胆管细胞癌细胞CD147表达及其临床意义*

目的 探讨CD147在肝胆管结石并发胆管细胞癌（ICC）组织的表达及其临床意义。方法 收集肝胆管结石并发ICC标本30例、对应的癌旁肝组织标本30例和正常肝标本10例。采用qRT-PCR法检测组织CD147 mRNA水平,采用免疫组化法检测CD147蛋白的表达;采用Western-Blotting法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和9（MMP-9）蛋白的表达;采用肯德尔（Kendall）等级相关分析CD147 mRNA、CD147、MMP-2和MMP-9表达的相关性。结果 经qRT-PCR检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147mRNA水平为（3.67±1.88）,显著高于癌旁组织【（1.52±0.57）,P<0.01】和正常肝组织【（1.05±0.32）,P<0.01】,癌旁组织高于正常肝组织（P<0.01）;>5 cm ICC组织CD147 mRNA相对水平（2.73±0.97）显著高于<5 cm肿瘤组织【（1.03±0.32）,P<0.01】,有淋巴转移（2.68±0.74）组织显著高于无转移组织【（1.07±0.44）,P<0.01】,肿瘤分化程度低组织（2.71±0.86）显著高于中高分化组织【（1.06±0.42）,P<0.01】;不同年龄和性别患者ICC组织CD147 mRNA水平无显著性差异（P>0.05);经免疫组化检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147蛋白表达相对水平为（27.95±4.90）,显著高于癌旁组织【（13.34±9.59）,P<0.01】和正常肝组织【（2.18±0.66）,P<0.01】,而癌旁组织高于正常肝组织（P<0.01）;ICC组织MMP2表达量为（1.06±0.13）,显著高于癌旁组织【（0.20±0.03）,P<0.01】和正常肝组织【（0.15±0.02）,P<0.01】,而癌旁组织MMP2表达量显著高于正常肝组织（P<0.01）;肝胆管结石并发ICC组织MMP9表达量为（0.93±0.12）,显著高于癌旁组织【（0.17±0.03）,P<0.01】和正常肝组织【（0.15±0.03）,P<0.01】,而癌旁组织MMP9表达量显著高于正常肝组织（P<0.01）;在ICC组织中,CD147mRNA水平与MMP2蛋白表达呈正相关（r=0.457,P<0.05）;CD147mRNA水平与MMP9蛋白表达也呈正相关（r=0.428,P<0.05）;CD147蛋白与MMP2蛋白表达呈正相关（r=0.543,P<0.05）,CD147蛋白与MMP9蛋白表达也呈正相关（r=0.517,P=0.05）。结论 CD147 mRNA、CD147、MMP2、MMP9均在肝胆管结石并发ICC组织中表达增强,CD147的表达可能促进了MMP2和MMP9的表达上调,它们可能共同参与了胆管癌的发生和发展过程。     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响*

目的 研究甘草酸二铵脂质配位体（DGLL）对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱（PPC）灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α（P-AMPKα）蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）、酰基辅酶A氧化酶（ACO）、肝脏型脂肪酸结合蛋白（L-FABP）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）mRNA。结果 DGLL组血清瘦素为（3.87±0.38）ng/ml,显著低于模型组【（4.68±0.39）ng/ml,P<0.01】或PPC组【（4.55±0.24）ng/ml,P<0.01】;DGLL组脂联素为（12.27±0.64）μg/ml,显著高于模型组【（10.46±0.28）μg/ml,P<0.01】,但与PPC组【（12.13±0.56）μg/ml,P>0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为（8.38±3.27）%,显著高于模型组【（1.81±0.90）%,P<0.01】或PPC组【（5.50±0.73）%,P<0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平分别为（1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54）,显著高于模型组【分别为（0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P<0.05】,但ACO mRNA水平（0.23±0.09）与模型组比,无统计学差异【（0.24±0.02）,P>0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 mRNA水平分别为（0.65±0.16）和（0.22±0.05）,显著低于DGLL组（P<0.05）,而GLUT-4和ACO mRNA水平（1.32±0.12和0.14±0.05）与DGLL组比,无统计学差异（P>0.05）;DGLL组肝组织ACC mRNA水平为（1.67±0.23）,显著低于模型组【（3.31±0.02）,P<0.05】或PPC组【（2.69±0.14）,P<0.05】;DGLL组L-FABP mRNA水平为（1.06±0.04）,显著低于模型组【（1.26±0.02）,P<0.05】,而与PPC组【（1.06±0.09）,P>0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 mRNA水平、下调L-FABP和ACC mRNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

