三草胶囊药效与毒性实验研究

三草胶囊对四氯化碳(CCl_4)、硫代乙酰胺(TAA)、氢化可的松所致小鼠谷丙转氨酶(ALT)升高有降低作用;并对CCl_4中毒小鼠磺溴肽钠(BSP)滞留量有降低作用。小鼠急性毒性、大鼠长期毒性试验表明该药毒性低.     

Hepcidin-orchestrated Hemogram and Iron Homeostatic Patterns in Two Models of Subchronic Hepatic injury

Objective This study was designed to evaluate hematological disorders and the orchestrating roles of hepcidin and IL-6 in rat models of thioacetamide(TAA) and carbon tetrachloride(CCl_4) hepatotoxicity. Methods Rats were intraperitoneally injected with TAA(10 mg/100 g rat weight dissolved in isosaline) or CCl_4(100 μL/100 g rat weight diluted as 1:4 in corn oil) twice weekly for eight consecutive weeks to induce subchronic liver fibrosis. Blood and tissue samples were collected and analyzed. Results CCl_4 but not TAA significantly decreased the RBCs, Hb, PCV, and MCV values with minimal alterations in other erythrocytic indices. Both hepatotoxins showed leukocytosis, granulocytosis, and thrombocytopenia. By the end of the experiment, the erythropoietin level increased in the CCl_4 model. The serum iron, UIBC, TIBC, transferrin saturation%, and serum transferrin concentration values significantly decreased, whereas that of ferritin increased in the CCl_4 model. TAA increased the iron parameters toward iron overload. RT-PCR analysis revealed increased expression of hepatic hepcidin and IL-6 m RNAs in the CCl_4 model and suppressed hepcidin expression without significant effect on IL-6 in the TAA model. Conclusion These data suggest differences driven by hepcidin and IL-6 expression between CCl_4 and TAA liver fibrosis models and are of clinical importance for diagnosis and therapeutics of liver diseases.     

龙胆苦甙对CCl_4、扑热息痛毒性的保护作用

龙胆苦甙在CCl_4染毒前后给药及染毒前给药均可显著降低小鼠的死亡率,且能明显提高LD_(50)。CCl_4组的LD_(50)为1222mg/kg,CCl_4染毒前后给药纽,染毒前给药组的LD_(50)分别为1775mg/kg,1610mg/kg。仅CCl_4染毒后给药对小鼠死亡率及LD_(50)无明显影响。龙胆苦甙预先给药可显著降低扑热息痛处置的小鼠死亡率。     

泡桐花总黄酮对小鼠肝损伤的预防保护作用

目的探讨泡桐花总黄酮对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 50只小鼠随机分为对照组、CCl4模型组、水飞蓟宾对照组、CCl4+黄酮低剂量组和CCl_4+黄酮高剂量组,每组10只。对照组和CCl_4模型组小鼠给予质量分数1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)10 m L·kg-1混悬液灌胃,水飞蓟宾对照组小鼠给予100 mg·kg~(-1)水飞蓟宾CMC-Na混悬液灌胃,CCl_4+黄酮低剂量组和CCl_4+黄酮高剂量组小鼠分别给予泡桐花总黄酮CMC-Na混悬液(100、200 mg·kg-1)灌胃,连续7 d,末次灌胃给药2 h后,对照组小鼠腹腔注射色拉油0.10 m L·kg-1,其余4组小鼠腹腔注射0.012 mol·L-1CCl4溶液10 m L·kg-1(色拉油配制)造成小鼠急性肝损伤,16 h(禁食不禁水12 h)后摘眼球采血,分离血清,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝脏组织中丙二醛(MDA)和过氧化物歧化酶(SOD)水平。结果与对照组比较,CCl_4模型组小鼠ALT、AST、MDA水平显著升高,SOD水平降低(P<0.01);与CCl4模型组比较,水飞蓟宾对照组、CCl4+黄酮低剂量组和CCl_4+黄酮高剂量组小鼠ALT、AST、MDA水平显著降低,SOD水平升高(P<0.05);CCl4+黄酮低剂量组小鼠ALT、AST、MDA、SOD水平与CCl4+黄酮高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05),CCl_4+黄酮低、高剂量组与水飞蓟宾对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论泡桐花总黄酮对CCl4造成的急性肝损伤有明显的保护作用。     

