固相反向间接血凝试验检测抗-HBS的抗独特型抗体

本文建立了固相反向间接血凝检测抗-HBS 的抗独特型抗体的方法。该方法是用羊抗人 IgG 包被聚苯乙稀微孔板(V型),捕捉血清中的抗-HBS 的抗独特型抗体(IgG),再加抗-HBS 致敏的血球,观察其凝集结果。用本法对正常人血清际本116例以及 HBsAg 阳性血清标本102例进行了抗-HBS 的抗独特型抗体检测。在 HBsAg 阳性血清标本中共检出抗-HBS 的抗独特型抗体阳型标本24例,阳性率为23.7％。实验表明,该方法具有简便、准确、快速等优点,又不需要特殊设备,适合于各级医疗单位。     

间接血凝法检测抗Sm抗体和抗RNP抗体

应用间接血凝法测定抗Ｓｍ抗体和抗ＲＮＰ抗体。对不同疾病的检测结果表明，建立的该种方法与免疫电泳法结果无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。对ＳＬＥ病４５例检测抗Ｓｍ抗体阳性率为１００％，抗ＲＮＰ抗体阳性率为９１％，抗Ｓｍ抗体可作为ＳＬＥ的特异性标志抗体，抗ＲＮＰ抗体在ＲＡ、ＰＳＳ、ＤＭ、ＭＣＴＤ病人中检出，其中ＭＣＴＤ病２３例，抗ＲＮＰ抗体阳性率高达９６％。且凝集效价高，可作为此病诊断的重要依据。间接血凝法具有操作简便、快速、敏感、特异性高、便于推广等特点，可代替免疫电泳法。     

用单克隆抗-HBs免疫同系小鼠制备抗独特型抗体

单克隆抗-HBs在同系BALB/c 小鼠体内所诱生的抗独特型抗体,能模拟HBsAg的作用,该抗独特型抗体既能与抗-HBs发生特异性结合,又能在同系动物中添生出抗HBs的独特型抗体,从而为生产乙肝疫苗开辟了一条新的可能的途径。由于单克隆抗-HBs在同系动物体内只诱生抗独特型抗体,故无同种型和同种异型的干扰,且纯化程序简单,避免了许多干扰因素,有利于研究机体免疫网络中各细胞间的相互作用。     

抗精子抗体的间接血凝测定

本文报告了用间接血凝技术测定抗精子抗体的方法。为了检测输精管结扎后兔的抗精子抗体,实验中用兔附睾精子免疫兔和豚鼠获标准血清。致敏韖酸化的红细胞的抗原液是兔附睾精子提取液,其蛋白质浓度为0.6mg/ml。稀释致敏红细胞的稳定剂以及稀释待试血清的稀释液以2％兔血清盐水效果稳定。实验中经与间接免疫荧光法比较,以及用间接血凝抑制试验验证,结果表明该方法的敏感性和特异性均较高。     

不同肝病Ig类别抗HBs独特型抗体的检测及意义

本文报告用 ELISA 法检测了285例肝病患者 IgG、IgA、IgM 类抗 HBs-Ab_2。结果表明,抗HBS-Ab_2主要存在于 HBsAg,HBeAg 阳性乙型病毒性肝炎患者血中,并与其它血清 HBV 标志关系密切.提示抗 HBs-Ab_2可能通过抑制抗 HBs 的形成而影响 HBV 的清除.     

ELISA检测抗精子抗体并与间接血凝法比较

本文结果表明,188份结扎兔血清中,ELISA抗精子抗体阳性者为85.1％,间接血凝(IHT)为62.8％,差异显著(P<0.005),以118份IHT阳性血清的抗体滴度对数值与相对应的ELISA光密度值相关分析结果表明,二者有非带显著的正相关(P<0.001)。我们认为,ELISA检测抗精子抗体是一种灵敏度高、方便、迅速且易于操作的免疫学方法。     

乙肝患者血中抗—HBs抗独特型抗体的检测及临床意义

目的探讨独特型-抗独特型网络对乙型肝炎病毒感染的免疫调节作用。方法参照TrorsiandHollinger及Lborra的方法，并加以改进，建立了一种检测乙肝患者外周血液中针对抗-HBs独特型抗体的固相RIA法，并对19例健康个体，97例乙肝患者。对例HBVM（-）肝炎患者进行了研究。结果该固相RIA法具有较高的特异性和良好的重复性；针对抗-HBs的抗特异性抗体仅见于乙肝患者血液中：抗-HBs抗独特型抗体的存在与乙肝病情的轻重有关，慢性活动性肝炎组阳性率最高；抗-HBs的抗独特型抗体的存在与患者血中乙肝病毒活跃复制指标有相关性。结论针对抗-HBs的抗独特型免疫反应涉及呈缺陷的反馈抑制，导致抗-HBs产生抑制及乙肝病毒携带状态的维持。     

