不同剂量转化生长因子-β1对兔颞下颌关节骨关节炎的影响

探讨关节腔内注射不同剂量转化生长因子-β1（TGF-β1）对兔颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）的影响。方法40只新西兰白兔,随机分为实验组（36只）和对照组（4只）。实验组通过双侧颞下颌关节盘部分切除建立骨关节炎模型,术后4周分别注射20、40和80 ng TGF-β1于右侧颞下颌关节内,左侧关节注射等量生理盐水。注射后6周及12周时,分批处死实验组与对照组动物。获取髁突标本后对软骨与软骨下骨分别行Micro CT检查与糖蛋白含量检测（番红-O染色）。结果 术后生理盐水组的关节呈明显的骨关节炎表现,其软骨糖蛋白含量较正常组明显降低,软骨下骨逐渐硬化。注射后6周,所有TGF-β1组糖蛋白含量均高于正常组与盐水组。其中,40 ng与80 ng组糖蛋白含量更高于20 ng组。注射后12周时,所有TGF-β1组关节软骨组织结构有序,其糖蛋白含量无组间差异,虽较6周时有所降低,但仍高于正常组。所有TGF-β1组的软骨下骨都得到显著改善,且具有与正常组类似的软骨下骨细微结构。结论 关节腔内注射TGF-β1能够有效地促进TMJOA中病变软骨的修复并阻止软骨下骨异常骨改建。     

白细胞介素-1受体拮抗剂抑制兔颞下颌关节骨关节炎软骨破坏的研究

目的:研究关节腔内注射白细胞介素-1受体拮抗剂对颞下颌关节骨关节炎关节软骨修复的影响。方法:取新西兰大白兔24只,用关节盘部分切除致使穿孔法建立双侧颞下颌关节骨关节炎模型。4周后,在每只动物右侧(实验侧)颞下颌关节腔内一次性注射重组人白细胞介素-1受体拮抗剂50μg,左侧(对照侧)关节腔内注射等量安慰剂。注射后12、24周分别处死12只动物,取双侧颞下颌关节标本进行组织学及RT-PCR检测。结果:双侧关节软骨均呈现出不同程度的骨关节炎病损,对照侧病损更严重。实验侧组织学分数明显高于对照侧(P<0.05)。注射后12和24周时实验侧II型胶原及聚集蛋白聚糖mRNA表达高于对照侧(P<0.05);12周时实验侧关节软骨聚集蛋白聚糖酶mRNA表达低于对照侧(P<0.05),24周时两侧无明显差异(P>0.05)。肿瘤坏死因子-αmRNA表达两侧无明显差异(P>0.05)。结论:颞下颌关节腔内注射IL-Ra能缓解骨关节炎导致的软骨病损,可望成为治疗颞下颌关节骨关节炎的一种新方法。     

rhIL-1Ra抑制大鼠颞下颌关节骨关节炎软骨破坏的研究

目的:探讨关节腔内注射重组人IL-1Ra对实验性大鼠颞下颌关节炎软骨关节修复的影响.方法:取SD大鼠24只,用关节腔内注射Ⅱ型胶原酶法建立双侧颞下颌关节骨关节炎模型,1周后,右侧(实验侧)关节腔内一次性注射重组人IL-1Ra5 μg(稀释于0.05 ml生理盐水),左侧(对照侧)注射等量生理盐水.建模后2周、4周各处死12只动物,取颞下颌关节标本进行HE染色、免疫组化染色及RT-PCR检测,用Mankin评分方法评估TMJ组织病理变化程度.另取1只SD大鼠用作空白对照,2周后处死.结果:2周时双侧颞下颌关节软骨均呈现不同程度的关节病损,实验侧和对照侧Mankin计分分别为1.33±0.52和2.00±6.63(P ＞0.05).4周时,实验侧改良和对照侧Mankin评分分别为3.00±0.63和6.50 ±0.84(P＜0.05).AD-AMTS-4、5的蛋白及mRNA表达也低于对照侧(P＜0.05).结论:颞下颌关节腔内注射重组人IL-1Ra能缓解骨关节炎导致的软骨病损,其治疗机制可能是通过抑制ADAMTS-4、5的表达来实现的.     

