标准曲线使用中的几个问题探析

在卫生理化检验方法中,大部分项目的测定,都使用浓度相对比较测量法,即试样中某种成分的量与该成分标准(已知浓度)比较计算后求出的.试样成分测定准确与否和标准是否准确密切相关.因此,标准曲线的制作与使用尤为重要.为了充分理解标准曲线及回归方程中各参数的意义,减少分析中的误差,保证检验数据的准确,本文对以下几个问题进行讨论.     

标准曲线法测定未知样品浓度的快速计算法

标准曲线法是利用吸收曲线上最适合的波长进行测定的理化检验方法。此法需根据计算结果绘制标准曲线,采用最小二乘法,计算直线回归方程。这一过程计算繁杂、易出错,为此,作者介绍了一种在Excel环境下利用标准曲线测定未知样品浓度的快速计算方法(以下简称“快速计算法”),既快捷又准确。     

标准曲线法测定未知样品浓度的快速计算法

标准曲线法是利用吸收曲线上最适合的波长进行测定的理化检验方法，此法需根据计算结果绘制标准曲线，采用最小二乘法，计算直线回归方程，这一过程计算繁杂，易出错，为此，作者介绍了一种在Excel环境下利用标准曲线的测定未知样品浓度的快速计算方法（以下简称“快速计算法”），既快捷又准确。     

原子吸收分光光度计测定葡萄酒中铁含量的两种方法比较

[目的]比较利用原子吸收分光光度计测定葡萄酒中铁元素含量的两种方法。[方法]采用标准浓度法与标准加入法。[结果]测定结果的相对标准偏差:标准浓度法为2 5%~3 2%,标准加入法为 1 4%~2 1%;回收范围分别为119 90%~146 60%和101 47%~103 80%;线性范围均为0~12 mg/L。[结论]确定了更为准确、稳定、快速的标准加入法作为原子吸收分光光度计分析葡萄酒中的铁元素含量的最佳方法,并可将该方法推广到其他元素的测定中使用。     

石墨炉原子吸收标准加入法测定尿中铅含量

目的建立使用石墨炉原子吸收法准确测定尿中铅含量的方法。方法优化实验条件,选用Pd（NO3）2-Mg（NO3）2做基体改进剂及标准加入法校准曲线消除基体干扰。结果精密度实验、回收率实验与冻干人尿铅标准物质测定均符合要求,铅标准加入浓度在0～100μg/L范围内,标准加入法校准曲线线性良好,相关系数r=0.997 6,校准方程A=0.001 26 C X-0.002 9,方法检出限为1.48μg/L。结论使用本方法检测尿铅,消除了基体干扰,精密度好,结果准确可靠,样品处理简便快捷,适合大批量尿样检测。     

尿中砷的原子荧光光谱测定法样品前处理及标准的研究

目的对尿中砷的原子荧光光谱测定法进行样品不同前处理方法的比较以及标准曲线和工作曲线的比较。简化分析程序,使得该法更易推广普及。方法配制两套相同浓度的砷标准系列进行消化与不消化的比较,将两组数据进行统计处理,比较有无显著性差异;尿样采用硝酸高氯酸在自控电热器上消解,用加标回收率评价此消化方法测定的准确度。高、低两个浓度的样品各取6份消化测定,计算精密度,看其消化过程中的稳定性。结果尿砷标准系列消化与不消化没有显著性差异,尿样采用硝酸高氯酸在自控电热消化器上消化,高、低浓度的加标回收率分别为99.8%、104.3%。高、低浓度的样品精密度分别为6.3%、9.5%。结论该法的改进不影响方法的灵敏、准确和稳定性,且大大简化了操作程序,便于操作,减轻了分析人员的工作量,也减少了复杂程序可能带来的误差,使用更少的仪器设备,更利于推广、普及。     

石墨炉原子吸收法与分光光度法测定面制食品中的铝

目的对石墨炉原子吸收法与分光光度法测定面制食品中铝进行比较。方法采用高氯酸—硝酸对食品进行前处理,分别用石墨炉原子吸收光谱法和铬天青S分光光度法对食品中铝进行检验。结果石墨炉原子吸收光谱法的线性范围在0.025~0.40 mg/L,使用新原理进行曲线拟合,标准各点均分布在曲线上,相关系数R达到0.999 6,面制品铝含量测定回收率为94.5%~102.7%,RSD1.07%;铬天青S分光光度法的线性范围在0.010~0.10 mg/L,相关系数R为0.997 3,面制品铝含量测定回收率为85.6%~115.7%,RSD3.58%。结论石墨炉原子吸收光谱法比铬天青S分光光度法测定面制品中铝的含量更加简单、快速和准确,回收率更高,值得推广使用。     

称量换算体积代替刻度移液管示值体积在标准曲线制作中的应用

卫生理化检验制作标准曲线时，经典的方法是用刻度移液管吸取某一梯度体积的标准使用液，制成系列标准管X（体积或浓度），再经过一些中间处理步骤后，采用分光光度法，电位法或其他仪器法等测定其对应值y，这样，就完成了标准曲线的制作。笔者在实际操作中发现，在移取小体积的标准使用液时，比如用量程1.OOml刻度移液管移取0.10，0.20……（ml）体积时，     

