青霉素结合蛋白与革兰阴性细菌耐药性的研究进展

青霉素结合蛋白(PBPs)的改变与β-内酰胺类抗生素的亲和力降低是革兰阳性球菌获得抗生素耐药性的重要机制之一,而在革兰阴性细菌中因PBPs的改变导致耐药的出现却十分少见,这一观点忽视了革兰阴性细菌中PBPs在β-内酰胺类抗生素耐药机制中的作用.文章对PBPs的结构、功能、检测方法及与革兰阴性细菌耐药性的关系等方面的研究进展作一综述.     

细菌对β—内酰胺类抗生素耐药性的研究进展

近年来细菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性研究从外膜通透性减少、β-内酰胺酶的水解作用和青霉素结合蛋白的改变三方面着手进行。外膜上的Porin通道是影响药物渗透的关键因素。β-内酰胺酶的水解作用则是引起细菌耐药性的重要原因,而非水解屏障和缓慢水解学说补充解释了耐药机制的复杂性。PBPs的改变不含β-内酰胺酶耐约菌的普遍特点,缓慢结合的PBPs或诱导产生的PBPs也与耐药性密切相关。本文阐明了三者间的关系及克服耐药性的有效方法。     

抗生素化学结构与合理应用

药物的化学结构决定药物的性质。了解抗生素的化学结构,能从本质上认识和了解药物的性质,掌握药物作用及其应用的规律。目前临床应用广泛的抗生素主要为:β-内酰胺类抗生素和喹诺酮类抗生素。1β-内酰胺类抗生素概念:β-内酰胺类抗生素系指化学结构中含有四个原子组成的β-内酰胺环的一大类抗生素。种类:包括临床最常用的青霉素类与头孢菌素类,以及新发展的头霉素类、硫霉素类、单环β-内酰胺类等其他非典型β-内酰胺类抗生素。优点:杀菌活性强、毒性低、适应证广及临床疗效好。本类药物化学结构,特别是侧链的改变形成许多不同抗菌谱和抗菌作用以及各种临床药理学特性的抗生素。缺点:由于β-内酰胺是由四个原子组成,分子张力比较大,使其化学性质不稳定易发生开环导致失活。1.1β-内酰胺类抗菌作用机制抑制转肽酶活性能与青霉素结合蛋白(PBPs)结合,抑制细菌细胞壁的粘肽转肽酶,使其催化的转肽反应不能进行,从而阻碍细菌细胞壁粘肽合成,使细菌细胞壁缺损,使细菌细胞肿胀、变形、破裂而死亡。增加细菌胞壁自溶酶活性对细菌的致死效应还应包括触发细菌的自溶酶活性,缺乏自溶酶的突变株则表现出耐药性。哺乳动物无细胞壁,不受β-内酰胺类抗生素的影响,因而本类药物对细...     

136株革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题.已发现越来越多的革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性.细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一.     

β-内酰胺酶抑制剂及其应用进展

β-内酰胺酶抑制剂(β-Lactamases Inhibitors)是一类新的β-内酰胺类药物。质粒传递产生β-内酰胺酶，致使一些药物β-内酰胺环水解而失活，是病菌对一些常见的β-内酰胺类抗生素(青霉素类，头孢菌素类)耐药的主要方式。细菌产生耐药性的机制主要有三种类型：产生灭活酶、改变细菌胞浆膜通透性、改变靶位蛋白，而使β-内酰胺类抗生素产生耐药性与     

利用相关主题词探讨β-内酰胺酶类的研究方向

青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素的发现和使用为本世纪人类抵抗细菌感染作出了巨大贡献。但是，随着这些抗生素的广泛、大量使用，细菌对它们产生了耐药性。β-内酰胺酶是一类由细菌产生的能够降解β-内酰胺类抗生素，使其抗菌作用减弱或消失的酶，这是细菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的一个重要因素，广泛地涉及到许多社区获     

产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性的检测进展

自40年代β-内酰胺类抗生素--青霉素首次被发现并在临床应用以来,β-内酰胺类抗生素家族不断发展和壮大.β-内酰胺类抗生素在临床上的广泛应用,有效控制了细菌感染性疾病对人类生命的威胁.但随其广泛应用,致病菌不断更新其耐药本领,以求"适者生存",产生的超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)已成为重要的广谱耐药介质引起全球关注[1].本文就ESBLs细菌耐药性的检测进展作一综述.     

