人感染H7N9禽流感监测病例中分离到一株A型呼吸道合胞病毒

目的对H7N9型禽流感病毒（简称H7N9病毒）监测病例进行病原学检测,以明确呼吸道感染的诊断与鉴别诊断。方法采用多重逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）对H7N9病毒进行监测的同时对22种呼吸道常见病原体核酸进行检测,并对检测到的病原体进行分离鉴定。结果在一例重症肺炎患者的H7N9病毒监测标本中检出A型呼吸道合胞病毒（RSV-A）,并利用人胚肺成纤维细胞（MRC-5）对该标本进行了病毒分离,成功分离到了一株RSV—A。结论多重RT—PCR能同时对22种呼吸道病原核酸进行检测,有助于疫情的及时诊断和控制。RSV—A的成功分离为呼吸道合胞病毒的进一步研究打下基础。     

浙江省丽水市人感染H7N9禽流感病毒监测结果分析

目的了解H7N9禽流感病毒在人、禽间的分布情况,指导人感染H7N9禽流感防制工作。方法对2013年4月至2014年2月浙江省丽水市医疗机构发热伴呼吸道症状病例及外环境标本采用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测H7N9亚型禽流感病毒核酸,对监测结果进行分析。结果轻症流感样病例和严重呼吸道感染病例分别检测768份和605份,H7N9禽流感病毒全部阴性,不明原因肺炎病例检测92份,阳性1份,阳性率1.09%;家禽粪便标本、笼具表面涂抹物、鸡蛋外壳涂抹物及不明原因死亡家野禽咽拭子和肛拭子共检测1317份,H7N9禽流感病毒阳性22份,阳性率1.67%,阳性标本分布在4个县(区)的8个活禽交易市场。结论首次在丽水市检测到人感染H7N9禽流感病毒,并在多个县(区)的活禽交易市场外环境检测到H7N9禽流感病毒,提示H7N9禽流感病毒已在丽水市禽间传播,存在人感染H7N9禽流感病毒的风险。     

2014-2017年甘肃省酒泉市禽类外环境中禽流感监测及人感染H7N9状况分析

目的 分析2014－2017年甘肃省酒泉市外环境中禽流感病毒监测结果,为人感染H7N9禽流感预警和防控提供依据。方法 采集酒泉市各县（区）集贸市场活禽销售点的不同类型标本,应用实时荧光聚合酶链式反应方法进行检测,并进行统计学分析。结果 共检测外环境标本1 091份,流感病毒核酸阳性率为21.17%（231/1 091）;H9N2、H7N9及两者混合阳性分别为162、51、18份,未检出H5亚型病毒。2014－2016年流感病毒核酸阳性率分别为3.23%、22.05%和31.32%,均为H9N2亚型,2017年阳性率为19.31%,其中H9N2、H7N9及两者混合阳性分别为阳性76、51、18份。城乡活禽市场流感病毒阳性率最高（30.14%）,其次规模养殖户（11.79%）和家禽屠宰加工场所（10.23%）。不同类型标本中,清洗禽类的污水检出率最高,宰杀或摆放禽肉案次之,禽类饮水最低,均差异有统计学意义（P<0.001）。在禽类外环境中检出H7N9核酸阳性后通过主动监测,检出甘肃省首例人感染H7N9禽流感病例。结论 甘肃省酒泉市2014－2017年每年均检出禽流感H9亚型,H7N9仅在2017年检出,外环境禽流感监测结果是人感染H7N9疫情预警的重要依据;应加强监测。     