间接血凝试验和间接荧光抗体试验诊断人体包虫病的研究

应用间接血凝试验（ＩＨＡＴ）和间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）对３０例包虫病患者的血清进行了检测，抗体阳性率分别为８６．７％和９０．０％，而肝囊肿、肝脓肿、肿瘤和旋毛虫病患者及健康人血清均为阴性反应，囊虫病患者的交叉反应率分别为３７．５％和３１．３％。包虫囊肿的部位、数量及囊肿是否破裂对检测结果有明显影响。包虫ＩＨＡＴ冻干抗原和包虫囊壁冰冻切片抗原在－２０℃可分别保存２ａ和３个月而不丧失活性。结果表明     

胃癌单克隆抗体反向被动血凝方法的建立及临床应用

作报道了用小鼠抗人胃癌单克隆抗体ＭＧ７，ＭＧｄ１以铬－１免疫球蛋白鞣酸法致敏绵羊红细胞（ＳＲＢＣｓ），建立反向被动血凝（ＲＰＨＡ），建立反向被动血凝，检测不同人群组中ＭＧ７，ＭＧｄ１抗原（ＭＧ－Ａｇｓ）的水平 如以≥１：３２血凝滴度为分界值，则诊断胃癌的敏感性为５２．４％，特异性９２．９％，准确性７６．７％。食管癌，肺癌，消化道良性病及健康献血员的阳性率分别为３５．７５，３３．３％，２４％，１０     

反向乳凝试验和乳凝抑制试验检测HBeAg和抗－HBe

以聚苯乙烯胶乳为载体，制成乙型肝炎ｅ系统胶乳诊断试剂．以反向被动乳凝试验（ＲＰＬＡ）和乳凝抑制试验（ＬＡＩＴ）检测ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｅ，并和ＥＬＩＳＡ法进行比较，结果发现受检５０份ＨＢｅＡｇ阳性血清及４１份抗－ＨＢｅ阳性标本的符合率为９６．０％和９１．１％，经统计学ｘ２检验无显著性差异．并且发现乳凝试验对乙型肝炎病毒表面和核心系统无交叉反应，对５份类风湿因子阳性血清和５０份健康人血清检测均为阴性，表明该法有良好的特异性（９８．１％）．此外本法与ＥＬＩＳＡ法相比，前者更具有操作简单，不需任何仪器设备，３～５ｍｉｎ出结果的特点，是检测乙型肝炎ｅ系统较为理想的方法之一，有推广应用价值．     

抗核抗体和疱疹病毒IgG类抗体间的相关性

用ＥＬＩＳＡ间接法检测了人血清中的ＣＭＶ和ＨＳＶⅠＩｇＧ类抗体，４８份间接荧光免疫技术检测的ＡＮＡ阳性血清和５７份ＡＮＡ阴性血清，ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率分别为６９％和３９％。３１份免疫印迹法检测的ＥＮＡ抗体阳性血清和６２份ＥＮＡ阴性血清，ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率分别为７１％和４２％，两类抗核抗体阳性组和阴性组间ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率有显著性差异，但ＨＳＶⅠＩｇＧ类抗体水平在这些抗核抗体阴性、阳性组间的差异不具显著性。     

固相萃取-反相HPLC荧光法快速测定血浆中氟罗沙星

目的建立固相萃取-反相HPLC荧光法快速测定人血浆中氟罗沙星的方法。方法采用C18固相萃取小柱萃取血浆中的氟罗沙星。色谱柱为ODS-BP柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为含1.31 g/L L-异亮氨酸和0.80 g/LCuSO4的水溶液-甲醇(80∶20,V∶V),激发波长为280 nm,发射波长为504 nm,流速为0.8 ml/min。结果该方法在0.4-20μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 3),最小检测限50 ng/ml,萃取回收率和方法回收率分别为89.52%和100.45%,高、中、低3个浓度的日内RSD为3.2%,日间RSD为1.5%。结论该法血样处理简单,干扰小,灵敏度高,精密度好,可用于该药物体内监测的快速测定。     

Extraction and determination of trace amounts of chlorpromazine in biological fluids using magnetic solid phase extraction followed by HPLC

A simple, rapid and sensitive method termed as magnetic solid phase extraction (MSPE) combined with high-performance liquid chromatography-ultraviolet detector (HPLC-UV) has been proposed for the determination of trace amounts of chlorpromazine (CPZ) in water, urine and plasma samples. The separation and determination was performed on a C18 column under the optimal chromatographic conditions. Several factors influencing the extraction efficiency of CPZ, such as pH, surfactant and adsorbent amounts, ionic strength, extraction time, sample volume and desorption conditions, were studied and optimized. Under the optimal MSPE conditions, the extraction percentage of CPZ was 74%, 27% and 16% in water, urine and plasma samples, respectively. The limits of detection (LODs) of the proposed approach were 0.1, 5.0 and 10 ng/mL in water, urine and plasma samples, respectively. The relative standard deviations (RSDs) based on five replicate determinations at 10 ng/mL level of CPZ was 1.2%. Good linear behaviors over the investigated concentration ranges (0.25–300 ng/mL) with good coefficient of determination, R²>0.9998, were obtained. Good spike recoveries with relative errors less than 9.0% were obtained when applying the proposed method to water, urine and plasma samples.     