颞下颌关节骨关节病动物模型的构建研究

目的建立能够很好地反映颞下颌关节骨关节病(temporomandibular joints osteoarthritis,TMJOA)的发病情况并为治疗打下良好基础的动物模型。方法选择37只新西兰白兔,分为实验组、阴性对照组和健康对照组,通过颞下颌关节(TMJ)内注射Ⅱ型胶原酶来诱导兔产生TMJOA,并动态全程观察4、8、12、16、20、24周兔颞下颌关节大体和组织病理学的发生、发展过程。结果随时间的延长,病变先是表现为逐渐加重,以后出现缓解趋势,实验组中均于4周后出现较明显的骨关节病损,其中12周组达到病变高峰,20、24周组出现局部修复现象。结论胶原酶注射后的兔颞下颌关节大体和组织病理学改变与人TMJOA的基本病理改变一致,具有良好的可比性和相似性,成功地构建了一种TMJOA的动物模型。     

兔颞下颌关节骨关节病动物模型超微结构的观察

目的：反映颞下颌关节骨关节病（Temporomandibular Joints Osteoarthritis,TMJOA）的超微结构变化,为该病的诊断和基因治疗打下良好基础。方法：选择35只新西兰白兔,分为实验组和健康对照组,通过TMJ内注射Ⅱ型胶原酶来诱导兔产生TMJOA,通过扫描电镜动态全程观察4、8、12、16、20、24w兔颞下颌关节的超微结构变化。结果：随时间的延长,病变先是表现为逐渐加重,以后出现缓解趋势,实验组中均于4w后出现较明显的骨关节病损,其中12w组达到病变高峰,20、24w组出现局部修复现象。结论：兔颞下颌关节骨关节病模型超微结构改变,与人TMJOA的基本病理改变十分一致,具有良好的可比性和相似性。     

医用臭氧对颞下颌关节骨关节炎大鼠髁突软骨作用研究

目的    分析于颞下颌关节腔内注射医用臭氧对颞下颌关节骨关节炎（temporomandibular joint osteoarthritis，TMJOA）大鼠髁突软骨的作用。方法    选取8 ~ 10周龄雄性SD大鼠22只，随机分为对照组6只、模型组6只、实验组10只。模型组和实验组大鼠建立TMJOA模型3周后，实验组大鼠颞下颌关节腔内注射质量浓度为30 μg/mL的医用臭氧，其他2组注射生理盐水，每周1次，共3次。行锥形束CT（cone beam computed tomography，CBCT）扫描后处死各组大鼠并进行取材，观察髁突和关节盘的变化；采用HE、甲苯胺蓝染色并分别通过改良Mankin′s评分和平均光密度值分析髁突软骨细胞和基质的变化情况；采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）染色观察破骨细胞数量及分布。结果    经CBCT检查和肉眼观察发现，模型组和实验组颞下颌关节髁突及关节盘呈现出不同程度的缺损，模型组缺损程度重于实验组。3组改良Mankin′s评分、平均光密度值和TRAP染色阳性细胞数比较，差异均有统计学意义（F值分别为93.462、44.498、113.918，均P < 0.05）。其中，模型组和实验组的改良Mankin′s评分、TRAP染色阳性细胞数均大于对照组，模型组这2个指标还高于实验组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）；模型组和实验组的平均光密度值低于对照组，模型组的平均光密度值低于实验组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。结论    于颞下颌关节腔内注射质量浓度为30 μg/mL的医用臭氧，可减轻TMJOA大鼠髁突软骨及软骨下骨的损伤。     