2011-2012年湖北省十堰市城乡活禽市场禽流感监测分析

目的 监测湖北省十堰市城乡活禽市场中禽流行性感冒（禽流感）病毒的分布状况,为人禽流感防控提供参考依据。方法 2011-2012年,设置十堰市区和郧县两个监测点,每季度从各监测点采集10~15份外环境标本（冲洗水、污水、禽类粪便及笼具表面等）,累计采集210份,以实时荧光定量RT-PCR方法检测禽流感病毒核酸FluA,阳性者检测H5、H7、H9亚型核酸和N1核酸。结果 FluA、H5、H7、H9和N1的检出率依次为47.62%、19.52%、0、34.76%和17.62%。FluA检出率最高的环境标本为冲洗禽类的污水（65.22%）,最低的为禽类粪便（36.62%）,阳性标本多数明确来自鸡源,少数来自鸽和鸭。FluA、H5与H9的检出率均在一、三季度较低,二、四季度较高,H5检出率总体上低于H9。市区禽流感病毒核酸FluA、H5、H9和N1检出率均明显高于郧县。结论 十堰市城乡活禽市场的禽类与外环境中常年流行着H5和H9等多种亚型禽流感病毒,应积极采取综合性防控措施。     

2016－2020年浙江省禽类相关外环境禽流感病毒污染状况及职业暴露人群血清监测

  目的   了解2016—2020年浙江省禽类相关外环境中禽流感病毒的污染状况和职业暴露人群中禽流感病毒的感染情况,为浙江省禽流感防控工作提供科学依据。  方法   采用Real-time RT-PCR对外环境标本进行甲型流感病毒通用型（A型）核酸检测,A型阳性的标本再进行H5、H7和H9亚型的禽流感病毒核酸检测,采用红细胞凝集抑制试验对职业暴露人群血清标本进行H5N6、H7N9、H9N2检测,采用描述性分析对检测结果进行统计分析。  结果   2016—2020年浙江省每年均在禽类相关外环境中检出禽流感病毒阳性标本,共检出A型阳性标本10 106份,总阳性率为24.60%,H5阳性标本525份,阳性率为1.28%,H7阳性标本1 137份,阳性率为2.77%,H9阳性标本3 634份,阳性率为8.84%,且存在H5＋H7、H5＋H9、H7＋H9、H5＋H7＋H9混合阳性的标本;城乡活禽市场、家禽屠宰加工厂、家禽散养户集中地区、家禽规模养殖（户）、野生候鸟栖息地5类场所中采集的宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭标本的禽流感病毒A型阳性检出率最高,达48.33%;冬春季时外环境中检出禽流感病毒阳性比例较高;2 888份职业暴露人群血清标本中检出1份H5N6和9份H9N2阳性标本,城乡活禽市场、家禽屠宰加工厂、家禽散养户集中地区、家禽规模养殖（户）4类场所均有分布,但以城乡活禽市场中检出较多。  结论   浙江省禽类相关外环境中禽流感病毒以H9亚型为主,H5亚型每年均有检出,H7亚型主要集中在2016和2017年,存在混合阳性的标本,有病毒重组的风险;职业暴露人群中存在H5N6和H9N2隐性感染,应加强禽流感病毒的防控工作,做好职业人群的安全宣教工作,加大禽流感的监测力度。     

2014－2017年广州市禽类市场外环境H7N9禽流感病毒监测与遗传进化分析

目的 对广州市禽类市场外环境H7N9禽流感病毒流行情况和基因进化特点进行监测分析,为人感染H7N9禽流感防控提供研究数据。 方法 采集2014 — 2017年广州市禽类市场外环境标本,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测H7N9禽流感病毒并绘制血凝素（HA）基因遗传进化树,分析H7N9禽流感病毒流行特点和基因进化特点。 结果 2014 — 2017年累计检测外环境标本28 252份,检出H7N9阳性标本888份,阳性率为3.14%。 检出率2015年最低,2014年最高,分别为1.60%和3.89%。2 — 5月出现H7N9禽流感病毒流行高峰,4月检出率最高为13.00%。 测序分析结果显示,HA基因核苷酸同源性为88.6% ~ 100%,氨基酸同源性为92.0% ~ 100%。 裂解位点分析发现,2017年外环境开始出现高致病性H7N9病毒。 进化分析发现,HA基因呈现多进化分支特点。 结论 2014 — 2017年广州市禽类市场外环境H7N9禽流感病毒持续存在且病毒变异较快,呈现基因多样性。 2017年外环境已发现高致病性H7N9病毒,近年病毒HA基因归属于华南分支,呈现本土化,同时监测到来源于野鸟的另一独立分支的病毒存在,提示加强本地区野鸟H7N9禽流感病毒监测的必要性。      

荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染

目的通过荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染情况,探讨该方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法采用WHO推荐的荧光定量PCR方法对3361例发热患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,确定甲型H1N1流感感染患者。结果共检测有流感样症状患者2156例,甲型流感病毒核酸阳性1176例,阳性率35.0%,其中甲型H1N1流感病毒核酸阳性599例,阳性率17.8%。14岁以下儿童甲型H1N1流感病毒核酸阳性283例,占甲型H1N1流感病毒核酸阳性总数的47.2%。结论实时荧光定量PCR反应快速、准确,适用于H1N1流感病毒感染的早期诊断并可作为监测手段在临床广泛开展,为控制疫情的蔓延发挥了重要作用。     

2019-2020年甘肃省外环境禽流感病毒及职业暴露人群血清学分析

目的 了解2019-2020年甘肃省职业暴露人群禽流感病毒接触感染状况及活禽市场外环境中禽流感病毒的分布,为防控禽流感疫情提供科学依据.方法 采集活禽市场笼具表面擦拭物及粪便等环境标本,采用实时荧光RT-PCR法检测标本中甲型通用流感病毒核酸,阳性标本再检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒核酸.同时采集禽流感职业暴露人群...     

2017年北京市大兴区首例人感染H7N9禽流感病例感染来源分析

目的 对2017年北京市大兴区首例人感染H7N9禽流感确诊病例的感染来源及部分基因序列进行分析,为人感染H7N9禽流感疫情防控提供依据。 方法 采用现场流行病学调查和实验室检测相结合的方法,追溯病例的感染来源。 结果 病例发病前1周有活禽接触史,病例咽拭子、深咳痰液、血液标本人感染H7N9禽流感核酸均为阳性,在暴露的活禽及外环境中检出H7N9禽流感病毒核酸阳性,7名共同暴露者及密切接触者核酸检测为阴性。 血凝素（HA）基因和神经氨酸酶（NA）基因测序分析显示未发生明显变异。 结论 活禽暴露是该病例感染的关键风险因素,病例的感染来源是购自某流动集市的活禽,病毒基因测序及HA0裂解位点测定,该病毒属于禽H7N9长江三角洲分支病毒,为低致病性禽流感病毒。      

浙江省永嘉县人感染H7N9禽流感外环境监测分析

目的了解外环境中H7N9病毒分布情况,为防控H7N9禽流感工作提供科学依据。方法采集活禽养殖场、农贸交易市场、宰杀场和农家酒店等鸡(鸭)的咽喉分泌物、肛粪、血、翅膀涂抹物、蛋涂抹物、鸡、鸭宿涂抹物、下蛋槽涂抹物和房水等标本,用上海之江生物科技股份有限公司生产的禽流感病毒(2013)核酸测定试剂盒(实时荧光定量聚合酶链反应)进行H7N9禽流感病毒检测,用Excel软件进行数据统计分析。结果监测8个月中,有4个月出现H7N9禽流感病毒阳性,阳性出现率50.00%;68个场所中7个检出H7N9禽流感病毒阳性,阳性率为10.29%(7/68),阳性场所波及县内多个不同区域,相互间隔距离较远。检测标本1670份,其中鸡相关标本1138份,阳性23份,阳性率2.02%(23/1138),鸭相关标本532份,未见阳性。活禽养殖场15所,阳性3所(3/15),623份鸡标本,阳性14份,阳性率2.25%(14/623);农贸交易市场38个,阳性4个,阳性率10.53%(4/38),355份鸡标本,阳性9份,阳性率2.54%(9/355)。携带H7N9禽流感病毒的活禽密切接触者26人,咽拭子病毒检测结果均阴性,未出现感染病例。结论环境场所存在H7N9禽流感病毒,该病毒在鸡群中存在的概率明显高于鸭群。     