胆管细胞癌组织S100A6 mRNA及其蛋白表达变化*

目的 检测胆管癌组织S100A6 mRNA及其蛋白表达的变化。方法 在40例胆管癌患者和40例胆道良性疾病,分别取胆管癌组织、癌旁组织和肝组织,检测S100A6 mRNA及其蛋白表达变化,采用ELISA法测定血清S100A6水平。应用单因素和多因素非条件Logistic回归分析造成胆管癌患者血清S100A6高水平的危险因素。结果 在40例癌旁组织和肝组织中,S100A6蛋白分别阳性8例（20%）和12例（30%）,显著低于肝内胆管癌组织的26例（65%,P<0.05）;癌旁组织和肝组织S100A6 mRNA相对水平分别为（0.92±0.33）和（1.12±0.46）,显著低于肝内胆管癌组织的【（1.93±0.57）,P<0.05】;癌旁组织和肝组织S100A6蛋白相对表达量分别为（0.56±0.16）和（0.85±0.46）,显著低于肝内胆管癌组织的【（1.63±0.51）,P<0.05】;肝内胆管癌患者血清S100A6水平为（2456.85±128.31）pg/ml,显著高于对照组的（2234.26±116.35）pg/ml（P<0.05）;S100A6与CEA、CRP、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度呈正相关（P<0.05）;多因素Logistic回归分析显示,肿瘤浸润深、淋巴结转移、TNM分期和细胞分化差是造成肿瘤患者血清S100A6高水平的危险因素（P<0.05）。结论 血清S100A6高水平的意义还有待于进一步研究。     

虾青素对肝纤维化大鼠的保护作用及机制研究*

目的 研究虾青素抑制肝纤维化作用是否与影响TGF-β1/Smad/ERK通路有关。方法 将50只大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg·kg^-1）、虾青素Ⅰ组（2 mg·kg^-1）和虾青素Ⅱ组（4 mg·kg^-1）,每组10只。采用皮下注射CCl₄法制备肝纤维化大鼠模型。在造模成功后,给予正常组和模型组动物生理盐水、而在药物干预组则分别给予秋水仙碱和虾青素灌胃,连续给药6 w。分别采用免疫组化法和Western blot法检测肝组织Ⅰ型胶原、Smad2、转化生长因子-β1（TGF-β1）和p-ERK蛋白表达,采用RT-PCR法检测肝组织CollagenⅠ、Smad2、TGF-β1 和p-ERK mRNA水平。结果 正常组、虾青素Ⅰ组和虾青素Ⅱ组肝组织Ⅰ型胶原蛋白分别为（0.4±0.1）、（1.4±0.3）和（1.2±0.3）,均显著低于模型组【（1.7±0.4）,P<0.05】,Smad2分别为（0.5±0.1）、（1.3±0.4）和（0.8±0.4）,显著低于模型组【（1.6±0.3）,P<0.05】,TGF-β1蛋白分别为（0.5±0.1）、（1.4±0.4）和（1.2±0.3）,显著低于模型组【（1.7±0.4）,P<0.05】,p-ERK蛋白分别为（0.4±0.1）、（1.3±0.4）和（0.9±0.3）,显著低于模型组【（1.6±0.5）,P<0.05】;正常组、虾青素Ⅰ组和虾青素Ⅱ肝组织Ⅰ型胶原 mRNA水平分别为（1.0±0.1）、（2.0±0.4）和（1.8±0.5）,均显著低于模型组【（2.4±0.4）,P<0.05】,Smad2 mRNA水平分别为（1.0±0.1）、（2.0±0.5）和（1.8±0.4）,显著低于模型组【（2.5±0.6）,P<0.05】,TGF-β1 mRNA水平分别为（1.0±0.1）、（2.1±0.4）和（1.6±0.3）,均显著低于模型组【（2.5±0.5）,P<0.05】,p-ERK mRNA水平分别为（1.1±0.1）、（2.1±0.4）和（1.8±0.3）,均明显低于模型组【（2.6±0.5）,P<0.05】。结论 虾青素可抑制肝纤维化进展,其机制可能与调控TGF-β1/Smad/ERK通路表达有关。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠内生性乙醇和肝组织乙醇代谢相关酶的变化*