青霉素临床应用

[药物概述] 本品为杀菌剂.青霉素、其他青霉素类和头孢菌素类等β-内酰胺抗生素系通过干扰细菌细胞壁的合成而产生抗菌作用.根据近年来研究结果提示青霉素结合蛋白(Penicillinbinding proteins,PBPs)是青霉素等β-内酰胺抗生素的作用靶位;由于青霉素和PBPs的紧密结合,前者对细菌细胞壁合成的早期阶段也发生抑制作用.     

β-内酰胺酶抑制剂与β-内酰胺类抗生素的复方制剂及其临床抗菌作用

自青霉素问世半个世纪以来,β-内酰胺类抗生素已有了广泛的发展,但同时各种细菌对其的耐药性也随之增多。这类细菌的耐药性不仅是院内感染,而且是院外感染(包括门诊)的重要问题。     

肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究进展

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是儿童社区获得性感染最常见细菌病原体,严重危害人类健康。β-内酰胺类抗生素是治疗肺炎链球菌感染最常用的药物。自1928年英国细菌学家亚历山大·弗莱明发现世界上第一种抗生素—青霉素以来,人类越来越依赖于抗生素,从而导致抗生素长期过度使用,使得肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性迅速增加,每年造成200万人死亡。本文拟从产β-内酰胺酶、青霉素结合蛋白基因的改变等方面综述肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制。     

肺炎支原体16SrRNA基因引物A(201)B(629)多聚酶链式反应特异性和敏感性的研究

用肺炎支原体16S rRNA基因序列A(201)B(629)做引物,以肺炎支原体、生殖支原体、口腔支原体、唾液支原体和人型支原体DNA为模板进行多聚酶链式反应(PCR),检测引物的特异性和敏感性。结果肺炎支原体呈阳性,但与生殖支原体有交叉;可检出标本中肺炎支原体最少菌量小于10~3/ml,敏感性高于核酸杂交。     

Determination of the Molecular Weight of Photoaffinity Labeled Glucocorticoid Receptor in Scalded Rat Liver Cytosol

Previous work in our laboratory showed that,after scalding,there wasnot only a decrease of rat liver cytosol [~3H]-Dexamethasone specific binding sitesbut also an increase of apparent dissociation constant of [~3H]-Dex and change ofsedimentation coefficient of glucocorticoid receptor.The present study was carriedout using photoaffinity labeling of glucocorticoid receptor in rat liver cytosol.Itwas found that there was no significant difference between molecular weights ofglucocorticoid receptor of normal and scalded rats determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis.Our result suggests that chnage ofsedimentation coefficient is not due to alteration of molecular weight ofglucocorticoid receptor binding subunit.     

幽门螺杆菌临床常用检测方法的比较

目的通过对几种幽门螺杆菌检测方法的灵敏性和特异性进行比较,为临床提供一种检测幽门螺杆菌的最佳方案。方法在胃窦大弯侧近幽门2cm处取活组织并抽血2mL,采用快速尿素酶试验法、组织染色法、13C-尿素呼气试验、ELISA法进行幽门螺杆菌测定。结果快速尿素酶试验法、组织银染法、13C-尿素呼气试验、ELISA法的灵敏度分别为84·6%、95·6%、97·8%、89·0%,特异性分别为77·2%、78·9%、88·2%、75·6%。结论4种方法中以13C-尿素呼气试验灵敏性和特异性最高。快速尿素酶法简单、易行、价廉;组织学染色准确率较高;血清HP抗体测定和13C-尿素呼气试验为非侵入性,准确率也较高,患者依从性好。     