肝刺激因子对实验性急性肝损伤小鼠的保护作用

大鼠肝刺激因子(HSS)是否有保肝作用?这一问题的阐明不仅有理论意义还有潜在的临床意义。本工作采取初断乳大鼠的肝提取HSS,用CCl_4和半乳糖胺损伤小鼠肝脏,结果观察到:(1)HSS明显降低CCl_4和半乳糖胺所致小鼠血清GPT和GOT升高的幅度;(2)HSS的保肝作用具有量效关系;(3)HSS抗CCl_4损伤肝的时程在72h以上;(4)肝组织切片检查表明,HSS可减轻CCl_4和丰乳糖胺损伤肝的程度。上述生化学和组织形态学的指标表明,HSS对实验性急性肝损伤小鼠确有保护作用。     

大鼠肝刺激因子对CCl_4致肝损伤小鼠保护作用的机制研究——Ⅲ.HSS对DNA合成和琥珀酸脱氢酶的影响

我们曾经证明肝刺激因子(HSS)对小鼠实验性肝损伤的保护机制有二:一为抗氧化作用;另一为保持膜的流动性。本文再次探讨其机制并获得如下结果:①HSS促进CCl_4染毒小鼠肝细胞合成DNA;②HSS增加~3H-TdR掺入CCl_4染毒肝的DNA,③HSS保护受CCl_4处理小鼠的肝线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性。根据这些结果我们设想,HSS对CCl_4染毒小鼠奸细胞有强烈的增殖作用,其对SDH活性的保护有利于葡萄糖的氧化,这二者也可能是HSS的保肝机制。     

党参花粉对小鼠慢性肝损伤的防治作用

用含6.8％党参花粉的饲料喂注射过四氯化碳(CCl_4)0.5ml/kg次/5天的小鼠,结果表明党参花粉能减轻CCl_4对小鼠肝脏的损伤,防止损伤所致血清白蛋白、肝脏蛋白的减少。形态学检查结果显示饲喂党参花粉的小鼠肝细胞脂变、坏死和轻微组织增生,修复完好。表明党参花粉对CCl_4所致的肝损伤具有保护作用。     

田基黄对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的:观察田基黄对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法:采用化学毒物四氯化碳(CCl_4)致小鼠肝脏损伤,测定其生化指标并观察病理组织学改变。结果:田基黄能降低CCl_4肝损伤所致的小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)升高(P<0.05)。病理组织学检查提示田基黄能减轻肝细胞变性、坏死。结论:田基黄对小鼠实验性肝损伤具有明显的保护作用。     

沙棘籽油对超氧化物歧化酶活性影响的研究

本文观察了沙棘籽油对小鼠SOD活性的影响,结果表明:沙棘籽油对正常小鼠血红细胞的SOD活性无明显影响(P>0.05),而对CCl_4诱发肝损伤小鼠血红细胞和肝组织SOD活性与对照组比较均有明显提高作用(P>0.001)。提示沙棘籽油保护肝脏、免受CCl_4损伤的作用可能与此有关。     

金银花-连翘提取物组合对CCl_4诱导小鼠肝纤维化的改善作用研究

目的:探讨金银花-连翘提取物组合对四氯化碳(CCl_4)诱导的小鼠肝纤维化的改善作用。方法:分别制备金银花和连翘提取物,混合后制得组合物(药材配比1∶2)。取雄性C57小鼠随机分为对照组、CCl_4组、组合低剂量(0.5 g/kg)+CCl_4组、组合高剂量(1.0 g/kg)+CCl_4组、组合高剂量(1.0 g/kg)组,每组5只。除对照组和组合高剂量组外,其他各组小鼠腹腔注射CCl_4诱导肝纤维化,每周2次,共4周。同时,各组灌胃给予相应剂量的组合物,连续4周。末次给药后,取血,收集肝脏组织。试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及肝脏羟脯氨酸(Hyp)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量。HE染色观察肝组织形态学变化,天狼猩红染色和Masson染色观察肝脏胶原沉积。PCR检测肝组织胶原1a1(Col1a1)、胶原3a1(Col3a1)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β(TGF-β)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,Western blot检测肝组织α-SMA蛋白表达。结果:(1)与CCl_4组相比,组合高剂量+CCl_4组血清ALT、AST水平显著降低(P0.01),肝组织炎症反应和肝细胞坏死程度明显减轻。(2)与CCl_4组相比,组合高剂量+CCl_4组肝脏Hyp和ColⅣ含量显著降低(P0.05,P0.01),组合低剂量+CCl_4组ColⅣ含量亦显著降低(P0.05),且两组肝组织胶原沉积程度明显减轻。(3)不同剂量的金银花-连翘组合物干预后,可明显下调模型小鼠肝脏Col1a1、Col3a1、FN和TGF-β的mRNA表达(P0.05,P0.01),α-SMA的mRNA和蛋白表达亦明显降低(P0.05,P0.01)。(4)金银花-连翘组合物对正常小鼠肝组织形态及以上指标无明显影响。结论:金银花-连翘提取物组合可能通过抑制肝星状细胞活化,减少胶原沉积,从而改善肝纤维化。     