目的 观察高脂饮食和高果糖饮食对大鼠肝脏病理、内生性乙醇、乙醇代谢酶的影响。方法 将SD大鼠18只随机分为正常组（n=6）,予以普通饲料喂养,高果糖组（n=6）接受普通饲料和含20%果糖水喂养,高脂组（n=6）接受高脂饲料喂养。造模16 w后,取肝组织进行非酒精性脂肪性肝病活动性评分（NAS）;采用Biovison试剂盒检测门静脉血乙醇水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织乙醇脱氢酶（ADH1）和乙醛脱氢酶（ALDH2）mRNA水平;采用Western blot法测定肝组织ADH1和ALDH2蛋白表达水平;使用乙醇脱氢酶活性试剂盒测定肝组织匀浆乙醇脱氢酶活性。结果 在16 w末,高果糖组大鼠肝组织表现为脂肪变性,高脂组大鼠肝组织主要表现为NASH;高脂组大鼠NAS评分为5.40±0.32,显著高于对照组【（1.10±0.25）,P<0.05】和高果糖组【（2.94±0.40）,P<0.05】 ;高脂组大鼠血清内生性乙醇水平【（1.30±0.15）nmol/μL】显著高于正常组【（1.00±0.10）nmol/μL,P<0.05）】和高果糖组【（1.04±0.23）nmol/μL,P<0.05）】;高脂组大鼠ADH1 mRNA水平显著高于正常组（（1.30倍,P<0.05）和高果糖组（1.36倍,P<0.05）;高脂组大鼠ALDH2mRNA水平显著高于正常组（1.55倍,P<0.05）和高果糖组（1.44倍,P<0.05）;高脂组大鼠ADH1蛋白表达显著高于正常组（2.56倍,P<0.05）和高果糖组（2.52倍,P<0.05）;高脂组大鼠ALDH2蛋白表达显著高于正常组（1.41倍,P<0.05）和高果糖组（1.57倍,P<0.05）;高脂组大鼠肝脏乙醇脱氢酶活性为（175±28）μ/L,显著高于正常组【（72±13）μ/L,P<0.05）】和高果糖组【( 78±9)μ/L,P<0.05）】。结论 高脂饮食造模大鼠内生性乙醇浓度显著升高,乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶蛋白水平升高,乙醇脱氢酶活性显著升高。     

两种手术方法处理腹腔镜胆囊切除术后胆总管残余结石患者临床疗效比较

目的 分析比较经内镜逆行性胰胆管造影（ERCP）下取石与开腹胆道探查（CBDE）治疗腹腔镜胆囊切除术（LC）后胆总管残余结石患者的临床疗效。方法 2015年2月~2016年12月我院收住的经LC术后存在胆总管残余结石患者84例,其中38例采取CBDE法（A组）治疗,46例采取ERCP下取石（B组）。结果 B组术中出血量明显少于A组[（3.4±1.3）ml对（124.2±65.8）ml,P<0.05],手术时间[（34.8±4.2）min对（123.3±15.8）min,P<0.05]、术后排气时间[（1.0±0.7）h对（42.6±9.1）h,P<0.05]和住院时间[（4.9±3.5）d对（9.3±4.3）d,P<0.05]均明显短于A组;术后1 w,B组血清GGT水平为（63.7±7.5）IU/L,与A组的（70.2±7.9）IU/L 比无显著性相差（P>0.05）,血清ALP水平为（105.6±11.5）IU/L,与A组的（115.4±12.8）IU/L比无显著性相差（P>0.05）;A组并发症发生率为23.7%、结石再复发率为5.3%,而B组分别为15.2%和6.5%,两组比较无显著性差异（P>0.05）。结论 相对于CBDE术,采用ERCP下取石处理经LC术后胆总管残余结石患者可有效降低术中出血量,缩短手术时间,并因可反复进行而具有优势。     