颞下颌关节骨关节病术后不同辅助治疗效果评价

目的    评价颞下颌关节骨关节病（temporomandibular joint osteoarthrosis，TMJOA）术后不同辅助治疗方法的临床效果，为术后康复治疗提供参考。方法    选取2015年6月至2021年11月于中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科行颞下颌关节盘松解复位固定手术的191例TMJOA患者进行回顾性分析。术后行牙合垫治疗+常规功能训练的63例患者记为牙合垫组，行几丁糖关节腔内注射治疗+常规功能训练的57例患者记为注射组，仅行常规功能训练的71例患者记为对照组。对3组患者治疗前后的疼痛视觉模拟评分法（VAS）评分、最大张口度、下颌运动分、肌肉压诊分进行比较分析。结果    治疗前，3组各项评价指标比较，差异均无统计学意义（均P > 0.05）。治疗后3个月，3组各项评价指标总的比较，差异均有统计学意义（均P < 0.05）；关于VAS评分、下颌运动分、肌肉压诊分方面，分值由低至高依次为注射组、牙合垫组、对照组，而最大张口度由大至小依次为注射组、牙合垫组、对照组，差异均有统计学意义（P < 0.05）；且3组各项评价指标结果均明显优于治疗前（均P < 0.05）。结论    TMJOA患者行颞下颌关节盘松解复位固定手术后采取适当辅助治疗和功能训练均能显著改善颞下颌关节功能，其中几丁糖关节腔内注射治疗结合常规功能训练的效果较佳。     

颞下颌关节强直动物模型中最大张口度与强直严重程度关系研究

 目的　研究主、被动最大张口度（AMMO、PMMO）与颞下颌关节强直严重程度的关系。方法　选取28只健康雄性绵羊随机分为实验组和对照组,每组各14只。实验组绵羊双侧颞下颌关节模拟髁突矢状骨折,其中左侧翼外肌被切断以阻断其功能;对照组绵羊未进行手术。于术前及术后12、24周对所有绵羊体重、AMMO、PMMO、颞下颌关节形态学特点进行测量评估。结果　实验组只有右侧保留翼外肌功能的颞下颌关节发生了骨强直。术后12、24周,实验组绵羊AMMO、PMMO、极限距离均显著低于对照组,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。实验组绵羊AMMO和PMMO与骨融合区宽度、长度、面积及钙化程度均呈负相关（均P < 0.05）,其中骨融合区面积为主要影响因素（术后12、24周相关系数r分别为-0.94、-0.95）。结论　颞下颌关节强直动物模型中阻断翼外肌功能可阻止骨强直的发生;对于早期髁突矢状骨折,可通过牙合垫或牙合板进行张口训练,进而阻断翼外肌功能。当颞下颌关节发生骨强直时,骨融合区面积越大,张口受限越明显。     

颞下颌关节强直动物模型中最大张口度与强直严重程度关系研究

目的　研究主、被动最大张口度（AMMO、PMMO）与颞下颌关节强直严重程度的关系。方法　选取28只健康雄性绵羊随机分为实验组和对照组，每组各14只。实验组绵羊双侧颞下颌关节模拟髁突矢状骨折，其中左侧翼外肌被切断以阻断其功能；对照组绵羊未进行手术。于术前及术后12、24周对所有绵羊体重、AMMO、PMMO、颞下颌关节形态学特点进行测量评估。结果　实验组只有右侧保留翼外肌功能的颞下颌关节发生了骨强直。术后12、24周，实验组绵羊AMMO、PMMO、极限距离均显著低于对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。实验组绵羊AMMO和PMMO与骨融合区宽度、长度、面积及钙化程度均呈负相关（均P < 0.05），其中骨融合区面积为主要影响因素（术后12、24周相关系数r分别为-0.94、-0.95）。结论　颞下颌关节强直动物模型中阻断翼外肌功能可阻止骨强直的发生；对于早期髁突矢状骨折，可通过牙合垫或牙合板进行张口训练，进而阻断翼外肌功能。当颞下颌关节发生骨强直时，骨融合区面积越大，张口受限越明显。     

颞下颌关节骨关节病动物模型关节滑液NO水平变化的研究

目的 研究一氧化氮(NO)与颞下颌关节骨关节病(TMJOA)模型的关系.方法 选用9只山羊通过关节上腔内注射0.5%胶原酶制造TMJOA实验动物模型,注射前、注射后4、 8、 12、 24周分别抽取关节滑液,以硝酸还原酶法检测关节滑液中NO的水平变化.结果 实验性TMJOA山羊关节滑液中NO水平明显升高,以注射胶原酶后12周为最高.结论 NO可能在TMJOA发生、进展过程中起着重要的作用.     