静态电位溶出标准连续加入法测定食盐中的铅

食盐的主要成份是氯化钠，同时含有许多其它离子，食盐中铅离子的测定目前较常采用的是双硫腙法和原子吸收方法，前者灵敏度比较低，操作繁琐，费时费试剂，使用剧毒的氰化钾污染环境；后者因为有大量氯化钠离子存在而产生基体干扰，由于盐效应，火焰原子吸收是无法直接测定食盐中的铅含量；石墨炉方法需要加入基体改进剂，高背景吸收影响结果的准确。本篇介绍在低盐浓度下，静态电位溶出法通过电位富集来提高检测灵敏度，在同一介质中采用连续标准加入法回归曲线，通过计算曲线与x轴上的截距值就是所含盐溶液的铅含量。该方法标准和所测样品在样品介质中进行，减少了其它离子的干扰，结果准确可靠，灵敏度高，操作简便，易于快速检测，该方法回收率为94％～108％，精密度RSD（n=6）为1．0％。     

吸光分析中理论回归线质控应用初探

在盐酸副玫瑰苯胺比色法测定SO_2过程中,由分析方法确定显色物质的摩尔吸光系数(ε_(546)=4.77×10~4l·mol~1)和标准系列浓度,算出对应吸光值,用统计相关法求出浓度-吸光度回归线(理论线),以此为标准对实测标准曲线进行拟合检验,再用各实测标准曲线的系例浓度推算出吸光值与相应理论线吸光值进行比较,将各检验t值标在以浓度为横轴,t值为纵轴的质控图上。我们所做4条校正曲线,有2线拟合度差异不显著(P>0.50),t值均在警告限内,另外2线拟合度差异显著(P<0.01),t值随浓度增加逐次超出控制限。     

快速消解-石墨炉原子吸收法测定土壤中镉

目的建立测定土壤中镉含量的快速消解-石墨炉原子吸收法。方法土壤样品于石墨消解仪上120℃下消解1 h,冷却后直接以去离子水定容后用石墨炉原子吸收法测定土壤中镉含量。结果将土壤镉标准品用电热板湿法消解法、微波消解法和石墨快速消解法进行消解,检测结果的相对标准偏差(RSD)分别为7.6%、6.7%、3.6%。使用标准加入法和浓度外标法分别对6个土壤样品进行加标回收测定,标准加入法的回收率为90.8%~103.2%,浓度外标法的回收率为75.0%~91.6%。使用二次方程曲线拟合和一次方程曲线拟合对2个土壤标准样品进行测定,其相对误差分别为3.8%、5.0%和5.2%、8.6%。本实验在0μg/L~10.0μg/L时线性关系良好(相关系数r=0.999 3),方法检出限为2.0μg/kg,相对误差为3.8%~5.0%,相对标准偏差(RSD)为1.7%~3.5%。结论该方法前处理操作简单、快速、实用,检出限、准确度、精密度都能满足测定要求,适合于日常土壤样品中镉含量的快速测定。     

电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定尿中碘

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定尿中碘元素的方法,并应用于日常检测工作。方法:随机选取一份尿样用1%HNO3进行1:20稀释,用该稀释液配制标准系列,用测定值绘制标准加入法曲线,利用工作站软件将标准加入法曲线转换为外标法标准曲线;样品经1:20稀释后在同样的条件下测定,在转换后的标准曲线上获得浓度值(仪器工作站软件自动给出)。结果:测定尿中碘元素的线性相关系数r=1.0000,相对标准偏差<3.0%,加标回收率94.2%~98.7%,最低检出浓度0.18μg/L,方法检出限3.6μg/L。结论:该方法样品前处理简单,检出限低,线性范围宽,准确度、重现性好,是一个简便、灵敏、准确的直接测量尿中碘的方法。     

4-胺基安替吡啉法测挥发酚的标准曲线稳定性分析

目的　掌握和控制影响酚标准曲线斜率的因素 ,认识回归方程的截距与空白测定值的关系 ,重新界定标准曲线的线性范围 ,提高酚标准曲线的精密性 ,减少批期内标准曲线测定次数 ,从而方便工作节省成本。方法　用统计学的方法分析酚标准曲线各点测定值及斜率的集中趋势、离散趋势并对酚标准曲线回归方程的截距及空白测定值做配对t检验。结果　控制了实验条件的各条酚标准曲线各点的测定值的标准差小于仪器的检出限 ,斜率趋于平均值 ;按国际法测定酚的线性范围可达 0 .16mg/L。结论　相同条件下 ,国际法测挥发酚时 ,有质控的用一条初始标准曲线进行定量计算即可[1〗;浓度在 0 .16mg/L以下的样品不必稀释可直接测定。     