乙型肝炎肝硬化患者血清B7-H3和IL-18水平变化及其临床意义探讨

目的 通过检测乙型肝炎肝硬化患者血清B7-H3和白细胞介素-18（IL-18）水平,探讨它们水平变化与疾病进展的相关性。方法 2015年4月~2017年3月纳入113例乙型肝炎肝硬化患者,其中代偿期肝硬化患者33例,失代偿期肝硬化患者80例,和健康志愿者20名。采用ELISA法检测血清B7-H3和IL-18水平,采用直线相关分析肝硬化患者血清B7-H3与IL-18水平间的相关性。结果 80例失代偿期肝硬化患者血清B7-H3水平为（62.29±22.17） ng/ml,显著高于33例代偿期肝硬化患者的（32.27±10.29） ng/ml（P<0.05）或20例健康人的（11.35±4.48） ng/ml（P<0.05）,代偿期肝硬化患者血清B7-H3水平也显著高于健康人（P<0.05）;失代偿期肝硬化患者血清IL-18水平为（585.63±121.28） pg/ml,显著高于代偿期肝硬化患者的（396.29±86.91） pg/ml（P<0.05）或健康人的（155.31±76.93） pg/ml（P<0.05）,代偿期肝硬化患者血清IL-18水平也显著高于健康人（P<0.05）;肝硬化患者血清B7-H3水平与IL-18水平间呈显著正相关（r=0.4111,P<0.01）;26例Child-Pugh C级患者血清B7-H3水平为（76.53±22.76） ng/ml,显著高于33例Child-Pugh A级患者的（23.27±9.84） ng/ml或54例Child-Pugh B级患者的（52.21±13.94） ng/ml（P<0.05）,Child-Pugh C患者IL-18水平为（594.13±112.21） pg/ml,显著高于Child-Pugh B级患者的（408.06±92.41） pg/ml或Child-Pugh A级患者的（243.82±57.03） pg/ml（P<0.05）,Child-Pugh B级患者血清IL-18水平也显著高于Child-Pugh A级（P<0.05）。结论 乙型肝炎肝硬化患者血清B7-H3和IL-18水平升高,两者呈正相关,提示B7-H3可能是乙型肝炎肝硬化患者一个预后不良因子,通过与IL-18的协同作用,引起体内免疫功能紊乱,加重了肝细胞损伤,从而促进了疾病的发生和发展。     

microRNA194过表达抑制荷瘤小鼠肝癌细胞生长的实验研究*

目的 探讨microRNA194过表达对肝癌细胞生长的抑制作用及其具体作用机制。方法 通过细胞转染法构建过表达microRNA194的肝癌细胞Hep3B,并将其接种于Balb/c裸鼠建立荷瘤小鼠。30只Balb/c裸鼠被随机分配为microRNA194过表达组15只和对照组15只,采用荧光定量PCR法检测Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织microRNA194水平,采用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测肿瘤组织胰岛素样生长因子1受体（IGF1R）水平及其蛋白表达情况。结果 Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织microRNA194 mRNA水平分别为（2.68±0.33）和（2.33±0.38）,均显著高于对照组【分别为（1.00±0.12）和（1.00±0.16）,P<0.01】;在肝癌细胞接种第11 d、16 d和21 d时,microRNA194过表达组小鼠肝肿瘤体积分别为（0.25±0.08）、（0.31±0.11）和（0.46±0.10）mm³,均显著小于对照组【分别为（0.56±0.13）、（0.73±0.20）和（0.95±0.22）mm³,P<0.01】;在肝癌细胞接种第21 d时,microRNA194过表达组小鼠肝肿瘤质量为（0.85±0.19）g,显著轻于对照组【（1.43±0.27）g,P<0.01】;microRNA194过表达组小鼠肝肿瘤IGF1R mRNA水平和其蛋白表达量分别为（0.78±0.12）和（0.81±0.17）,均显著低于对照组【分别为（1.0±0.16）和（1.0±0.11）,P<0.01】。结论 microRNA194过表达可以抑制肝癌细胞生长,有可能是通过抑制了下游靶基因IGF1R的表达而发挥作用的。     