2009-2015年浙江省丽水市外环境禽流感病毒监测与分析

目的 了解丽水市外环境H5、H7、H9亚型禽流感病毒的动态分布情况,为防治人感染禽流感提供依据。方法 对2009-2015年1月丽水市外环境标本(清洗禽类污水、禽类粪便及笼具表面等)采用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测禽流感病毒核酸,阳性者进一步检测 H5、H7、H9 亚型核酸,监测数据用 Excel 软件进行统计分析。结果 监测各类外环境场所87个,检出禽流感病毒场所28个,占32.18%,以家禽宰杀加工场所和城乡活禽交易市场的病毒检出比例最高,分别为100.00%和92.30%。不同场所来源标本病毒阳性率以家禽宰杀加工场所最高,达46.34%,其次为城乡活禽市场的23.54%,最低为家禽散养集中地区,为1.25%。H5、H7、H9 和其他未分型禽流感病毒的检出率分别为0.99%、4.08%、5.83%和 9.33%,检出的H7均为H7N9亚型。禽流感病毒检出率最高的标本为清洗禽类污水(40.00%),最低为笼具表面涂抹物(12.07%),平均检出率达19.37%。H5亚型的检出率以三季度为高;H7亚型的检出率一、四季度较高,二、三季度较低;H9亚型检出率一季度最低,四季度最高;总体上H5亚型的检出率最低。结论 丽水市城乡活禽市场与宰杀加工场所等外环境中常年有H5、H9、H7N9 等多种亚型禽流感病毒存在,有感染人的风险,应积极采取综合性防控措施。     

2011-2015年九江市职业暴露人群血清学和环境禽流感病原学监测结果分析

目的 了解九江市2011年至2015年职业暴露人群H5N1禽流感病毒抗体水平和环境中禽流感病毒的感染状况,以期为九江市人感染高致病性禽流感的防控提供技术支持.方法 马红细胞血凝抑制试验(HI)检测禽类养殖人群H5N1血凝素抗体;real-time PCR对环境标本进行A型检测,对A阳性进一步检测H5、H7和H9亚型;结果 1340份职业人群血清H5N1血凝素抗体均为阴性;5个年度中1461份环境标本禽流感病毒核酸检测A型阳性率为30.94%,其中H5、H7、H9阳性率分别为10.47%(153/1461)、0.55%(8/1461)、21.77%(318/1461),A未分型阳性率为3.90%(57/1461).结论 九江市禽类中存在H5、H7、H9亚型感染,存在人感染高致病性禽流感的风险,应加强禽流感病毒感染监测.     

2013年广东省潮州市流行性感冒流行特征分析

目的：了解广东省潮州市2013年度流行性感冒流行特征及病毒流行株构成。方法采集监测哨点医院疑似流感样患者咽拭子标本,采用实时荧光 PCR（real-time RT-PCR）检测病毒核酸。结果全市流感检测哨点医院共采集标本830份,流感病毒核酸阳性为53份,阳性率为6.39％;其中新甲型 H1N1流感占49.06％（26／53）、乙型流感病毒占28.30％（15／53）、季节性流感病毒 H3亚型占22.64％（12／53）,未分离到季节性流感病毒H1。4月和12月为年度病毒检测高峰。病毒感染率以5～14岁组（14.12％）最高,与其它组比较存在统计学差异（P <0.05）。结论2013年度潮州市流感病毒优势株为新型甲型H1N1,全年有2个流行高峰,在4月和12月,主要发病人群为学龄前儿童和小学生。     

