配制在病理常规HE制片中的应用

目的:解决常规HE染色中苏木素染色力很快减弱、浪费严重的问题。方法:将两种不同配法的苏木素混合使用。结果:新苏木素着色力强,染色时间短,使用时间长。结论:两种苏木素的配制是传统方法,各有利弊,混合使用,消除不利因素,效果可靠,易于常规大量HE制片过程中推广应用。