miR-363靶向调控E2F3表达影响HepG2细胞增殖和凋亡研究*

目的 探讨微小RNA-363（miR-363）靶向调控E2F转录因子3（E2F3）的表达对HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外培养HepG2细胞,采用Lipofectamine法将miR-363抑制剂或其阴性对照转染到HepG2细胞,继续培养48 h,收获细胞,采用四噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖率,使用流式细胞术法检测细胞凋亡率,采用实时荧光RT-PCR法检测HepG2细胞miR-363 mRNA水平,采用Western Blot法检测HepG2细胞E2F3、BAX和Caspase-3蛋白表达水平。结果 对照组HepG2细胞增殖率为（96.4±9.7)%,显著高于抑制剂处理组【（72.3±6.5）%,P<0.05】,凋亡率为（8.2±1.4）%,显著低于抑制剂处理组【（9.7±0.8）%,P<0.05】;对照组HepG2细胞miR-363 mRNA相对水平为（1.0±0.1）,显著高于抑制剂处理组【（0.6±0.2）,P<0.05】,E2F3蛋白表达量为（1.0±0.1）,显著高于抑制剂处理组【（0.6±0.1）,P<0.05】,而对照组HepG2细胞Bax和Caspase-3蛋白表达量分别为（0.4±0.0）和（0.5±0.1）,均显著低于抑制剂处理组【（0.6±0.1）和（0.7±0.0）,P均<0.05】。结论 miR-363可靶向调控E2F3的表达,抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡。本研究结果为肝癌靶向治疗提供了一定的理论依据。     

酒精性肝硬化患者尿微量蛋白的变化

目的探讨酒精性肝硬化患者Child-Turcotte-Pugh （CTP）分级与尿微量蛋白及血糖和血脂变化的关系。方法收集92例酒精性肝硬化患者,其中CTP A级30例,B级38例,C级24例。采用RIA法检测尿微量白蛋白（M-Alb）、免疫球蛋白G （IgG）、β2-微球蛋白（β2-MG）和α1-微球蛋白（α1-MG）;使用Selectra XL全自动生化分析仪检测空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）和低密度脂蛋白（LDL-C）。结果不同CTP分级组间尿M-Alb、IgG、β2-MG和α1-MG水平差异均有统计学意义（P<0.05）,其中CTP分级为C级患者尿M-Alb、IgG、β2-MG和α1-MG分别为（93.50±4.15） mg/L、（27.92±2.67） mg/L、（29.68±3.59） mg/L和（57.30±4.62） mg/L,均显著高于A级和B级患者（P<0.05）,而A级与B级比较差异无统计学意义（P>0.05）;不同CTP分级组间FBG、TC、LDL-C比较差异均有统计学意义（P<0.05）,而TG、HDL-C比较差异无统计学意义（P>0.05）,其中CTP分级为C级患者FBG为（6.21±2.03） mmol/L,显著高于A级和B级,TC、LDL-C分别为（2.83±1.13） mmol/L和（1.15±0.54） mmol/L,显著低于A级和B级（P<0.05）,CTP分级为B级患者LDL-C为（1.87±0.67）mmol/L,显著低于A级（P<0.05）。结论酒精性肝硬化患者肝功能受损越严重,肾功能损伤和糖脂代谢紊乱越明显。     

自身免疫性肝炎患者肝组织程序性死亡受体1表达及其临床意义探讨*

目的 观察自身免疫性肝炎（AIH）患者肝组织程序性死亡受体1（PD-1）表达情况及其临床意义。方法 2015年5月~2017年4月我院收治的AIH患者68例（活动期48例,缓解期20例）,在超声引导下使用BARD一次性全自动活检枪行肝穿刺活检术取得肝组织。另选择同期肝血管瘤患者13例,经手术取得肝组织。采用ABC法检测肝组织PD-1表达。比较肝组织PD-1表达情况并采用Pearson相关分析其与血生化学和血清学指标的相关性。结果 48例活动期AIH患者血清TBIL、AST、ALT、ALP和GGT水平分别为（72.1±48.9） μmol/L、（243.1±170.4） U/L、（345.3±217.7） U/L、（154.3±94.6） U/L和（86.5±43.5） U/L,显著高于20例缓解期患者【分别为（14.8±4.2） μmol/L、（28.3±8.7） U/L、（27.6±8.8） U/L、（73.3±51.3） U/L和（71.3±27.3） U/L,P<0.05】;活动期患者血清GLO和IgG水平分别为（34.3±11.3） g/L和（23.2±7.5） g/L,显著高于缓解期【分别为（30.7±10.2） g/L和（11.7±4.6） g/L,P<0.05】; 68例AIH患者肝组织PD-1表达阳性率为（13.61±6.87）%,显著高于对照组的（2.25±0.68）%（P<0.05）,而48例活动期患者肝组织PD-1表达阳性率为（16.56±7.81）%,显著高于缓解期组的（6.56±3.21）%（P<0.05）;48例活动期患者肝组织界面性肝炎为93.75%,淋巴细胞浸润为89.58%,单管破坏性炎症为6.25%,而20例缓解期患者无界面性肝炎、淋巴细胞浸润或单管破坏性炎症表现;活动期AIH患者肝组织PD-1表达阳性率与血清TBIL （r=0.996,P<0.001）、AST（r=0.989,P<0.001）、ALT（r=0.995,P<0.001）、ALP（r=0.998,P<0.001）、GGT（r=0.995,P<0.001）、GLO（r=0.996,P<0.001）和IgG（r=0.997,P<0.001）均呈正相关,在缓解期AIH患者,肝组织PD-1表达阳性率与血清TBIL （r=0.999,P<0.001）、AST（r=0.999,P<0.001）、ALT（r=0.999,P<0.001）、ALP（r=0.999,P<0.001）、GGT（r=0.999,P<0.001）和IgG（r=0.999,P<0.001）呈正相关（P<0.001）。结论 AIH患者肝组织PD-1表达增强,与肝组织炎症活动度密切相关,其参与肝损伤的作用机制还需要进一步探讨。     