广东省江门市H7N9禽流感外环境监测及人感染H7N9禽流感流行趋势研究

目的 了解广东省江门市活禽市场外环境中H7N9病毒污染情况及人感染H7N9禽流感流行情况,指导H7N9禽流感防控工作。方法 于2014年1月26日至2015年2月23日,在江门市选取5个禽类批发市场和33个居民肉菜市场,以擦拭涂抹法采集活禽档口外环境粪便、地面以及各种用具表面拭子,采用荧光定量RT-PCR方法检测甲型流感病毒核酸,并对人感染H7N9禽流感疫情进行流行病学分析。结果 监测14个月中,采集样品989份,检出H7亚型阳性74份,阳性率为7.48%。鸡相关标本的阳性率最高（8.88%）,鸡与其他禽种相关标本的阳性率差异有统计学意义（2=10.02,P0.05）。砧板与刀具涂抹物阳性率高于笼框内面与笼子地面涂抹物等,差异有统计学意义（2=74.39,P0.01）。冬春季（12月至次年5月）阳性率稍高,为8.44%（70/829）,夏秋季（6-11月）阳性率稍低,为2.50%（4/160）,二者差异有统计学意义（2=6.01,P0.05）。期间报告了9例人感染H7N9禽流感病例,1-2月发病8例。结论 江门市冬春季活禽市场外环境普遍存在H7亚型禽流感病毒污染,人感染H7N9禽流感疫情流行具有明显的季节性,冬春季为发病高峰期。     

浙江省德清县1例人感染H7N9禽流感病例流行病学调查与分析

目的 探索2016年浙江省德清县1例人感染H7N9禽流感病例的感染来源,为防控人禽流感提供科学依据。方法 调查确诊病例和密切接触者,采集外环境标本进行实验室检测。结果 患者确诊为人感染H7N9禽流感病例,经救治无效死亡。患者年龄76岁,有高血压病史,发病前7天无活禽接触史,有农贸市场暴露史,虽然该农贸市场无活禽交易,但市场内杀白禽摊位处检出1份H7N9流感病毒核酸阳性的污水标本。3名杀白禽摊主的活禽关养宰杀场所均有H7N9流感病毒核酸阳性标本检出。13名密切接触者均未出现急性呼吸道感染症状。结论 病例感染来源于受H7N9病毒污染的农贸市场的可能性较大,建议加强农贸市场的卫生管理和消毒工作,规范禽类宰杀与销售。     

2016－2017年云南省禽类相关外环境禽流感病毒监测结果分析

  目的  对2016 — 2017年度云南省5类场所禽流感病毒监测结果进行分析,了解禽流感病毒分布情况,同时评估人感染禽流感病毒的风险,为云南省禽流感防控工作提供依据。  方法  选取全省16个市（州）共139个监测点,采集6类环境标本827份,采用荧光定量PCR方法对标本进行甲型及H5、H7、H9亚型流感病毒检测,χ2检验用于结果分析,同时对甲型流感阳性标本进行病毒分离及亚型鉴定工作。  结果  827份外环境标本中,共检出甲型流感阳性样本221份,阳性率26.27%,H5亚型阳性5份,阳性率0.60%,H9亚型阳性182份,阳性率22.00%,H5、H9亚型混合阳性7份,阳性率0.85%,甲型未分型27份,阳性率3.26%。 不同地区之间甲型流感病毒阳性率差异有统计学意义（χ2＝122.043,P＜0.001）,位居前3的依次为文山州（70.00%）、保山市（58.49%）和怒江州（47.83%）;鸡胚分离到禽流感病毒亚型有H5N1、H5N2、H9N2等,其中H9N2毒株107株,占95.53%,H5N2毒株2株,H5N6毒株2株,各占1.79%,H5N1毒株1株占0.89%;不同监测场所之间甲型流感病毒阳性率差异有统计学意义（χ2＝127.920,P＜0.001）,其中以城乡活禽市场环境禽流感病毒阳性率高,活禽批发市场次之;不同标本类型之间甲型流感病毒阳性率差异有统计学意义（χ2＝51.689,P＜0.001）,其中清洗禽类的污水阳性最高,宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本次之。  结论  云南省外环境中禽流感病毒以H9亚型为主,H5亚型少量存在,混合感染多见,应积极采取综合性预防控制措施。     