呋苄青霉素对绿脓杆菌K799/WT青霉素结合蛋白亲和力研究

本文对呋苄青霉素等五种B—内酰胺类抗生素与绿脓杆菌K799/WT靶位蛋白—青霉素结合蛋白(PBPs)的亲和力进行了研究。结果表明呋苄青霉素对绿脓杆菌K799/WT的致死性PBPs具有强大的亲和力。对PBP-1a、PBP-1b、PBP-2、PBP-3的IC_(50)值分别为0.13、1.03、2.89、0.014 mg/L。羧节青霉素对PBP-1a、PBP-2、PBP-3的亲和力仅分别为呋苄青霉素的34％,<9.6％,与2.9％。呋苄青霉素对绿脓杆菌PBPS亲和力与苯咪唑青霉素相似,优于氧哌嗪青霉素与头孢哌酮。     

原位放射免疫分析在检测肺炎支原体克隆基因表达产物及临床微量标本上的应用

应用原位放射免疫分析法,从本实验室重组的以质粒为载体的重组子中,筛选出一株表达肺炎支原体抗原的克隆。同时应用此法对7例疑为非典型肺炎的患儿痰及咽嗽液标本进行检洲,其中4例出现阳性结果。试验表明此法也适用于临床微量抗原的直接检测。     

Clinical and laboratory evaluation of penicillin resistant Streptococcus pneumoniae in relation to the mutations of pbp 1a, pbp2b and pbp2x

A total of 210 isolates of Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) were selected randomly to examine drug susceptibility which were obtained from out- and in-patients who visited Kurume University Hospital and other affiliated hospitals through May 1998 to September 1999. The prevalence of penicillin resistant S. pneumoniae in this study was 39.5% and was compatible with those of previous reports in Japan. From the clinical aspects, the resistant strains of S. pneumoniae have been shown not to be so highly virulent comparing with sensitive strains that only few severe or mortal cases had been reported. Carbapenems, glycopeptides, and fluoroquinolones were shown to be highly active against penicillin-resistant S. pneumoniae strains as evidenced by the low minimum inhibitory concentrations (MICs) though LVFX showed 4 micrograms/ml or higher MICs against some strains. Regarding to the mechanisms of penicillin resistance, penicillin binding proteins coding gene (pbp1a, pbp2x and pbp2b) mutations that cause modifications in these proteins were also examined for all isolates. The multivariate analysis showed statistically significant correlation between higher MIC of penicillin and cephem and pbp1a mutation while no significant contribution of pbp2x and pbp2b to the resistance was demonstrated. Additionally, no significant correlation between pbp mutation and MIC of carbapenem was observed. Furthermore, there were two highly penicillin resistant S. pneumoniae strains with no pbp mutations. Thus the pbp mutations alone were not responsible for the elevation of MIC all beta-lactams. Nevertheless the pbp mutations were detected in advance of actual MIC elevations by inducement experiment in vitro. It indicated that penicillin resistance might be detected earlier than conventional methods. In previous reports some other responsible genes for penicillin resistance were demonstrated. Therefore, it might be possible to presume exact values of MICs of beta-lactams against resistant strains of S. pneumoniae by detecting still unknown genes other than pbps.     

The aetiology of purulent meningitis in highland children: a bacteriological study

Of 155 highlands children with purulent culture-positive meningitis studied from March 1980 to September 1984, 84% were aged twelve months or less and 92% were infected with either Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae or both organisms. Other pathogens were Neisseria meningitidis (8 isolations), Streptococcus pyogenes (2 isolations) and Streptococcus agalactiae and Klebsiella species (1 of each). Among H. influenzae isolates, serotype b strains predominated (83%) and most (96%) belonged to biotype I or II. Infections due to non-b haemophili included serotype a (9 strains), serotype f (1 strain) and non-serotypable variants (3 strains). Of 67 S. pneumoniae strains 22% were resistant to benzylpenicillin, with minimal inhibitory concentrations of 0.1-1.0 micrograms/ml. The commonest serotypes were types 5 (11 isolates), type 7 (9 isolates) and types 2, 6 and 46 (6 of each). No resistance to chloramphenicol was detected in either H. influenzae or S. pneumoniae and only one of 56 strains of H. influenzae was insensitive to betalactam antibiotics. The known case fatality rate in this study was 37%. More children with pneumococcal infection died (46%) than those with haemophilus infection (30%), though the difference was not statistically significant; 79% of all deaths occurred in children aged less than twelve months. There is an urgent need for H. influenzae and S. pneumoniae vaccines that are effective in young children.     