胆管癌组织紧密连结蛋白18、丝氨酸蛋白酶抑制剂和p53蛋白表达及其临床意义

目的 探讨胆管癌组织紧密连结蛋白18（claudin-18）、丝氨酸蛋白酶抑制剂（maspin）和p53蛋白表达的临床意义。方法 采用免疫组化和Western blot法检测46例胆管癌和32例正常胆管组织claudin-18、maspin和p53蛋白的表达,采用Spearman等级相关分析。结果 胆管癌组织claudin-18和p53蛋白阳性率分别为52.17%和56.52%,显著高于正常胆管组织（0.0%和0.0%,P<0.01）;胆管癌组织maspin阳性率为86.96%,显著低于正常胆管组织（100.0%,P<0.01）;胆管癌组织claudin-18、maspin和p53蛋白表达量分别为2.83±0.52、2.45±1.24和1.73±1.26,均显著高于正常胆管组织（0.48±0.75、0.46±0.32和0.0±0.0,P<0.05）;胆管癌组织maspin与p53表达呈负相关（r=-8.546,P=0.001）。结论 胆管癌组织maspin、claudin-18和p53蛋白表达的意义还有待于进一步研究。     

肝细胞癌组织miRNA-155水平变化及其对预后的影响

目的 观察肝细胞癌（HCC）组织miRNA-155水平变化,并分析其对患者预后的意义。方法 2013年1月~2014年5月我院诊治的50例HCC患者,取手术切除的癌组织,另取50例正常肝组织作为对照组,采用荧光定量PCR法检测组织miRNA-155水平。结果 正常肝组织miRNA-155水平（1.06±0.1）明显低于HCC癌组织,10例Ⅰ级、15例Ⅱ级、12例Ⅲ级和13例Ⅳ级HCC 组织miRNA-155水平分别为（2.04±0.82）、（3.02±1.20）、（4.20±1.84）和（6.24±2.36）;miRNA-155低水平HCC患者生存率（24.00%）明显高于miRNA-155高水平患者（9.24%,P<0.05）;在不同分级HCC（14.26月对9.02月）、不同肿瘤大小（15.68 月对10.02月）、肿瘤是否转移（8.20 月对14.46月）、是否静脉侵犯（9.36 月对14.36月）、肿瘤分化程度（15.20月对7.84月）和miRNA-155水平高低（7.86月对16.32月）患者间生存期均存在明显差异（P<0.05）;肿瘤大小（>5 cm,HR=1.46,P=0.038）、肿瘤转移（是,HR=1.72,P=0.026）、静脉侵犯（是,HR=1.46,P<0.001）、肿瘤分化（高分化,HR=1.33,P=0.012）和miRNA-155（高水平,HR=1.65,P<0.001）均为影响HCC患者预后的独立危险因素（P<0.05）。结论 肝癌组织miRNA-155水平明显高于正常肝组织,且高水平的miRNA-155为HCC患者预后的独立危险因素。结果表明,miRNA-155水平高低可评估HCC患者预后,可考虑将其作为评估HCC患者预后的独立预测因子之一。     