H7N9禽流感病毒污染的外环境消毒效果评价

目的评价H7N9禽流感病毒污染外环境消毒措施及消毒效果。方法采用基因扩增(PCR)技术,对某地3处H7N9禽流感病毒污染的外环境的疫源地消毒处理效果进行评价。结果消毒前采集3处(含2处活禽销售摊主家庭和1处活禽市场)外环境标本44份,检出H7N9禽流感病毒核酸阳性28份。2处摊主家庭分别采用有效氯浓度为2 000 mg/L和5 000 mg/L含氯消毒液喷洒消毒环境物体表面,另1处活禽市场物体表面用浓度10 g/L过氧乙酸消毒液喷洒物体表面,消毒后在3处疫源地现场采集各种标本34份,有10份检出H7N9禽流感病毒核酸阳性,但人工污染的枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢菌片则全部被杀灭。结论此次H7N9禽流感病毒污染疫源地现场消毒虽然检出病毒核酸阳性标本,但仍可认为达到了有效消毒。     

广东省深圳市首例孕妇感染H9N2禽流感病例流行病学调查

目的通过对广东省深圳市龙岗区报告的首例孕妇感染H9N2禽流感病例的流行病学调查,探明可能的感染来源,为今后防控H9N2等亚型禽流感疫情积累经验。方法2017－2018年采用现场流行病学方法系统收集深圳市龙岗区报告病例的流行病学资料,采集病例、密切接触者和暴露环境等样本;应用抗原检测的方法检测A型流感病毒;应用荧光定量PCR的方法检测禽流感病毒,并进行分型。采用Excel 2019软件对检验结果进行分析。结果患者咽拭子H9N2禽流感病毒核酸阳性,确诊为深圳市首例孕妇感染H9N2禽流感病例;8名密切接触者在医学观察期内均未出现流感样症状,流感抗原及禽流感核酸检测均呈阴性;2017年日常监测结果外环境H9病毒亚型阳性率为14.49%,在A型通用阳性中占比达62.69%;本次疫情共采集外环境标本103份,其中A型通用阳性15份,H9亚型阳性9份。 结论该患者感染来源可能为青峰乳鸽农庄,但也不能排除日常接触禽类制品暴露。深圳禽类市场外环境禽流感病毒污染情况仍然存在,流行季节高危人群仍有暴露感染的可能,需要予以重视。     

人高致病性H5N1亚型禽流感一例临床报告

目的探讨人感染高致病性H5N1亚型禽流感的临床特征及防治手段。方法对确诊的一例人感染高致病性H5N1亚型禽流感的临床资料进行回顾性分析。结果患者为16岁男性,发病前无明确病、死禽接触史,发病后,病变由右下肺片状影迅速蔓延至双肺,且并发纵隔、皮下气肿,发病第5天出现急性呼吸窘迫综合征（ARDS）,治疗上采用以机械通气为主的综合治疗措施。发病第6天,中国疾病预防控制中心对患者咽试子标本采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量PCR（Real—time PCR）方法检测,提示A／H5／N1病毒核酸呈阳性并分离出禽流感（H5N1）病毒。从发病至死亡约10d。结论人感染高致病性亚型H5N1禽流感是一种致命的传染病,如病变广泛,出现ARDS,预后不佳。     

四重荧光定量RT-PCR检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒

将H7N9禽流感病毒HA和NA基因设为内部参考,并分别设计特异性探针和引物,分析不同来源呼吸道病毒的特异性,并对四重荧光定量RT-PCR检测方法的重复性和灵敏度进行评定。结果甲型H7N9禽流感病毒标本和RNase P检测灵敏度均为102copies/m L,特异性为99.7%,变异系数均低于2.20%,阳性符合率和阴性符合率均为100%。利用四重荧光定量RT-PCR检测H7N9病毒具有较高的灵敏度和特异性,且检测快速准确,对H7N9病毒感染者早期诊断有重要意义。