MHC-Ig/肽复合体在实验性自身免疫性葡萄膜炎CTLs研究中的应用

目的 探讨MHC-Ig/肽复合体用于小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)研究的应用价值.方法 用人类光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)合成多肽IRBP161-180免疫B10RⅢ小鼠制备EAU动物模型.将源于IRBP161-180多肽序列的10种不同短肽片段与MHC-Ig多聚体形成复合体,用于检测BIORⅢ小鼠EAU中特异性CTLs.比较各种MHC-Ig/IRBP短肽复合体与CTLs的结合能力,以及刺激CTLs的增殖和lFN-γ的表达水平,并选用对CTLs作用最强的复合体,检测小鼠在EAU不同发病期外周血CTLs的表达情况.结果 各MHC-Ig/IRBP短肽复合体能够检测出抗原特异CTLs,其中MHC-Ig/IRBP168-177短肽复合体检测出CTLs的阳性率达12.3%;并且其刺激CTLs的增殖和IFN-γ的表达水平明显高于其它短肽组(P＜0.01),可初步推断短肽序列IRBP168-177为该EAU模型特异CTLs主要的抗原识别表位.用MHC-Ig/IRBP168-177短肽复合体检测EAU疾病过程中外周血CTLs的表达发现,EAU在炎症急性期特异性CTLs的阳性表达最高(4.9%±1.1%).结论 MHC-Ig/肽复合体技术,是一种新的定量分析抗原特异性CTLs的方法 ,能检测抗原特异性CTLs的表达情况,分析CTLs的抗原识别表位,为动物模型EAU的研究提供了高效、特异、敏感的检测手段.     

海南岛黎族3个支系人群Y染色体特异性短串联重复序列多态性比较研究

目的:探讨海南岛黎族不同支系的Y染色体特异性短串联重复序列遗传多态与差异。方法:采用PCR扩增Y-27H39基因座,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果。结果:黎族3个支系289个男性个体的Y染色体特异性微卫星Y-27H39基因座发现4种等位基因,等位基因频率分布,在3个支系中均以194bp的频率为最高,分别是0.711、0.855和0.667。统计分析显示:杞黎与黎人群在DYS19位点的等位基因频率有显著性差异,而本地黎与杞黎无显著性差异。结论:本研究为我国人群Y染色体特异性STR的群体遗传学、法医学研究提供了可比性资料。     

儿童肺炎支原体肺炎的临床和实验室检查特征分析

目的分析儿童肺炎支原体肺炎(MP)的临床特征,为临床准确诊断和治疗提供依据。方法收集2010年1月—2011年5月在新疆医科大学第一附属医院儿科收住的肺炎支原体肺炎97例患儿的临床资料,按患儿年龄分组:<1岁组11例,1～3岁组17例,3～5岁组41例,>5岁组28例。按患儿肺炎的类型和严重程度,分为支气管肺炎组(55例),大叶性肺炎组(42例)。采用酶联免疫吸附试验在入院时和出院时分别进行血清学检测,抗体滴度≥1∶80为阳性。比较各组患儿的临床和实验室检查特点。结果 97例中有39例(40.2%)入院时MP-IgM阴性,出院时阳性,58例(59.8%)血清学检查阳性患儿MP-IgM滴度升高4倍以上。血清学阳转者出院时的MP-IgM平均滴度为1∶160(1∶80～1∶2 560)。血清学阳性者入院时的MP-IgM平均滴度为1∶160(1∶80～1∶640),出院时为1∶640(1∶80～1∶2560)。发病的高峰年龄为3～5岁,>5岁患儿更容易引起大叶性肺炎和胸腔积液,且发热时间长,伴随白细胞和淋巴细胞计数下降及ESR和CRP升高。结论肺炎支原体肺炎患儿的临床特征与年龄密切相关,由于血清学阳转率比较高以及假阳性的存在,应重视双份血清学检查在临床确诊中的价值。