自体外周血干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者临床疗效及其对外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的 研究应用自体外周血干细胞（PBSC）移植治疗乙型肝炎肝硬化患者的临床疗效及其对外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法 2014年4月~2017年4月我院收治的乙型肝炎肝硬化患者95例,被随机分为移植组48例和对照组47例。两组均接受护肝、降酶和恩替卡韦抗病毒治疗,另48例患者再接受自体PBSC经肝动脉移植治疗。使用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群,使用Fibroscan扫描仪检测肝脏硬度,采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6 （IL-6）,采用免疫透射比浊法检测血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）。结果 在治疗后6 m,移植组患者血清总胆红素（TBIL）水平为（16.4±1.2） μmol/L,显著低于对照组的（22.5±2.6） μmol/L（P<0.05）,血清白蛋白（ALB）水平为（35.2±4.0） g/L,显著高于对照组的（31.6±3.7） g/L（P<0.05）;移植组外周血CD3⁺细胞百分比为（67.9±6.5） %,显著高于对照组的【（60.3±5.5） %,P<0.05】,CD4⁺为（42.7±3.8） %,显著高于对照组的【（38.2±3.5） %,P<0.05】,CD4⁺/ CD8⁺细胞比值为（1.5±0.2）,显著高于对照组的【（1.4±0.1）,P<0.05】;移植组肝硬度值为（7.1±0.1）kPa,显著低于对照组[（7.9±0.1） kPa,P<0.05],Child-Pugh评分为（5.5±1.5）,显著低于对照组[（7.4±2.3）,P<0.05];移植组血清TNF-α水平为（28.0±8.7） pg/mL,显著低于对照组[（36.2±8.6）pg/mL,P<0.05], IL-6水平为（6.0±2.2） mg/L,显著低于对照组[（8.7±3.5） mg/L,P<0.05], hs-CRP水平为（18.9±5.6） pg/mL,显著低于对照组[（25.2±7.9） pg/mL,P<0.05]。结论 自体外周血干细胞移植治疗乙型肝炎肝硬化患者近期疗效较好,能有效降低血清细胞因子水平,改善肝功能。     

脾切除对原发性胆汁性肝硬化小鼠肝组织纤维化影响研究*

目的 探讨脾切除对原发性胆汁性肝硬化（PBC）小鼠的影响及其相关因素。方法 40只雌性C57BL/6小鼠被分为脾切除组（n=10）、假手术组（n=10）、模型组（n=10）和正常对照组（n=10）。在前三组,采用1%聚肌胞苷酸腹腔注射建立PBC模型,在正常对照组,给予等体积生理盐水腹腔注射。在实验20 w末,对动物分别行脾切除术,或在假手术组采取腹壁切开后仅轻微翻动脾脏,或在模型组和正常对照组不行任何处理。在实验32w,行血生化和肝组织病理学检查。采用RT-PCR法检测肝组织转化生长因子-β1（TGF-β1）及其I型受体（TβRI）和II型受体（TβRII）mRNA水平。取末端回肠组织,采用ELISA法检测其匀浆TNF-α水平。结果 在32w时,脾切除组、假手术组和模型组动物肝指数均显著低于对照组[（41.5±5.2）、（39.6±7.5）、（39.1±1.0）对（53.2±2.1),P值均<0.05];脾切除组血清ALT、AST和ALP水平分别为（43.5±6.4） U/L、（157.7±20.9） U/L和（178.1±38.0）U/L,显著低于模型组[（52.0±9.0） U/L、（183.4±12.4） U/L和（195.3±62.6） U/L,P值均<0.05];脾切除组肝组织纤维化程度明显轻于假手术组和模型组;脾切除组肝组织TGF-β1、TβRI和TβRII mRNA水平分别为（0.5±0.09）、（0.5±0.05）和（0.5±0.09）,显著低于模型组[（1.0±0.10）、（1.0±0.08）和（1.0±0.09）,P值均<0.05];脾切除组回肠末端匀浆TNF-α水平为（50.0±8.6） ng/L,显著低于模型组 [（106.8±19.8） ng/L,P<0.05]。结论 脾切除可缓解PBC小鼠肝组织纤维化进程,可能与抑制肝脏TGF-β1表达和抑制回肠末端TNF-α分泌有关。