不同骨内植入材料对巨噬细胞活性的影响

目的：研究不同骨植入材料对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7活性的影响。方法：在钛（Ti）、医用不锈钢（SS）和聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）材料表面及细胞培养板（PSC）上培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,在不同时间用cck-8法测定细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法测定单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达水平。结果：小鼠巨噬细胞系RAW264.7在各种材料上均能良好生长,无明显细胞毒性。Ti和PSC组细胞增殖速率明显高于SS和PMMA组。各组材料表面巨噬细胞MCP-1mRNA表达随时间减少,PMMA组表达较高。除钛组外,其余各组巨噬细胞TGF-β1mRNA表达水平随时间增加,12h和24h时钛组表达较高。TNF-αmRNA的表达水平随时间增加,Ti组和PSC组显著高于SS和PMMA组。结论：骨内植入材料表面的巨噬细胞增殖活性和基因表达受不同材料和接触时间的影响。     

HGF在人牙周膜成纤维细胞中的表达

目的：观察HGF在人牙周膜成纤维细胞中的表达及探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-1β（IL-1β）与HGF之间的关系。方法：分别采用IL-1β梯度浓度、最佳干预浓度和TGF-β1梯度浓度干预第5代人牙周膜成纤维细胞,并运用酶联免疫技术检测人牙周膜成纤维细胞的上清液中HGF的表达。结果：经IL-1β单独作用,人牙周膜成纤维细胞的上清液中HGF的含量较空白对照组高,并优选出IL-1β的最佳干预浓度为10 ng/mL。当一定浓度的TGF-β1和10 ng/mL的IL-1β联合干预人牙周膜成纤维细胞,该细胞上清液中HGF的含量较单独IL-1β作用组低。结论：TGF-β1能够抑制IL-1β诱导的人牙周膜成纤维细胞分泌HGF。     

盐酸氨基葡萄糖片联合玻璃酸钠治疗颞下颌关节骨关节炎的临床随机对照试验

目的初步探索通过双盲临床随机对照试验评估盐酸氨基葡萄糖治疗颞下颌关节骨关节炎的有效性和安全性。方法28例被诊断为颞下颌关节骨关节炎的患者被随机分到试验组和对照组。试验组14例接受口服盐酸氨基葡萄糖片（每日服1.44 g）4周;对照组14例口服安慰剂。2组均同时接受颞下颌关节上下腔注射玻璃酸钠治疗（每周1次,共4次）。在试验基线和治疗后第2、3、4周分别测量2组的最大张口度、张口疼痛和张口偏斜;在试验基线和第4周使用OHIP-14量表测量患者的生存质量。统计分析采用意向性分析的方法。结果除对照组2例失访,其余患者均完成治疗及随访。2组基线各指标无明显差异。口服盐酸氨基葡萄糖能显著增加患者的最大张口度（P=0.03）、降低张口疼痛（P=0.02）,但在改变张口偏斜和患者生存质量方面其短期效果不明显（P=0.67,P=0.77）。试验过程中未发现严重不良事件。结论盐酸氨基葡萄糖口服与玻璃酸钠关节内注射在颞下颌关节骨关节炎的治疗上有显著的效果和安全性。     

颞下颌关节骨关节炎治疗的临床疗效比较

目的:探讨比较关节腔注射治疗、超短波物理治疗、药物口服治疗对颞下颌关节骨关节炎的临床疗效。方法 :选取初期骨关节炎患者60例,随机分为3组,分别采用透明质酸钠(Sodium hyaluronate,SH)关节上腔注射法、超短波物理治疗法、双氯芬酸钠(diclofenac sodium)联合盐酸氨基葡萄糖(glucosamine hydrochloride)口服法进行治疗。利用颞下颌关节功能障碍指数(dysfunction index,DI)及疼痛直观模拟标尺(visual analog variables,VAS)对比各组治疗后1周、1个月、3个月及6个月的疗效。结果:治疗后1周各组疗效无差异(P>0.05);治疗后1个月注射组及超短波组疗效优于药物组(P<0.05);治疗后3个月及6个月注射组疗效显著优于短波组及药物组(P<0.05)。结论:药物口服及超短波物理治疗疗效稳定性较差。透明质酸钠关节腔内注射法的疗效稳定性值得肯定。     