六味地黄煎剂研究 Ⅱ.“三补”、“三泻”对小鼠肝损伤的保护作用

本实验室曾报道,六味地黄煎剂对小鼠实验性肝损伤有保护作用,能显著降低CCl_4中毒小鼠及硫代乙酰胺引起的小鼠谷丙转氨酶活性升高。为进一步探讨六味地黄配方组成的合理性及其与保肝作用关系,本实验考察了其拆方后“三补”、“三泻”对小鼠SGPT活性升高的影响。     

六味地黄煎剂对小鼠实验性肝损伤的保护作用

六味地黄煎剂对四氯化碳、硫代乙酰胺和强的松龙引起的血清谷丙转氨酶活性升高均有明显的降低作用,且能促进四氯化碳中毒小鼠对溴磺酞钠的排泄,亦能显著缩短戊巴比妥钠诱导正常小鼠和四氯化碳中毒小鼠的睡眠时间。结果揭示,六味地黄煎剂对小鼠实验性肝损伤具有明显的保护作用。     

六味地黄煎剂研究：Ⅲ.全方与“三补”,“三泻”对家蝇的抗衰老作用

六味地黄方传统用于滋阴补肾,因此被认为具有抗衰老的作用。但该方对动物的生存寿命和衰老生化指标有何影响,特别是全方和拆方的作用未见报道。本文用家蝇为动物模型,分别饲给六味地黄全方和两个拆方,测定存活     

补泻不同配伍补阴方对衰老大鼠三磷酸腺苷酶及Bcl-2和Bax表达的影响

目的从实验的角度分析和比较补泻不同配伍补阴方及两方共有＂三补＂药物组抗衰老作用机制。方法观察补泻不同配伍补阴方左归丸、六味地黄丸及两方共有＂三补＂药物组对D-半乳糖（D-gal）致亚急性衰老大鼠三磷酸腺苷酶（ATPase）及细胞凋亡相关因子Bcl-2和Bax表达的影响。结果亚急性衰老大鼠肝、脑组织中ATPase活力降低而脑海马区的Bcl-2和Bax表达升高,左归丸、六味地黄丸及两方共有＂三补＂药物组干预后,大鼠Na＋-K＋-AT-Pase和Ca2＋-Mg2＋-ATPase活力表现出不同程度的升高,Bcl-2的表达上调而Bax表达下调。结论左归丸、六味地黄丸及两方共有＂三补＂药物组的抗衰老作用可能与维持细胞膜的稳定性和改善细胞凋亡作用有关,两补阴方尽管存在补泻配伍方法上的不同,但在本研究中未出现显著性药理作用差异,提示＂三补＂在两方中发挥了优势性作用     

六味地黄煎剂研究 Ⅱ.“三补”、“三泻”对小鼠肝损伤的保护作用

本实验室曾报道,六味地黄煎剂对小鼠实验性肝损伤有保护作用,能显著降低CCl_4中毒小鼠及硫代乙酰胺引起的小鼠谷丙转氨酶活性升高。为进一步探讨六味地黄配方组成的合理性及其与保肝作用关系,本实验考察了其拆方后“三补”、“三泻”对小鼠SGPT活性升高的影响。     