应用离子选择电极标准增量测定法有关问题讨论

离子选择电极在卫生检验中已被广泛应用,其测定方法有多种,其中标准曲线法和标准增量法已被列入国家卫生标准检验方法中氟的测定[1 ] 。标准增量法的样品测定和标准测定是在试液离子强度、pH、温度、搅拌速度等基本相同的背景下进行的,该方法是一种方便、准确的测定方法。笔者根据本实验室应用标准增量法的体会,对该方法测定和计算过程中有关问题作粗浅的讨论。1　为保证测定结果的准确性样品和标准测定应在相同条件下进行标准增量法测定,由于样品的多样性和复杂性,特别在样品成份十分复杂时,离子强度缓冲溶液也很难保证样品试液和标准试液…     

酶联免疫法检测黄曲霉毒素B1的标准曲线拟合分析

目的探索酶联免疫吸附法(ELISA)检测黄曲霉毒素B1(AFB1)标准曲线的拟合方程,提高检测结果的准确性。方法用SPSS生物统计软件建立AFB1测定标准系列的拟合二次曲线及指数曲线方程,并比较两种方程的准确性。结果由拟合二次曲线方程求得的样品浓度与从标准曲线上求得的样品浓度偏差<10%。结论拟合二次曲线方程作AFB1测定标准曲线的拟合较为合适,测定快速而准确。     

原子荧光光谱法测定海产品中的砷

砷在食品卫生监督检验中被列为重点监督检验的有害元素之一，传统的检验方法有砷斑法，灵敏度低；二乙基二硫代氨基甲酸银比色法，准确可靠，但操作繁琐，灵敏度低，且吸收剂为致癌物质，大量样品分析时试剂及玻璃仪器太多极不方便；原子吸收分光光度法测定砷的灵敏度低，干扰大；氢化物发生原子吸收分光光度法测定范围窄。应用氢化物原子荧光法对50份海产品中砷测定，精密度好，回收率高、灵敏度高，省时简单。与DDC—Ag法比较获得满意效果，现将结果报告如下：     

再论理化检验中空白值的扣除方法及应用

中国卫生检验杂志2000年6月第10卷第3期包先金同志《试论理化检验中空白值的扣除方法》一文讲得很好:一未经过原点的标准曲线,其空白值的正确扣除做法是根据空白液的仪器响应信号值求得与之相对应的浓度或含量,再作扣除,否则就会有a/b的相差;若曲线经过原点,就可将空白液测出的仪器响应信号值拿来直接从试样响应值中减去,然后到校准曲线上去查结果。在实际工作中,我们所求的标准曲线一般情况下是一条不通过原点的直线,但可经过坐标平移使本来不过原点的直线变为经过原点的直线。这样空白值的扣除就可将空白液测出的响应值拿来直接从试样响应值中减去,然后到平移后的标准曲线上查结果。     

Excel 2003在离子选择电极法检验数据处理中的应用

<正>离子选择电极法是理化捡验中常用的方法,其常用的检验数据处理是以电位值为纵坐标,以待测离子浓度为横坐标,在半对数坐标纸上绘制标准曲线。根据试样电位值在标准曲线上求得浓度。手     

石墨炉原子吸收光谱法测定尿中锰的研究

目的建立石墨炉原子吸收光谱法测定尿中锰的检测方法。方法直接进尿样于石墨炉中,加入钯和抗坏血酸作为基体改进剂,干燥、灰化和原子化后测定吸光度,与标准加入工作曲线比较定量。结果在0～30μg/L范围内线性关系良好,r=0.9955～0.9997,检出限为0.37μg/L,试样RSD在1.7%～7.0%,加标回收率在72.5%～105.0%,与标准方法和萃取-火焰原子吸收法检测结果比较,其差异均无显著性(P>0.05)。结论试样无需前处理,方法简单快速,工作曲线线性关系良好,灵敏度高,重现性、回收率好,适合大批量试样检测。     

石墨炉原子吸收法测定尿铅的影响因素分析

目的研究石墨炉原子吸收法测定尿铅的影响因素。方法比较5种基体改进剂的效果并选择最佳基体改进剂及其用量;优化石墨炉的升温程序;对标准加入法与外标法及尿样的稀释比例对尿铅测定的影响进行探讨。结果基体改进剂及其用量、灰化温度、原子化温度、尿样稀释及标准曲线中加入正常人尿与否对尿铅的测定影响较大。比较5种基体改进剂的效果,最佳基体改进剂及用量为5μl 5g/L磷酸二氢铵-1g/L硝酸钯。优化石墨炉升温程序,最佳灰化温度为1 200℃,最佳原子化温度为1 600℃,在灰化之前通入空气,有利于清除尿样中的有机物。在标准曲线中加入正常人尿,测定1∶1稀释尿样加标回收率和尿铅参考物,加标回收率在95.3%-112.7%之间,尿铅参考物测定值在标准值范围内。结论石墨炉原子吸收法测尿铅,采用5μl 5g/L磷酸二氢铵-1g/L硝酸钯基体改进剂,最佳灰化温度1 200℃,最佳原子化温度1 600℃,在灰化之前通入空气,采用加入正常人尿的标准加入曲线测定1∶1稀释尿样,可得到更加准确的尿铅测定结果。