热敏型可修复分子印迹固相微萃取纤维的制备及其应用

以螺旋霉素为模板分子,甲基丙烯酸和N-异丙基丙烯酰胺为功能单体,乙二醇甲基丙烯酸酯为交联剂,硅烷化的石英毛细管为载体合成了具有热敏型、可修复的分子印迹固相微萃取纤维。通过扫描电镜和氮气吸附/脱附对制备的分子印迹固相微萃取纤维进行表征,并对影响萃取效果的参数进行了优化。分子印迹固相微萃取纤维对大环内酯类抗生素具有高选择性和灵敏性,与高效液相色谱联用可对食品基质中的螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素4种大环内酯类抗生素进行定量分析,在0.5～50μg/mL范围内,色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,样品在3种不同添加水平下的加标回收率在81.8%～119.1%之间,日间精密度均小于13.8%(n=6),日内精密度均小于15.5%(n=3)。     

反向点杂交检测肝癌细胞DNA甲基化方法的建立

目的建立反向点杂交(RDB)检测DNA甲基化的方法,并应用于临床肝癌细胞MAGE-A3 5'端CpG位点异常甲基化的检测。方法亚硫酸氢盐修饰后聚合酶链式测序分析细胞株Hep G2和外周血白细胞DNA的甲基化模式差异,建立RDB检测DNA甲基化方法,进行方法学评价,并运用于临床肝癌病理组织标本、肝硬化组织标本和正常对照组。结果 RDB检测肝癌细胞MAGE-A3 5'端CpG位点异常甲基化的灵敏度、特异度和准确性分别是83%(25/30)、100%(60/60)和94%(85/90)。其与临床肝癌诊断金标准的检验结果一致性较好(Kappa=0.870,P<0.05)。结论建立了RDB检测肝癌细胞DNA异常甲基化的方法,并可用于肝癌的临床早期诊断。     

固相萃取-高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量

目的 采用固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC）联用技术建立珍菊降压片中盐酸可乐定的含量测定方法。方法 以Cleanert SCX-SPE阳离子固相萃取小柱对样品进行前处理,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液（10∶90）,流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长为220 nm。结果 珍菊降压片中盐酸可乐定含量测定的回归方程为y=2.9662x＋0.0485（r=0.99999）,在1.234～123.4 ng 的测定范围内线性关系良好;低、中、高3个剂量的平均回收率为98.56%,RSD为0.68%,方法的重复性、中间精密度和准确度良好,符合含量测定对方法的要求。结论 该方法有效地消除了阴性干扰,专属性、灵敏度、重现性和准确度良好,为珍菊降压片中盐酸可乐定的检测提供了可靠的技术手段。     

固相微萃取和气相色谱-质谱联用分析罗汉果浸膏的挥发性成分

目的　对罗汉果浸膏的挥发性成分进行分离分析鉴定。方法　采用固相微萃取和气相色谱 -质谱联用技术 ,在固相微萃取实验中使用 85μm聚丙烯酸酯作为萃取纤维 ,并对萃取时间、萃取温度、离子强度、解吸时间等实验条件进行优化 ,应用峰面积归一化法测定各组分的相对含量。结果　在 HP-5MS柱共鉴定出 3 8种化合物 ,主要成分为β-大马酮、β-二氢大马酮、糠醛、苯甲酸苄酯等。结论　本方法为罗汉果资源的合理使用提供了科学依据     

心肌M2胆碱受体抗体对大鼠心房及心室肌cAMP含量的影响

目的 :了解心肌M2 胆碱受体抗体 (M2 Ab)对大鼠心房和心室肌cAMP含量的影响 ,并与M2 胆碱受体激动剂卡巴可 (Carb)的作用进行了对比观察。方法 :采用离体生化放射免疫分析法测定M2 Ab及M2 胆碱受体激动剂Carb对心肌cAMP含量的影响。结果 :①M2 Ab及Carb两者均可剂量依赖性抑制异丙肾上腺素 (Isoproterenol,Iso)所刺激的大鼠心房及心室肌cAMP的增加。卡巴可浓度为 2 μmol/L ,10 μmol/L ,5 0 μmol/L时可分别抑制Iso所刺激的cAMP含量 (8.5± 1.2 ) % ,(16 .2± 1.4) % ,(2 9.5± 2 .1) % ,而M2 Ab浓度为 5 0nmol/L ,10 0nmol/L ,40 0nmol/L时 ,可分别抑制 (6 .1± 0 .6 ) % ,(17.3± 1.8) % ,(31.7± 3.1) % (P <0 .0 1)。②Carb(10 μmol/L)及M2 Ab(10 0nmol/L)两者可分别抑制基础cAMP(49.2± 4.3) %和 (6 4.3± 5 .1) %。③M受体阻断剂阿托品 (Atr) (1.5 μmol/L)不但可阻断Carb对Iso的抑制反应 ,亦能阻断M2 Ab的这种反应。而相应的抗原性肽段也能阻断M2 Ab的这种反应。结论 :M2 Ab抑制Iso引起的心室肌细胞cAMP生成量的增加反应 ,类似于M受体激动剂Carb ,两者效应均通过作用于M2 受体途径实现。