人参皂苷Rg1/ADSCs辅以透明质酸为基质对兔颞下颌关节骨关节病的改善作用

目的:探讨人参皂苷Rg1/ADSCs辅以透明质酸为基质对兔颞下颌关节骨关节病的治疗效果。方法:32只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、对照组、实验组,每组8只。通过关节腔内注射木瓜蛋白酶法建立骨关节病模型,对照组与实验组造模成功2周后开始药物治疗。对照组关节上腔注射人参皂苷Rg1/ADSCs悬液0.6mL,实验组注射透明质酸/人参皂苷Rg1/ADSCs复合物0.6mL,每周1次。各组动物分别于用药第3、9周后处死,每次16只,每组4只。制备标本,行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时定量PCR检测,采用SPSS17.0软件包对数据进行方差分析及t检验。结果:扫描电镜与组织学观察可见,实验组软骨病变区改善情况优于对照组。与模型组比较,实时定量PCR结果显示,实验组MMP-13表达与空白组相对持平但低于对照组,差异有显著性(P<0.05);实验组TIMP-1表达与空白组相对持平但高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1/ADSCs辅以透明质酸为基质对改善兔颞下颌关节骨关节病有明显作用。     

超声对大鼠牙骨质修复过程中TGF-β1表达和OPG/RANKL表达比值的影响

目的：研究超声在大鼠牙骨质修复过程中对转化生长因子-β1（TGF-β1）表达和骨保护蛋白、核因子-KB受体活化因子配体（OPG/RANKL）表达比值的影响。方法：选择32只健康雄性Wistar大鼠建立正畸性牙根吸收动物模型,随机分为4组,每组8只,分别为空白对照组,单纯加力组,自然修复组,超声修复组,其中用频率1.5MHz,强度100MW/cm2的治疗超声对超声修复组的实验牙在2周的修复期进行每天15min治疗超声照射。2周治疗结束后,取上颌第一磨牙及其牙周组织,制作以上颌第一磨牙为中心的,近远中方向的组织切片,行TGF-β1,OPG,RANKL,免疫组化染色,光镜观察并作免疫组化光密度分析,对实验结果进行单因素方差分析。结果：超声修复组TGF-β1的光密度值（0.36228±0.02833）,明显高于自然修复组（0.24576±0.03183）,差异有统计学意义。超声修复组OPG/RANKL光密度值比值（1.1126±0.096）,也明显高于自然修复组（0.7835±0.067）差异有统计学意义。结论：超声通过上调TGF-β1表达,改变OPG/RANKL的比值,促进牙骨质的修复重建。     

糖尿病牙周病大鼠牙周龈沟液中TNF-α,IL-1β和LPS水平的研究

目的：本文主要研究了糖尿病牙周病大鼠模型龈沟液中TNF-α,IL-1β和LPS水平的改变。方法：15只大鼠通过注射链脲佐菌素建成糖尿病模型并使用丝线诱导成牙周病模型（组1）,15只大鼠丝线诱导成牙周病模型（组2）,15只大鼠链脲佐菌素注射建成糖尿病模型（组3）,15只系统健康大鼠作为正常对照组（组4）。用ELISA方法检测龈沟液中TNF-α,IL-1β和LPS水平。结果：组1与组2、3、4相比TNF-α,IL-1β和LPS水平较高（P〈0.05）,组2中的水平比组3、4高（P〈0.05）,组3的比组4的水平高（P〈0.05）。组间数据有统计学意义。结论：数据表明糖尿病可以提高牙周龈沟液中TNF-α,IL-1β和LPS的水平。     

压力作用时间对人牙周膜成纤维细胞合成TGF-β1的影响

目的:探讨压力作用不同时间对人牙周膜成纤维细胞表达TGF-β1的影响.方法:本实验采用细胞加载装置,对人牙周膜成纤维细胞施加1.0MPa的压力,分别持续1Omin、30min、50min、通过酶联免疫吸附实验,分别检测细胞受力后6h、12h、18h、24h时TGF-β1的含量.结果:加载1Omin组在细胞受力后的各个时段TGF-β1含量与对照组相比无显著性差异(P>0.05).加载30min组(0.51±0.06)和加载50min组(0.46±0.06)TGF-β1含量在细胞受力后的第12h同对照组(0.78±0.08)相比明显降低(P<0.05).结论:在一定加载时间内,人牙周膜成纤维细胞合成TGF-β1量随着压力作用时间的延长而有所降低.