名老中医王行宽肝心同治心系病遣方经验探讨

王行宽教授辨治胸痹心痛,从肝治心,善用经方—小陷胸汤、瓜蒌薤白半夏汤、茯苓杏仁甘草汤等,活用古验方—生脉散、柴胡陷胸汤、补中益气汤、六味地黄丸等,创＂心痛治肝＂之法,拟心痛灵系列（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号）方、平肝煎;辨治风眩推崇从肝论治,遣古验方—六味地黄丸、二至丸、天麻钩藤饮、滋水清肝饮、半夏白术天麻汤等,自拟验方—加味滋生青阳汤、平肝煎等等,乃王老临床辨治心系病的遣方经验。     

六味地黄汤通过树突状细胞Notch信号通路调节T细胞分化干预自身免疫性脑脊髓炎

目的 通过观察树突状细胞（dendritic cells,DCs）Notch信号通路对CD4+ T细胞分化的影响,探究六味地黄汤干预实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）的机制。方法 采用主动免疫法诱导2D2小鼠EAE模型,采用磁珠分选收集脾脏和淋巴结中CD4+ T细胞;体外分离培养及诱导C57BL/6（C57）小鼠骨髓来源树突状细胞（bone marrow derived dendritic cells, BMDCs）成熟,分组干预后,与CD4+ T细胞共培养后,被动注射至C57小鼠体内,观察小鼠发病情况。将BMDCs与CD4+ T细胞的共培养细胞分为对照组、六味地黄汤组、γ分泌酶抑制剂（gamma-secretase inhibitor,GSI）组。采用Western blot法检测各组BMDCs的Notch通路蛋白表达水平,采用流式细胞仪分析各组CD4+ T细胞分化情况。结果 与正常组比较,模型组Notch通路相关蛋白Notch1、Jagged1、MAML蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。与模型组比较,六味地黄汤组DCs的Notch1、Jagged1、MAML蛋白水平显著下调（P<0.05）。通过BMDCs诱导的CD4+ T细胞向Treg分化增多,向Th17分化减少,并改善被动免疫诱导的EAE小鼠症状评分。结论 六味地黄汤可通过抑制DCs的Notch信号通路活化,减少CD4+ T细胞分化,进而缓解EAE残疾症状。     

六味地黄汤对D-半乳糖致衰老小鼠运动能力的影响

目的：探讨六味地黄汤对D-半乳糖致衰老小鼠的运动能力影响机制。方法：以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型，同时给予六味地黄汤治疗，6周后以全面观察六味地黄汤对运动能力的影响及机制。结果：六味地黄汤能有效延长衰老小鼠的游泳力竭时间、提高衰老小鼠的学习记忆成绩，不同程度提高衰老小鼠心、脑、骨骼肌中的SOD、Na^＋-K^＋-ATP、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性，降低心肌细胞、骨骼肌细胞内Ca^2＋、MDA含量。结论：六味地黄汤能有效肪止D-半乳糖致衰老小鼠的运动能力下降．学习记忆障碍等多项衰老体征的出现。     

六味地黄汤对衰老加血瘀模型大鼠血脂和纤溶活性的影响

目的利用衰老加血瘀模型大鼠研究六味地黄汤及其配伍对血脂和纤溶活性的影响。方法本实验利用衰老加血瘀动物模型,观察了六味地黄汤及其配伍对模型大鼠体外血栓形成、血清脂质、纤维蛋白原(Fg)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活抑制物(PAI)的影响。结果六味地黄汤全方能抑制模型大鼠体外血栓形成,降低血脂、Fg含量,减少内皮细胞分泌PAI,增加t-PA的水平。结论六味地黄汤通过改善模型大鼠内皮细胞分泌功能,调节血脂和纤溶系统,达到抑制血栓形成的目的。      

小鼠急性中毒性肝炎时血清结合胆酸含量与谷丙转氨酶活性的比较

应用放射免疫分析法定测定被不同剂量四氯化碳染毒的小鼠血清结合胆酸的含量,并与血清谷丙转氨酶活性进行比较,探讨了这两项指标的关系。实验结果表明,血清结合胆酸含量在10mg/kg体重四氯化碳染毒组显著高于对照组(p<0.05),而血清谷丙转氨酶活性则在20mg/kg体重四氯化碳染毒组显著高于对照组(p<0.01)。可以认为,就诊断中毒性肝炎而言,检测血清结合胆酸的含量较检测血清谷丙转氨酶活性更为敏感。